 |
|
|
|||||||||
|
Вакцины против опухолей: современное состояние проблемы. Дендритные клеточные вакциныДендридно-клеточные вакцины - Клиника иммунопатологииВ 85-90% случаев вирус герпеса находится под контролем иммунной системы. Однако у 10-15% людей при ослаблении иммунитета происходит развитие выраженных проявлений заболевания, при этом частота рецидивов может варьировать от 1-2 до 12-20 раз в год. Стандартные методы леченияКак правило, для лечения хронической рецидивирующей герпесвирусной инфекции используют противовирусные препараты. Наиболее широко применяются ацикловир, валтрекс (противовирусные препараты), а также иммуномодуляторы –ликопид, полиоксидоний, деринат, глутоксим, неовир, циклоферон, витамины группы В. Однако все вышеописанные препараты могут лишь купировать острые проявления, но не предотвращают повторного рецидивирования хронической герпетической инфекции, а в ряде случаев даже не снижают частоту рецидивов. Кроме того, отсутствуют четкие клинико-лабораторные критерии назначения и последовательности применения тех или иных комбинаций различных препаратов. При этом важно отметить, что к большинству современных противовирусных препаратов формируется «привыкание», что также приводит к рецидивам заболевания и новому циклу терапии.
В нашей клинике специалисты подходят к лечению герпесвирусной инфекции комплексно. На базе отделения иммунологии проводятся программы лечения, которые позволяют добиться длительной ремиссии. В нашей программе лечения сочетаются:
Курс лечения начинается в стационаре (две недели) и длится 3 месяца. Наличие в клинике огромной лаборатории клеточных технологий, позволяет сочетать стандартные медикаментозные методы лечения с собственными научно-практическими разработками. Так в нашей клинике активно внедряются методы клеточных технологий, которые зарекомендовали себя как действенные, результативные и безопасные для пациента. Описание метода ДК вакциныСотрудники Института клинической иммунологии разработали альтернативный метод лечения хронических вирусных инфекций с помощью дендритно-клеточных вакцин (ДК-вакцины). Известно, что ключевую роль в распознавании чужеродных (в том числе, вирусных) клеток и борьбе с ними играют дендритные клетки (ДК). Когда ДК обнаруживают вирусные клетки, они направляются к ближайшему лимфатическому узлу и активируют натуральных киллеров, которые без ДК находятся в состоянии покоя и самостоятельно не могут обнаружить угрозу для организма человека. Таким образом, сотни тысяч клеток в организме человека способны погасить вирус, в случае если командовать ими будет ДК. Рядом исследований было показано, что хронические инфекционные заболевания вирусной природы происходят из-за снижения количества и/или функциональной активности ДК, что рассматривается в качестве одного из возможных механизмов проявления вируса в организме больного. Поэтому основой метода стало наполнение организма больного недостающими ДК, для правильной работы иммунной системы. На сегодняшний день специалистами отделения иммунологии используется уникальный способ генерации ДК с ипользованием ИФН- α (Интерферон Альфа). Так, ИФН-ДК генерируются быстрее по времени, характеризуются высокой способностью к захвату антигена, сохраняют стабильность, имеют более высокую миграционную активность, более активно стимулируют CD8 Т-лимфоциты, индуцируют сбалансированный клеточный и гуморальный иммунный ответ. Учитывая также, что ИФН-ДК по некоторым данным обладают прямой цитотоксической активностью, применение данного типа ДК при хронических вирусных инфекциях представляется более перспективным.
ПрименениеГоспитализация больного осуществляется в период ремиссии (как минимум через 2 недели после последнего рецидива). Показанием для проведения специфической иммунотерапии является наличие хронической герпесвирусной инфекции, резистентной к противовирусным препаратам и с частотой обострения более 6 раз в год. ДК генерируют из моноцитов периферической крови больного. Процедуру забора крови проводят в утренние часы. Далее в лаборатории клиники по специальным технологиям обрабатывают кровь и культивируют нужные в данном случае клетки.Специфическую иммунотерапию проводят в виде 2 курсов ДК-вакцинаций. Первый «индукторный» курс включает 4-6 подкожных инъекций с 2-недельным интервалом. Через 3 мес после завершения первого курса проводят второй «поддерживающий» курс ДК-вакцинаций 1 раз в месяц.
РезультатыЗаявляемый способ иммунотерапии был применен у 29 больных. Длительность заболевания составила в среднем от 15 до 25 лет, а количество обострений от 8 до 15 в год. Лечение проводили на фоне полной отмены противовирусных препаратов (вследствие их токсичности и/или малой эффективности) и каких-либо других иммуномодуляторов. Проведение специфической иммунотерапии по разработанной схеме характеризовалось хорошей переносимостью, не вызывало местных и системных аллергических и/или воспалительных реакций. У больных регистрировалось достоверное уменьшение числа обострений: на фоне лечения количество рецидивов снизилось до 4 против 6 эпизодов до лечения, а в течение 6 мес после окончания лечения – до 2,4. Соответственно, межрецидивный период на фоне терапии увеличился до 82 дней. При этом у 45% пациентов в период 6-месячного наблюдения не было зарегистрировано ни одного обострения, а у 55% имевших рецидивы, обострения протекали в более легкой форме с меньшей площадью высыпаний и менее выраженной интоксикацией. Таким образом данный способ позволяет уменьшить число рецидивов и выраженность клинических проявлений герпесвирусной инфекции, за счет индукции эффективного антиген-специфического клеточного иммунного ответа и поддержания его на адекватном уровне в течение длительного периода времени. Подробнеео заболевании kl-im.ru Вакцины на основе дендритных клеток в лечении герпетической инфекцииУДК 612.017.1; 615.375 ВАКЦИНЫ НА ОСНОВЕ ДЕНДРИТНЫХ КЛЕТОК В ЛЕЧЕНИИ ГЕРПЕТИЧЕСКОЙ ИНФЕКЦИИ Леплина О.Ю., Желтова О.И., Борисова А.Е., Старостина Н.М, Останин А.А., Черных Е.Р. НИИ клинической иммунологии СО РАМН, Новосибирск Введение Дендритные клетки (ДК), будучи наиболее эффективными антигенпрезентирующими клетками, играют важную роль в запуске противовирусного иммунного ответа [1]. Поэтому использование ДК, нагруженных вирусными антигенами, рассматривается в качестве перспективной стратегии активации иммунного ответа при лечении хронических рецидивирующих форм вирусных инфекций, в том числе вызванных вирусом простого герпеса. Традиционно ДК получают путем культивирования моноцитов периферической крови в присутствии GM-CSF и IL-4 [4]. Однако замена IL-4 на интерферон-a (ИФН-ДК) позволяет получить клетки с более высокой миграционной активностью, способностью активировать как Th2-, так и Th3-ответ и продуцировать IFN-a [2, 3]. Целью работы явилось проведение пилотного клинического исследования по оценке переносимости, безопасности и эффективности иммунотерапии (ИТ) с использованием дендритных клеток у больных рецидивирующей герпетической инфекцией. Материалы и методы. В исследование было включено 7 женщин (средний возраст–29,7±3,5лет) с орофациальной локализацией герпетической инфекции, длительность заболевания у которых составляла в среднем 18,3±1,3 года, а количеством обострений — 11,9±0,96 в год. Лечение проводилось согласно протоколу, утвержденному решением Ученого Совета и Локального этического комитетом, после подписания пациентами информированного согласия. Мононуклеарные клетки (МНК) из периферической крови получали центрифугированием в градиенте плотности фиколла-верографина. Дендритные клетки генерировали путем культивирования прилипающей фракции МНК во флаконах для культивирования (BD Bioscienses Falcon, UK) в течение 3 сут в среде RPMI-1640 (Sigma, США) в присутствии GM-CSF (Sigma, США) 40 нг/мл и INF-a 1000 ЕД/мл (Роферон-А, Roche, Швейцария) с последующим дозреванием в течение 24 ч в присутствии полиоксидония 2 нг/мл (НПО ПетроваксФарм, г.Москва). ДК нагружали специфическим рекомбинантым антигеном HSV1gD (НПО «Диагностические системы», г.Нижний Новгород) в дозе 5 мкг/мл и криоконсервировали для последующего использования. Лечение проводилось в два курса. Первый — включал 4-6 подкожных инъекций ИНФ-ДК (5х106 клеток), c 2-недельным интервалом. Второй (через 3 месяца после завершения первого) — 3-6 вакцинаций с кратностью 1 раз в месяц. В качестве адъюванта использовался ронколейкин по 250000 ЕД. Интенсивность специфического ответа оценивали на 3 сут по пролиферации МНК больных в ответ на стимуляцию HSV1gD антигеном (5 мг/мл) в отсутствие и присутствие ронколейкина (100 Ед/мл). Неспецифический ответ оценивали по пролиферации МНК в ответ на стимуляцию конканавалином А (15 мкг/мл; Sigma, USA). Статистическую обработку данных проводили при помощи пакета прикладных программ Statistica 6.0 для Windows. Результаты исследования. Проведение специфической ИТ характеризовалось хорошей переносимостью, не вызывало аллергических и/или воспалительных реакций. При анализе клинической эффективности было показано достоверное уменьшение числа обострений на фоне лечения (4,0±0,7 против 5,93±0,48 эпизодов до лечения; рu<0,05) и в течение последующих 6 месяцев наблюдения (2,4±0,97;рu<0,05). Соответственно, межрецидивный период на фоне терапии возрос до 81,6±13,8 дней, а в период 6 мес наблюдения после терапии составил 67,1±16,2 дня, что было достоверно выше соответствующего показателя до лечения (18,7±3,2; рu<0,05). При этом у 3 пациентов в период 6-месячного наблюдения не было зарегистрировано ни одного обострения, а у 4-х имевших рецидивы, обострения протекали более мягко с меньшей площадью высыпаний и интоксикацией. Проведение ИТ приводило к достоверному усилению антигенспецифического ответа, который сохранялся повышенным до 6 мес после завершения терапии (таб.1) Кроме того, у больных отмечалось значимое усиление исходно сниженной пролиферативной активности МНК на поликлональный митоген конканавалин А. Причем за период 6 мес наблюдения после лечения пролиферативный ответ МНК на КонА возрос более чем в 2 раза. Таблица 1. Динамика пролиферативного ответа МНК (имп/мин) на HSV1gD антиген и КонА
Примечание: данные представлены в виде М±m, *-достоверность различий, рu<0,05, u-критерий Вилкоксона-Манна-Уитни Таким образом, судя по предварительным данным, специфическая ИТ на основе ДК позволяет уменьшить число рецидивов и выраженность их проявлений, что сопряжено с активацией специфического и неспецифического иммунного ответа. Важно отметить, что стандартная противовирусная терапия не всегда позволяет избежать рецидива заболевания и добиться нормализации иммунологических показателей у данной категории пациентов. В связи с этим разработка новых подходов к терапии, направленных на активацию специфического иммунного ответа, является важными компонентом комплексного лечения герпесвирусной инфекции. В этом аспекте интреферон-индуцированные ДК, нагруженные HSV1gD антигеном, могут быть перспективными кандидатами при проведении специфической ИТ. Список литературы
ВАКЦИНЫ НА ОСНОВЕ ДЕНДРИТНЫХ КЛЕТОК В ЛЕЧЕНИИ ГЕРПЕТИЧЕСКОЙ ИНФЕКЦИИ Леплина О.Ю, Желтова О.И., Борисова А.Е.. Старостина Н.М, Останин А.А., Черных Е.Р. НИИ клинической иммунологии СО РАМН, Новосибирск Резюме Исследование посвящено оценке безопасности, клинической эффективности и иммунокорригирующего эффекта специфической иммунотерапии на основе дендритных клеток у больных рецидивирующей герпесвирусной инфекцией. Семи пациенткам проведено два курса вакцинаций аутологичными дендритными клетками (ДК), нагруженных специфическим HSV1gD-антигеном. Иммунотерапия характеризовалась хорошей переносимостью, не вызывала аллергических и воспалительных реакций и приводила к достоверному уменьшению числа рецидивов и увеличению межрецидивного периода. В ходе лечения отмечено нарастание анитигенспецифического иммунного ответа и усиление исходно сниженной пролиферативной активности МНК на поликлональный митоген конканавалин А. Разработка такого подхода позволяет повысить эффективность лечения больных рецидивирующей герпетической инфекцией.. В этом аспекте интреферон-индуцированные ДК, нагруженные HSV1gD антигеном, могут быть перспективными кандидатами при проведении специфической ИТ. DENDRITIC CELLS VACCINES IN THE TREATMENT OF HERPETIC INFECTIONLeplina O.Yu, Zheltova O.I, Borisova A.E., Starostina N.M., Ostanin A.A., Chernykh E.R.Institute of Clinical Immunology SB RAMS, NovosibirskSummary The present research is devoted to the assessment of the safety, clinical efficacy and immunomodulatory effect of specific immunotherapy based on dendritic cells (DC) in patients with recurrent herpes virus infection. Seven patients enrolled in this pilot study were introduced with autologous dendritic cells pulsed with specific HSV1gD-antigen. Immunotherapy is well tolerated, does not cause allergic and inflammatory reactions. It is of grate importance that such a vaccination leads to a reduction in the number of relapses and significantly increase period between them. The treatment with dendritic cells is associated with the increase of antigen-specific immune response and enhancement of proliferative response of polyclonal activated MNC, which was initially reduced. Specific immunotherapy based on dendritic cells can improve the efficiency of traditional treatment in recurrent herpes infection patients In this aspect interferon-induced DCs pulsed with HSV1gD antigen may be perspective candidates for specific immunotherapy. Клеточные технологии в лечении инсульта: проблемы и перспективы »« Аутологичные клетки костного мозга в комплексном лечении пациентов c хроническими гепатитами и циррозом печениkl-im.ru Противоопухолевые вакцины: последняя на дендритные клетки | Существует растущий консенсус среди исследователей, дендритные клетки обеспечивают сильные стимулы для создания иммунитета, однако, что в результате онкологических заболеваний иммунного ответа может оказаться недолговечным. Консенсус относительно оптимального маршрута доставки этих клеток, однако, остается неуловимым. Некоторые исследователи показали отличные деятельности посредством внутривенного введения, некоторые с внутрикожного администрации, и другие с подкожного введения. Intranodal маршрут заслуживает особого упоминания, поскольку его глубокое научное обоснование. Первые испытания с использованием пептид-импульсной дендритных клеток для лечения метастазов злокачественных новообразований были представлены на ASCO прошлогоднем совещании. В этом году мы видим Попытки доработать стратегию. [1] MUC-1 "продолжает Гарнер внимания, но энтузиазм пошел на убыль, как сравнительно мало доказательств демонстрирующих, что MUC 5-Mer повторяю может спровоцировать мощное цитотоксических Т-лимфоцитов (CTL ) или сильного обобщенного Т-клеточных реакций. Валон и коллег [2] занятого дендритных клеток, полученных из мононуклеарных клеток периферической крови инкубировали EX VIVO без цитокинов и импульсный с идиотип белка у больных с множественной миеломой; лечились либо высоких или низких пациента опухоль бремя. Шесть из 13 пациента низкая нагрузка была ответом на многочисленные внутривенно дендритных клеток (3 полных ремиссий и 3 частичных ремиссий). Иммунных ответов были замечены только на одну треть, но коррелировал с клинической реакции. Нет ответов наблюдались у пациентов с большим бременем опухоли, но 17 из 38 больных был несовершеннолетним ответ или стабилизация заболевания. Эти обнадеживающие результаты могут быть отчасти объясняется работой Faries [3], который лечил больных меланомой пептид-импульсной дендритных клеток, созрел с новой комбинацией кальция ИОНОФОРОМ, интерлейкин (IL) -2, ИЛ-12 и оценили маршрут иммунизации в небольшое исследование. Intranodal маршруте, в отличие от внутривенно или подкожно, появилась генерировать больше клинических ответы и гиперчувствительность замедленного типа (DTH) ответов, о чем свидетельствует тот факт, что 6 из 6 intranodal больных были положительные ответы DTH. Только 2 смешанных респондентов были замечены из 12 больных, однако. Другой подход был принят Haluska и коллег, [4], который лечил пациента метастатической меланомы дендритных клеток трансфецированных аденовирусной вектора кодировки 2 различным антигенам меланомы, GP100 и MART-1. Дендритных клеток вводился подкожно, и 3 из 9 пациентов развилась витилиго. Нет объективных клинических ответов были замечены в 8-анализа пациентов, но конкретный антиген-реактивность CTL наблюдалась у 2 больных. РаЫ и коллеги [5] пациентов подшипник MAGE-1 и -3 положительных опухолей МАГЭ пептиды с или без замочной скважины hemocyanin lympet (KLH) в качестве "антиген помощником" и подкожно и внутривенно. Был никаких доказательств, что KLH добавили в дендритные клетки расширенной реактивность CTL направлено против антигенов, а реактивность по ELISPOT было отмечено в более чем 50% пациентов в обеих группах. Реакционная достигнуто в среднем 0,37% от CD8 +-клеток в течение недели после иммунизации в неофициальном KLH группе, но это было лишь временным. Эти данные позволяют предположить, что вспомогательные антиген как KLH которой хозяин наивно не может увеличить CTL реактивность в конце концов, как предполагалось ранее на основе предварительных данным на мышах. Баттерфилд и связывает [6] лечение больных с метастатической меланомы с MART-1 импульсный дендритные клетки предоставляется либо внутрикожно или внутривенно. Уровень CTL порожденных тетрамером анализ показал, что увеличение произошло более решительно больных, получавших дендритные клетки внутрикожно, которая достигла пика после 1-2 инъекций; частот увеличилась у некоторых пациентов до 1 / 27 CD8 + Т-клеток. Среди 6 пациентов, было 1 частичной ремиссии и 1 стабильного пациента. Вебер и коллег [7] изучили иммунные реакции у больных с резецировали этап III / IV меланомой с высоким риском рецидива, который получил несколько меланомы пептиды эмульгированных с адъювантной неполной Фрейнда с или без Ил-12. Исследователи обнаружили, что добавление низких доз ИЛ-12 на вакцину сайта расширенный иммунный ответ, хотя уровень рецидивов составил эквивалент в обеих руках. Обширную серию анализов иммунную предложил, чтобы существовала согласованность между DTH, иммуноферментного анализов и анализов на тетрамером свежей крови. Концепция, что целую лизатами опухоль или экстракты могут обладать всеми необходимыми антигенов для стимуляции CTL была испытана Кахалем и коллег, [8], который вводил гранулоциты-моноцитов колонии-стимулирующий фактор (GM-CSF) пополнялось пациентам внутривенно опухоли Лизат - импульсный дендритных клеток, затем Ил-2, альфа-интерферон, и ГМ-КСФ. DTH ответы на лизаты наблюдается в большинстве пациентов, и 1 частичную ремиссию (меланомы) и 7 стабильных пациентов были замечены в общей сложности 15 рассматриваются, хотя их медианы статус исполнения было 2. Амато и связывает [9] проверили эту идею, что введение опухоли, полученных gp96 белков теплового шока (БТШ) будет вызывать регресс у больных с метастатической почечно-клеточного рака после нефрэктомии. Из 70 больных, 21 не могут быть оценены. Для 25 из оставшихся 49 пациентов, было 2 цели клинических ответов; прогрессирующих больных с Ил-2 были стабильными. Кадиш и сотрудниками [10] приняли совершенно иной тактики путем иммунизации нормалей с вирусом папилломы человека (ВПЧ) E7-HSP65 синтеза белка. Одноместные дозы HSP-синтез белка от 10 до 500 микрограмм (мкг) вводился подкожно, без существенных побочных эффектов; Т-хелперов пролиферативный ответ был увеличен postvaccine в трети пациентов, независимо от дозы. Вопросов генетической модификации опухолевых клеток и их использование в качестве реагентов продолжать вакцина будет продолжено. Смит и связывает [11] вводят HLA-A2 + больных раком молочной железы с аллогенной HLA-A2 +, + HER2/neu рак молочной железы трансфецированных линия для производства костимуляторных CD80 молекуле. Пациенты также получили ГМ-КСФ и БЦЖ в качестве адъювантов. Не наблюдалось клинических ответов, хотя были замечены иммунных ответов на HER2/neu и untransfected линию клеток опухоли. Яффе и коллеги [12] вакцинированных больных раком поджелудочной железы postpancreatectomy с ГМ-КСФ трансфецированных аллогенных линии опухолевых клеток и измерить DTH реактивность для опухолевых клеток и общей выживаемости до и после введения адъювантной химиолучевой терапии. DTH реактивность на опухолевые клетки были обнаружены в высшую когорту дозы и, как представляется, коррелируют с выживанием. Non-класс I Ограниченная Белки Вакцины Ряд исследователей испытания Non-класс я ограничены белки вакцин. Slovin и связывает [13] испытания кластерной Тп sialoprotein связано с KLH и администрируется адъювантной QS-21 до 15 пациентов с раком простаты. Высокий титр IgG и IgM антител против Т "были обнаружены у большинства пациентов, а также несколько пациентов было сокращения простата-специфического антигена (ПСА) значения или уменьшения скорости СРП. Есихарой и сотрудниками [14] тестирование бета-ХГЧ пептидных вакцин фрагмента сопряженного дифтерийный анатоксин в качестве перевозчика у больных с колоректальным раком. Пятьдесят шесть из 77 больных позволило антител против бета-ХГЧ и, самое главное, общей выживаемости изменяется с общей титры, а также числа эпитопам которых были произведены антитела. MUC-1 вакцину, состоящую из 5-Mer повторение пептид последовательности позвоночник с примесью роман адъювантной СО-AS2 была испытана в резекции или расширенный больных раком поджелудочной железы по Раманатан и коллег. [15] гликозилированный полипептидных была способна заставить антител а также CD8 + T-клеточного ответа на 2 низких дозировках. MUC-1 повторяют основе пептидных тримера связано с KLH и смешивают с адъювантной QS-21 была использована Гилевски и сотрудниками [16] для иммунизации пациентов с высокой резекции рака молочной железы риск, и только 5 из 12 больных были IgM ответов на обязательные анализы MUC-1 положительных клеток опухоли, и только 1 из 12 IgG был ответ. Не наблюдалось DTH ответов, предполагая, что этот конкретный MUC построить не иммуногенной. В завершение этой сессии, Самир Khleif, д.м.н., Национальный институт рака в Бетесде, штат Мэриленд, отметил, что дендритные клеточная терапия имеет огромный потенциал, и должны осуществляться агрессивно. [1] Он отметил, что маршрут и режим иммунизации, самобытности и формат антигенов, тип и аксессуары / адъювантов, а также формы представления до сих пор не разработаны на втором этапе исследования. Вместе с тем он предупредил, исследователи не должны попасть в ловушку монтажа недостаточным размером исследований, которые не дают убедительных ответов о тех вопросах. |
 г.Самара, ул. Димитрова 131 [email protected] |
 |