Забыли пароль?
Регистрация
О компании
Доставка
Каталог товаров  
Контакты
Задать вопрос
Как сделать заказ
Рекомендации
Партнёрам
Получить консультацию

живая вакцина против колибактериоза свиней. Вакцина против колибактериоза свиней


Вакцина против колибактериоза поросят

 

(19)RU(11)1149466(13)C(51)  МПК 6    A61K39/108Статус: по данным на 17.01.2013 - прекратил действиеПошлина: учтена за 15 год с 30.07.1997 по 29.07.1998

(54) ВАКЦИНА ПРОТИВ КОЛИБАКТЕРИОЗА ПОРОСЯТ

Изобретение относится к ветеринарной микробиологии, в частности к способам получения вакцин, применяемых для профилактики колибактериоза (эшерихиоза) сельскохозяйственных животных. Колибактериоз (эшерихиоз) инфекционная болезнь, вызываемая энтеропатогенными эшерихиями, -широко распространен во многих странах мира и наносит значительный экономический ущерб животноводству за счет высокой смертности поросят как в первые дни жизни, так и в послеотъемный период, снижения привесов и потери продуктивности у переболевших животных. Основными методами борьбы с колибактериозом являются химио- и антибиотикотерапия. Однако возникновение резистентных форм энтеропатогенных эшерихий заметно снижает лечебную эффективность препаратов. В этой связи разработка средств специфической профилактики колибактериоза, в частности вакцин, имеет актуальное значение. Известно, что энтеропатогенные эшерихии обладают комплексом факторов вирулентности, из которых основными можно считать продуцирование термолабильных и термостабильных токсинов и гемолизина, наличие адгезионных антигенов К-88 и К-99. Наличие и степень выраженности этих факторов у эшерихий определяют и форму проявления колибактериоза у поросят: энтеротоксемическая, септическая и отечная. Первые две отмечают у поросят в первые дни жизни, последнюю в период отъема. В этой связи высокоэффективная вакцина против колибактериоза поросят должна обеспечить нейтрализацию основных факторов вирулентности энтеропатогенных эшерихий. Известна инактивированная квасцово-масляная вакцина против колибактериоза поросят, содержащая смесь штаммов эшерихий сероваров 08, 020, 054, 078, 0101, 0138, 0139, 0141, 0147 и 0149, формалин, минеральное масло, квасцы, сапонин, ланолин и толуол. Однако вакцина обладает ограниченным спектром действия в связи с отсутствием адгезионных антигенов и энтеротоксинов. Известна вакцина против колибактериоза поросят, содержащая термостабильный токсин и адъювант. Однако вакцина не обладает высокой эффективностью при различных формах колибактериоза в связи с отсутствием полного набора факторов, ответственных за широту иммуногенного спектра действия препарата. Известна вакцина против колибактериоза (эшерихиоза) поросят, содержащая смесь 10 штаммов Escherichia coli сероваров 08, 09, 078, 0137, 0138, 0139, 0141, 0142, 0147, 0149 с концентрацией 24 млрд. микробных тел, инактиватор формалин и адъювант гидроокись алюминия. Вакцина не обеспечивает достаточно напряженного иммунитета у вакцинированных животных при энтеротоксемических формах колибактериоза. Кроме того, из-за большой концентрации антигена имеет высокую реактогенность и вызывает абсцессы в местах введения. Цель изобретения повышение иммуногенности вакцины против колибактериоза поросят и расширение спектра ее действия. Поставленная цель достигается тем, что вакцина против колибактериоза поросят, содержащая антигены эшерихий, консервант на основе формалина и тиомерсала и адъювант, дополнительно содержит бульон Хоттингера и физиологический раствор, а в качестве антигенов смесь штаммов Escherichia coli ВГНКИ N 305-37/10, E. coli ВГНКИ N 355-37/12, E.coli ВГНКИ N 357-37/12, E.coli ВГНКИ N 331-37/12, E.coli ВГНКИ N 359-37/12, E.coli ВГНКИ N 360-37/12, E.coli ВГНКИ N 299-37/10, E.coli ВГНКИ N 330-37/11 при следующем содержании компонентов на 1 л вакцины: Антигены эшер- рихий, клеток 7,7х1012-9,2х1012 Гидроокись алю- миния,см3 280-330 Формалин, см3 2,8-3,5 Тиомерсал, г 0,13-0,18 Бульон Хот- тингера, см3 100-160 Физиологичес- кий раствор, л До 1Вакцина содержит штаммы эшерихий 8 серогрупп (08, 09, 078, 0138, 0139, 0141, 0147 и 0149), наиболее часто поражающие поросят. Штаммы содержат капсульные антигены К30, К80, К43, К81, К85, К88, К91, способны продуцировать гемолизин, термостабильные и термолабильные токсины. Штаммы эшерихий, используемые для изготовления вакцины, селекционированы по иммуногенной и антигенной активности. Штаммы Е.coli ВГНКИ N 305-37/10, E.coli ВГНКИ N 355-37/12, E.coli ВГНКИ N 299-37/10, E. coli ВГНКИ N 330-37/11, E.coli ВГНКИ N 357-37/12, E.coli ВГНКИ N 331-37/12, ET.coli ВГНКИ N 359-37/12, E.coli ВГНКИ N 360-37/12 депонированы в коллекции микроорганизмов Всесоюзного государственного научно-контрольного института ветеринарных препаратов МСХ СССР. Штаммы обладают следующими свойствами. Морфологические свойства. Штаммы E. coli N 299-37/10, N 355-37/12, N 330-37/11, N 305-37/10, N 357-37/12, N 331-37/12, N 359-37/12, N 360-37/12 представляют собой мелкие грамотрицательные палочки без спор и капсул. Размер 1,5-2 мк, ширина 0,3-0,5 мк. Клетки штаммов N 305-37/10, N 360-37/12, N 330-37/11, N 331-37/12, N 359-37/12 подвижны за счет перетрихнально расположенных жгутиков. Культуральные свойства. На мясопептонном бульоне все штаммы образуют интенсивное помутнение через 6-8 ч роста при 37-38оС. На МПА растут в виде матовых круглых, гладких мелкозернистых, слегка выпуклых колоний (S-форма) диаметром 2-4 мм. Ферментативные свойства. Все штаммы сбраживают лактозу за исключением штамма N 331-37/12, глюкозу, маннит, арабинозу, сорбит и сахарозу за исключением штамма N 305-37/10, N 360-37/12, N 299-37/10, рафинозу за исключением штамма N 360-37/12, дульцит за исключением штамма N 360-37/12. Все штаммы свертывают молоко и образуют индол. Штаммы N 305-37/10, N 357-37/12, N 330-37/11, N 355-37/12, N 360-37/12, N 331-37/12 обладают выраженными гемолитическими свойствами. Антигенная структура. Штаммы эшерихий имеют следующую антигенную структуру: штамм N 305-37/12 агглютинируется О-коли сывороткой 078 до титра 1: 6400 и сывороткой К80. штамм N 299-37/10 агглютинируется О-коли сывороткой 08 до титра 1:3200 и сывороткой К-43; штамм N 355-37/12 агглютинируется О-коли сывороткой 09 до титра 1:3200 и сывороткой К-30; штамм N 330-37/11 агглютинируется О-коли сывороткой 0138 до титра 1:6400 и сывороткой К-81; штамм N 357-37/12 сывороткой 0139 до титра 1:12800, штамм N 331-37/12 сывороткой 0141 до титра 1:12800 и сывороткой К-88 до титра 1:320 и К-85; штамм N 359-37/12 агглютинируется О-коли сывороткой 0147 до титра 1:6400; штамм N 360-37/12 сывороткой 0149 в титре 1:6400, сывороткой К-88 до титра 1:640 и сывороткой К-91. Вирулентность штаммов. Штамм N 305-37/12 имеет величину ЛД50, для мышей равную 57 млн. штамм N 299-37/10 79, N 355-37/12 500, N 330-37/11 125, N 357-37/12 45, N 331-37/12 280, N 359-37/12 275, N 360-37/12 94 млн.микробных клеток суточной агаровой культуры. Токсические и токсигенные свойства. Штамм N 305-37/12 продуцирует термолабильный (ТЛ) энтеротоксин, штамм N 355-37/121 ТЛ и термостабильный (ТС) токсин, штаммы N 359-37/12, N 360-37/12, 331-37/12 образуют ТЛ и ТС токсины, штамм N 330-37/11 ТЛ токсин. Все штаммы обладают эндотоксином. П р и м е р 1. Способ изготовления вакцины против колибактериоза (эшерихиоза) поросят заключается в следующем. Штаммы эшерихий засевают каждый отдельно по 0,5 см3 во флаконы на 200 см3, содержащие 80-100 см3бульона Хоттингера, имеющего аминного азота 150-200 мг% триптофана 50-100 мг и рН 7,8-8,0. Штаммы выращивают в течение 8-10 ч при температуре 37-38оС. Выросшие культуры проверяют на чистоту. Чистые культуры засевают из флаконов отдельно в наполовину заполненные бульоном Хоттингера 10-литровые бутыли и культивируют в течение 8-10 ч при температуре 37-38оС, периодически встряхивая. Штаммы засевают в реактор группами с учетом их колициногенности. В каждый реактор засевают 5-7% от объема среды матровых расплодок, выращивают в течение 10-14 ч при температуре 37-38оС, непрерывной аэрации и перемешивании. По окончании выращивания определяют рН, концентрацию микробных тел, чистоту культуры микроскопией и высевом на питательные среды. Полученную бактериальную массу в каждом реакторе разводят стерильным физиологическим раствором до концентрации 10 млрд. микробных тел в 1 см3, перекачивают и смешивают в одном реакторе. В реактор к смеси культур добавляют при включенной мешалке формалин, разведенный физиологическим раствором 1:1, с таким расчетом, чтобы его концентрация в культуре была 0,3% и тиомерсал в количестве 0,01% Инактивацию культуры проводят в течение 15-16 суток при температуре 37-38оС. К инактивированной культуре добавляют стерильный 6%-ный раствор гидроокиси алюминия до концентрации 30% от объема и 0,05 г тиомерсала на 1 л вакцины и тщательно перемешивают. Затем доводят рН 10%-ным NaОН до 7,2-7,4, оставляют вакцину при температуре 18-20оС и проводят контроль на стерильность. Проверенную на стерильность вакцину расфасовывают при включенной мешалке во флаконы, которые закрывают резиновыми пробками, обкатывают металлическими колпачками и этикетируют. Расфасованную вакцину проверяют на стерильность, безвредность и активность. Полученная вакцина имеет компонентный состав, приведенный в табл.1. П р и м е р 2. Полученную вакцину вводят внутримышечно двукратно супоросным свиноматкам за 1,5-2 месяца до опороса, а также поросятам перед отъемом в дозах: супоросным свиноматкам, 4-5 и 5-6 см3, поросятам перед отъемом 1-1,5 и 1,5-2 см3. Вакцину применяют в хозяйствах, неблагополучных по колибактериозу, для вакцинации супоросных свиноматок за 1,5-2 месяца до опороса, а также поросят перед отъемом. Вакцину вводят внутримышечно в область шеи с соблюдением правил асептики, двукратно с интервалом 10-15 дней в дозах, приведенных в табл.2. Молодняк вакцинируют перед отъемом не ранее чем в 21-дневном возрасте. Слабый молодняк вакцинируют в половинных дозах. Иммунитет наступает через 18-20 дней после первой дозы вакцины и сохраняется у взрослых животных в течение 5-6 месяцев, у молодняка 3-5 месяца. Испытание иммуногенных свойств вакцины проводили в 3 хозяйствах. Контрольные (невакцинированные) группы животных (супоросные свиноматки), а также родившийся молодняк находились в аналогичных условиях содержания, кормления и ухода в одних и тех же помещениях и в одно и то же время вместе с опытными животными, родившимися от вакцинированных свиноматок. Испытание проведено на 464 супоросных свиноматках. Результаты испытания показали (см. табл. 3), что поросята от вакцинированных матерей заболевают колибактериозом в среднем в 8,2% случаев против 32,6% в контрольной группе, болезнь у них протекает в легкой форме и отход поросят в этой группе был в 6,6 раза меньше, чем у поросят, родившихся от невакцинированных свиноматок. П р и м е р 3. Экспериментальную серию вакцины сравнивали по иммуногенной активности с вакциной-прототипом на 10 супоросных свиноматках (по 5 животных на вакцину). Две свиноматки служили контролем. Вакцинацию проводили за 1,5-2 месяца до опороса двукратно в дозах 4 + 5 с3 с интервалом между дозами 10 дней. Через 24 ч после рождения поросят заражали внутрибрюшинно контрольным штаммом E.coli 078 в дозе 2

1010 клеток суточной агаровой культуры на физиологическом растворе. Результаты представлены в табл.4. Таким образом, результаты экспериментального заражения поросят от матерей, вакцинированных двумя вакцинами, свидетельствуют о преимуществе новой вакцины, где сохранность поросят составила 100% против 39% у вакцинированных вакциной-прототипом. Кроме того, вакцина-прототип имела повышенную реактогенность и вызывала абсцессы и свиноматок на месте введения. Предложенная вакцина обладает хорошо выраженными антигенными свойствами, а также широким спектром иммуногенности, что позволяет профилактировать колибактериоз поросят в различных регионах мира.

Формула изобретения

ВАКЦИНА ПРОТИВ КОЛИБАКТЕРИОЗА ПОРОСЯТ, содержащая антигены эшерихий, консервант на основе формалина и тиомерсала и адъювант, отличающаяся тем, что, с целью повышения иммуногенности и расширения спектра действия, дополнительно содержит бульон Хоттингера и физиологический раствор, а в качестве антигенов смесь штаммов Escherichia coli ВГНКИ N 305-37/10, E.coli ВГНКИ N 355-37/12, E.coli ВГНКИ N 357-37/12, E.coli ВГНКИ N 331-37/12, E.coli ВГНКИ N 359-37/12, E. coli ВГНКИ N 360-37/12, E.coli ВГНКИ N 299-37/10, E.coli ВГНКИ N 330-37/11, взятых в равных соотношениях при следующем содержании компонентов на 1 л вакцины: Антигены эшерихий, клеток 7,7
1012 9,2 1012 Гидроокись алюминия, см3 280 330 Формалин, см3 2,8 3,5 Тиомерсал, г 0,13 0,18 Бульон Хоттингера, см3 100 160 Физиологический раствор, л До 1

РИСУНКИ

Рисунок 1, Рисунок 2, Рисунок 3

www.findpatent.ru

живая вакцина против колибактериоза свиней - патент РФ 2248806

Изобретение относится к ветеринарной микробиологии и биотехнологии. Живая вакцина представляет собой суспензию, содержащую растворитель и антиген из штамма E.coli в виде бактериальной массы колониеобразующих микробных клеток. Вакцина содержит в качестве растворителя - физиологический раствор, а в качестве антигена - антиген из штамма E.coli "Б-5" с содержанием 2,4×108-2,4×10 9 микробных клеток в 1 см3 физиологического раствора. Живая вакцина обладает высокоиммуногенными свойствами, безопасна. 3 табл.

Изобретение относится к ветеринарной микробиологии и биотехнологии и может быть использовано для получения живых вакцин против колибактериоза сельскохозяйственных животных.

Колибактериоз (эшерихиоз) - инфекционная болезнь, вызываемая энтеропатогенными эшерихиями, широко распространен во многих странах мира и наносит значительный экономический ущерб животноводству за счет высокой смертности телят и поросят.

Известна вакцина против колибактериоза сельскохозяйственных животных (см. патент РФ №1149466 по кл. А 61 К 39/108, опуб. 10.12.95), содержащая антигены эшерихий, консервант на основе формалина, адъювант, бульон Хоттингера и физиологический раствор. Вакцина изготовлена на основе штаммов, продуцирующих термолабильные и термостабильные токсины, обладает выраженными антигенными свойствами, широким спектром иммуногенности.

Однако эффективность данной вакцины невысока, поскольку она, являясь инактивированной, теряет свою иммуногенность при инактивации. Кроме этого, изготовление данной вакцины требует значительных трудозатрат, и она является дорогостоящей, так как предусматривает использование нескольких штаммов.

Известна также живая вакцина против колибактериоза сельскохозяйственных животных для внутримышечного введения (см. Wilson R.A., Jotila J.W. Experimental neonatal colibacillosis caws. Serological studies // J. Infection and Jmmunity. - 1976. - V.13. - №1 - Р.92), содержащая бульонную культуру штамма “В-44” (E.coli 0,9:K:H) с содержанием 3×1010 микробных клеток в см3 и адъювант. Вакцину вводят один раз подкожно, а второй - внутримышечно.

Однако вирулентность данной вакцины достаточно высока. Кроме этого, вакцина является многокомпонентной системой, поскольку включает адъювант, а необходимость двукратного введения увеличивает трудозатраты.

Наиболее близкой к заявляемой является живая вакцина против колибактериоза поросят (см. Nagy L.K., Phogal B.S. The effect of colostrums on the adhesion of Escherihia coli to the small intenstine of the pig.// Research in Veterinery sience. - 1976 - v.21. - p.303-308), содержащая суспензию штамма 0149:К91:К88, при этом суспензия содержит 1×1010 колониеобразующих микробных клеток в см3. Штамм ресуспензирован в кислотном гидролизате казеина. Вакцина предназначена для пероральной иммунизации новорожденных поросят.

Однако данная вакцина обладает остаточной вирулентностью. Кроме того, использование гидролизата казеина может приводить к появлению аллергических реакций, отвлечению иммунной системы на дополнительный раздражитель, а также появлению воспалительного процесса на месте введения вакцины.

Изобретение направлено на решение задачи создания безопасной живой вакцины против колибактериоза свиней для внутримышечного введения, обладающей высокоиммуногенными свойствами.

Для решения поставленной задачи живая вакцина против колибактериоза свиней, представляющая собой суспензию, содержащую растворитель и антиген из штамма Е.coli в виде бактериальной массы колониеобразующих микробных клеток, согласно изобретению содержит в качестве растворителя - физиологический раствор, а в качестве антигена - антиген из штамма Е.coli “Б-5” с содержанием 2,4×108-2,4×10 9 микробных клеток в 1 см3 физиологического раствора.

В известных авторам источниках патентной и научно-технической литературы не описано авирулентных живых вакцин против колибактериоза свиней, обладающих высокоиммуногенными свойствами за счет использования антигена из штамма Е.coli “Б-5”, представляющего собой бактериальную массу с содержанием 2,4×108-2,4×109 микробных клеток в см3.

Сказанное позволяет сделать вывод о наличии в заявляемом изобретении критерия “изобретательский уровень”.

Штамм, предназначенный для изготовления вакцины, характеризуется следующими свойствами.

Культуральные и морфологические признаки.

Культивирование осуществляют вначале на мясопептонном бульоне (МПБ), затем на мясопептонном агаре (МПА) при температуре 37°С в течение от 18 до 48 часов при аэробных условиях. При этом на МПБ колонии растут диффузно, образуя интенсивную муть и легко разбивающийся осадок, на МПА вначале образуются гладкие, выпуклые, блестящие с ровными краями колонии S-формы. В последующем возможно образование переходных от S- к R-форме колоний и суховатых с неровными краями R-форм колоний (до 50%). На агаре Эндо формируются темно-красные с металлическим блеском колонии.

Ферментативные свойства.

Микроорганизм обладает подвижностью, проявляет каталазную активность, дает положительную реакцию с метилротом, продуцирует индол, ферментирует глюкозу с газообразованием, а также лактозу, арабинозу, маннит, мальтозу, ксилозу, сорбит, дульцит.

Условия и состав сред для токсинообразования: бульон Хоттингера.

Антигенные свойства.

Продукт, синтезируемый штаммом Escherichia coli Б-5 - термолабильный экзотоксин, не подверженный нейтрализации поливалентной антитоксической сывороткой против колибактериоза (эшерихиоза) сельскохозяйственных животных.

Молекулярно-генетическая особенность штамма - треки штамма как в S-, так и в R-формах имеют репликон размером около 0,3 кв, в данном репликоне имеется ген, кодирующий В-субъединицу термолабильного токсина (ЛТ), обуславливающий иммуногенную активность штамма. Структурные гены ЛТ дополнительно интегрированы и в хромосому микробной клетки. В клетках штамма имеется репликон, несущий генетическую информацию регуляторного свойства, необходимую для синтеза ЛТ-продукции. У штамма имеется в наличии иммуногенный эпитоп, но отсутствует репликон, ответственный за реактогенность эшерихий.

Чувствительность к антибиотикам (зона задержки роста в мм): полимиксин - 11, стрептомицин - 25, левомицетин - 25, рифампицин -9, карбенициллин - 15; не чувствителен к: оксациллину, доксициклину, линкомицину, тетрациклину, олеандомицину, ампициллину, пенициллину.

Вирулентные свойства.

Внутрибрюшинное введение культуры штамма в концентрации 5·108 м.к./см3 и объеме 0,5 мл гибели белых мышей не вызывает. LД50 - 1,2·1010 м.к./см3 . Гибель белых мышей наступает в течение суток.

Определение энтеротоксигенных свойств штамма.

Для определения токсинообразования культивирование штамма проводили в питательном составе Mundeli в течение 20 часов. Полученную бульонную культуру разделяли на токсиносодержащий материал и бакмассу методом стерилизующей фильтрации. Культуральная жидкость, лишенная бактериального компонента, служила материалом, содержащим экзотоксин Е.coli.

Устойчивость к температуре определяли прогреванием токсиносодержащего материала в течение 10-минутного кипячения при 100°С и последующим его введением белым мышам.

Определение ТЛ-токсина проводили с использованием: прогретого токсиносодержащего материала, не прогретого и питательной среды Mundeli - в качестве отрицательного контроля.

Культивирование штамма можно осуществлять, например, на разработанной и запатентованной Саратовской НИВС (патент №2142505) питательной среде следующего состава, мас.%: аминокровин 5-20; пептон 0,6-1,5; хлористый аммоний 0,08-0,18; хлористый натрий 0,09-0,11; гидролизат казеина 9-20; питательная среда “ИГЛА” 52-61; дистиллированная вода - остальное. На данной среде культивирование осуществляют в течение 7 суток при температуре 37°С, затем суспензию центрифугируют при 6000 об/мин в течение 30 минут. Надосадочная жидкость являлась энтеротоксигенным материалом.

Пример 1.

Способ изготовления живой вакцины против колибактериоза свиней заключается в следующем.

Осуществляют культивирование штамма. Для этого штамм Е.coli “Б-5” засевают в пробирки вначале на мясопептонном бульоне (МПБ), затем на мясопептонном агаре (МПА) при температуре 37°С в течение 18 часов при аэробных условиях.

Полученную бактериальную массу смывают физиологическим раствором и получают суспензию с содержанием микробных клеток 1,2×1010 в 1 см3 раствора. Затем добавлением к полученной суспензии физиологического раствора доводят содержание микробных клеток до 2,4×108-2,4×109 в 1 см3 физиологического раствора.

При этом суспензию с содержанием микробных клеток 2,4×10 8 в 1 см3 используют для вакцинации поросят, а с содержанием микробных клеток 2,4×109 в 1 см3 - для вакцинации свиноматок.

Пример 2. Оценку иммуногенных свойств вакцины проводили путем определения титра специфических антител в сыворотке крови кроликов, иммунизированных заявляемой вакциной.

Для этого ставили реакцию агглютинации (РА) с сыворотками крови иммунизированных и интактных кроликов. В серологических пробирках осуществляли разведение сывороток, начиная с 1:25 до 1:6400 в объеме 1 мл. В каждое разведение сывороток вносили по 2 капли антигена, в качестве которого использовали 10 млрд. взвеси микробных тел Е.coli (живой и инактивированной). Сыворотки перемешивали с антигеном, встряхивая пробирки, после чего их помещали в термостат и выдерживали вначале в течение 4 часов при 37°С, а затем 18-24 часа при комнатной температуре. Учет реакции осуществляли по степени просветления сывороток и образованию конгломерата (осадка в виде “зонтика”) на дне каждой пробирки. Результат определения титра специфических антител в сыворотках крови иммунизированных и интактных кроликов представлен в таблице 1, где характер агглютинации представлен следующим образом:

++++ - полная агглютинация,

+++ - почти полная агглютинация,

++ - неполная агглютинация,

+ - незначительная агглютинация,

- отсутствие агглютинации.

Таблица 1
Сыворотки Титр антител
  1:251:501:100 1:2001:400 1:8001:16001:3200 1:6400
С ЖИВОЙ КУЛЬТУРОЙ
Опытная ++++++++++++ +++++++ ++++ +
Контрольная +++++++++ +++ ++-
С ИНАКТИВИРОВАННОЙ КУЛЬТУРОЙ
Опытная++++ ++++++++ +++++++++ +++
Контрольная++++ ++++++ +++ +-

Таким образом, однократное введение живой вакцины обеспечивает повышение уровня иммунитета как в отношении Н- (жгутикового), так и O- (соматического) антигенов по сравнению с контролем в 8 раз.

Пример 3. Для оценки напряженности иммунитета использовали две группы белых мышей. Первую группу мышей (10 голов) подвергли однократной иммунизации культурой штамма E.coli Б-5, вторая группа мышей (10 голов), которым вводили физиологический раствор в тех же дозах, была контрольной. Через 14 дней обе группы животных заразили внутрибрюшинно вирулентной культурой эшерихий с концентрацией 5×108 микробных клеток в 1 см3 физиологического раствора в дозе 0,5 мл. Результаты исследований представлены в таблице 2, из которой следует, что сохранность иммунизированных животных составляет 100%, в контрольной группе все животные погибли.

Таблица 2
Группы белых мышей Кол-во головПало, голов Выжило, голов
Иммунизированные10 010
Контрольные 1010 0

Пример 4.

Для доказательства авирулентности вакцины ее вводили мышам в концентрации 5×108 микробных тел. Гибели мышей не наступало.

Пример 5.

Производилась отработка дозы вакцины как для свиноматок, так и для поросят. Свиноматкам вводили вакцину с концентрацией 2,4×109 микробных клеток в 1 см3, а поросятам - с концентрацией 2,4×108 в 1 см3 физиологического раствора.

Для этого одной группе свиноматок в количестве 7 голов вакцину вводили внутримышечно в дозе 2 мл, а другой группе в количестве 6 голов - в дозе 3 мл. В результате проведенных экспериментов была подобрана доза 2 мл, которая обеспечивала наиболее эффективную защиту животных и их сохранность - 98,5%, при этом родившиеся поросята колибактериозом не болели. На месте введения вакцины у животных воспалительных реакций не регистрировалось. Введение вакцины свиноматкам в дозе 3 мл не оказывало особого влияния на эффективность вакцинации.

Аналогичным образом была испытана вакцина в концентрации 2,4×108 на поросятах. Результат исследований представлен в таблице 3, из которой следует, что сохранность поросят в опытной группе на 6,9% больше, чем в контрольной. При этом наилучшая эффективность достигалась при введении вакцины в дозе 2 мл.

Таблица 3
Наименование групп животных Кол-во поросятВыжило, голов% сохранности
Опытная254250 98,4
Контрольная 249228 91,5

Проведены широкие производственные испытания вакцины на свиноматках и отдельно - на поросятах.

Вакцину вводили 4783 свиноматкам внутримышечно в дозе 2 мл однократно на 104-105 день супоросности. В контрольной группе животных (в количестве 852 головы) использовали общепринятые методы профилактики колибактериоза. Сохранность поросят-сосунов от вакцинированных свиноматок в опытной группе была на 8,7% выше, чем в контрольной.

Введение вакцины 5194 поросятам в возрасте 2-7 дней внутримышечно однократно в дозе 2 мл показало повышение сохранности на 10,8% по сравнению с контрольной группой (в количестве 7148 поросят), которым осуществляли профилактику принятыми в хозяйствах методами.

Таким образом, заявляемая вакцина высокоиммуногенна, не обладает реактогенностью, аллергогенностью, не вызывает воспалительных реакций на месте введения и обеспечивает защиту поросят от колибактериоза.

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

Живая вакцина против колибактериоза свиней, представляющая собой суспензию, содержащую растворитель и антиген из штамма E.coli в виде бактериальной массы колониеобразующих микробных клеток, отличающаяся тем, что она содержит в качестве растворителя физиологический раствор, а в качестве антигена - антиген из штамма Е.coli "Б-5" с содержанием 2,4×108-2,4×10 9 микробных клеток в 1 см3 физиологического раствора.

www.freepatent.ru

Колибактериоз поросят, колибактериоз свиней (фото и видео)

Чаще всего болезнь поражает самых маленьких

Заболевание колибактериоз свиней поражает в основном маленьких поросят и очень опасно для них. Этот недуг протекает стремительно, истощает животное, вызывает заражение крови и часто приводит к быстрой гибели. К счастью, достаточно эффективное лечение существует, а профилактика позволит защитить животноводческое хозяйство. Мы расскажем, как распознать и вылечить болезнь, а также о том, как не допустить ее возникновения.

Откуда недуг берется и как распространяется

Возбудителем колибактериоза являются кишечные палочки из рода эшерихий, поэтому еще одно название болезни – эшерихиоз. Поросята практически всегда заболевают из-за штаммов ЕТЕС, STES, EPEC. Чаще всего из-за первого.

Инфекция проявляет себя, независимо от времени года и поражает в основном поросят от рождения до 4 месяцев. Особенно уязвимы малыши после отъема от свиноматки. Болезнь распространяется среди животных чрезвычайно быстро и способна в короткие сроки поразить сотни особей.

Источником бактерий становятся недавно переболевшие или больные животные, а также свиньи-носители. По статистике носителями являются почти все подсосные свиноматки и едва ли не половина остальных взрослых особей. В очень редких случаях возможно инфицирование поросят еще в утробе.

В зоне риска малыши после отъема от свиноматки

Как правило, поросенок заражается сразу после рождения или спустя непродолжительное время, если не соблюдены все санитарно-гигиенические предосторожности. Также возбудитель может распространяться с грязными предметами ухода за животными, зараженными насекомыми, одеждой персонала. В корм свиней микроорганизм иногда попадает с добавками – зернофуражом, рыбной, мясокостной и мясной мукой.

Что происходит с организмом животного при заражении

Бактерии проникают в пищеварительный тракт поросенка, активно размножаются в слизистой оболочке тонкого кишечника. В это время они выделяют массу токсинов. Из-за сложных биохимических реакций в кишечнике больного животного скапливается жидкость, начинается сильная диарея. При этом организм свиньи теряет большое количество воды, жизненно важные вещества, электролиты. Нарушается кислотно-щелочной баланс (возникает ацидоз), а со временем наступает тяжелое обезвоживание, шок и смерть.

Поскольку у новорожденных поросят еще не до конца сформирован организм, а защитные системы не «включены» на полную мощность, смертность среди них достигает 80-100%. Конечно, это при отсутствии своевременного лечения.

Возбудитель заболевания быстро разносится по организму

При этом эшерихии могут преодолевать ослабленную защиту в кишечнике и проникать в кровь, лимфу, разноситься по всему организму. Заражение крови в данном случае может убить поросенка раньше, чем начнется диарея. Поэтому важно вызывать ветеринара при первых же признаках недомогания у животных, – только он сможет правильно поставить диагноз.

Клинические признаки заболевания и его течение

Симптомы колибактериоза у поросят, в целом, типичные для кишечных инфекций. Различают три стадии болезни:

  • подострую;
  • острую;
  • сверхострую.

При любой форме болезни у животного поднимается температура до 40-42 градусов, возникает диарея (кроме вышеописанной ситуации с новорожденными поросятами). На подостром этапе из-за сильного поноса идет нарастание обезвоживания.

У питомца поднялась температура

На второй стадии к этим симптомам добавляются сильные боли в животе, судороги, можно видеть, что глазные яблоки поросенка как бы западают в глазницы. Если не принять серьезных лечебных мер на этой стадии, примерно через трое суток наступает смерть.

Сверхострый этап сопровождается внезапным и сильным скачком температуры, у поросенка нарушается координация, он впадает в кому и погибает через 24-48 часов.

Еще один признак колибактериоза – стремительное похудение животного из-за потери жидкости. За пару дней поросенок может терять до половины своего нормального веса. На начальном этапе кал бывает желтым, по консистенции похож на кашу, затем приобретает серовато-белый цвет.

У родившихся уже больными поросят эшерихиоз дает о себе знать очень скоро – спустя 2-3 часа после опороса свиноматки.

Ярко выраженная симптоматика

Особенности протекания разных форм болезни

Есть три формы заболевания: энтеротоксемическая, энтеритная и септическая.

При энтеритной происходит воспаление слизистой оболочки кишечника. У поросенка развивается непрерывный понос, при этом выходит вода практически в чистом виде.

Септическую регистрируют у совсем маленьких поросят и сосунов. Недуг развивается быстро, протекает остро, либо сверхостро. Животные отказываются есть, становятся апатичными, при ходьбе плохо ориентируются в пространстве, поднимается высокая температура. Эта форма болезни очень часто оканчивается смертью поросят.

При любых подозрениях - вызывайте ветеринара

Энтеротоксемическая, или отечная, форма имеет инкубационный период до 12 часов (но может развиваться и через 3 часа после заражения). Поросята начинают нервничать, не едят, дергают конечностями или головой, при ходьбе могут пошатываться.

Кожа в некоторых местах бледнеет и становится синеватой – на ушах, конечностях, пятачке, животе. Большая часть поросят умирает спустя несколько часов после появления симптомов. Чаще других эта форма недуга поражает крупных, упитанных животных.

Изменения в организме, вызываемые инфекцией

Если заболевание проходит сверхостро, характерных, видимых глазу, изменений не бывает, – они не успевают появиться. В других случаях отмечается бледность слизистых покровов у маленьких поросят, кроме слизистой желудка – она покрасневшая, выделяется инфильтрат студенистой консистенции. Слизистая оболочка тонкой кишки отечна, воспалена и покрыта слизью.

Патология вызывает необратимые изменения

Отечность отмечается и в тканях мозга животного. Бледность и анемичность – в тканях почек, печени, а селезенка поросят имеет темный серый оттенок, она заметно увеличена.

При энтеротоксемической форме также регистрируют отеки всей соединительной ткани. Лимфоузлы, расположенные в кишечнике животного, крупнее нормы, легкие и мозг отечны, сердечная мышца покрыта мелкими кровоизлияниями, на ощупь дряблая. В желудке поросят часто обнаруживают твердое содержимое, а в бронхах и трахее – пенистую жидкость.

Таким образом, очевидно, что колибактериоз поросят приводят к развитию необратимых патологических изменений, выжить при которых невозможно.

Подтверждение диагноза, отличие от других болезней

Эшерихиоз надо дифферинцировать от других схожих по симптомам недугов: сальмонеллеза, диспепсии, вирусного гастроэнтерита или анаэробной энтеротоксемии.

Для постановки диагноза исследуют трупы, органы или фекалии нескольких поросят, но лишь тех, которых не лечили антибиотиками. Для лабораторных исследований годятся почки, печень, желчный пузырь, сердце, селезенка, тонкий кишечник, желудок, мозг, трубчатые кости животных. Они должны быть доставлены для анализа как можно скорее, не позже 4 часов после смерти животного.

Тела поросят отправляют в лабораторию в водонепроницаемых контейнерах, органы – обязательно в чистой таре, при этом кишечник и желудок пакуются отдельно.

Пораженный болезнью кишечник

Положительное заключение и диагноз «колибактериоз» ставят, проанализировав поступившие органы или тела, патологоанатомические изменения в них, выделив кишечную палочку, определив ее патогенность и штамм. Во внимание также берутся данные по эпизоотической обстановке, состоянию хозяйства и клинические признаки заболевания.

Что делать, если ваши поросята заболели: правильное лечение

Для успешной борьбы с болезнью надо не только уничтожить возбудителя, но и восполнить потерянные организмом поросенка вещества и воду, а также вывести токсины.

Обязательно назначают антибиотики, антибактериальные препараты. Неплохой эффект дают экопцеф, амоксициклин, хостамокс, кобактан, неопен, но лучше всего применять левомицетин, мономицин, неомицин. Поскольку поросята более уязвимы, дозировка для них должна быть выше, чем для взрослых животных.

Первым делом - антибиотики

Так, неомицин назначают поросятам возрастом до полугода из расчета 30 мг на 1 кг веса, взрослым – 20 мг на 1 кг. Лучше применять сразу несколько препаратов, чтобы избежать устойчивости бактерий к одному из них.

При терапии антибиотиками свиньям обязательно вводят витамины группы В. Это нужно, потому что препараты убивают эшерихии, лишая их – а значит, и организм — данных витаминов.

Для восполнения воды в организме поросятам вводят раствор Рингера в брюшину или дают выпить. Также внутрибрюшинно можно вводить дюфалак (10 мл). Не лишними будут иммуномодулирующие препараты, например, лидиум. Его дозировка – 2 мл на кг. Еще дают пробиотики, например, «Лакто-Сакк» или « Био Плюс 2В».

Добавление витаминов в пищу

Из народных методов применяют отвары и настои дубовой коры, зверобоя, а также тысячелистника и конского щавеля. Но они эффективны, если поросенок старше двух недель.

Иммунитет у свиней и применение вакцины

Чем больше в молозиве свиноматки иммуноглобулинов, тем лучше пассивный иммунитет у новорожденных поросят.

Чтобы иммуноглобулинов было как можно больше, незадолго до родов животных вакцинируют. Применяют формолтиомерсаловую поливалентную гидроокисьалюминиевую (ГОА) вакцину. Она содержит целых девять штаммов бактерий эшерихий. Свиноматкам колют внутримышечно или подкожно за 6-8 недель до опороса, затем повторяют процедуру через две недели. Дозировка – 5 и 6 мл соответственно.

Подкожное введение лекарства

Обязательно прививают поросят перед отъемом – за 20 или 10 дней до него. Вводят по той же схеме 1,5 и 2 мл.

Поливалентную сыворотку колют внутримышечно поросятам до достижения пятидневного возраста в дозе 8 мл. Более старшим вводят от 10 до 15 мл.

Неспецифическая профилактика инфекции в хозяйстве

Сегодня свиноводство, как и любое направление сельского хозяйства, требует ответственного соблюдения предписанных правил и норм. Так, в профилактике колибактериоза у поросят большое значение имеет санитария и гигиена на ферме.

За две недели до родов готовят продезинфицированные помещения, где будет находиться свиноматка с поросятами, и переводят ее туда. Перед этим свинью моют, обрабатывают конечности лизолом или формалином (0,5 и 5% соответственно).

Санитарная обработка родильных боксов

В больших комплексах сначала проводят обычную уборку помещений, затем обмывают самые загрязненные участки 2% раствором едкого натра температурой не ниже 70 градусов. Можно использовать также препарат «Демп». Через полчаса обработку помещения завершают мойкой.

Во время опороса обстановка должна быть стерильной. Как только свиноматка начала готовиться к родам, заднюю часть ее тела обрабатывают любым дезинфицирующим раствором.

После опороса свинью моют, кожу и соски дезинфицируют. Подстилку обязательно заменяют на чистую. Только после этого к ней можно подпускать поросят.

Все, что потребляют поросята, помимо молока свиноматки, должно быть пастеризовано или прокипячено.

Перед родами свиноматку надо обтереть дезинфицирующим средством

Помните, что лучшая профилактика любых заболеваний в хозяйстве – постоянное строгое соблюдение санитарно-гигиенических и ветеринарных норм.

С другой серьезной патологией у молодняка вы можете познакомиться в статье «Симптомы и лечение отечной болезни у поросят».

Оцените полезность статьи в комментариях.

Если вам понравился материал, не забудьте поставить лайк.

 

Тэги: Болезни, Свиньи

znaifermu.ru

Вакцина против колибактериоза поросят — SU 1149466

ВАКЦИНА ПРОТИВ КОЛИБАКТЕРИОЗА ПОРОСЯТ, содержащая антигены эшерихий, консервант на основе формалина и тиомерсала и адъювант, отличающаяся тем, что, с целью повышения иммуногенности и расширения спектра действия, дополнительно содержит бульон Хоттингера и физиологический раствор, а в качестве антигенов смесь штаммов Escherichia coli ВГНКИ N 305-37/10, E.coli ВГНКИ N 355-37/12, E.coli ВГНКИ N 357-37/12, E.coli ВГНКИ N 331-37/12, E.coli ВГНКИ N 359-37/12, E. coli ВГНКИ N 360-37/12, E.coli ВГНКИ N 299-37/10, E.coli ВГНКИ N 330-37/11, взятых в равных соотношениях при следующем содержании компонентов на 1 л вакцины:Антигены эшерихий, клеток 7,7 1012 9,2 1012Гидроокись алюминия, см3 280 330Формалин, см3 2,8 3,5Тиомерсал, г 0,13 0,18Бульон Хоттингера, см3 100 160Физиологический раствор, л До 1

Изобретение относится к ветеринарной микробиологии, в частности к способам получения вакцин, применяемых для профилактики колибактериоза (эшерихиоза) сельскохозяйственных животных.Колибактериоз (эшерихиоз) инфекционная болезнь, вызываемая энтеропатогенными эшерихиями, -широко распространен во многих странах мира и наносит значительный экономический ущерб животноводству за счет высокой смертности поросят как в первые дни жизни, так и в послеотъемный период, снижения привесов и потери продуктивности у переболевших животных.Основными методами борьбы с колибактериозом являются химио- и антибиотикотерапия. Однако возникновение резистентных форм энтеропатогенных эшерихий заметно снижает лечебную эффективность препаратов. В этой связи разработка средств специфической профилактики колибактериоза, в частности вакцин, имеет актуальное значение.Известно, что энтеропатогенные эшерихии обладают комплексом факторов вирулентности, из которых основными можно считать продуцирование термолабильных и термостабильных токсинов и гемолизина, наличие адгезионных антигенов К-88 и К-99. Наличие и степень выраженности этих факторов у эшерихий определяют и форму проявления колибактериоза у поросят: энтеротоксемическая, септическая и отечная. Первые две отмечают у поросят в первые дни жизни, последнюю в период отъема.В этой связи высокоэффективная вакцина против колибактериоза поросят должна обеспечить нейтрализацию основных факторов вирулентности энтеропатогенных эшерихий.Известна инактивированная квасцово-масляная вакцина против колибактериоза поросят, содержащая смесь штаммов эшерихий сероваров 08, 020, 054, 078, 0101, 0138, 0139, 0141, 0147 и 0149, формалин, минеральное масло, квасцы, сапонин, ланолин и толуол. Однако вакцина обладает ограниченным спектром действия в связи с отсутствием адгезионных антигенов и энтеротоксинов.Известна вакцина против колибактериоза поросят, содержащая термостабильный токсин и адъювант. Однако вакцина не обладает высокой эффективностью при различных формах колибактериоза в связи с отсутствием полного набора факторов, ответственных за широту иммуногенного спектра действия препарата.Известна вакцина против колибактериоза (эшерихиоза) поросят, содержащая смесь 10 штаммов Escherichia coli сероваров 08, 09, 078, 0137, 0138, 0139, 0141, 0142, 0147, 0149 с концентрацией 24 млрд. микробных тел, инактиватор формалин и адъювант гидроокись алюминия.Вакцина не обеспечивает достаточно напряженного иммунитета у вакцинированных животных при энтеротоксемических формах колибактериоза. Кроме того, из-за большой концентрации антигена имеет высокую реактогенность и вызывает абсцессы в местах введения.Цель изобретения повышение иммуногенности вакцины против колибактериоза поросят и расширение спектра ее действия.Поставленная цель достигается тем, что вакцина против колибактериоза поросят, содержащая антигены эшерихий, консервант на основе формалина и тиомерсала и адъювант, дополнительно содержит бульон Хоттингера и физиологический раствор, а в качестве антигенов смесь штаммов Escherichia coli ВГНКИ N 305-37/10, E. coli ВГНКИ N 355-37/12, E.coli ВГНКИ N 357-37/12, E.coli ВГНКИ N 331-37/12, E.coli ВГНКИ N 359-37/12, E.coli ВГНКИ N 360-37/12, E.coli ВГНКИ N 299-37/10, E.coli ВГНКИ N 330-37/11 при следующем содержании компонентов на 1 л вакцины: Антигены эшер- рихий, клеток 7,7х1012-9,2х1012 Гидроокись алю- миния,см3 280-330 Формалин, см3 2,8-3,5 Тиомерсал, г 0,13-0,18 Бульон Хот- тингера, см3 100-160 Физиологичес- кий раствор, л До 1Вакцина содержит штаммы эшерихий 8 серогрупп (08, 09, 078, 0138, 0139, 0141, 0147 и 0149), наиболее часто поражающие поросят. Штаммы содержат капсульные антигены К30, К80, К43, К81, К85, К88, К91, способны продуцировать гемолизин, термостабильные и термолабильные токсины.Штаммы эшерихий, используемые для изготовления вакцины, селекционированы по иммуногенной и антигенной активности.Штаммы Е.coli ВГНКИ N 305-37/10, E.coli ВГНКИ N 355-37/12, E.coli ВГНКИ N 299-37/10, E. coli ВГНКИ N 330-37/11, E.coli ВГНКИ N 357-37/12, E.coli ВГНКИ N 331-37/12, ET.coli ВГНКИ N 359-37/12, E.coli ВГНКИ N 360-37/12 депонированы в коллекции микроорганизмов Всесоюзного государственного научно-контрольного института ветеринарных препаратов МСХ СССР.Штаммы обладают следующими свойствами.Морфологические свойства. Штаммы E. coli N 299-37/10, N 355-37/12, N 330-37/11, N 305-37/10, N 357-37/12, N 331-37/12, N 359-37/12, N 360-37/12 представляют собой мелкие грамотрицательные палочки без спор и капсул. Размер 1,5-2 мк, ширина 0,3-0,5 мк. Клетки штаммов N 305-37/10, N 360-37/12, N 330-37/11, N 331-37/12, N 359-37/12 подвижны за счет перетрихнально расположенных жгутиков.Культуральные свойства. На мясопептонном бульоне все штаммы образуют интенсивное помутнение через 6-8 ч роста при 37-38оС. На МПА растут в виде матовых круглых, гладких мелкозернистых, слегка выпуклых колоний (S-форма) диаметром 2-4 мм.Ферментативные свойства. Все штаммы сбраживают лактозу за исключением штамма N 331-37/12, глюкозу, маннит, арабинозу, сорбит и сахарозу за исключением штамма N 305-37/10, N 360-37/12, N 299-37/10, рафинозу за исключением штамма N 360-37/12, дульцит за исключением штамма N 360-37/12. Все штаммы свертывают молоко и образуют индол.Штаммы N 305-37/10, N 357-37/12, N 330-37/11, N 355-37/12, N 360-37/12, N 331-37/12 обладают выраженными гемолитическими свойствами.Антигенная структура. Штаммы эшерихий имеют следующую антигенную структуру: штамм N 305-37/12 агглютинируется О-коли сывороткой 078 до титра 1: 6400 и сывороткой К80. штамм N 299-37/10 агглютинируется О-коли сывороткой 08 до титра 1:3200 и сывороткой К-43; штамм N 355-37/12 агглютинируется О-коли сывороткой 09 до титра 1:3200 и сывороткой К-30; штамм N 330-37/11 агглютинируется О-коли сывороткой 0138 до титра 1:6400 и сывороткой К-81; штамм N 357-37/12 сывороткой 0139 до титра 1:12800, штамм N 331-37/12 сывороткой 0141 до титра 1:12800 и сывороткой К-88 до титра 1:320 и К-85; штамм N 359-37/12 агглютинируется О-коли сывороткой 0147 до титра 1:6400; штамм N 360-37/12 сывороткой 0149 в титре 1:6400, сывороткой К-88 до титра 1:640 и сывороткой К-91.Вирулентность штаммов. Штамм N 305-37/12 имеет величину ЛД50, для мышей равную 57 млн. штамм N 299-37/10 79, N 355-37/12 500, N 330-37/11 125, N 357-37/12 45, N 331-37/12 280, N 359-37/12 275, N 360-37/12 94 млн.микробных клеток суточной агаровой культуры.Токсические и токсигенные свойства. Штамм N 305-37/12 продуцирует термолабильный (ТЛ) энтеротоксин, штамм N 355-37/121 ТЛ и термостабильный (ТС) токсин, штаммы N 359-37/12, N 360-37/12, 331-37/12 образуют ТЛ и ТС токсины, штамм N 330-37/11 ТЛ токсин.Все штаммы обладают эндотоксином.П р и м е р 1. Способ изготовления вакцины против колибактериоза (эшерихиоза) поросят заключается в следующем. Штаммы эшерихий засевают каждый отдельно по 0,5 см3 во флаконы на 200 см3, содержащие 80-100 см3бульона Хоттингера, имеющего аминного азота 150-200 мг% триптофана 50-100 мг и рН 7,8-8,0.Штаммы выращивают в течение 8-10 ч при температуре 37-38оС. Выросшие культуры проверяют на чистоту. Чистые культуры засевают из флаконов отдельно в наполовину заполненные бульоном Хоттингера 10-литровые бутыли и культивируют в течение 8-10 ч при температуре 37-38оС, периодически встряхивая. Штаммы засевают в реактор группами с учетом их колициногенности.В каждый реактор засевают 5-7% от объема среды матровых расплодок, выращивают в течение 10-14 ч при температуре 37-38оС, непрерывной аэрации и перемешивании.По окончании выращивания определяют рН, концентрацию микробных тел, чистоту культуры микроскопией и высевом на питательные среды. Полученную бактериальную массу в каждом реакторе разводят стерильным физиологическим раствором до концентрации 10 млрд. микробных тел в 1 см3, перекачивают и смешивают в одном реакторе.В реактор к смеси культур добавляют при включенной мешалке формалин, разведенный физиологическим раствором 1:1, с таким расчетом, чтобы его концентрация в культуре была 0,3% и тиомерсал в количестве 0,01% Инактивацию культуры проводят в течение 15-16 суток при температуре 37-38оС.К инактивированной культуре добавляют стерильный 6%-ный раствор гидроокиси алюминия до концентрации 30% от объема и 0,05 г тиомерсала на 1 л вакцины и тщательно перемешивают. Затем доводят рН 10%-ным NaОН до 7,2-7,4, оставляют вакцину при температуре 18-20оС и проводят контроль на стерильность.Проверенную на стерильность вакцину расфасовывают при включенной мешалке во флаконы, которые закрывают резиновыми пробками, обкатывают металлическими колпачками и этикетируют. Расфасованную вакцину проверяют на стерильность, безвредность и активность. Полученная вакцина имеет компонентный состав, приведенный в табл.1.П р и м е р 2. Полученную вакцину вводят внутримышечно двукратно супоросным свиноматкам за 1,5-2 месяца до опороса, а также поросятам перед отъемом в дозах: супоросным свиноматкам, 4-5 и 5-6 см3, поросятам перед отъемом 1-1,5 и 1,5-2 см3.Вакцину применяют в хозяйствах, неблагополучных по колибактериозу, для вакцинации супоросных свиноматок за 1,5-2 месяца до опороса, а также поросят перед отъемом.Вакцину вводят внутримышечно в область шеи с соблюдением правил асептики, двукратно с интервалом 10-15 дней в дозах, приведенных в табл.2.Молодняк вакцинируют перед отъемом не ранее чем в 21-дневном возрасте. Слабый молодняк вакцинируют в половинных дозах. Иммунитет наступает через 18-20 дней после первой дозы вакцины и сохраняется у взрослых животных в течение 5-6 месяцев, у молодняка 3-5 месяца.Испытание иммуногенных свойств вакцины проводили в 3 хозяйствах. Контрольные (невакцинированные) группы животных (супоросные свиноматки), а также родившийся молодняк находились в аналогичных условиях содержания, кормления и ухода в одних и тех же помещениях и в одно и то же время вместе с опытными животными, родившимися от вакцинированных свиноматок.Испытание проведено на 464 супоросных свиноматках. Результаты испытания показали (см. табл. 3), что поросята от вакцинированных матерей заболевают колибактериозом в среднем в 8,2% случаев против 32,6% в контрольной группе, болезнь у них протекает в легкой форме и отход поросят в этой группе был в 6,6 раза меньше, чем у поросят, родившихся от невакцинированных свиноматок.П р и м е р 3. Экспериментальную серию вакцины сравнивали по иммуногенной активности с вакциной-прототипом на 10 супоросных свиноматках (по 5 животных на вакцину). Две свиноматки служили контролем.Вакцинацию проводили за 1,5-2 месяца до опороса двукратно в дозах 4 + 5 с3 с интервалом между дозами 10 дней. Через 24 ч после рождения поросят заражали внутрибрюшинно контрольным штаммом E.coli 078 в дозе 2 1010 клеток суточной агаровой культуры на физиологическом растворе. Результаты представлены в табл.4.Таким образом, результаты экспериментального заражения поросят от матерей, вакцинированных двумя вакцинами, свидетельствуют о преимуществе новой вакцины, где сохранность поросят составила 100% против 39% у вакцинированных вакциной-прототипом. Кроме того, вакцина-прототип имела повышенную реактогенность и вызывала абсцессы и свиноматок на месте введения.Предложенная вакцина обладает хорошо выраженными антигенными свойствами, а также широким спектром иммуногенности, что позволяет профилактировать колибактериоз поросят в различных регионах мира.

patents.su

Способ профилактики колибактериоза и сальмонеллеза поросят

Изобретение относится к области ветеринарии. Способ включает иммунизацию глубокосупоросных свиноматок и полученных от них поросят вакциной против эшерихиоза животных (Коли-Вак К88, К99, 987P,F41, ТЛ- и ТС-анатоксины). Одновременно животных прививают и вакциной против сальмонеллеза свиней из супрессорного ревертанта живой. Дополнительно одновременно с иммунизацией дважды внутримышечно вводят лигфол глубокосупоросным свиноматкам за 1,5 месяца до опороса с интервалом 10-15 дней в дозе 3 мл на животное, а поросятам, полученным от этих свиноматок, на 21-23 день после рождения двукратно с интервалом 10-15 дней вводят лигфол в дозе 0,1 мл/кг массы тела. Способ позволяет создать у свиноматок более напряженный специфический иммунитет и колостральный иммунитет у полученных поросят. 5 табл.

 

Изобретение относится к области ветеринарии, касается способа профилактики колибактериоза и сальмонеллеза поросят.

Колибактериоз свиней (эшерихиоз) - остро протекающая инфекционная болезнь поросят, характеризующаяся диареей, явлениями токсемии, реже септицемией, и сопровождающаяся высокой смертностью. Основными возбудителями колибактериоза поросят являются эшерихии следующих серогрупп: (08, 04, 033, 026, 0111, 0137, 0138, 0139, 0141, 0142,0147,0149).

Наиболее восприимчивыми к колибактериозу являются поросята-сосуны до 2-3 недельного возраста, а также поросята в первые две недели после отъема.

Сальмонеллез свиней (паратиф) - инфекционная болезнь поросят преимущественно до 4 месячного возраста, характеризующаяся лихорадкой, диареей и дегенеративными процессами в тонком и толстом отделах кишечника. Возбудитель - бактерии семейства Enterobacteriaceae, рода Salmonella: S. cholerae suis, S. typhisuis, реже S. typhimurium и S. enteritidis, var. dublin. Наибольший ущерб наносят S. cholerae suis и S. typhisuis, которые вызывают заболевание у поросят-отъемышей, подсвинков и откормочных свиней 2-5 месячного возраста, могут болеть и поросята-сосуны [1].

Известен способ профилактики желудочно-кишечных болезней поросят с использованием антибактериального препарата роданур [2].

Однако данный способ трудоемок, предусматривает применение препарата в смеси с кормом в течение 14 дней.

Известен способ профилактики колибактериоза и сальмонеллеза поросят, включающий применение поверхностно-активного препарата мирамистина, препарат применяют перорально 1 раз в день в течение 5 суток в дозе 1,5 мл/кг массы тела [3]. Однако данный способ весьма трудоемкий, так как включает фиксацию поросят, дозированное применение препарата.

Известен способ профилактики колибактериоза и сальмонеллеза поросят с применением гипериммунных, аллогенных сывороток и сывороток реконвалесцентов [4].

Основные недостатки этого способа - непродолжительный срок пассивного иммунитета - 10-14 дней, многократная обработка, трудоемкость.

Известен способ профилактики колибактериоза поросят, включающий иммунизацию супоросных свиноматок вакциной против эшерихиоза животных (Коли-Вак К88, К99, 987Р, F41, ТЛ- и ТС-анатоксины) [5] внутримышечно за полтора месяца до опороса с интервалом 10-15 дней, при этом первая и вторая доза составляет - 5 см3.

Известен способ профилактики сальмонеллеза поросят, включающий иммунизацию супоросных свиноматок вакциной против сальмонеллеза свиней из супрессорного ревертанта, живой [6] внутримышечно за полтора месяца до опороса с интервалом 10-15 дней; при этом первая и вторая доза составляет 4 см3.

Однако использование одной вакцины не позволяет добиться высокого уровня иммунитета у свиноматок, и, как следствие, у поросят низкий колостральный (молозивный) иммунитет, не обеспечивающий надлежащую защиту их от желудочно-кишечных болезней бактериальной этиологии.

Известен способ профилактики колибактериоза, включающий иммунизацию поросят вакциной против эшерихиоза животных (Коли-Вак К88, К99, 987Р, F41, ТЛ- и ТС-анатоксины) внутримышечно перед отъемом с интервалом 10-15 дней; при этом первая доза составляет 1 см3, вторая - 1,5 см3 [5].

Известен способ профилактики сальмонеллеза, включающий пероральную иммунизацию поросят вакциной против сальмонеллеза свиней из супрессорного ревертанта живой с интервалом в 5 дней, при этом первая доза составляет 8 см3, вторая - 12 см3, третья - 16 см3 [6].

Однако использование одной вакцины не позволяет достичь высокого уровня иммунитета у поросят, что не обеспечивает надлежащей защиты их от желудочно-кишечных болезней бактериальной этиологии.

Технический результат изобретения - повышение эффективности профилактики колибактериоза и сальмонеллеза поросят.

Технический результат достигается одновременной иммунизацией глубокосупоросных свиноматок вакциной против эшерихиоза животных (Коли-Вак К88, К99, 987Р, F41, ТЛ- и ТС-анатоксины) и вакциной против сальмонеллеза свиней из супрессорного ревертанта, живой и применением препарата «лигфол», иммунизацией поросят вакциной против эшерихиоза животных (Коли-Вак К88, К99, 987Р, F41, ТЛ- и ТС-анатоксины) и вакциной против сальмонеллеза свиней из супрессорного ревертанта живой и применением препарата лигфол.

Вакцина против эшерихиоза животных (Коли-Вак К88, К99, 987Р, F41, ТЛ- и ТС-анатоксины) предназначена для профилактики эшерихиоза сельскохозяйственных животных и пушных зверей клеточного содержания. Вакцина содержит сорбированные на гидроокиси алюминия протективные антигены энтеропатогенных эшерихий: соматические (09; 078; 0141), адгезивные (К88, К99, 987Р, F41), капсульные полисахаридные (К80; К30; К87), термолабильный и термостабильный анатоксины [5].

Вакцина против сальмонеллеза свиней из супрессорного ревертанта Salmonella choleraesuis №9 предназначена для профилактики сальмонеллеза, вызванного S.choleraesuis. Представляет собой лиофилизированную мелкопористую массу белого или светло-серого цвета, легко растворимую в физиологическом растворе или воде [6].

Лигфол - комплексный препарат, в состав которого входят гуминовые кислоты, полученные при гидролизе природного (древесного) лигнина. Препарат обладает адаптогенной, стресс-корректорной активностью, повышает резистентность организма, способствует сохранению здоровья и продуктивности животных [7].

Способ осуществляется следующим способом.

Глубокосупоросных свиноматок за 1,5 месяца до опороса одновременно иммунизируют вакциной против эшерихиоза животных (Коли-Вак К88, К99, 987Р, F41, ТЛ- и ТС-анатоксины) и вакциной против сальмонеллеза свиней из супрессорного ревертанта, живой с интервалом 10-15 дней. Первая и вторая доза вакцины против эшерихиоза животных составляет 5 см3, а первая и вторая доза вакцины против сальмонеллеза свиней - 4 см3, одновременно с иммунизацией дважды внутримышечно вводится лигфол в дозе 3 мл на животное. Поросят, полученных от этих свиноматок, перед отъемом (21-23 день после рождения) с целью профилактики отечной болезни внутримышечно иммунизируют вакциной против эшерихиоза животных (Коли-Вак К88, К99, 987Р, F41, ТЛ- и ТС-анатоксины) двукратно с интервалом 10-15 дней, при этом первая доза составляет 1 см3, вторая - 1,5 см3, и перорально вакциной против сальмонеллеза свиней из супрессорного ревертанта живой трехкратно на 10, 15 и 20 дни жизни. При этом первая доза составляет 8 см3, вторая - 12 см3, третья - 16 см3, и одновременно с иммунизацией вакциной против эшерихиоза животных (Коли-Вак К88, К99, 987Р, F41, ТЛ- и ТС-анатоксины) дважды внутримышечно вводят лигфол в дозе 0,1 мл/кг массы тела.

Двукратное введение свиноматкам лигфола в сочетании с вакцинацией способствует созданию более напряженного специфического иммунитета у супоросных свиноматок и колострального иммунитета у полученных от них поросят. Двукратное введение лигфола поросятам перед отъемом в сочетании с вакцинацией способствовало созданию у них более напряженного специфического иммунитета и приводило к повышению устойчивости поросят к желудочно-кишечным болезням.

Проверка эффективности заявляемого способа проводилась в ООО «Вишневское» Верхнехавского района Воронежской области, СХА МХП «Николаевское» Аннинского района Воронежской области, ОАО «Русская АПК» Лебедянского района Воронежской области.

Сущность способа поясняется примерами.

Пример 1. Обоснование иммунизации супоросных свиноматок.

В хозяйстве, стационарно неблагополучном по колибактериозу и сальмонеллезу поросят, подобрано 2 группы по 6 глубокосупоросных свиноматок.

В первую (опытную) группу вошли свиноматки, которых за 1,5 месяца до опороса одновременно иммунизировали вакциной против эшерихиоза животных (Коли-Вак К88, К99, 987Р, F41, ТЛ- и ТС-анатоксины) и вакциной против сальмонеллеза свиней из супрессорного ревертанта, живой с интервалом 10-15 дней. Первая и вторая доза вакцины против эшерихиоза животных составляет 5 см3, а первая и вторая доза вакцины против сальмонеллеза свиней - 4 см3. Во вторую (контрольную) группу вошли свиноматки, которых не иммунизировали (интактные).

За поросятами, полученными от подопытных свиноматок, проводили клиническое наблюдение, учитывали заболеваемость, исход болезни, определяли массу тела на 21 и 45 сутки после рождения. Диагноз на колибактериоз и сальмонеллез устанавливали на основании анализа эпизоотической ситуации в хозяйстве, результатов клинических, патологоанатомических и бактериологических исследований. Результаты опыта приведены в таблице 1.

Таблица 1
Эффективность иммунизации супоросных свиноматок при колибактериозе и сальмонеллезе поросят
№ п/п Показатели Поросята, полученные от свиноматок:
1 группа (опытная) 2 группа (контрольная)
1 Количество поросят, голов 54 52
% 100 100
2 Из них заболело, голов 10 35
% 18,5 67,3
3 Масса тела на 21 сутки, кг 5,8±1,4 5,35±1,6
4 Масса тела на 45 сутки, кг 12,56±2,5 11,38±2,4
5 Среднесуточный прирост массы тела с 21 по 45 сутки, г 281±12,5 251±10,8
6 Прирост массы тела за 24 дня, кг% 6,76+116,6 6,03+112,7

Из таблицы 1 видно, что в первой группе поросят желудочно-кишечными болезнями заболело 10 (18,5%) животных, во второй - 35 (67,3%) животных. Среднесуточный прирост и прирост массы тела в целом поросят в первой группе с 21 по 45 сутки был на 30 г и 3,9% больше, чем у животных второй группы.

Влияние иммунизации свиноматок на высоту титров агглютининов к эшерихиозному и сальмонеллезному антигенам в сыворотке крови представлено в таблице 2.

Таблица 2
Титры агглютининов в сыворотке крови свиноматок к эшерихиозному и сальмонеллезному антигенам
Сроки исследования Группы свиноматок Титры антител в сыворотке крови к антигенам:
Эшерихий Сальмонелл
До иммунизации 1 (опытная) 1:19±0,70 1:56±1,11
2 (контрольная) 1:54±1,10 1:42±0,70
За 14-21 день до опороса 1 (опытная) 1:85±1,62 1:72±1,35
2 (контрольная) 1:17±0,70 1:20±0,71
На 2-4 день после опороса 1 (опытная) 1:125±3,73 1:84±1,62
2 (контрольная) 1:37,5±1,1 1:33,3±0,56

Из таблицы 2 видно, что за 14-21 день до опороса у свиноматок первой группы титры антител в крови к эшерихиозному и сальмонеллезному антигенам, по сравнению с таковыми у свиноматок второй группы, возрастал соответственно в 5 и 3,6 раза, на 2-4 день после опороса - в 3,3 и 2,5 раза.

Влияние иммунизации свиноматок на высоту титров агглютининов к эшерихиозному и сальмонеллезному антигенам в сыворотке молозива представлено в таблице 3.

Таблица 3
Титры агглютининов к эшерихиозному и сальмонеллезному антигенам в молозиве свиноматок
Сроки исследования Группы животных Титры антител в молозиве к антигенам:
Эшерихий Сальмонелл
На 1-2 час после опороса 1 (опытная) 1:730±3,85 1:670±3,70
2 (контрольная) 1:480±3,93 1:230±7,97

Как видно из таблицы 3, иммунизация животных способствовала увеличению титра антител в молозиве, тем самым повышала эффективность профилактики желудочно-кишечных болезней у поросят. Так, по сравнению с показателями второй (интактной) группы, средние титры антител к эшерихиозному и сальмонеллезному антигенам в молозиве иммунизированных свиноматок были выше соответственно в 1,5 и 2,9 раза.

Пример 2. Обоснование эффективности.

В хозяйстве, стационарно неблагополучном по колибактериозу и сальмонеллезу поросят, подобрали 2 группы по 6 глубокосупоросных свиноматок.

Свиноматок первой (контрольной) группы за 1,5 месяца до опороса одновременно иммунизировали вакциной против эшерихиоза животных (Коли-Вак К88, К99, 987Р, F41, ТЛ- и ТС-анатоксины) и вакциной против сальмонеллеза свиней из супрессорного ревертанта живой с интервалом 10-15 дней. Первая и вторая доза вакцины против эшерихиоза животных составляет 5 см3, а первая и вторая доза вакцины против сальмонеллеза свиней - 4 см3. Поросят (n=53), полученных от этих свиноматок, перед отъемом (21-23 день после рождения) с целью профилактики отечной болезни внутримышечно иммунизировали вакциной против эшерихиоза животных (Коли-Вак К88, К99, 987Р, F41, ТЛ- и ТС-анатоксины) двукратно с интервалом 10-15 дней, при этом первая доза составляет 1 см3, вторая - 1,5 см3, и перорально вакциной против сальмонеллеза свиней из супрессорного ревертанта живой трехкратно на 10, 15 и 20 дни жизни. При этом первая доза составляет 8 см3, вторая - 12, третья - 16 см3.

Свиноматок второй (опытной) группы также за 1,5 месяца до опороса одновременно иммунизировали вакциной против эшерихиоза животных (Коли-Вак К88, К99, 987Р, F41, ТЛ- и ТС-анатоксины) и вакциной против сальмонеллеза свиней из супрессорного ревертанта живой с интервалом 10-15 дней. Первая и вторая доза вакцины против эшерихиоза животных составляет 5 см3, а первая и вторая доза вакцины против сальмонеллеза свиней - 4 см3. Одновременно с иммунизацией дважды внутримышечно вводили лигфол в дозе 3 мл на животное. Поросят (n=54), полученных от этих свиноматок, перед отъемом (21-23 день после рождения) с целью профилактики отечной болезни внутримышечно иммунизировали вакциной против эшерихиоза животных (Коли-Вак К88, К99, 987Р, F41, ТЛ- и ТС-анатоксины) двукратно с интервалом 10-15 дней, при этом первая доза составляет 1 см3, вторая - 1,5 см3, и перорально вакциной против сальмонеллеза свиней из супрессорного ревертанта живой трехкратно на 10, 15 и 20 дни жизни. При этом первая доза составляет 8 см3, вторая - 12, третья - 16 см3, и одновременно с иммунизацией дважды (23 и 33 день) внутримышечно вводили лигфол в дозе 0,1 мл/кг массы тела поросенка.

За поросятами в течение опыта вели клиническое наблюдение по методике, описанной в примере 1.

Результаты опыта представлены в таблице 4.

Таблица 4
Сравнительная эффективность заявляемого и известного способов
№ п/п Показатели Группы
Контрольная Опытная
1 Количество поросят, голов 53 54
% 100 100
2 Из них заболело, голов 6 3
% 11,3 5,6
3 Масса тела на 20 сутки, кг 5,43±0,2 5,08±0,22
4 Масса тела на 51 сутки, кг 13,04±1,1 13,99±0,6
5 Среднесуточный прирост массы тела с 20 по 51 сутки, г 245±10,4 287±13,6
6 Прирост массы тела за 31 день, кг% 7,61+140,1 8,91+175,0

Как видно из таблицы 4, профилактическая эффективность заявляемого способа составляет 94,4%, а известного - 88,7%. Поросята, полученные от свиноматок, иммунизированных в сочетании с лигфолом, имели среднесуточный прирост массы тела на 42 г больше, а прирост массы тела - на 34,9% по сравнению с таковым у поросят, полученных от свиноматок, иммунизированных без препарата.

Влияние иммунизации поросят без препарата и в сочетании с лигфолом на титр агглютининов к эшерихиозному и сальмонеллезному антигенам в сыворотке крови представлено в таблице 5.

Из таблицы 5 видно, что у поросят 38-43 дневного возраста, иммунизированных в сочетании с лигфолом, титры антител к эшерихиозному и сальмонеллезному антигенам, по сравнению с таковыми у поросят, иммунизированных без препарата, были выше в 3,4 и 4,0 раза соответственно. После отъема и перевода поросят на доращивание у животных контрольной и опытной групп титры антител снижались, но они оставались выше у поросят, вакцинированных в сочетании с лигфолом, что способствовало снижению заболеваемости их желудочно-кишечными болезнями.

Таким образом, проведенные исследования показывают, что применение лигфола одновременно с иммунизацией супоросных свиноматок способствует созданию у них более напряженного специфического иммунитета и колострального иммунитета у полученных поросят. Применение лигфола одновременно с иммунизацией поросят сопровождается формированием у них более напряженного поствакционального иммунитета, что повышает их устойчивость к колибактериозу и сальмонеллезу.

Источники информации

1. Урбан В.П., Найманов И.Л. Болезни молодняка в промышленном животноводстве. - М.: Колос, 1984. - 207 с.

2. Кузнецова И.И. и др. Профилактика желудочно-кишечных болезней поросят родануром // Научные основы профилактики и лечения незаразных болезней сельскохозяйственных животных. - Воронеж, 1991. - С.42-43.

3. Пояркова Т.В. Антимикробная активность и лечебная эффективность мирамистина при колибактериозе и сальмонеллезе поросят. Автореферат на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук. - Воронеж, 2005.

4. Ефанова Л.И., Сайдулдин Е.Г. Защитные механизмы организма. Иммунодиагностика и иммунопрофилактика инфекционных болезней животных. / Под ред. А.Г.Шахова. - Воронеж: ВГАУ, 2004. - 391 с.

5. Наставление по применению вакцины против эшерихиоза животных (Коли-Вак К88, К99, 987Р, F41, ТЛ- и ТС-анатоксины). / Утверждено Департаментом ветеринарии Минсельхоза России 20.06.1997 г.

6. Наставление по применению вакцины против сальмонеллеза свиней из супрессорного ревертанта живой. / Утверждено Департаментом ветеринарии Минсельхоза России 15.05.1996 г.

7. Наставление по применению Лигфола в качестве адаптогена и стресс-корректора в ветеринарии // Утверждено Департаментом ветеринарии Минсельхоза России 3.05.2000 за №13-4-03/0063.

Способ профилактики колибактериоза и сальмонеллеза поросят, включающий иммунизацию глубокосупоросных свиноматок и полученных от них поросят вакциной против эшерихиоза животных (Коли-Вак К88, К99, 987Р, F41, ТЛ- и ТС-анатоксины), отличающийся тем, что одновременно животных прививают вакциной против сальмонеллеза свиней из супрессорного ревертанта живой и дополнительно одновременно с иммунизацией дважды внутримышечно вводят лигфол глубокосупоросным свиноматкам за 1,5 месяца до опороса с интервалом 10-15 дней в дозе 3 мл на животное, а поросятам, полученным от этих свиноматок, на 21-23 день после рождения двукратно с интервалом 10-15 дней вводят лигфол в дозе 0,1 мл/кг массы тела.

www.findpatent.ru


Смотрите также




г.Самара, ул. Димитрова 131
[email protected]