Пироплазмоз (бабезиоз) крупного рогатого скота. Вакцина против пироплазмоза крс

признаки и лечение (фото и видео),

Техасская лихорадка, она же чихирь или пироплазмоз крупного рогатого скота, может сильно снизить численность стада. Это опасное заболевание протекает очень быстро и нередко заканчивается летальным исходом. Пироплазмоз вызывают клещи-переносчики, которые через укус заносят в организм скотины пироплазмы (бабезии). Здесь они начинают размножаться и поражают внутренние органы, а затем — кровь. Переболевшие коровы получают иммунитет, который защищает их от повторного заражения на 6-8 месяцев.

Основные признаки заболевания

Пироплазмоз у коров всегда проходит очень остро. После заражения через укус клещей, скрытый период составляет 8-12 суток. С первых дней болезни температура тела повышается до 42 градусов, животные чувствуют себя угнетенными. Они отказываются от пищи, прекращают жевать, постоянно пьют воду. Коровы с трудом переносят выгул на пастбище. Ходить им становится тяжело, поэтому они отстают от стада, постоянно ложатся, а количество удоя снижается.

Признаки включают учащение пульса до 120 ударов в минуту, тяжелое дыхание. На слизистых оболочках проявляются кровеносные сосуды, а через 2 дня образуется большое количество пятнистых кровоизлияний. Зараженные коровы постоянно стоят с наклоненной к полу головой, у них отмечается повышенное слезотечение. Также симптомы характеризуются нарушением деятельности желудочно-кишечного тракта. Животные страдают поносом, запором.

На вторые сутки после повышения температуры тела начинается гемоглобинурия, под влиянием которой моча становится темно-вишневой и содержит большое количество белка. Мочеиспускание учащается.

Патологоанатомические изменения

Если коровы погибают от пироплазмоза, их трупы очень истощенные. Слизистые оболочки, сухожилия, жир, становятся желтоватого оттенка. На слизистой кишечника и в лимфатических узлах заметны кровоизлияния. Кровь сворачивается медленно, имеет очень жидкую консистенцию. Селезенка животного увеличивается в размерах, становится дряблой и вишневого цвета в разрезе.

Также увеличиваются почки и печень, а желчный пузырь заполняется большим количеством желчи. Из-за гемоглобинурии остатки мочи в мочевом пузыре ярко-красного цвета. Кровеносные сосуды в кишечнике переполняются кровью, легкие отекают и покрываются кровоизлияниями. Размеры сердца увеличиваются, сердечная мышца становится дряблой. В ее полостях скапливается кровь. Головной мозг отекает и весь покрывается кровоизлияниями.

Места распространения болезни

Вспышки пироплазмоза КРС (крупного рогатого скота) чаще всего возникают в южных территориях, где обитают клещи. Болезнь распространена в Средней Азии, Курской, Воронежской областях, на Кавказе и Крымском полуострове. Пироплазмоз переносят однохозяйные, двуххозяйные и треххозяйные клещи.

Чаще всего вспышки болезни бывают летом, однако в теплых регионах могут появиться весной и осенью. Скотина обычно заражается во время прогулок на пастбище, где можно легко подцепить клеща. Но заболевание может проявиться даже при стойловом содержании, если вместе со свежей травой занести клещей.

Местный КРС переносит болезнь намного легче, чем скотина, которая была привезена из других районов. Если животные старые, плохо питаются и часто болеют, то пироплазмоз протекает тяжелее. У беременных телок может случиться аборт. На территориях Средней Азии, Кавказа, Крыма и Украины распространен однохозяйный клещ Boophilus calcaratus. При его укусе корова может подхватить пироплазмоз совместно с бабезиозом и франсаиеллезом.

Как диагностировать заболевание у КРС

Диагностика пироплазмоза проводится с учетом клинических и патоморфологических данных. Важно провести микроскопический анализ крови. Если животное заражено, в эритроцитах мазка будут выявлены паразиты. У трупа поражено до 40% эритроцитов. Когда животное погибает, мазок необходимо брать максимум через сутки, чтобы диагностика была предельно точной.

Пироплазмоз можно легко спутать с другими заболеваниями:

• бабезиоз,
• тейлериоз;
• франсаиеллез;
• анаплазмоз;
• лептоспироз;
• сибирская язва;
• отравление.

Главным фактором при диагностике пироплазмоза является наличие паразитов в эритроцитах. По этому признаку во время клинического анализа его можно отличить от франсаиеллеза и бабезиоза. Кроме того, во время бабезиоза кровоизлияния менее выражены, а франсаиеллез отличается слабой желтушностью.

Препараты для лечения заболевания

Лечение должно начаться с изоляции больного животного от стада. Ему нужно обеспечить полный покой, отсутствие стрессов и регулярное питание. Обязательно должна стоять емкость с водой. В рацион нужно добавить кислое молоко, витамин В12 и специальные добавки, которые содержат большое количество микроэлементов.

Хорошо действуют внутривенные уколы «Флавакридина» и «Трипафлавина». 1% препарат нужно брать в расчете 0,004 г на 1 кг массы скота. Если животному становится хуже, медикаменты вводят дважды с перерывом в 4 часа. Также эффективен «Гемоспоридин» и «Пироплазмин». Первый препарат (2% раствор) нужно вводить подкожно 2 раза с перерывом в сутки из расчета 0,5 мг на кг веса. 5% раствор «Пироплазмина» также вводится подкожно дважды с таким же интервалом.

Ветеринары часто применяют «Азидин» подкожно или внутримышечно. 7% препарат нужно вводить в дозе 3,5 мг на кг веса. Если болеют телята или коровы в период лактации, используется «Беренил», который не оказывает негативного влияния на молочные железы и выводится из организма за 24 часа. 7% препарат нужно вводить подкожно или внутримышечно в расчете 0,5 мл на 10 кг.

Если коров, заболевших пироплазмозом, не лечить, они погибнут через 8-10 дней после начала заболевания.

Важные правила профилактики

Фермерам и владельцам личных подсобных хозяйств нужно пасти скотину только в безопасных местах, где отсутствуют клещи. Лучше всего для этих целей использовать культурные территории.

Перегонять коров в благополучные по пироплазмозу хозяйства нужно только зимой, чтобы не занести клещей на новые пастбища. Если животных необходимо перевести летом, предварительно их следует обработать акарицидным препаратом. К примеру, «Севином», «Хлорофосом». 3% раствор средства нужно распылить на кожу животного и тщательно втереть. Обработку необходимо проводить 3 раза с перерывом в 5 дней.

В неблагополучных районах и в начале вспышки заболевания всему стаду нужно ввести 7% раствор «Беренила». Этот медикамент защитит животных от пироплазмоза на 2-3 недели. Территории сельскохозяйственных предприятий нужно обязательно обрабатывать специальными химикатами для недопущения распространения опасных насекомых. Чтобы снизить количество клещей, скотину нужно пасти в одном месте максимум 3 недели. Поэтому фермерам рекомендуется иметь 4 сменяемые территории. Нужно учитывать, что клещи нападают и на лошадей, коз, собак, которые также могут перенести вредителей на себе.

Если вам понравилась статья, поставьте лайк.

В комментариях поделитесь, пожалуйста, опытом выявления и лечения пироплазмоза у КРС.

Тэги: Болезни, Клещи, Коровы

znaifermu.ru

Пироплазмоз КРС: симптомы, лечение

Возбудитель заболевания размножается в организме клещей. Он поражает половые органы самок членистоногих, которые откладывают яйца. Причиной заражения коров является укус инфицированного клеща. Пироплазмоз крупного рогатого скота – опасное заболевание, которое может привести к резкому снижению поголовья. При отсутствии лечения КРС погибает в течение 8-10 дней.

Стадо коров на лугу

Что собой представляет болезнь?

Источником патологии являются клещи, которые заражают скот. В процессе укуса в организм коровы проникают пироплазмы (бабезии). Пироплазмиды считаются кровепаразитами, которые поражают лимфоциты и эритроциты животного.

Они размножаются путем деления в теле членистоногих. Именно клещи выступают в роли первого хозяина паразитов. Инфекция присутствует в яйцах членистоногих. Во время укуса паразиты попадают в кровоток животных.

Причины

Чаще всего от пироплазмоза страдают животные, которые живут на юге России. Летом риск инфицирования повышается, так как скот постоянно находится на пастбище.

Коровы могут заразиться даже при стойловом содержании. Клещи часто присутствуют в зеленом корме.

Членистоногие проявляют высокую устойчивость к низким температурам. Клещи могут голодать в течение 2 лет. Они предпочитают жить в высокой траве, в которой ожидают свою жертву. После укуса бабезии попадают в кровь коров и начинают размножаться.

Излюбленным место размножения паразита является эпителий кишечника. У животного возникает расстройство пищеварения. При отсутствии лечения пироплазмиды проникают в слюнные железы коровы. Инфекция поражает внутренние органы животного.

Эпителий толстого кишечника

Симптомы

1. Инфицированные животные начинают отказываться от пищи. Корова испытывает сильную жажду.
2. Заболевание сопровождается повышением температуры до 42 градусов.
3. Корова с трудом передвигается по пастбищу. Она отстает от здоровых особей и периодически ложится на землю.
4. Активное размножение микроорганизмов приводит к снижению удоя.
5. Патологию можно распознать по учащенному пульсу, который достигает 120 ударов в минуту.
6. В процессе осмотра можно заметить, что на слизистых оболочках увеличиваются кровеносные сосуды. В течение 2 дней после резкого обострения заболевания у животного возникают очаги кровоизлияний.
7. Обессиленное животное с трудом удерживает голову в прямом положении. У коровы начинается повышенное слезотечение.

Ситуация усугубляется нарушением работы пищеварительной системы. Моча больной коровы становится темной, так как в ней содержится большое количество белка.

Инфекция поражает не только печень и почки. У животного нарушается работа сердечной мышцы. Заболевания приводит к обширному кровоизлиянию головного мозга. При отсутствии лечения летальный исход практически неизбежен.

Диагностика

Пироплазмоз КРС можно выявить с помощью микроскопического анализа крови. У зараженного животного в эритроцитах присутствуют паразиты. Если корова погибла, то забор материала нужно произвести в течение 24 часов. Это повысить точность результатов анализа. Сложность постановки диагноза осложняется тем, что пироплазмоз легко перепутать с другими патологиями.

Лечение

Чтобы предотвратить обезвоживание необходимо поставить в помещении, где содержится больное животное, емкость с чистой водой. В рационе коровы должно присутствовать кислое молоко и витаминные добавки.

Для борьбы с инфекцией ветеринар прописывает Флавакридин или Трипафлавин. Препараты необходимо вводить внутривенно. В процессе лечения не превышайте дозировку, указанные в инструкции. Избавиться от пироплазмоза можно за счет Гемоспоридина и Пироплазмина.

Беренил

Особенно уязвимы к инфекции молодые особи. Телятам вводят внутримышечно Беренил. Животное может погибнуть в течение 8-10 дней, если не остановить размножение опасных микроорганизмов.

При лечении пироплазмоза необходимо скорректировать питание. КРС кормят луговой травой и мелко нарезанными корнеплодами. Восстановить работу сердечной мышцы можно за счет глауберовой соли. Чтобы компенсировать дефицит жидкости коров нужно поить раствором хлорида натрия. При выявлении паразитов заводчикам нужно действовать достаточно быстро. Заболевание в большинстве случаев протекает в острой форме. Чтобы уничтожить бабезии используется Азидин (7%). При необходимости его можно заменить другим препаратом. Размножение паразитов вызывает дефицит витамина B12. У животного резко падает иммунитет. Чтобы ему помочь необходимо регулярно делать инъекции с витамином B12.

Важно! Корову нельзя перегонять на другое место. Инфицированный скот нуждается в покое.

Профилактика

Заводчик должен придерживаться нескольких правил:

1. Нельзя пасти коров в местах, где высока вероятность присутствия большого количества клещей. Для выпаса нужно выбирать культурные территории.
2. Перед перегоном на новое место нужно обработать кожу коров акарицидными средствами (Севин, Хророфос).
3. Чтобы предотвратить заражение всего стада необходимо ввести коровам Беринил. Препарат поможет защитить животных от пироплазмоза.
4. КРС нельзя пасти в одном месте больше 3 недель. Владельцам стада рекомендуется найти 4 территории, которые можно использовать для выпаса.

Важно! Территории, прилегающие к коровнику, необходимо обработать противоклещевыми химикатами.

Заключение

Пироплазмоз достаточно часто приводит к летальному исходу. Животное погибает из-за паразитов, которые проникают в кровоток после укуса клещей. Не у всех владельцев коров существует возможность выбора пастбищ. Зачастую местность достаточно сильно заражена клещами. Предотвратить заражение пироплазмозом можно за счет обработки акарицидными средствами.

fermhelp.ru

Способ приготовления вакцины против кровепаразитарных инфекций

Изобретение относится к области биотехнологии. Способ включает забор вирулентной крови и инактивацию последней. При этом забор крови осуществляют от того биологического объекта, которому необходимо приготовить вакцину. Далее кровь предварительно центрифугируют, плазму удаляют, в оставшуюся эритроцитную массу добавляют стерильную дистиллированную воду в соотношении 1:(1,5-2,0), встряхивают в течение 7-12 минут для полного лизиса клеток крови, выдерживают полученный лизат крови в течение 21 дня при температуре 15-25°C, затем вносят в лизат 4% раствор гентамицина и 15% раствор клиндамицина и выдерживают 7 дней. Способ обеспечивает получение эффективной и безопасной вакцины и позволяет существенно снизить затраты на приготовление вакцинного материала. 3 з.п. ф-лы.

Изобретение относится к области гуманитарной и ветеринарной медицины и предназначено для приготовления вакцины для защиты от кровепаразитарных болезней человека, сельскохозяйственных и мелких домашних животных.

Еще в 1934 году Шакалов К.И. применил аутогемотерапию (введение собственной крови подкожно или внутримышечно) при фурункулезе у 29 лошадей и получил хороший результат. Автор производил 1-2- или 3-кратное применение аутогемотерапии с интервалом от 3 до 6 дней. В первый раз больной лошади инъецировали 75-100 мл цитратной крови, во второй и третий - 150-200 мл. Инъекции крови производили подкожно в области подгрудка. В 1936 году Мальцев А.И. применял аутогемотерапию в острых случаях периодического воспаления глаз у лошадей и также получил положительный результат. Азбукин Н.А. и Волков П.К. (1936) применили аутогемотерапию при гнойных эндометритах коров. Остро протекающие гнойные эндометриты при применении аутогемотерапии быстро прекращались. При хронических эндометритах, которые трудно поддаются обычному медикаментозному лечению, аутогемотерапия также показала хороший результат. Оливков Б.М. (1945) изучал аутогемотерапию в хирургической практике. По мнению автора, аутогемотерапия является разновидностью активной или раздражающей терапии. Она представляет собой аутопротеинотерапию, комбинированную с аутосеротерапией и аутовакцинацией (цит. по Шакалов [1]). За рубежом в гуманитарной медицине метод аутогемотерапии используется более 30 лет, схема применения на людях описана Дагмар Ланнингер-Боллинг [2]. По сути, метод аутогемотерапии является базовым прототипом в использовании собственной крови, как вакцинного материала, при внутримышечном или подкожном введении.

Дальнейшие исследования этой проблемы в СССР - опыты по созданию вакцины для овец против бабезиоза, проведенные в лабораторных условиях из вирулентной крови с возбудителем, ослабленным путем хранения при температуре 8-22°С в течение 23-40 дней дали положительный результат. С 1954 года метод активной иммунизации овец против бабезиоза применяли в порядке широкого опыта в Грузии путем прививок кровью от спленэктомированных доноров. Из иммунизированных животных заболело 0,4%, из контрольных - 10,4% овец. В 1960 г. заболеваний не было как среди иммунизированных, так и контрольных животных [3].

Богородицкий [4] использовал в качестве вакцины кровь животных с живыми возбудителями: при бабезиозе и франсаиллезе в период до 3 и 6 месяцев после переболевания, соответственно, и тейлериозе - в период острого проявления. В порядке широкого опыта персоналом племенных совхозов была проведена иммунизация бычков крупного рогатого скота против бабезиоза, тейлериоза и франсаиллеза. Среди 339 иммунизированных животных в живых остались 61,4%, а среди 485 неиммунизированных бычков в живых остались 13,3%. Таким образом, иммунизированных животных сохранилось в 4.6 раза больше, чем неиммунизированных.

Колабский Н.А. [5] использовал в качестве вакцины кровь крупного рогатого скота с анаплазмоидными и кольцевидными формами паразита, которые не переходили в амебовидные или грушевидные формы паразита и, по данным автора, оказались формами, не способными вызвать заражение животного. Всего было иммунизировано 1491 животное, из них заболело 48, или 3.2%, причем 32 из этих 48 заболело на 3-4-й день после иммунизации (возможно, эти животные были в инкубационном периоде). Среди контрольной группы, состоящей из 816 коров, заболело 151 животное, или 18.5%. Приготовление вакцины против бабезиоза для крупного рогатого скота с биологически измененными гемоспоридиями не требует применения лечебных средств. Иммунизированные животные приобретают иммунитет, причем по данным иммунизации 1949 года животные оставались невосприимчивыми в течение 3 лет.

Использование в качестве вакцины суспензии из слюнных желез клещей-переносчиков во всех случаях сопровождалось заболеванием животных бабезиозом (по Степановой Н.И.). Переболевшие бабезиозом животные приобретали нестерильный иммунитет к возбудителю данного заболевания и являлись скрытыми носителями инвазии [3].

Для изготовления вакцины большинством исследователей использовался непостоянный в своих свойствах возбудитель, выделенный от больных или переболевших животных. При введении восприимчивым животным возбудитель массово размножался и без применения химиотерапевтических препаратов вызывал тяжелое переболевание. Кроме того, такой метод приготовления вакцины и иммунизации животных приводил к перезаражению клещей и тем самым создавал дополнительный резервуар возбудителя бабезиоза в природе.

В настоящее время для вакцинации животных за рубежом используют вакцины, приготовленные на основе инактивированных мерозоитов бабезий - Babesia canis [6], Babesia equi [7] и живых аттенуированных штаммов бабезий - Babesia begimina и Babesia bovis [8]. По данным Moreau et аl. [6] иммунизация будет неэффективной, если животное уже инфицировано. Эффективность вакцины для собак "Pirodog" составляет около 88% при условии отсутствия бабезий в крови животных на момент вакцинации.

На настоящий момент способ приготовления вакцины против основных кровепаразитарных инфекций людей не разработан.

Наиболее ближайшим к заявляемому способу - прототипом является способ приготовления вакцины против кровепаразитарных инфекций по Свирской С.А. [9], включающий забор вирулентной крови от специально подобранных животных-доноров, дефибринизацию крови. Вакцинный материал (дефибринированная кровь) исследовали микроскопически и в отдельных случаях проверяли культурально и биологически для исключения бактериальных загрязнений. Предварительно ставили опыт по проверке длительности инкубационного периода и силы реакции при применении различных доз крови, используемых для вакцинации. Вакцинацию проводили 1 мл вирулентной дефибринированной кровью в комбинации с химиотерапевтическими препаратами (пироплазмином, новоплазмином, акаприном и некоторыми другими антипротозойными препаратами).

Способ прост, но у него есть ряд недостатков. Для вакцинации использовали вирулентную кровь (живых возбудителей) от больных животных-доноров. Внесение в кровь антипротозойных препаратов перед самой вакцинацией не предохраняет животное от последующего заражения, если возбудитель устойчив к препарату или препарат действует на разные формы - только на внеэритроцитарную или только на внутриэритроцитарную форму. В крови животного могут находиться в латентной форме и другие возбудители кровепаразитарных инфекций (бартонеллы, риккетсии, анаплазмы, токсоплазмы и т.д.). Поэтому введение зараженной крови в качестве вакцинного материала в данном случае будет способствовать искусственному распространению инфекции, которая может быть невосприимчивой к используемым антипротозойным препаратам.

Технической задачей изобретения является создание эффективной и безопасной вакцины (аутогемовакцины) против кровепаразитарных инфекций.

Поставленная техническая задача достигается предлагаемым способом, заключающимся в следующем.

Производят забор венозной крови в емкость с антикоагулянтом от того биологического объекта (больное животное или человек), которому необходимо приготовить вакцину. Кровь центрифугируют 10 мин при 5000 об·мин-1 для осаждения клеток крови с находящейся в них внутриклеточной инфекцией и внеклеточных форм кровепаразитов из плазмы. После центрифугирования супернатант (плазму) удаляют. Отцентрифугированный осадок (эритроцитную массу) лизируют добавлением к последнему стерильной дистиллированной воды в соотношении 1:(1,5-2,0) с последующим тщательным встряхиванием емкости в течение 7-12 мин для полного лизиса клеток крови. Деструктурирование клеток крови и инфекционных агентов происходит за счет вхождения дистиллированной воды в клетки с более высокой концентрацией веществ, клетки разбухают и лопаются. Далее лизат крови выдерживают в течение 21 дня при температуре 15-25°C, производя активное встряхивание емкости в течение 1-3 мин не менее двух раз в неделю. Через 21 день в лизате крови будут находиться элементы дефрагментированных мембран клеток крови, их органелл, гемоглобин, поверхностные мембранные антигены и ДНК возбудителей. Для дополнительной инактивации ДНК и "стерилизации" вакцинного материала в последний вносят 4% раствор гентамицина и 15% раствор клиндамицина и выдерживают еще 7 дней. В частном случае производят забор 5 мл венозной крови в шприц или пробирку с антикоагулянтом, собранную кровь распределяют по 1 мл в 4 пластиковые стерильные пробирки с крышечками объемом 1,5 мл и далее все технологические операции производят одновременно с каждой пробиркой, что позволяет сохранить стерильность вакцинного материала и в последующем дозировать вакцинный материал в определенном объеме.

Полученную аутогемовакцину вводят подкожно или внутримышечно по 3 мл два раза с интервалом между введениями 14 дней или в три приема - по 1.5 мл в 1 и 7 дни и на 14 день - 3 мл. В каждом случае период введения вакцины занимает 2 недели. После применения данной вакцины организм начинает вырабатывать иммунные тела против тех возбудителей, с которыми не смог справиться при длительном паразитоносительстве.

Определяющими отличиями предлагаемого способа от прототипа являются:

1. Забор крови осуществляют от того биологического объекта (больное животное или человек), которому необходимо приготовить аутогемовакцину, что позволяет избежать заражения инфекциями из крови другого организма.

2. Кровь предварительно центрифугируют, преимущественно при 5000 об/мин, что позволяет осадить клетки крови с находящейся в них внутриклеточной инфекцией и внеклеточные формы кровепаразитов из плазмы.

3. После центрифугирования плазму крови с растворенным в ней фибрином удаляют, что позволяет максимально сохранить клетки крови, которые могут содержать возбудителей "кровяных" инфекций, таких как бабезии, малярийный плазмодий, токсоплазмы, бартонеллы, риккетсии, анаплазмы, микоплазмы и т.п.; при этом происходит минимальная контаминация вакцинного материала. В прототипе при дефибринировании крови эритроциты, пораженные "кровяными" инфекциями, а также внеклеточные формы инфекций за счет цитоадгезивных лигандов могли захватываться волокнами фибрина и удаляться из крови.

4. Отцентрифугированный осадок (оставшуюся эритроцитную массу) лизируют добавлением к осадку стерильной дистиллированной воды в соотношении 1: (1,5-2,0) и встряхивают в течение 7-12 минут для полного лизиса клеток крови, что позволяет оставить в лизате ДНК возбудителей "кровяных" инфекций и их поверхностные мембранные антигены.

5. Лизат крови выдерживают в течение 21 дня при температуре 15-25°C, что позволяет выделить ДНК из всех паразитов и освободить ее от белков-гистонов посредством взаимодействии ее с электролитами крови (Na+ и К+), выделившимися в гемолизат из эритроцитов. Преимущественно два раза в неделю лизат крови активно встряхивают в течение 1-3 минут.

6. К вакцинному материалу добавляют 4% раствор гентамицина и 15% раствор клиндамицина - антибиотиков, обладающих синергизмом и широким спектром антимикробного действия, выдерживают 7 дней для полной инактивации "кровяных" инфекций и стерилизации вакцинного материала.

Принцип аутогемовакцинации построен на том факте, что в крови животных и людей в большинстве случаев содержатся возбудители кровяных инфекций, которые подавляют гуморальный и клеточный иммунитет. Это есть инфекция, которую организм сам уничтожить не может, так как кровепаразиты являются внутриклеточными и хорошо защищены от иммунных клеток организма хозяина и, кроме того, синтезируют вещества, разрушающие гуморальные и макрофагальные антитела.

Использование аутонозода подкожным или внутримышечным введением позволяет восстановить функцию иммунной системы. Особенностью строения внеклеточных форм бабезий является то, что они имеют полисахаридную наружную мембрану, что препятствует работе гуморального и клеточного иммунитета, так как в этой мембране отсутствуют белковые рецепторы. После проникновения в эритроциты полисахаридная мембрана редуцируется и остается одна белковая. Но в этом случае паразит защищен только мембраной эритроцита. Более того, на поверхности пораженных паразитами эритроцитов накапливаются ложные белки-антигены, которые выбрасываются паразитами для избегания иммунного ответа со стороны макроорганизма. При осаждении антигенов центрифугированием и при разрушении эритроцитов в лизат попадают дефрагментированные цитоскелеты клеток эритроцитов и лейкоцитов, органеллы и ДНК клеток белой крови, гемоглобин, поверхностные антигены, расположенные на мембранах эритроцитов, внутриклеточные инфекционные антигены, белки одинарных мембран, ДНК трофозоитов и мерозоитов. Вышедший из эритроцитов белок-гемоглобин в данном вакцинном материале выступает в качестве депонирующего вещества. ДНК, освобожденная от белков-гистонов под действием электролитов крови, становится информативной и доступной для макрофагов, активируя их компетентность. В лизате происходит разбухание и разрушение внеклеточных форм - мерозоитов, которые дополнительно инактивируются антибиотиками (в качестве инактиваторов должны использоваться смеси антибиотиков, ингибирующие 30S и 50S субъединицы рибосом). Срок хранения вакцины - до 1 года при температуре 4-8°С.

Способ иллюстрируется следующими примерами конкретного выполнения.

Пример 1

Вакцинация проведена на животных - собаках и кошках.

Для приготовления вакцины собаке забирали у животного из вены 5 мл венозной крови в шприц с 50 мкл стандартного раствора гепарина или в пробирку, обработанную ЭДТА. Кровь по 1 мл распределяли в 4 пластиковые стерильные пробирки с крышечками объемом 1.5 мл (эппендорф) и центрифугировали 10 мин при 5000 об·мин-1, плазму из пробирок удаляли. У кошек в связи с малым объемом крови в организме забирали 1-2 мл крови и распределяли по 0.5-1 мл в 2 пробирки.

В пробирки доливали стерильную дистиллированную воду до объема 0,5-1,0 мл и тщательно встряхивали в течение 7 мин. Затем пробирки выдерживали в течение 21 дня при температуре 15-25°C, два раза в неделю производя активное встряхивание штатива с пробирками в течение 3 мин. Через 21 день в каждую из пробирок вносили по 100 мкл 4% раствора гентамицина и 50 мкл 15% раствора клиндамицина и оставляли пробирки еще на 7 дней.

Полученную вакцину вводили: крупным собакам - подкожно или внутримышечно по 3 мл два раза с интервалом между введениями 14 дней; мелким собакам - в три приема - по 1,5 мл в 1 и 7 дни и на 14 день - 3 мл. В каждом случае период введения вакцины занимал 2 недели. Кошкам вакцину вводили подкожно или внутримышечно в количестве 0,5-1 мл с интервалом в 14 дней.

Всего было вакцинировано 82 животных - 58 собак и 24 кошки. В результате вакцинации было установлено, что при хроническом течении бабезиоза (пироплазмоза) и бартонеллеза с неявно выраженными клиническими признаками заболевания происходило снижение паразитемии на 20-30%, или происходило полное очищение крови. При введении аутогемовакцины в тканях происходит активация клеточного (макрофагального) иммунитета. За счет встречи с антигеном в тканях макрофаги становятся компетентными по отношению к "кровяным" инфекциям и начинают ее уничтожать.

Пример 2.

Пациент А, 42 года. Вакцинирован три года назад. Кровь для приготовления аутогемовакцины предварительно была исследована на наличие кровепаразитарных инфекций. Анализ показал, что паразитемия составляла 68% пораженных эритроцитов.

Для приготовления вакцины произвели забор у пациента 5 мл венозной крови в пробирку с гепарином, кровь по 1 мл распределили в 4 пластиковые стерильные пробирки с крышечками объемом 1.5 мл (эппендорф) и центрифугировали 10 мин при 5000 об·мин-1, плазму из пробирок удалили. В пробирку долили стерильную дистиллированную воду (вода для инъекций) до объема 1,3 мл и тщательно встряхивали в течение 10 мин. Затем пробирки выдерживали в течение 21 дня при температуре 15-25°C, два раза в неделю производя активное встряхивание штатива с пробирками в течение 1 мин. Через 21 день в каждую из пробирок вносили по 100 мкл 4% раствора гентамицина и 50 мкл 15% раствора клиндамицина и оставляли пробирки еще на 7 дней.

Полученную вакцину ввели пациенту внутримышечно в два приема - по 3 мл в 1 и 14 дни.

Через 4 месяца после вакцинации паразитемия у пациента снизилась до 1-2% и сохранялась стабильной в течение 3 лет.

Всего заявляемой вакциной было вакцинировано 95 человек.

Заявляемый способ обеспечивает получение эффективной и безопасной вакцины и позволяет существенно снизить затраты времени и финансовых средств на приготовление вакцинного материала. Применение аутогемовакцины устраняет возможность развития аллергических реакций, которые могут возникнуть на введение вакцины из экзогенного антигена. Приготовление вакцинного материала возможно в лабораторных условиях поликлиник и стационаров, поскольку способ технически прост, эффективен и доступен в любой лаборатории. Использование заявляемой вакцины позволит улучшить иммунобиологическую реактивность организма и усилить активную иммунизацию против "кровяных" внутриклеточных инфекций. Данная вакцина особенно рекомендована тем пациентам, которые по каким-либо причинам не могут принимать антипротозойные препараты и антибиотики.

Источники информации

1. Шакалов К.И. Патогенетическая терапия заболеваний животных. - Л. - М.: Сельхозгиз, 1961, - 496 с.

2. Ланнингер-Боллинг Д. Целительная сила крови: руководство по аутогемотерапии. Пер. с нем. - М.: Арнебия. 2001, - 140 с.

3. Болезни овец (Под ред. Терентьева Ф.А., Маркова А.А., Полыковского М.Д. - М.: Сельхозиздат; 1963. - 520 с.

4. Богородицкий А.В. Иммунизация молодняка крупного рогатого скота против тейлериоза, пироплазмоза и франсаиллеза // Протозойные болезни сельскохозяйственных животных. - Москва, 1955. - С.200-207.

5. Колабский Н.А. Опыты по ослаблению вирулентных свойств гемоспоридий и использование их для иммунизации сельскохозяйственных животных // Протозойные болезни сельскохозяйственных животных. - Москва, 1955. - С.213-222.

6. Moreau Y., Vidor E., Bissuel G, Dubreuil N. Vaccination against canine babesiosis: an overview of field observations // Trans. Roy. Soc. Trop. Med. Hyg. - 1989. - Vol.83. - P.95-96.

7. Kumar S., Malhotra D., Dhar S., Nichani A. Vaccination of donkeys against Babesia equi using killed merozoite immunogen // Vet. Parasitol. - 2002. - Vol.106, №1. - Р.19-33.

8. Costa-Junior L.M., Rabelo E.M., Martins Filho O.A., Ribeiro M.F. Comparison different direct diagnostic methods to identify Babesia bovis and Babesia bigemina in animals vaccinated with live attenuated parasites // Vet. Parasitol. - 2006. - V.139. - №1-3. - P.231-236.

9. Свирская С.А. Опыты по иммунизации крупного рогатого скота против бабезиеллоза // Протозойные болезни сельскохозяйственных животных (гемоспоридиозы и трипаносомозы). - Москва, 1955. - С.208-213.

1. Способ приготовления вакцины против кровепаразитарных инфекций, включающий забор вирулентной крови и инактивацию последней, отличающийся тем, что забор крови осуществляют от того биологического объекта, которому необходимо приготовить вакцину, далее кровь предварительно центрифугируют, плазму удаляют, в оставшуюся эритроцитную массу добавляют стерильную дистиллированную воду в соотношении 1:(1,5-2,0), встряхивают в течение 7-12 мин для полного лизиса клеток крови, выдерживают полученный лизат крови в течение 21 дня при температуре 15-25°, затем вносят в лизат 4%-ный раствор гентамицина и 15%-ный раствор клиндамицина и выдерживают 7 дней.

2. Способ по п.1, отличающийся тем, что собирают 5 мл венозной крови в шприц или пробирку с антикоагулянтом, а затем собранную кровь распределяют по 1 мл в 4 пластиковые стерильные пробирки с крышечками объемом 1,5 мл.

3. Способ по п.1, отличающийся тем, что кровь центрифугируют при 5000 об/мин-1 в течение 10 мин.

4. Способ по п.1, отличающийся тем, что при выдерживании лизата крови последний интенсивно встряхивают в течение 1 -3 мин не менее двух раз в неделю.

www.findpatent.ru

Пироплазмоз (бабезиоз) крупного рогатого скота