 |
|
|
|||||||||
|
Обзор вакцин против холеры. Вакцины холерные1. Вакцина акдс(Адсорбированная коклюш, дифтерия, столбняк)
2.Вакцина против клещевого энцефалита
3.Холерная вакцина Эль-Тор
4. Вакцина Энджерикс-В
5.Антирабическая вакцина (КОКАВ) (культуральная очищенная концентрированная антирабическая вакцина)
6.Вакцина БЦЖ
7.Гриппозная вакцина субъединичная (Значит содержит только основные антигенные компоненты вируса гриппа — его гемагглютинин (НА) и нейраминидазу 1 (NA))
studfiles.net 1.Монофаги холерные жидкиеПредставляют собой стерильные фильтраты фаголизатов бульонных культур холерных вибрионов +стабилизатор( лактоза 3%, натрий глутаминовокислый) . Применяется для идентификации и типирования холерных вибрионов. 2.Сыворотка холерная диагностическая люминесцирующаяИспользуют для экспресс-диагностики холеры. Противохолерную сыворотку получают путем гипериммунизации кроликов холерными вибрионами, полученную сыворотку обрабатывоют флюорохромами. Препараты из исследуемого материала обраб. полученной сывороткой и исследуют в люминисцентный микроскоп. Положительный результат – ярко- зеленое свечение в виде блестящего ободка. 3. Холерная вакцина сухаяВзвесь убитых холерных вибрионов серотипов Инаба и Огава или Эль-Тор 80-160 млрд микробов во флаконах по 1-2 мл Предназначена для активной иммунизации против холеры по эпидемическим показаниям. Вакцину вводят подкожно в верхнюю треть плеча. Ежегодно, двукратно с интервалом 7 дней. +Жидкая вакцина Имеет вид суспензии и содержит 1-16 млрд вибрионов во флаконах по 100 мл 4.Холероген анатоксинВзвесь убитых холерных вибрионов, выращенных в жидкой питательной среде, очищен от балластных веществ. Выпускается в сухом виде. Применяют для специфической профилактики холеры. 5. противохолерная агглютинирующая О-сыворотка, типовые сыворотки Огава и Инаба. Получены из крови кроликов, иммунизированных холерными вибрионами. Применяются для серологической идентификации и типирования холерных вибрионов в реакции агглютинации. Лизоцим. Природа и его свойства. Значение лизоцима в полости рта. -фермент, обладающий свойством лизировать клетки ( в основном грамположительные микроорганизмы) Стимулирует естественную резистентность организма Большое количество находится в местах наиболее подверженных воздействию микроорг(в слюне, секрете слизистых оболочек носа и верхних дыхательных путей) Принято считать фактором неспецифического иммунитета. Сравнительно высокое содержание лизоцима в слюне обуславливает своеобразный местный иммунитет слизистой полости рта. Поэтому небольшие оперативные вмешательства в полости рта, редко осложняются развитием воспаления.. При ряде заболеваний количество лизоцима меняется что позволяет судить об иммунологической реактивности организма. Стафилококки
Инфильтрат бульонных культур стафилококка, осажденный трихлоруксусной кислотой , очищен этиловым спиртом, обезврежен формалином, адсорбирован на гидроксиде алюминия. Выпускается в ампулах по 1 мл. Для активной профилактики стаф. заболеваний и их рецидивов, а так же лечения заболеваний вызываемых стаф. Вводят подкожно в область нижнего угла лопатки. Разовая доза 1.5 мл. дозировка препарата и длительность применения зависят от характера применения.
γ-глобулиновая фракция сыворотки крови, содержащая стафилококковый анатоксин. Готовят из крови людей, содержащих высокие титры антител или доноров , иммунизированных адсорбированными анатоксинами, проверенных на отсутствие антител к ВИЧ-1, ВИЧ-2, к вирусу гепатита С и поверхностного антигена гепатита В, очищенной и концентрированной методом фракционирования спиртовыми осаждающими растворами , прошедшей стадию вирусной инактивации сольвент-детергентным методом. Не содержит консервантов и антибиотиков. Для специфического лечения стафилококковых заболеваний.
Фильтрат фаголизата стафилококка. Прозрачная жидкость, желтоватого цвета + консервант 0,01% хинозол. Применяют для профилактики гнойных кожных инфекций, для коррекции бактериозов, при лечении местных и общих заболеваний. Противопоказаний
Фильтрат бульонной культуры, обезврежен формалином и теплой водой, очищен от балластных белков. Применяют для специфической гипосенсибилизации при аллергозах дыхательных путей. Вводят местно путем аэрозолей, постепенно увеличивая дозу.
Взвесь коагулазоположительных золотистых стафилококков, инактивированных нагреванием . применяется для активной иммунизации с целью с целью лечения длителтно , вялотекущих заболеваний.
Экстракт из культур патогенных стафилококков, прогретых при 100°С и профильтрованных через бактериальный фильтр. Содержит термостабильные стафилококковые антигены . применяют для специфической иммунотерапии.
Набор типоспецифических фагов для фаготипирования Стрептококки studfiles.net Обзор вакцин против холерыНовый обзор исследовательской литературы, возглавляемой исследователями Школы общественного здравоохранения Джона Хопкинса Блумберга (the Johns Hopkins Bloomberg School of Public Health), показывает, что вакцины против холеры обеспечивают значительную защиту взрослых, но обеспечивают значительно меньшую защиту для детей в возрасте до 5 лет, население, особенно подверженное риску смерти от этого заболевания. В обзоре, в котором рассматривались семь клинических испытаний и шесть обсервационных исследований, было установлено, что стандартный режим вакцинации двумя дозами снижает риск заражения холерой в среднем на 58% у взрослых, и только на 30% детей в возрасте до 5 лет. Выводы могут помочь информировать разработчиков политики о том, как и когда использовать вакцину, особенно в условиях вспышки, такой как продолжающаяся эпидемия в Йемене. По оценкам данных, в Йемене выявлено около 400 000 случаев с подозрением на заболевание, а также зафиксировано 1900 случаев смерти от холеры после начала эпидемии в апреле 2017 года. Холера передается фекально-оральным путем, причем вспышки и эндемическая передача имеют тенденцию возникать в районах с плохими санитарными условиями и отсутствием чистой питьевой воды. От холеры ежегодно страдает от трех до пяти миллионов человек во всем мире и ежегодно умирает от 28 000 до 130 000 человек. Вакцины от этого заболевания стоят в среднем 1,85 долл. США за дозу. Оральные холерные вакцины, которые состоят из убитых целых клеток бактерий Vibrio cholerae, стали коммерчески доступны вскоре после их разработки в 1980-х годах. Однако в течение многих лет эти вакцины не были широко доступны, а также были довольно дорогими для широкого общественного здравоохранения. Исследования показали широкий диапазон того, насколько хорошо эти вакцины обеспечивают защиту, а некоторые результаты говорят о том, что риск заболеть холерой сокращается вдвое с помощью вакцины, а другие предполагают, что риск почти устраняется. «По-прежнему существует много дезинформации о том, что такое эта вакцина и что она может делать», - говорит Азман (Azman). Чтобы лучше понять возможности этих вакцин и помочь понять расхождения в результатах исследований, Азман и его коллеги из рабочей группы по пероральной холерной вакцине провели обзор литературы и метаанализ вакцин (Насколько хорошо они защищают в идеальных ситуациях, таких как рандомизированное клиническое исследование) и прямой эффективности (насколько хорошо они работают в менее идеальных ситуациях, например, в разгар вспышки). Команда провела поиск любых рандомизированных контролируемых исследований и обсервационных исследований, которые изучали данные по пероральным вакцинам против холеры. Результатом этих исследований стало семь исследований и шесть исследований, в каждом из которых были задействованы три основные коммерческие вакцины, которые в настоящее время используются. В испытаниях и исследованиях участвовало более 500 000 тысяч человек. Принимая в среднем эти результаты, исследователи обнаружили, что для режима с двумя дозами – стандарт для этих вакцин - эффективность составила 58 % и 76%. Однако для детей младше 5 лет эффективность была значительно ниже: около 30 процентов. По-видимому, одна доза этих вакцин обеспечивала такую же защиту, как и двухдозовый режим, по крайней мере, в течение шести месяцев после вакцинации. Не было данных для изучения долгосрочной защиты режима с одной дозой. Обзор помогает объяснить расхождения в прошлых исследованиях, которые изучали, насколько хорошо эти вакцины работают, говорят авторы. Выводы должны иметь огромное значение для политики вакцинации. Поскольку вакцины не так эффективны у маленьких детей, исследователям необходимо будет лучше понять наилучший способ их использования, чтобы обеспечить наиболее эффективную защиту. В документе также есть надежда на использование режима однократной дозы в районах с высокой передачей холеры, таких как текущая вспышка в Йемене. Было запланировано, что миллион доз вакцины будет отправлен в эту страну - что было бы самым крупным из всех глобальных поставок вакцины против холеры, но правительство решило отменить кампанию, сославшись на проблемы с логистикой и проблемы, связанные с тем, что вакцина не смогла бы что -то сделать, чтобы обуздать эпидемию. Вы можете оценить статью: 1 0 medalmanah.ru Способ получения вакцины против холеры
Использование: в медицине для профилактической иммунизации против холеры. Сущность изобретения: проводят конъюгацию В-субъединицы холерного токсина с сополимером N-окиси этиленпиперазина и N-ацилгидразида этиленпиперазиний бромида с мол.м. 40 кДа азидным методом при весовом соотношении носитель - антиген 3 - 5 : 1. Предложенный способ позволяет получить безвредную, высокоиммуногенную вакцину, не вызывающую аллергического действия на организм. 3 табл. Изобретение относится к способу получения новых физиологически активных соединений, а именно к способу получения конъюгированных вакцин против холеры. Изобретение наиболее эффективно может быть использовано в медицине для профилактической иммунизации против холеры. Известны способы получения живых, убитых, химических вакцин [1-4]. Недостатком живых и убитых вакцин является их высокая реактогенность, кроме того, для живых нельзя исключить возможность реверсии холерогенности. Генно-инженерные вакцины характеризуются непродолжительностью и недостаточной напряженностью иммунитета [5]. Современные представления об особенностях иммунного ответа организма на отдельные протективные антигены холерного вибриона служат основой для конструирования вакцинных препаратов. Вакцины должны способствовать формированию антибактериального и антитоксического иммунитета, направленного как против колонизации возбудителей в кишечнике, так и против действия его токсического фактора, играющего основную роль в патогенезе холеры [6]. Выпускаемые в СССР убитая корпускулярная холерная вакцина и холерная вакцина (холероген-анатоксин+О-антиген) способны стимулировать: первая - антимикробный, вторая - антимикробный и антитоксический иммунитет при парентеральном введении [7,8]. Для поддержания напряженного иммунитета необходима ревакцинация через шесть месяцев. При этом отмечено развитие сенсибилизации, вторичных иммунодефицитов у привитых вследствие многократной вакцинации. Использование в качестве отдельных иммунизирующих агентов анатоксина, B-субъединицы холерного энтеротоксина оказалось малоэффективным вследствие стимуляции только антитоксического иммунитета [1,2]. Наиболее близкой по технической сущности к заявляемому объекту является оральная комбинированная цельноклеточная вакцина с очищенной B-субъединицей холерного токсина. Недостатками указанной вакцины являются невысокий защитный эффект наряду с высокой реактогенностью [9]. Применение оральных вакцин требует многократных ревакцинаций. Целью изобретения является разработка способа получения вакцины против холеры, обладающей высокой эффективностью и безвредностью. Это достигается конъюгацией антигена холерного вибриона - B-субъединицы холерного токсина на полимере-носителе - сополимере N-окиси этиленпиперазина и N-ацилгидразида этиленпиперазиний бромида (полиоксидония) азидным методом при соотношении носитель:антиген 3-5:1. Принципиально новым в предлагаемом изобретении является создание на основе B-субъединицы холерного токсина и полимерного иммуноадъювантного носителя - полиоксидония высокоэффективной вакцины. При этом B-субъединица холерного токсина ответственна за связывание с клеточными рецепторами слизистой оболочки кишечника, то есть способствует формированию антитоксического иммунитета. Конъюгат стимулирует антительный ответ против антигенов, снижает аллергические и другие побочные реакции. Процесс конъюгации проводят при весовом соотношении полиоксидония к B-субъединице 3-5:1. Увеличение соотношения приводит к снижению активности B-субъединицы, уменьшение - к снижению стабильности продукта. Предложенный способ конъюгации позволяет полностью избежать межмолекулярных и внутримолекулярных сшивок и получить конъюгаты с высоким выходом. Выделение конъюгатов осуществляют хроматографическим методом, анализ проводят методами электрофореза в ПААГ, флуоресцентной спектроскопии и малоуглового лазерного светорассеяния. Предложенный способ позволяет получать высокоиммуногенные конъюгаты, обладающие выраженными протективными свойствами, безвредные для организма. Предложенная вакцина может быть использована как самостоятельно, так и в комплексе с конъюгатами деацилированных липополисахаридов (д-ЛПС) сероваров Инаба и Огава с полиоксидонием. Вакцинирующая смесь вышеуказанных конъюгатов, содержащая в своем составе антигены, принимающие участие в формировании антибактериального и антитоксического иммунитета, при однократном введении дает потенциирующий эффект, что ведет к увеличению протективности и иммунологической эффективности. Испытания вакцинирующих соединений, полученных указанным способом, проведены на мышах и кроликах. Проверка заявленного технического решения на соответствие его критерию "существенные отличия" показала, что ни в патентной, ни в научно-технической литературе не выявлено совокупности признаков, указанных в формуле изобретения. Ниже приводятся конкретные примеры осуществления способа получения и анализа физиологических свойств целевого продукта. П р и м е р 1. Получение конъюгата полиоксидония с B-субъединицей холерного энтероксина (конъюгат 1, соотношение полимер:белок - 3:1). 100 мг сополимера N-окиси этиленпиперазина и N-ацилгидразида этиленпиперазиний бромида [10] (мол.м. 40 КДа, 1-10 моль аминогрупп) растворяют в 4 мл 1 н. HCl. Раствор охлаждают до 2оС на ледяной бане. При охлаждении и перемешивании добавляют 1,15 мл 3%-ного раствора нитрита натрия. Через 15 мин доводят pH раствора до 8,5 добавлением 2 н. NaOH. Раствор 33 мг белка (B-субъединица холерного токсина), выделяемого согласно [11] в 10 мл 0,05 М фосфатного буфера pH 8,5, добавляют к раствору активированного сополимера. Поддерживают pH реакционной смеси добавлением 2 н. NaOH. Реакция продолжается в течение 12 ч при охлаждении (2оС) и перемешивании. Для выделения и очистки конъюгата реакционную смесь наносят на колонку (2,6 90), заполненную ультрагелем АсА-34. В качестве элюента используют 0,05 М фосфатный буфер pH 7,5, содержащий 0,05 М NaCl. Выход конъюгата контролируют с помощью проточного спектрофотометра при 226 нм. Выделяют фракцию, выходящую в объеме колонки, содержащую белок и полимер (контроль фракций осуществляют методом флуоресцентной спектроскопии). Для контроля в идентичных условиях хроматографируют смесь нативной В-субъединицы и полиоксидония. Определение содержания белка и анализ конъюгата проводят методами флуоресцентной спектроскопии, электрофореза в ПААГ, малоуглового светорассеяния. В 1 мг препарата содержится 0,3 мг B-субъединицы холерного токсина. Выход: 120 мг (90,2%). П р и м е р 2. Получение конъюгата полиоксидония с B-субъединицей холерного энтеротоксина (конъюгат 2) проводят аналогично описанному в примере 1, соотношение полимер:белок в реакционной смеси составляет 5:1. В 1 мг конъюгата 2 содержится 0,15 мг белка. Выход: 90%. П р и м е р 3. Иммунологическую эффективность проверяют на кроликах (табл.1) и нелинейных белых мышах (табл.2) в условиях однократной подкожной иммунизации. В качестве показателя эффективности изучаемого препарата использовали средние значения титров токсиннейтрализующих антител, выявленных в системе реакций РПГА и РТПГА с холерным эритроцитарным диагностикумом и во внутрикожной пробе Крейга. Через 21 день после иммунизации определяют токсиннейтрализующие антитела в сыворотке крови и напряженность местного антитоксического иммунитета по степени подавления холерогенного синдрома в лигированных петлях тонкой кишки иммунизированных кроликов при внутрикишечном введении возрастающих доз холерного энтеротоксина. Проведено сравнительное изучение иммунологической эффективности коммерческой вакцины (холероген-анатоксин+O-антиген), B-субъединицы холерного токсина и конъюгированной вакцины. Данные приведены в табл.1, 2. Из табл. 1 и 2 видно, что конъюгаты 1 и 2 обладают выраженным иммунным эффектом, стимулируют формирование антитоксического иммунитета, о чем свидетельствует накопление токсиннейтрализующих антител в сыворотке крови животных. Однократное введение этих препаратов способствует формированию напряженного местного антитоксического иммунитета в слизистой тонкого кишечника. Следует подчеркнуть, что конъюгаты проявляют высокую специфическую активность в дозах, в 100 раз меньших, чем коммерческая вакцина (холероген-анатоксин+O-антиген). П р и м е р 4. Испытания иммуногенных свойств в тесте активной защиты мышей проводили у конъюгатов 1 и 2 и исходной B-субъединицы холерного энтеротоксина (табл. 3). Препараты вводят внутрибрюшинно однократно в дозах 0,25 мкг; 1,3 мкг; 6,5 мкг; 32,5 мкг по белку в объеме 0,5 мл по 10 мышей на дозу. Через 13+1 дней иммунизированных животных заражают внутрибрюшинно взвесью 4+1-часовой агаровой культурой вибрионов эльтор серовара Огава в дозе 500 ЛД 50, суспендированной в 5% муцине. Степень протекции оценивают по величине половинной иммунизирующей дозы (ИМД 50), которую определяли по методу Кербера в модификации Ашмарина. Определение ИМД 50 позволяет сопоставить активность препарата с содержанием в нем белка. Результаты представлены в табл.3. П р и м е р 5. Изучение безопасности вакцины проводилось в соответствии с требованиями Комитета вакцин и сывороток и включало оценку острой токсичности (при различных путях введения) и хронической токсичности с оценкой состояния периферической крови, функции печени и почек, состояния сердечно-сосудистой и центральной нервной систем, аллергической активности. Установлено, что заявляемая вакцина не обладает местным раздражающим действием, не вызывает гибели мышей при введении им 1 человеко-дозы. В исследуемых органах и показателях крови закономерных изменений не обнаружено. На модели индукции аллергии замедленного типа (анафилактического шока у морских свинок) не выявлено аллергизирующего действия.Формула изобретения СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ВАКЦИНЫ ПРОТИВ ХОЛЕРЫ, предусматривающий приготовление В-субъединицы холерного токсина, отличающийся тем, что В-субъединицу конъюгируют с носителем-сополимером N-оксида этиленпиперазина и N-ацилгидразида этиленпиперазиний бромида с ММ 40КД, причем конъюгирование проводят азидным методом при массовом соотношении носитель : антиген 3 - 5 : 1.РИСУНКИ Рисунок 1www.findpatent.ru |
 г.Самара, ул. Димитрова 131 [email protected] |
 |