Вакцина ассоциированная против инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота на основе антигенов бактерии Moraxella bovis и герпес вируса типа I. Вакцина против инфекционного кератоконъюнктивита крс

Вакцина ассоциированная против инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота на основе антигенов бактерии Moraxella bovis и герпес вируса типа I.

I.ОБЩИЕ СВЕДЕНИЯ.

1. Вакцина ассоциированнаяпротив кератоконъюнктивита крупного рогатого скота на основе антигенов бактерийMoraxella bovis и герпес вируса типа I.

2. В состав вакцины входятинактивированные концентрированные антигены культур бактерий Moraxella bovis штаммов "I-97-ВНИВИ"и"ШЗ-01" штамма "ТТСА-ВИВЭВ-В2" герпесвируса типа I крупногорогатого скота, гидроокись алюминия.

3. Вакцина представляет собойнепрозрачную жидкость с белым осадком, который при встряхивании разбивается,образуя гомогенную взвесь бледно- розового цвета.

4. Вакцину расфасовывают по100 и 200 см3 в стеклянные флаконы соответствующей вместимости,укупоривают резиновыми пробками, обрабатывают алюминиевыми колпачками иэтикетируют. На этикетке указывают: наименование организации производителя, еёадрес, и товарный знак, название вакцины, количество доз во флаконе, дозу испособ применения, условия хранения, номер серии, номер госконтроля, датаизготовления (месяц, год), срок годности, обозначение ТУ, регистрационныйномер, надпись "Для животных".

5. Флаконы с вакцинойупаковывают в ящики из фанеры, для обеспечения целостности флаконы обёртываютбумагой или алигнином, в холодное время года- ватой или другимитеплоизолирующими материалами. Внутрь каждого ящика вкладывают 3 экз.инструкции по применению вакцины.

на упаковку с флаконами (транспортная тара)наклеивают этикетку, на которой указывают: наименование ведомства, наименованиеорганизации производителя, её адрес и товарный знак, название препарата, егоколичества в ящике, объём вакцины во флаконе, номер серии, номер контроля, датуизготовления (месяц, год), срок годности, условия хранения, обозначениетехнических условий, регистрационный номер, надпись "Для животных".

6. Вакцину транспортируют ихранят в сухом, защищенном от света месте , при температуре от 4 до 8°С. Срокгодности препарата 12 месяцев со дня изготовления при соблюдении условийтранспортировки и хранения.

Вакцину снарушенной целостностью флакона и подвергшуюся замораживанию, без этикеток,с наличием посторонних примесей, а такжене использованную в день вскрытия флакона, выбраковывают. Выбракованную вакцинуподвергают кипячению в течение 15 минут.

II. Биологические свойства.

7. Активными компонентамивакцины являются антигены бактерий Moraxella bovis и герпес вируса типа I. Все компоненты вакцины безвредны,обладают высокой иммуногенностью и полностью совместимы.

Вакцина при двукратном введении с интервалом 21- 30дней в соответствующих дозах вызывает у молодняка и взрослого поголовьякрупного рогатого скота образование напряженного иммунитета продолжительностьюне менее двенадцати месяцев.

III. ПОРЯДОК ПРИМЕНЕНИЯ ВАКЦИНЫ.

8. Вакцину применяют спрофилактической целью в угрожаемых и стационарно неблагополучных хозяйствах поинфекционному кератоконъюнктивиту крупного рогатого скота.

9. Вакцинируют весьнарождающийся молодняк в возрасте 30-35 дней независимо от времени года, атакже всё поголовье крупного рогатого скота перед выгоном на пастбище. Вакцинувводят подкожно в среднюю треть шеи, двукратно с интервалом 21- 30 дней, вдозах для первой и второй прививки:

-3см3- телятам в возрасте от 1 до 6месяцев;

-5см3- молодняку в возрасте от 6 месяцевдо года;

-10см3- молодняку старше года, коровам ибыкам- производителям.

10. Перед применениемфлаконы с вакциной необходимо тщательно встряхивать,а в холодное времяподогревать в водяной бане до 37-38°С.

11. Молоко и продукты убоя,полученные от вакцинированных животных, в любое время после прививкиреализуются без ограничений.

12. При проведении прививокнеобходимо соблюдать правила асептики и антисептики. Место введения вакциныдезинфицируют 70% раствором этилового спирта. Шприцы и иглы перед применениемстерилизуют кипячением, для каждого животного используют отдельную иглу.

13. Наряду с вакцинациейживотных необходимо проводить в хозяйстве ветерианрно- санитарные мероприятия,направленные на уничтожение инфекционного начала.

14. Противопоказания вприменению:

- не вакцинировать больныхи ослабленных животных;

- не применятьгипериммунные сыворотки или иммунодепрессанты в течение 1 месяца послевакцинации.

IV. МЕРЫ ЛИЧНОЙ ПРОФИЛАКТИКИ.

15. При проведениивакцинации необходимо соблюдать правила личной гигиены, принятые при работе слекарственными средствами. В местах работы должна находится аптечка дляоказания первой доврачебной помощи.

16. В случае попаданиявакцины на открытые участки тела или слизистые оболочки глаз, рта и носа, ипосле окончания работы руки и другие открытые участки тела моют водой с мылом.

17. Вакцина по истечениисрока годности применению не подлежит.

18. Вакцину следует хранитьв местах недоступных для детей.

kazvetsnab.kz

АССОЦИИРОВАННАЯ ВАКЦИНА ПРОТИВ ИНФЕКЦИОННОГО КЕРАТОКОНЪЮНКТИВИТА (моракселлеза) КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА

Х.З. ГАФФАРОВ, А.В. ИВАНОВ, Г.Н. СПИРИДОНОВ, Л.Ш. ДУПЛЕВА, Л.В. ВАЛЕБНАЯ, М.А. ЕФИМОВА Федеральный центр токсикологической и радиационной безопасности животных (ФЦТРБ-ВНИВИ)

Инфекционный кератоконъюнктивит крупного рогатого скота (ИКК, моракселлез), вызываемый бактериями Moraxella bovis, наносит значительный экономический ущерб скотоводческим хозяйствам за счет выбраковки племенных животных, снижения удоев и прироста массы тела, затрат на проведение лечебных и оздоровительных мероприятий.

Частота проявления этой острой высококонтагиозной болезни в Российской Федерации резко увеличивается в летние месяцы, когда крупный рогатый скот находится на пастбище или открытых выгулах. Наиболее высока заболеваемость среди молодняка в группах доращивания и откормочных площадках с большой плотностью поголовья на фоне интенсивного облучения их солнечными УФ-лучами.

Современный уровень интенсификации животноводства в РФ, разноречивость взглядов в отношении этиологии ИКК, отсутствие каких-либо нормативных документов по диагностике и мерам борьбы с ним, завоз из-за рубежа племенного крупного рогатого скота, скрытых носителей возбудителя, перемещение инфицированных животных из одного региона (или хозяйств) в другой (другие) привели к значительному распространению и появлению стационарно неблагополучных очагов ИКК. Если учесть, что жизнеспособные Moraxella bovis сохраняются в глазных и носовых выделениях животных в течение многих месяцев после клинического выздоровления, являясь постоянным источником возбудителя, то проблема организации контроля и борьбы с данной патологией остается актуальной.

Установлено, что особи, переболевшие острой и хронической формами ИКК, резистентны к повторному заражению [2, 6]. В 70 - 90-е годы XX в. во многих странах вопросы специфической профилактики этой болезни были решены. Авторы вакцин подчеркивали, что резистентность вакцинированных животных к заражению обусловлена общими защитными механизмами - воздействием сывороточных и слезных антител, влиянием иммунокомпетентных клеток, концентрированных в лимфоидных органах [ 6, 8 - 10, 13, 14]. В мировой практике для специфической профилактики ИКК используют ряд вакцин, отличающихся по способам получения и по методу проведения иммунизации. Принципы их изготовления менялись в зависимости от научных представлений [4-6, 11, 12, 15].

Цель данных экспериментов - разработка технологии изготовления инактивированной вакцины на основе антигенов гемолитических форм бактерий Moraxella bovis и герпесвируса типа 1, определение антигенной и иммуногенной активности биопрепарата, а также оценка его эффективности.

При создании вакцины против ИКК крупного рогатого скота исходили из того, что ведущую роль в возникновении этой формы патологии играют бактерии Moraxella bovis. Учитывали также, что герпесвирус типа 1 вызывает острый конъюнктивит и при этом воспалительный процесс не прогрессирует до изъязвления роговицы. Существует мнение, что герпесвирус типа 1 создает особо благоприятную среду для патогенного действия основного возбудителя ИКК [1, 15]. Во внимание также приняли факт широкого распространения и значение герпесвируса в патологии крупного рогатого скота, вызывающего разные клинически выраженные болезни.

Для изготовления ассоциированной вакцины использовали 2 наиболее активных в антигенном отношении штамма Moraxella bovis - Г97-ВНИВИ и ШЗ-01, а в качестве питательной среды - МПА, содержащий 10% дефибринированной крови барана. Культуру проверяли на чистоту, морфологическую и серологическую типичность. Бактериальную взвесь инактивировали формалином, содержащим 37 - 38 % активного формальдегида.

Герпесвирус крупного рогатого скота размножали в перевиваемой культуре клеток трахеи эмбриона коровы (линия TR), выращенной в роллерных 3-литровых бутылях на комбинированной ростовой среде. Полученные вирусные суспензии объединяли и инактивировали формалином при комнатной температуре. Полноту инактивации герпесвируса контролировали тремя последовательными пассажами пробы вирусной суспензии на перевиваемой культуре клеток трахеи эмбриона коровы с интервалом 5-6 сут.

Таблица 1 Содержание специфических антител в сыворотке крови вакцинированных животных

Вакцина состоит из смеси концентрированных антигенов гемолитических форм штаммов Moraxella bovis и культуральной суспензии герпесвируса типа 1 в оптимальных соотношениях. Депонированная гидроокисью алюминия вакцина представляет собой непрозрачную жидкость с белым осадком, который при встряхивании флакона разбивается, образуя гомогенную взвесь бледно-розового цвета.

Безвредность ее проверяли на 10 белых мышах массой тела 17- 18 г, инъекцией им биопрепарата подкожно в дозе 0,5 см3. Вакцину считали безвредной, если животные в течение 10 сут оставались живыми и клинически здоровыми. Иммуногенную активность определяли путем подкожного двукратного введения ее кроликам и молодняку крупного рогатого скота с интервалом 14 дней: телятам в область средней трети шеи по 5 см3, кроликам по 2 см3. Через каждые 14 дней у животных брали кровь и сыворотку исследовали в ИФА для определения уровня специфических антител к антигенам.

Лабораторные испытания показали, что все серии ассоциированной вакцины были стерильны, безвредны и антигенно-активны для животных, не обладали остаточной   вирулентностью   и   их   можно  использовать в производственных условиях для специфической профилактики ИКК крупного рогатого скота. Показатели иммуногенной активности ассоциированной вакцины представлены в таблице 1, из которой следует, что наивысший уровень накопления антител наблюдали на 14-й день после двукратной вакцинации кроликов и телят.

Уровень клеточного иммунитета вак-цинированных животных определяли по процентному соотношению Т- и В-лимфоцитов, которые выделяли на градиенте плотности сахарозы центрифугированием и идентифицировали методом Е-РОКи ЗС3-РОК. После каждой иммунизации происходило  увеличение   процентного соотношения Т- и В-лимфоцитов (табл. 2). Изучая    иммуногенную    активность ассоциированной вакцины на белых мышах, установили, что она защищает после каждой вакцинации 80 % грызунов при их контрольном заражении.

Исследуя на белых мышах превентивные свойства сыворотки крови вакцинированных телят и кроликов, установили, что после 2-й иммунизации они были на 80 % выше, чем превентивные свойства сыворотки крови контрольных животных.

Таблица 2 Содержание Т- и В-лимфоцитов в крови вакцинироввнных животных (M±m, n = 5)

Таблица 3 Эффективность применения вссоциированной вакцины для специфической профилактики инфекционного кератоконъюнктивитв крупного рогатого скотв на основе внтигенов бактерий Moraxella bovis и герпесвирусв типа 1

В угрожаемых и стационарно неблагополучных хозяйствах по ИКК крупного рогатого скота с профилактической целью привили весь молодняк в возрасте 30 - 35 дней независимо от времени года, а весь остальной скот - перед выгоном на пастбище. Вакцину вводили подкожно в среднюю треть шеи двукратно с интервалом 21-30 дней в дозах: 3 см3 -1-6-месячным телятам; 5 см3 - молодняку в возрасте от 6 мес до года; 10 см3 - молодняку старше года, коровам и быкам-производителям. Иммунитет у животных формировался на 21 - 30-й день после второй прививки и сохранялся в течение года.

Производственные испытания экспериментальных серий вакцины провели в 9 хозяйствах, неблагополучных по ИКК крупного рогатого скота. Заболеваемость телят до 6-месячного возраста в них составляла 24 - 56 %, молодняка до 12-месячного возраста - 19 - 35 и молодняка старше года и взрослого поголовья - 8 -22 %. Вакцинация животных в этих хозяйствах позволила полностью искоренить ИКК в 6 из них, а в остальных снизить заболеваемость до минимума (табл. 3).

За 2000 - 2006 гг. было изготовлено в ФЦТРБ-ВНИВИ более 100 тыс. доз ассоциированной вакцины против ИКК крупного рогатого скота, которые применили в широком производственном опыте с положительными результатами. При иммунизация животных заболеваемость инфекционным кератоконъюнктивитом снизилась в среднем в 16 раз, что значительно сократило экономический ущерб.

Ассоциированная вакцина для специфической профилактики инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота на основе антигенов бактерий Moraxella bovis и герпесвируса типа I защищена патентом РФ на изобретение. Нормативно-техническая документация на нее одобрена Федеральным агенством по ветеринарному и фитосанитарному надзору, она предложена для внедрения в ветеринарную практику.

Заключение. Разработанная вакцина против ИКК крупного рогатого скота при иммунизации животных значительно активизирует их специфические защитные механизмы и формирует активный иммунитет против данной болезни. При этом нарастают титры специфических антител, повышаются процентное соотношение Т- и В-лимфоцитов и превентивная активность сыворотки крови вакцинированных животных.

ЛИТЕРАТУРА

1. Гаффаров Х.З. и др. Ассоциированная вакцина для специфической профилактики инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота на основе бактерий Moraxella bovis и герпесвируса типа 1. - Патент РФ на изобретение № 2264227 (приоритет от 24.02.2004).

2. Штрауб О.Х. Инфекции крупного рогатого скота, вызываемые вирусами герпеса/ Под ред. Д.Ф.Осидзе. -М.: Колос, 1981.

3. Baptista P. //Brit. Vet. J. 1979, 135.

4. Brinton C.C., Goodnow R.A. Vaccine for immunizing cattle against Infectious Bovine Kerato-conjunctivitis infection by Moraxella bovis.- European Patent Application. № 0107845, A2; of 21.10.1983.

5. European patent. Moraxella bovis Bacterin. № 0.146.523; of 07.12.1984. - Bull. V. 85. - № 26.

6. Gwin R. Medicament and method for producing immunity to infections bovine keratoconjunctivitis. -United States Patent. № 4.539.201; of 03.09.1985.

7. Hughes D.E. et al. //Am. J. Vet. Res. 1968, 29.

8. Hughes D.E. et al. //Am. J. Vet. Res. 1971, 32, 6.

9. Hughes D.E. et al. //Am. J. Vet. Res. 1975, 36.

10. Hughes D.E. etal.//Am. J. Vet. Res. 1976,37, 11.

11. Lepper A.W.D. //Austr. Vet. J. 1988, 65, 10.

12. Lepper A.W.D. et al. //Vet. Microbiology. 1995, 45.

13. Pugh G.W. et al. //Am. J. Vet. Res. 1980, 41, 2.

14. Pugh G.W. et al. // Am. J. Vet. Res. 1982, 43, 2.

15. Rebnun W. et al. // Corn. Vet. 1978, 68.

16. United States Patent. Composition for prophylactic treatment of "pinkeye"; №4.254.098, of 03.1981.

журнал "Ветеринария" № 5 2008

www.liveanimal.ru

АССОЦИИРОВАННАЯ ВАКЦИНА ПРОТИВ ИНФЕКЦИОННОГО КЕРАТОКОНЪЮНКТИВИТА (моракселлеза) КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА

Х.З. ГАФФАРОВ, А.В. ИВАНОВ, Г.Н. СПИРИДОНОВ, Л.Ш. ДУПЛЕВА, Л.В. ВАЛЕБНАЯ, М.А. ЕФИМОВА Федеральный центр токсикологической и радиационной безопасности животных (ФЦТРБ-ВНИВИ)

Инфекционный кератоконъюнктивит крупного рогатого скота (ИКК, моракселлез), вызываемый бактериями Moraxella bovis, наносит значительный экономический ущерб скотоводческим хозяйствам за счет выбраковки племенных животных, снижения удоев и прироста массы тела, затрат на проведение лечебных и оздоровительных мероприятий.

Частота проявления этой острой высококонтагиозной болезни в Российской Федерации резко увеличивается в летние месяцы, когда крупный рогатый скот находится на пастбище или открытых выгулах. Наиболее высока заболеваемость среди молодняка в группах доращивания и откормочных площадках с большой плотностью поголовья на фоне интенсивного облучения их солнечными УФ-лучами.

Современный уровень интенсификации животноводства в РФ, разноречивость взглядов в отношении этиологии ИКК, отсутствие каких-либо нормативных документов по диагностике и мерам борьбы с ним, завоз из-за рубежа племенного крупного рогатого скота, скрытых носителей возбудителя, перемещение инфицированных животных из одного региона (или хозяйств) в другой (другие) привели к значительному распространению и появлению стационарно неблагополучных очагов ИКК. Если учесть, что жизнеспособные Moraxella bovis сохраняются в глазных и носовых выделениях животных в течение многих месяцев после клинического выздоровления, являясь постоянным источником возбудителя, то проблема организации контроля и борьбы с данной патологией остается актуальной.

Установлено, что особи, переболевшие острой и хронической формами ИКК, резистентны к повторному заражению [2, 6]. В 70 - 90-е годы XX в. во многих странах вопросы специфической профилактики этой болезни были решены. Авторы вакцин подчеркивали, что резистентность вакцинированных животных к заражению обусловлена общими защитными механизмами - воздействием сывороточных и слезных антител, влиянием иммунокомпетентных клеток, концентрированных в лимфоидных органах [ 6, 8 - 10, 13, 14]. В мировой практике для специфической профилактики ИКК используют ряд вакцин, отличающихся по способам получения и по методу проведения иммунизации. Принципы их изготовления менялись в зависимости от научных представлений [4-6, 11, 12, 15].

Цель данных экспериментов - разработка технологии изготовления инактивированной вакцины на основе антигенов гемолитических форм бактерий Moraxella bovis и герпесвируса типа 1, определение антигенной и иммуногенной активности биопрепарата, а также оценка его эффективности.

При создании вакцины против ИКК крупного рогатого скота исходили из того, что ведущую роль в возникновении этой формы патологии играют бактерии Moraxella bovis. Учитывали также, что герпесвирус типа 1 вызывает острый конъюнктивит и при этом воспалительный процесс не прогрессирует до изъязвления роговицы. Существует мнение, что герпесвирус типа 1 создает особо благоприятную среду для патогенного действия основного возбудителя ИКК [1, 15]. Во внимание также приняли факт широкого распространения и значение герпесвируса в патологии крупного рогатого скота, вызывающего разные клинически выраженные болезни.

Для изготовления ассоциированной вакцины использовали 2 наиболее активных в антигенном отношении штамма Moraxella bovis - Г97-ВНИВИ и ШЗ-01, а в качестве питательной среды - МПА, содержащий 10% дефибринированной крови барана. Культуру проверяли на чистоту, морфологическую и серологическую типичность. Бактериальную взвесь инактивировали формалином, содержащим 37 - 38 % активного формальдегида.

Герпесвирус крупного рогатого скота размножали в перевиваемой культуре клеток трахеи эмбриона коровы (линия TR), выращенной в роллерных 3-литровых бутылях на комбинированной ростовой среде. Полученные вирусные суспензии объединяли и инактивировали формалином при комнатной температуре. Полноту инактивации герпесвируса контролировали тремя последовательными пассажами пробы вирусной суспензии на перевиваемой культуре клеток трахеи эмбриона коровы с интервалом 5-6 сут.

Таблица 1 Содержание специфических антител в сыворотке крови вакцинированных животных

Вакцина состоит из смеси концентрированных антигенов гемолитических форм штаммов Moraxella bovis и культуральной суспензии герпесвируса типа 1 в оптимальных соотношениях. Депонированная гидроокисью алюминия вакцина представляет собой непрозрачную жидкость с белым осадком, который при встряхивании флакона разбивается, образуя гомогенную взвесь бледно-розового цвета.

Безвредность ее проверяли на 10 белых мышах массой тела 17- 18 г, инъекцией им биопрепарата подкожно в дозе 0,5 см3. Вакцину считали безвредной, если животные в течение 10 сут оставались живыми и клинически здоровыми. Иммуногенную активность определяли путем подкожного двукратного введения ее кроликам и молодняку крупного рогатого скота с интервалом 14 дней: телятам в область средней трети шеи по 5 см3, кроликам по 2 см3. Через каждые 14 дней у животных брали кровь и сыворотку исследовали в ИФА для определения уровня специфических антител к антигенам.

Лабораторные испытания показали, что все серии ассоциированной вакцины были стерильны, безвредны и антигенно-активны для животных, не обладали остаточной   вирулентностью   и   их   можно  использовать в производственных условиях для специфической профилактики ИКК крупного рогатого скота. Показатели иммуногенной активности ассоциированной вакцины представлены в таблице 1, из которой следует, что наивысший уровень накопления антител наблюдали на 14-й день после двукратной вакцинации кроликов и телят.

Уровень клеточного иммунитета вак-цинированных животных определяли по процентному соотношению Т- и В-лимфоцитов, которые выделяли на градиенте плотности сахарозы центрифугированием и идентифицировали методом Е-РОКи ЗС3-РОК. После каждой иммунизации происходило  увеличение   процентного соотношения Т- и В-лимфоцитов (табл. 2). Изучая    иммуногенную    активность ассоциированной вакцины на белых мышах, установили, что она защищает после каждой вакцинации 80 % грызунов при их контрольном заражении.

Исследуя на белых мышах превентивные свойства сыворотки крови вакцинированных телят и кроликов, установили, что после 2-й иммунизации они были на 80 % выше, чем превентивные свойства сыворотки крови контрольных животных.

Таблица 2 Содержание Т- и В-лимфоцитов в крови вакцинироввнных животных (M±m, n = 5)

Таблица 3 Эффективность применения вссоциированной вакцины для специфической профилактики инфекционного кератоконъюнктивитв крупного рогатого скотв на основе внтигенов бактерий Moraxella bovis и герпесвирусв типа 1

В угрожаемых и стационарно неблагополучных хозяйствах по ИКК крупного рогатого скота с профилактической целью привили весь молодняк в возрасте 30 - 35 дней независимо от времени года, а весь остальной скот - перед выгоном на пастбище. Вакцину вводили подкожно в среднюю треть шеи двукратно с интервалом 21-30 дней в дозах: 3 см3 -1-6-месячным телятам; 5 см3 - молодняку в возрасте от 6 мес до года; 10 см3 - молодняку старше года, коровам и быкам-производителям. Иммунитет у животных формировался на 21 - 30-й день после второй прививки и сохранялся в течение года.

Производственные испытания экспериментальных серий вакцины провели в 9 хозяйствах, неблагополучных по ИКК крупного рогатого скота. Заболеваемость телят до 6-месячного возраста в них составляла 24 - 56 %, молодняка до 12-месячного возраста - 19 - 35 и молодняка старше года и взрослого поголовья - 8 -22 %. Вакцинация животных в этих хозяйствах позволила полностью искоренить ИКК в 6 из них, а в остальных снизить заболеваемость до минимума (табл. 3).

За 2000 - 2006 гг. было изготовлено в ФЦТРБ-ВНИВИ более 100 тыс. доз ассоциированной вакцины против ИКК крупного рогатого скота, которые применили в широком производственном опыте с положительными результатами. При иммунизация животных заболеваемость инфекционным кератоконъюнктивитом снизилась в среднем в 16 раз, что значительно сократило экономический ущерб.

Ассоциированная вакцина для специфической профилактики инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота на основе антигенов бактерий Moraxella bovis и герпесвируса типа I защищена патентом РФ на изобретение. Нормативно-техническая документация на нее одобрена Федеральным агенством по ветеринарному и фитосанитарному надзору, она предложена для внедрения в ветеринарную практику.

Заключение. Разработанная вакцина против ИКК крупного рогатого скота при иммунизации животных значительно активизирует их специфические защитные механизмы и формирует активный иммунитет против данной болезни. При этом нарастают титры специфических антител, повышаются процентное соотношение Т- и В-лимфоцитов и превентивная активность сыворотки крови вакцинированных животных.

ЛИТЕРАТУРА

1. Гаффаров Х.З. и др. Ассоциированная вакцина для специфической профилактики инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота на основе бактерий Moraxella bovis и герпесвируса типа 1. - Патент РФ на изобретение № 2264227 (приоритет от 24.02.2004).

2. Штрауб О.Х. Инфекции крупного рогатого скота, вызываемые вирусами герпеса/ Под ред. Д.Ф.Осидзе. -М.: Колос, 1981.

3. Baptista P. //Brit. Vet. J. 1979, 135.

4. Brinton C.C., Goodnow R.A. Vaccine for immunizing cattle against Infectious Bovine Kerato-conjunctivitis infection by Moraxella bovis.- European Patent Application. № 0107845, A2; of 21.10.1983.

5. European patent. Moraxella bovis Bacterin. № 0.146.523; of 07.12.1984. - Bull. V. 85. - № 26.

6. Gwin R. Medicament and method for producing immunity to infections bovine keratoconjunctivitis. -United States Patent. № 4.539.201; of 03.09.1985.

7. Hughes D.E. et al. //Am. J. Vet. Res. 1968, 29.

8. Hughes D.E. et al. //Am. J. Vet. Res. 1971, 32, 6.

9. Hughes D.E. et al. //Am. J. Vet. Res. 1975, 36.

10. Hughes D.E. etal.//Am. J. Vet. Res. 1976,37, 11.

11. Lepper A.W.D. //Austr. Vet. J. 1988, 65, 10.

12. Lepper A.W.D. et al. //Vet. Microbiology. 1995, 45.

13. Pugh G.W. et al. //Am. J. Vet. Res. 1980, 41, 2.

14. Pugh G.W. et al. // Am. J. Vet. Res. 1982, 43, 2.

15. Rebnun W. et al. // Corn. Vet. 1978, 68.

16. United States Patent. Composition for prophylactic treatment of "pinkeye"; №4.254.098, of 03.1981.

журнал "Ветеринария" № 5 2008

www.liveanimal.ru

средство для профилактики инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота и способ профилактики этого заболевания - патент РФ 2240820

Изобретение относится к ветеринарии. Средство для профилактики инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота состоит из вакцинного штамма Moraxella bovis-KBH, буферного раствора, гидрата окиси алюминия, формалина при определенном соотношении компонентов. Способ профилактики инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота заключается в подкожном введении указанного средства крупному рогатому скоту в области средней трети шеи первый раз в дозе 3 мл, второй раз через 21 день после первого введения в дозе 3-4 мл. Способ обеспечивает эффективную профилактику инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота при введении средства за 1-1,5 месяца до начала заболевания. 2 н. и 2 з.п. ф-лы, 2 табл.

Изобретение относится к ветеринарии, в частности к средству для профилактики инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота и способам профилактики этого и других инфекционных заболеваний крупного рогатого скота (варианты), и может быть использовано для специфической профилактики крупного рогатого скота от инфекционных заболеваний.

За рубежом в условиях производства инфекционный кератоконъюнктивит бактериальной этиологии имеет широкое распространение и наносит фермерским хозяйствам большой экономический ущерб за счет снижения привесов у телят и удоя у коров. По данным Anon, американского исследователя, инфекционный кератоконъюнктивит приводит к потере массы у телят и снижению удоев у коров. Anon применил вакцину против данного заболевания, которую вводят подкожно в объеме 3 мл, вводят двукратно с интервалом 1-4 месяца [1].

Davidson К провел испытание вакцины против инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота. Вакциной было привито 175 голов крупного рогатого скота и 175 голов служили контролем. Вакцину вводят двукратно с месячным интервалом. Установлено, что было поражено 41% вакцинированных и 53% невакцинированных животных. Среди вакцинированного поголовья заболело 19% животных, из невакцинированных - 26% [2].

Анализируя приведенные данные по вакцинам против инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота, следует отметить, что они имеют существенные недостатки.

При изготовлении они трудоемки в технологическом отношении.

Данные вакцины защищают животных от инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота от 81-85%, то есть они недостаточно эффективны по сравнению с предлагаемым средством.

В связи с тем что в нашей стране данная проблема еще не изучена, задачей изобретения является: разработать средство и способ профилактики инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота.

В научно-технической и патентной литературе не обнаружены технические решения, содержащие признаки, аналогичные заявленному предложению, так как данное инфекционное заболевание крупного рогатого скота еще не зарегистрировано в Российской Федерации.

Автором разработки установлено, что заявленное средство и способ обладают высокой профилактической активностью. Средство для профилактики инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота имеет следующий состав: вакцинный штамм Moraxella bovis-КВН (суспензия в буферном р-ре.млрд/см3 ) буферный раствор, гидрат окиси алюминия, формалин при следующем соотношении компонентов, мас.%:

Буферный раствор 94,75-94,75

Гидрат окиси алюминия 4-5

Формалин 0,20-0,20

Вакцинный штамм Moraxella bovis-KBH Остальное

Способ профилактики животных против инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота состоит в том, что средство против инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота применяют для специфической профилактики животных от этого заболевания, причем средство вводят двукратно с интервалом три недели.

Средство, состоящее из вакцинного штамма Moraxella bovis-КВН, буферного раствора, гидрата окиси алюминия и формалина, вводят подкожно в области средней трети шеи крупному рогатому скоту, первый раз в дозе 3 мл, второй раз через 21 день после первого введения в дозе 4 мл, молодняку крупного рогатого скота первый раз в дозе 3 мл, второй раз через 21 день после первого введения в той же дозе - 3 мл. Средство вводят за 1,5-2 месяца до начала заболевания. Напряженный иммунитет наступает через 10 дней после второго введения и продолжается в течение 12 месяцев.

Пример 1. Применение средства и способа профилактики инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота в неблагополучном хозяйстве по данному заболеванию.

В хозяйстве, являющемся неблагополучным по инфекционному кератоконъюнктивиту, применяют средство и способ профилактики инфекционного заболевания.

Для этого в хозяйстве подбирают по принципу аналогов две группы телят по 130 голов. Первая группа опытная, вторая контрольная. Телятам опытной группы вводят средство против инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота, состоящее из вакцинного штамма Moraxella bovis-КВН (суспензия в буферном р-ре, млрд/см3), буферного раствора, гидрата окиси алюминия, формалина при следуюшем соотношении компонентов, мас.%:

Буферный раствор 94,75

Гидрат окиси алюминия 5

Формалин 0,20

Вакцинный штамм Moraxella bovis-КВН Остальное

Причем указанное средство вводят подкожно в области средней трети шеи молодняку крупного рогатого скота первый раз в дозе 3 мл, второй через 21 день после первого введения в той же дозе - 3 мл. Средство вводят за 2 месяца до начала заболевания. Контрольной группе телят средство не вводят. Оценку эффективности средства и способа проводят спустя 10 месяцев после его введения. Результаты исследований представлены в табл.1.

Из данных, приведенных в табл.1, видно, что из 130 вакцинированных против инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота заболело 8 телят (5,39%) с диагнозом инфекционный кератоконъюнктивит крупного рогатого скота, не заболело инфекционным кератоконъюнктивитом 122 теленка (94,61%). В контрольной группе из 130 телят заболело инфекционным кератоконъюнктивитом 98 животных (75,46%), не заболело 42 теленка (24,54%).

Таким образом, предложенное средство и способ профилактики инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота защищают от инфекции 94,61% телят и создают напряженный иммунитет в течение 12 месяцев.

Пример 2. Применение средства и способа профилактики инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота в неблагополучном хозяйстве по данному заболеванию.

Для этого в хозяйстве подбирают по принципу аналогов две группы по 90 коров. Первая группа опытная, вторая контрольная. Коровам опытной группы вводят средство, состоящее из вакцинного штамма Moraxella bovis-КВН (суспензия в буферном р-ре, млрд/см 3), буферного раствора, гидрата окиси алюминия, формалина при следующем соотношении компонентов, мас.%:

Буферный раствор 94,75

Гидрат окиси алюминия 5

Формалин 0,20

Вакцинный штамм Moraxella bovis-KBH Остальное

Причем указанное средство вводят подкожно в области средней трети шеи крупному рогатому скоту первый раз в дозе 3 мл, второй раз через 21 день после первого введения в дозе 4 мл. Средство вводят за 2 месяца до начала заболевания. Контрольной группе коров средство не вводят. Оценку эффективности средств и способа проводят спустя 10 месяцев после его введения. Результаты исследований представлены в табл.2.

Полученные нами данные свидетельствуют, что из 90 вакцинированных против инфекционного кератоконъюнктивита заболело 6 коров (6,67%) с диагнозом инфекционный кератоконъюнктивит крупного рогатого скота, не заболело 84 коровы (93,33%). В контрольной группе из 90 коров заболело инфекционным кератоконъюнктивитом 69 коров (76,66%), не заболела 21 корова (23,34%).

Необходимо отметить, что предложенные средство и способ профилактики инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота защищают от инфекции 93,33% коров и создают напряженный иммунитет у коров в течение 12 месяцев.

Таким образом, предложенное средство и способ профилактики инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота создают напряженный иммунитет у животных в течение 12 месяцев, обладают высокой профилактической эффективностью и их можно рекомендовать для широкого применения в ветеринарной практике.

Известно одновременное совместное введение вакцин для профилактики различных инфекционных заболеваний [3; 5], например, вакцина Bar-Vас-7 Pinkeye - для профилактики кератоконъюнктивита и клостридиозных инфекций, вакцина Breed-Bach-7 Pinkeye - для профилактики кератоконъюнктивита, лептоспироза и транспортной лихорадки, одновременная иммунизация свиней производственными вакцинами против чумы, рожи, Болезни Ауески, пастереллеза, сальмонеллеза. Однако в Российской Федерации ни в научно-технической, ни в патентной литературе, ни в промышленном применении не обнаружены способы одновременной профилактики инфекционного кератоконъюнктивита и других инфекционных заболеваний крупного рогатого скота.

Задача изобретения - разработать способы одновременной профилактики двух и более одновременно возникающих инфекционных заболеваний крупного рогатого скота.

Способ одновременной профилактики двух и более инфекционных заболеваний крупного рогатого скота состоит в том, что одновременно вводят две или более вакцины, причем одна из них - предлагаемое средство для профилактики инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота, состоящая из вакцинного штамма Moraxella bovis-КВН, буферного раствора, гидрата окиси алюминия, формалина. Способ профилактики инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота состоит в подкожном введении средства в области средней трети шеи первый раз в дозе 3 мл, второй раз через 21 день крупному рогатому скоту в дозе 4 мл, молодняку крупного рогатого скота первый раз в дозе 3 мл, второй раз через 21 день после первой вакцинации в той же дозе - 3 мл. При этом в зависимости от наличия других распространенных в данной местности в данный период времени инфекционных заболеваний вводят одновременно другие вакцины, например концентрированную формолквасцовую вакцину против паратифа телят или другие вакцины согласно наставлениям по применению, утвержденным Главным управлением ветеринарии.

Пример 3. В зависимости от эпизоотической обстановки хозяйства по инфекционному кератоконъюнктивиту и сальмонеллезу крупного рогатого скота вводят одновременно вакцины. Средство по п.1 вводят способом по п.2.

Концентрированную формолквасцовую вакцину против сальмонеллеза (паратифа) телят вводят стельным коровам 2-кратно за 50-60 дней до отела в дозах 10 и 15 см 3 с интервалом 8-10 дней между инъекциями. Телят, полученных от вакцинированных коров, прививают в 17-20 дневном возрасте 2-кратно в дозах 1 и 2 см3 с интервалом в 8-10 дней между инъекциями. Телят, полученных от невакцинированных коров, иммунизируют в 8-10 дневном возрасте 2-кратно в дозах 1 и 2 см 3 с интервалом в 8-10 дней между инъекциями [6].

Пример 4. В неблагополучных хозяйствах по инфекционному кератоконъюнктивиту, паратифу и колибактериозу крупного рогатого скота вводят одновременно вакцины. Средство по п.1 вводят способом по п.2. Поливалентную вакцину против паратифа и колибактериоза пушных зверей, птиц, телят и поросят вводят подкожно в области шеи. Коров вакцинируют трехкратно: первый раз за 35-40 дней до отела в дозе 5 мл, второй раз через 10 дней после первой прививки в дозе 10 мл и третий раз через 7-10 дней после второй прививки в дозе 20 мл. Телят вакцинируют первый раз в дозе 1-2 мл, второй раз - 2-3 мл, третий раз - 3-5 мл [4].

Пример 5. В зависимости от эпизоотической обстановки хозяйства по инфекционному кератоконъюнктивиту и пастереллезу крупного рогатого скота вводят одновременно вакцины. Средство по п.1 вводят способом по п.2. Эмульгированную вакцину против пастереллеза крупного рогатого скота применяют однократно внутримышечно в области средней трети шеи независимо от возраста в дозе - 3 мл [4].

Пример 6. В неблагоприятных хозяйствах по инфекционному кератоконъюнктивиту и диплококковой септицимии крупного рогатого скота вводят одновременно вакцины. Средство по п.1 вводят способом по п.2. Формолвакцину против диплококковой септицимии телят, ягнят и поросят применяют внутримышечно в области внутренней поверхности бедра двукратно с интервалом 10-14 дней, в дозах независимо от возраста и веса животного, телятам - первый раз 5 мл, второй раз 10 мл [4].

Пример 7. В зависимости от эпизоотической обстановки хозяйства по инфекционному кератоконъюнктивиту и лептоспирозу крупного рогатого скота вводят одновременно вакцины. Средство по п.1 вводят способом по п.2. Поливалентную вакцину ВГНКИ против лептоспироза животных вводят внутримышечно однократно в следующих дозах: молодняк крупного рогатого скота до 6 месяцев - 4 мл, ревакцинация через 6 месяцев в дозе - 4 мл, от 6 до 12 месяцев - 4 мл, ревакцинация через 6 месяцев - 8 мл, от 1 года до 2 лет - 8 мл, ревакцинация через 12 месяцев - 8 мл, взрослые животные - 10 мл, ревакцинация через 12 месяцев - 10 мл [6].

Пример 8. В неблагополучных хозяйствах по инфекционному кератоконъюнктивиту, паратифу и колибактериозу, диплококковой септицимии крупного рогатого скота вводят одновременно вакцины. Средство по п.1 водят способом по п.2. Поливалентную вакцину против паратифа и колибактериоза пушных зверей, птиц, телят и поросят вводят подкожно в области шеи. Коров вакцинируют трехкратно: первый раз за 35-40 дней до отела в дозе 5 мл, второй раз через 10 дней после первой прививки в дозе 10 мл и третий раз через 7-10 дней после второй прививки в дозе 20 мл. Телят вакцинируют первый раз в дозе 1-2 мл, второй раз - 2-3 мл, третий раз - 3-5 мл. Формолвакцину против диплококковой септицимии телят, ягнят и поросят вводят внутримышечно в области внутренней поверхности бедра двукратно, с интервалом 10-14 дней, в дозах, независимых от возраста и веса животного, телятам первый раз - 5 мл, второй раз - 10 мл [4].

Пример 9. В зависимости от эпизоотической обстановки хозяйства по инфекционному кератоконъюнктивиту, паратифу и колибактериозу, лептоспирозу крупного рогатого скота вводят одновременно вакцины. Средство по п.1 вводят способом по п.2. Поливалентную вакцину против паратифа и колибактериоза пушных зверей, птиц, телят и поросят вводят подкожно в области шеи. Коров вакцинируют трехкратно: первый раз за 35-40 дней до отела в дозе 5 мл, второй раз через 10 дней после первой прививки в дозе 10 мл и третий раз через 7-10 дней после второй прививки в дозе 20 мл. Телят вакцинируют первый раз в дозе 1-2 мл, второй раз - 2-3 мл, третий раз - 3-5 мл. Поливалентную вакцину ВГНКИ против лептоспироза животных вводят внутримышечно однократно в следующих дозах: молодняк крупного рогатого скота до 6 месяцев - 4 мл, ревакцинация через 6 месяцев в дозе - 4 мл, от до 12 месяцев - 4 мл, ревакцинация через 6 месяцев - 8 мл, от 1 года до 2 лет - 8 мл, ревакцинация через 12 месяцев - 8 мл, взрослые животные -10 мл, ревакцинация через 12 месяцев - 10 мл [4; 6].

Пример 10. В неблагополучных хозяйствах по инфекционному кератоконъюнктивиту, диплококковой септицимии и лептоспирозу крупного рогатого скота вводят одновременно вакцины. Средство по п.1 вводят способом по п.2. Формолвакцину против диплококковой септицимии телят, ягнят и поросят вводят внутримышечно в области внутренней поверхности бедра двукратно, с интервалом 10-14 дней, в дозах независимо от возраста и веса животного, телятам первый раз - 5 мл, второй раз - 10 мл. Поливалентную вакцину ВГНКИ против лептоспироза животных вводят внутримышечно однократно в следующих дозах: молодняк крупного рогатого скота до 6 месяцев - 4 мл, ревакцинация через 6 месяцев в дозе - 4 мл, от 6 до 12 месяцев - 4 мл, ревакцинация через 6 месяцев - 8 мл, от 1 года до 2 лет - 8 мл, ревакцинация через 12 месяцев - 8 мл, ревакцинация через 12 месяцев - 8 мл, взрослые животные - 10 мл, ревакцинация через 12 месяцев - 10 мл [4; 6].

Пример 11. В зависимости от эпизоотической обстановки хозяйства по инфекционному кератоконъюнктивиту, пастереллезу и лептоспирозу крупного рогатого скота вводят одновременно вакцины. Средство по п.1 вводят способом по п.2. Эмульгированную вакцину против пастереллеза крупного рогатого скота, буйволов и овец применяют однократно внутримышечно в области средней трети шеи независимо от возраста в дозе 3 мл (по 1,5 мл с обеих сторон шеи). Поливалентную вакцину ВГНКИ против лептоспироза животных вводят внутримышечно однократно в следующих дозах: молодняк крупного рогатого скота до 6 месяцев - 4 мл, ревакцинация через 6 месяцев в дозе - 4 мл, от 6 до 12 месяцев - 4 мл, ревакцинация через 6 месяцев - 8 мл, от года до 2 лет - 8 мл, ревакцинация через 12 месяцев - 8 мл, взрослые животные - 10 мл, ревакцинация через 12 месяцев - 10 мл [4; 6].

Пример 12. В неблагополучных хозяйствах по инфекционному кератоконъюнктивиту, пастереллезу и диплококковой септицимии крупного рогатого скота вводят одновременно вакцины. Средство по п.1 вводят способом по п.2. Эмульгированную вакцину против пастереллеза крупного рогатого скота, буйволов и овец применяют однократно внутримышечно в области средней трети шеи независимо от возраста в дозе 3 мл (по 1,5 мл с обеих сторон шеи). Формолвакцину против диплококковой септицимии телят, ягнят и поросят применяют внутримышечно в области внутренней поверхности бедра двукратно с интервалом 10-14 дней, в дозах независимо от возраста и веса животного, телятам первый раз - 5 мл, второй раз - 10 мл [4].

Пример 13. В зависимости от эпизоотической обстановки хозяйства по инфекционному кератоконъюнктивиту, паратифу и колибактериозу, пастереллезу крупного рогатого скота вводят одновременно вакцины. Средство по п.1 вводят способом по п.2. Поливалентную вакцину против паратифа и колибактериоза пушных зверей, птиц, телят и поросят вводят подкожно в области шеи. Коров вакцинируют трехкратно: первый раз за 35-40 дней до отела в дозе 5 мл, второй раз через 10 дней после первой прививки в дозе 10 мл и третий раз через 7-10 дней после второй прививки в дозе 20 мл. Телят вакцинируют первый раз в дозе 1-2 мл, второй раз - 2-3 мл, третий раз - 3-5 мл. Эмульгированную вакцину против пастереллеза крупного рогатого скота, буйволов и овец применяют однократно внутримышечно в области средней трети шеи независимо от возраста в дозе - 3 мл (по 1,5 мл с обеих сторон шеи) [4].

Пример 14. В неблагополучных хозяйствах по инфекционному кератокнъюнктивиту, парагриппу-3 и инфекционному ринотрахеиту крупного рогатого скота вводят одновременно вакцины. Средство по п.1 вводят способом по п.2. Сухую культуральную ассоциированную вакцину против парагриппа-3 и инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота вводят телятам в возрасте до 3 месяцев 2-кратно - первый раз интраназально по 1 мл в каждый носовой ход, второй раз - подкожно в дозе 2 мл через 14 дней после интраназальной вакцинации; молодняку старше 3 месяцев - интраназально по 1 мл в каждый носовой ход, повторно через 14 дней - подкожно в дозе 3 мл [6].

Пример 15. В зависимости от эпизоотической обстановки хозяйства по инфекционному кератоконъюнктивиту, парагриппу-3 и инфекционному ринотрахеиту, паратифу и колибактериозу крупного рогатого скота вводят одновременно вакцины. Средство по п.1 вводят способом по п.2. Сухую культуральную ассоциированную вакцину против парагриппа-3 и инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота вводят телятам в возрасте до 3 месяцев 2-кратно - первый раз интраназально по 1 мл в каждый носовой ход, второй раз - подкожно в дозе 2 мл через 14 дней после интраназальной вакцинации; молодняку старше 3 месяцев - интраназально по 1 мл в каждый носовой ход, повторно через 14 дней - подкожно в дозе 3 мл. Поливалентную вакцину против паратифа и колибактериоза пушных зверей, птиц, телят и поросят вводят подкожно в области шеи. Коров вакцинируют трехкратно: первый раз за 35-40 дней до отела в дозе 5 мл, второй раз через 10 дней после первой прививки в дозе 10 мл и третий раз через 7-10 дней после второй прививки в дозе 20 мл. Телят вакцинируют первый раз - 1-2 мл, второй раз в дозе 2-3 мл, третий раз - 3-5 мл [4; 6].

Пример 16. В неблагополучных хозяйствах по инфекционному кератоконъюнктивиту, парагриппу-3 и инфекционному ринотрахеиту и пастереллезу крупного рогатого скота вводят одновременно вакцины. Средство по п.1 вводят способом по п.2. Сухую культуральную ассоциированную вакцину против парагриппа-3 и инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота вводят телятам в возрасте до 3 месяцев 2-кратно - первый раз интраназально по 1 мл в каждый носовой ход, второй раз подкожно в дозе 2 мл через 14 дней после интраназальной вакцинации; молодняку старше 3 месяцев - интраназально по 1 мл в каждый носовой ход, повторно через 14 дней - подкожно в дозе 3 мл. Эмульгированную вакцину против пастереллеза крупного рогатого скота, буйволов и овец применяют однократно внутримышечно в области средней трети шеи независимо от возраста в дозе 3 мл (по 1,5 мл с обеих сторон шеи) [4; 6].

Пример 17. В зависимости от эпизоотической обстановки хозяйства по инфекционному кератоконъюнктивиту, парагриппу-3 и инфекционному ринотрахеиту и диплококковой септицимии крупного рогатого скота вводят одновременно вакцины. Средство по п.1 вводят способом по п.2. Сухую культуральную ассоциированную вакцину против парагриппа-3 и инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота вводят телятам в возрасте до 3 месяцев 2-кратно - первый раз интраназально по 1 мл в каждый носовой ход, второй раз подкожно в дозе 2 мл через 14 дней после интраназальной вакцинации; молодняку старше 3 месяцев - интраназально по 1 мл в каждый носовой ход, повторно через 14 дней - подкожно в дозе 3 мл. Формолвакцину против диплококковой септицимии телят, ягнят и поросят применяют внутримышечно в области внутренней поверхности бедра двукратно с интервалом 10-14 дней, в дозах независимо от возраста и веса животного, телятам первый раз - 5 мл, второй раз - 10 мл [4; 6].

Пример 18. В неблагополучных хозяйствах по инфекционному кератоконъюнктивиту, парагриппу-3 и инфекционному ринотрахеиту и лептоспирозу крупного рогатого скота вводят одновременно вакцины. Средство по п.1 вводят способом по п.2. Сухую культуральную ассоциированную вакцину против парагриппа-3 и инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота вводят телятам в возрасте до 3 месяцев 2-кратно - первый раз интраназально по 1 мл в каждый носовой ход, второй раз подкожно в дозе 2 мл через 14 дней после интраназальной вакцинации; молодняку старше 3 месяцев - интраназально по 1 мл в каждый носовой ход, повторно через 14 дней - подкожно в дозе 3 мл. Поливалентную вакцину ВГНКИ против лептоспироза животных вводят внутримышечно однократно в следующих дозах: молодняк крупного рогатого скота до 6 месяцев - 4 мл, ревакцинация через 6 месяцев в дозе 4 мл, от 6 до 12 месяцев - 4 мл, ревакцинация через 6 месяцев - 8 мл, от 1 года до 2 лет - 8 мл, ревакцинация через 12 месяцев - 8 мл, взрослые животные - 10 мл, ревакцинация через 12 месяцев - 10 мл [6].

Источники информации

1. Anon. USDA Licenses first pinkey vaccine for cuttle health care. Beef. 1985. - 21.6.69.

2. Davidson К. Cloudy View of pinkeye vaccines. Cattlemen beet mag. 1986. - 49, 2. S.30, 32.

3. Anon. Tahe steps to control Pinkeye. Am. Hereford I. 1985. - 76, 2. S.33.

4. Tретьяков А.Д. Ветеринарное законодательство. Том 1. М.: Колос, 1973. - С.542, 547, 556.

5. Третьяков А.Д. Ветеринарное законодательство. Том 3. М.: Колос, 1981. - С.170.

6. Третьяков А.Д. Ветеринарное законодательство. Том 4. М.: ВО “Агропромиздат”, 1989. - С.531, 524, 536.

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. Средство для профилактики инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота, состоящее из вакцинного штамма Moraxella bovis-КВН, буферного раствора, гидрата окиси алюминия, формалина при следующем соотношении компонентов, мас.%:

Буферный раствор 94,75-94,75

Гидрат окиси алюминия 4-5

Формалин 0,20-0,20

Вакцинный штамм Moraxella bovis-KBH Остальное

2. Способ профилактики инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота, включающий подкожное введение средства в области средней трети шеи, отличающийся тем, что в качестве средства используют средство по п.1, которое вводят крупному рогатому скоту первый раз в дозе 3 мл, второй раз через 21 день после первого введения.

3. Способ по п.2, отличающийся тем, что крупному рогатому скоту второй раз вводят средство по п.1 в дозе 4 мл.

4. Способ по п.2, отличающийся тем, что молодняку крупного рогатого скота второй раз вводят средство по п.1 в дозе 3 мл.

www.freepatent.ru

Ассоциированная вакцина для специфической профилактики инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота на основе антигенов бактерий moraxella bovis и герпесвируса типа i

Изобретение относится к области ветеринарной микробиологии, вирусологии и биотехнологии, в частности к производству вакцины для специфической профилактики инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота. Установлено, что основными этиологическими возбудителями заболевания являются гемолитические формы бактерий Moraxlla bovis на фоне интенсивного солнечного УФ-излучения. Инфекционный кератоконънктивит широко распространен во всех странах мира. Частота его проявления в РФ наиболее высока среди молодняка крупного рогатого скота на откормочных площадках с высокой плотностью поголовья и интенсивность развития эпизоотического процесса зависит от степени облучения животных в летние месяцы экстремальным потоком солнечных УФ-лучей и при этом заболевание охватывает от 25 до 90% поголовья.

Наряду с этим, доказано, что вирус инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота (герпесвирус типа 1) также может вызвать острый конъюнктивит у этого вида животных. Однако воспалительный процесс при этом не прогрессирует до помутнения роговицы и ее изъязвления, как это имеет место при инфекционном кератоконъюнктивите (Дженсен Р., Маккей Д. Болезни крупного рогатого скота при промышленном откорме. М.: Колос, 1977, - с.127-129; Abinanti F.R., Plumer G.J.: The isolation of Infectious Bovine Rhinotracheitis Virus from Cattle Affected with Conjunctivitis-Observations on the Experimental Infection. // Am. J.Vet Res., 1961, 22, - p.13-17; Hughes J.P. et al. Keratoconjunctivitis Associated with Infectious Bovine Rhinotracheitis. // Am. J. Vet. Med. Ass., 1964, 45, - p.32-42; George W. et al. Bovine Infectious Keratoconjunctivitis: Interaction of Moraxella bovis and Infectious Rhinotrachitis Virus. // Am. J. Vet. Res., 1970, 31, №4 - p.653-662).

Результаты исследований, проведенные в 80-е годы по проблеме инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота, показали, что вирус инфекционного ринотрахеита является одним из возбудителей, который вместе с бактериями Moraxella bovis вызывает эту болезнь (Штрауб О.Х. Инфекции крупного рогатого скота, вызываемые вирусом герпеса. - М.: Колос, 1981, - с.33-35).

Другие литературные источники также указывают на то, что вирус инфекционного ринотрахеита может быть первичным возбудителем конъюнктивита, но не кератоконъюнктивита (Rebnun W. et al. Anoutbreak of the conjunctivitis form of infectious bovine rhinotraheitis. // Cornell. Veter., 1978, 68, 3, - p.297-307). В ряде работ высказывается мнение, что вирус инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота создает особо благоприятную среду для патогенного действия основного возбудителя кератоконъюнктивита - бактерий Moraxella bovis.

Позднее было доказано, что менее выраженную этиологическую роль при инфекционном кератоконъюнктивите крупного рогатого скота могут играть также хламидии (Wehr I. et al. Untersuchungen zur Bedeutung der Chlamidien bei der infektiosen Keratokonjunctivitis des Rindes. // Wissensch. Humbold. Univ. Berlin, 1980, 29, 1, - p.61-65), Mycoplasma bovoculi (Langford E.V. Characterization of mycoplasma isolated from infectionus bovine keratoconjunctivitis: M. bovoculi sp. nov. // Can. J. Microbiol., 1973, 19, - p.1435-1444), риккетсии и условно-патогенные бактерии, участвуя преимущественно в формировании смешанных инфекций.

Нерасшифрованность этиологии инфекционного кератоконъюнктивита в нашей стране, отсутствие каких-либо нормативных документов по его диагностике и мерам борьбы, завоз племенного поголовья из стран Западной Европы - скрытых носителей возбудителя, привели к появлению стационарно неблагополучных по инфекционному кератоконъюнктивиту обширных очагов и сохранению тенденции дальнейшего распространения болезни, наносящей значительный экономический ущерб вследствие снижения удоев и прироста живой массы животных из-за частичной или полной потери зрения (Бобырь В.К. Инфекционные кератоконъюнктивиты крупного рогатого скота в хозяйствах Гомелевской области. // Болезни с.-х. животных и птиц, их профилактика и лечение./УСборник работ ЛВИ, выпуск 39. - Л., 1974, - с.167-179; Андрисян В.Б. Инфекционный кератоконъюнктивит крупного рогатого скота в Северо-Западной зоне РСФСР // Сборник научных трудов ЛВИ. - Л., 1988, - с.6-11; Какоулин Т.Е. Инфекционный кератоконъюнктивит телят в Иркутской области. // И книге: Профилактика болезней молодняка с.-х. животных Сибири и Дальнего Востока. Новосибирск, 1982, - с.73-75; Гаффаров Х.З. соавт. Эпизоотологические аспекты инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота. // Материалы Международной научной конференции, посвященной 125-летию КГАВМ. Казань, 1998, - с.29-31; Гаффаров Х.З., Спиридонов Г.Н., Валебная Л.В. Штамм бактерий Moraxella bovis "Г97-ВНИВИ", используемый для изготовления диагностикумов и вакцин против инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота. // Патент на изобретение РФ №2145353, приоритет от 15.09.1998 г.; Гаффаров Х.З., Валебная Л.В., Спиридонов Г.Н. Инфекционный кератоконъюнктивит крупного рогатого скота в регионе Среднего Поволжья и Предуралья. // Актуальные проблемы болезней молодняка в современных условиях. Материалы международной научно-практической конференции 23-25 сентября 2002 г., Воронеж, - с.188-191).

Осуществленный эпизоотологический мониторинг в отношении ИКК в 48 хозяйствах 12 районов Республики Татарстан и 29 хозяйствах 8 районов Республики Башкортостан и Удмуртской Республики показал, что заболеваемость телят 1-5 месячного возраста составляет 50-85%, у телят более старшего возраста - 20-25% и среди дойного стада она колеблется в пределах 12-15% (Гаффаров Х.З., Валебная Л.В., Спиридонов Г.Н. Инфекционный кератоконъюнктивит крупного рогатого скота в регионе Среднего Поволжья и Предуралья. // Актуальные проблемы болезней молодняка в современных условиях. Материалы международной научно-практической конференции 23-25 сентября 2002 г., Воронеж, - с.188-191).

Учитывая, что инфекционный кератоконъюнктивит имеет широкое распространение и поражает всех возрастных групп животных, особенно молодняк, вакцинация рассматривается как весьма эффективный метод борьбы с ним. Следует отметить, что проблема специфической профилактики инфекционного кератоконъюнктивита во многих странах мира уже решена в 70-90-е годы прошедшего столетия (Hughes D.et. al. Experimenally Induced Bovine Infectious Keratoconjunctivitis: Effectivenes of Intramuscular Vaccination with Viable Moraxella bovis Culture. // Am. J. Vet. Res., 1971, 32, №6, - p.879-886; Pugh G.W. et al. Infectious bovine keratoconjunctivitis in cattle vaccinated and medicated against Moraxella bovis befare parturition. // Am. J. Vet. Res., 1982, 43 №2, - p.320-325; Gwin R. Medicament and method for prodicing immunity the infectious bovine keratoconjunctivitis. // Патент США №4539201 от 3 сентября 1985). Поэтому проблема создания вакцины против инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота в РФ является весьма актуальной. Отечественных аналогов вакцин против инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота, изготовленных на основе гемолитических форм бактерий Moraxella bovis до наших исследований не существует. Наиболее близким аналогом по отношению к предложенной "Ассоциированной вакцины для специфической профилактики инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота на основе антигенов бактерий Moraxella bovis и герпесвируса типа 1" может служить патент США "Moraxella bovis infectious bovine keratoconjunctivitis steam-killed bacterin" 3401219 от 10.1968 г. в котором описывается факт использования иммунизируещего антигена Moraxella bovis, в частности бактерина, который применяется в качестве профилактического средства против инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота. Бактерии представляют собой инактивированную текучим паром в течение одного часа суспензию бактерий Moraxella bovis. Бактерии способен создать иммунитет против инфекционного кератоконъюнктивита на 6 месяцев. Недостатком данной вакцины является то, что она не защищает животных от кератоконъюнктивита герпесвирусной этиологии.

Задачей изобретения является создание ассоциированной вакцины на основе гемолитических форм бактерий Moraxella bovis и герпесвируса типа 1, предназначенной для создания специфической профилактики инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота на территории РФ, и увеличение продолжительности иммунитета до 12 месяцев.

Технический результат изобретения заключается в получении ассоциированной вакцины, обладающей высокой иммуногенной активностью, и расширении ее иммуногенного спектра.

Сущность изобретения заключается в следующем: ассоциированная вакцина против инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота содержит антигены гемолитических форм бактерий Moraxella bovis и герпесвируса крупного рогатого скота, депонированные на гидроокиси алюминия, при следующем соотношении компонентов, об.%:

Для изготовления ассоциированной вакцины для специфической профилактики инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота на основе антигенов бактерий Moraxella bovis и герпесвируса типа 1 используют запатентованный штамм бактерий Moraxella bovis "Г97-ВНИВИ" (Патент РФ на изобретение №2145353 с приоритетом от 15.09.1998 г.) и новый штамм бактерий Moraxella bovis "Ш3-01", полученный от больного инфекционным кератоконъюнктивитом теленка. Штамм бактерий Moraxella bovis "Ш3-01" характеризуется следующими свойствами: это короткие толстые палочки длиной 1,5-2,0 и в диаметре 0,5-1,0 мкм с округленными концами, расположенные парами или в виде коротких цепочек, спор не образуют, неподвижные, окрашиваются грамотрицательно. На кровяном МПА при рН 7,2-7,6 после 24 часовой инкубации при 37°С образуют колонии диаметром от 1 до 3 мм с зоной β-гемолиза шириной 0,5-2,0 мм. Колонии гладкие, круглые, блестящие, серовато-белые. На МПБ через 24-48 часовой инкубации при 37°С наблюдается помутнение бульона с образованием небольшого осадка. Штамм факультативный аэроб, не ферментирует сахаров, не восстанавливает нитраты в нитриты, не образует индол, разжижает желатину, т.е. обладает протеолитической активностью, пептонизирует лакмусовое молоко, дает положительную реакцию на оксидазу, которые являются характерными признаками для микроорганизмов семейства Neisseriaceae, рода Moraxella. Штамм вирулентен для белых мышей, вызывает их гибель в течение 24 часов после внутрибрюшинного введения им суточной агаровой культуры в дозе 500 млн. м.к.

Пример 1. Получение матровой расплодки каждого штамма бактерий Moraxella bovis.

Для изготовления вакцины берут ампулы с лиофилизированными культурами производственных штаммов М.bovis; "Г97-ВНИВИ" и "Ш3-01 ", которые растворяют в 0,5-2,0 см3 МПБ и переносят в чашки Петри с 10%-ным кровяным МПА. Выращивание проводят в течение 16-18 часов, затем культуры проверяют на соответствие морфологических, культуральных, ферментативных и вирулентных свойств. Если они соответствуют гемолитическим формам бактерий М.bovis, то их используют для получения бактериальной массы, необходимой для изготовления ассоциированной вакцины.

Штаммы хранят в лиофилизированном виде. Для этого суспензию суточной культуры бактерий Moraxella bovis с концентрацией 50 млрд. м. к. в 1 см3 смешивают защитной средой (снятое молоко с сахарозой 5%, желатиной 1,5%) в соотношении 1:1, расфасовывают в ампулы по 1 см3, высушивают методом сублимации, запаивают ампулы под вакуумом и хранят при температуре +2-8°С.

Пример 2. Выращивание бактериальной массы каждого штамма бактерий Moraxella bovis в отдельности и ее инактивация.

Для получения биомассы культур М. bovis используют МПА, содержащий 10% дефибринированной крови барана. С этой целью указанную среду в стерильных условиях разливают в 1,5 литровые матрасы по 250-300 см, после застывания среды делают посев указанных штаммов путем внесения в каждый матрас по 2 см3 бактериальной суспензии, содержащей по 1 млрд, м. к. в 1 см3. Посевы выдерживают в термостате при температуре 37°С. Через 36-48 ч выросшие колонии культур М.bovis смывают 0,02%-ным раствором натрия хлорида, готовят суспензию с концентрацией 100-120 млрд. м.к. в 1 см 3 по бактерийному или оптическому стандарту мутности ГИСК им. Тарасевича. Культуру проверяют на чистоту, морфологическую и серологическую типичность.

Инактивацию бактериальной взвеси осуществляют формалином. Для этого в микробную взвесь добавляют формалин с содержанием 37-38% активного формальдегида 0,5 см3 на 100 см3 суспензии. Перемешивают и ставят в термостат на 72 ч. Затем берут пробу на полноту инактивации, которую проводят путем посева инактивированных микробных взвесей на кровяной МПА.

Пример 3. Приготовление нативной суспензии герпесвируса крупного рогатого скота и ее инактивация.

Герпесвирус крупного рогатого скота (шт. "ТКА-ВИЭВ-В2") размножают в перевиваемой культуре клеток трахеи эмбриона коровы (линия TR), выращенной в роллерных трехлитровых бутылях на комбинированной ростовой среде, состоящей из среды 199 - 10%, ГЛА - 40%, среды Игла МЭМ - 40% и сыворотки крупного рогатого скота - 10%. Культуру выращивают в течение 3-4 суток при посевной концентрации 140-150 тыс. клеток в 1 см3 среды. Ростовую среду сливают, вносят поддерживающую среду (среды 199 - 20%, ГЛА - 40% и Игла МЭМ - 40%) в количестве 350-370 см3, в которую предварительно вносят герпесвирус из расчета 10 см3 на 500 см 3 среды, 3%-ный раствор глутамина - 5 см3 и антибиотики (стрептомицин - 100 мкг/см3, пенициллин - 100 ЕД./см3). Бутыли инкубируют в роллерной установке при 37-38°С в течение 3-4-х дней. Сбор культуральной жидкости производят путем трехкратного замораживания и размораживания в период выраженного цитопатического эффекта - максимального накопления вируса. Полученные вирусные суспензии объединяют и с целью инактивации вируса добавляют формалин с содержанием активного формальдегида 37-38% из расчета 0,5 см3 на 100 см 3 вирусной суспензии, перемешивают и оставляют на 24-36 ч при комнатной температуре, после чего проверяют на бактериальную и грибковую контаминацию. Для приготовления вакцины берут вирусную суспензию без посторонней контаминации. Контроль полноты инактивации герпесвируса крупного рогатого скота проводят путем 3-х последовательных пассажей пробы инактивированной вирусной суспензии, используемой для изготовления ассоциированной вакцины против кератоконъюнктивита крупного рогатого скота, на перевиваемой культуре клеток трахеи эмбриона коровы (линия TR) с интервалом 5-6 суток. Вирусную суспензию считают инактивированной, если в третьем пассаже не обнаруживается цитопатическое действие вируса.

Пример 4. Приготовление ассоциированной вакцины для специфической профилактики инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота на основе антигенов бактерий Moraxella bovis и герпесвируса типа 1.

Вакцину готовят из антигена герпесвируса крупного рогатого скота с инфекционным титром 107,0-7,5 ТЦД50/мл и производственных штаммов бактерий Moraxella bovis: "Г97-ВНИВИ", "Ш3-01".

Берут герпесвирусную суспензию, к ней добавляют 100-120 млрд.-ную суспензию бактерий Moraxella bovis исходя из расчета 4-5 см3 каждого штамма на 100 см3 вакцинного препарата, а также 6%-ный гель гидроокиси алюминия из расчета 10 см3 на 100 см3 вакцины. Доводят рН вакцины до 7,2-7,4 и расфасовывают при тщательном периодическом перемешивании во флаконы, которые потом закрывают резиновыми пробками, обкатывают металлическими колпачками и этикетируют. В таблице 1 приведен состав вакцины.

Пример 5. Контроль вакцины на стерильность, безвредность и на антигенную активность.

Для проверки на стерильность из 6 флаконов вакцины каждой серии делают посевы по 0,2 см 3 на МПБ, МПА, кровяной МПА, МППБ под вазелиновым маслом и агар Сабуро по 2 пробирки на каждый флакон. Посевы со всеми средами выдерживают в термостате при 37°С, а с агаром Сабуро - при 20-22°С в течение 15 суток. Питательные среды должны оставаться стерильными.

Для проверки на безвредность отбирают 10 белых мышей живой массой 17-18 г и вводят им вакцину подкожно в дозе 0,5 см3. Вакцину считают безвредной, если мыши в течение 10 суток после введения вакцины остаются живыми и клинически здоровыми.

Антигенную активность вакцины контролируют на 3-х кроликах живой массой 2,0-2,5 кг, которым вводят препарат подкожно в дозе 2 см3 двукратно с интервалом 14 дней. Через 14 дней после последней вакцинации у кроликов из ушной вены берут кровь и исследуют сыворотку с целью установления уровня специфических антител к герпесвирусу типа 1 и антигенам бактерий Moraxella bovis. Титры антител к герпесвирусу крупного рогатого скота должен быть в пределах 1:320-1:640 в ИФА, к штаммам бактерий Moraxella bovis - 1:400-1:1600 в реакции ИФА.

Результаты контроля 24 экспериментальных серий вакцины показали, что все серии биопрепарата были стерильными, безвредными и антигенно-активными. Показатели антигенной активности ассоциированной вакцины представлены в таблице 2.

Производственное испытание экспериментальных серий вакцины было проведено в 8 хозяйствах Республики Татарстан и в одном - Чувашской Республики, неблагополучных по инфекционному кератоконъюнктивиту крупного рогатого скота, где заболеваемость телят до 6 месячного возраста составляла 24-56%, молодняка до 12 месячного возраста - 19-35% и молодняка старше года и взрослого поголовья 8-22%. Все поголовье крупного рогатого скота в этих хозяйствах вакцинировали ассоциированной вакциной перед выгоном на пастбище двукратно с интервалом 21-30 дней в дозах: телят до 6 месячного возраста - 3 см3, молодняка от 6 до 12 мес. - 5 см3, молодняка старше года и взрослого поголовья - 10 см3. Результаты испытаний вакцины в этих хозяйствах представлены в таблице 4. Из таблицы следует, что ассоциированная вакцина обладает высокой иммуногенной активностью. Применение ее с профилактической целью в 9 стационарно неблагополучных хозяйствах позволило полностью искоренить заболевание в 6 хозяйствах, а в остальных трех - снизить заболевание до единичных случаев.

Пример 6. Назначение, общие сведения и порядок применения ассоциированной вакцины для специфической профилактики инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота на основе антигенов бактерий Moraxella bovis и герпесвируса типа 1.

Вакцина предназначена для специфической профилактики инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота, вызываемого смешанной инфекцией, обусловленной бактериями Moraxella bovis и вирусом инфекционного ринотрахеита (герпесвирус тип 1) на фоне повышенной солнечной ультрафиолетовой радиации в летние месяцы.

Вакцина представляет собой смесь концентрированных антигенов гемолитических форм бактерий М.bovis и культуральной суспензии герпесвируса типа 1 в оптимальных соотношениях.

По внешнему виду вакцина, депонированная гидроокисью алюминия, непрозрачная жидкость с белым осадком, который при встряхивании флакона легко разбивается, образуя гомогенную взвесь бледно-розового цвета.

Вакцину выпускают в стеклянных флаконах по 100, 200 и 500 см3 с плотно закрытыми резиновыми пробками, обкатанными металлическими колпачками, и этикетируют в соответствии с ТУ.

Вакцина пригодна для применения в течение 12 месяцев со дня изготовления при условии хранения и транспортировки при температуре 2-10°С.

Вакцину применяют с профилактической целью в угрожаемых и стационарно неблагополучных хозяйствах по инфекционному кератоконъюнктивиту крупного рогатого скота. Вакцинируют весь нарождающийся молодняк в возрасте 30-35 дней независимо от времени года, а также все поголовье крупного рогатого скота перед выгоном на пастбище. Вакцину вводят подкожно в среднюю треть шеи двукратно с интервалом 21-30 дней в дозах:

- 3 см3 - телятам в возрасте от 1 до 6 мес.;

- 5 см3 - молодняку в возрасте от 6 мес. до года;

- 10 см3- молодняку старше года, коровам и быкам производителям.

Вакцина обеспечивает создание у молодняка и взрослого поголовья крупного рогатого скота иммунитета, который сохраняется в течение года.

За период 1999-2003 гг. изготовлено 814,5 литров ассоциированной вакцины, которая использована в хозяйствах Республики Татарстан, Марий Эл, Башкортостана, Удмуртии и Чувашии, неблагополучных по инфекционному кератоконъюнктивиту крупного рогатого скота (таблица 3).

bankpatentov.ru

Методические рекомендации по диагностике, лечению и профилактике инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота Казань 2010 г

Республики Татарстан

ФГУ «Федеральный центр токсикологической и радиационной безопасности животных»

Главное управление ветеринарии кабинета министров

Республики Татарстан

МЕТОДИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

по диагностике, лечению и профилактике инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота

Казань 2010 г.

Рекомендации разработаны авторским коллективом сотрудников ФГУ «ФЦТРБ-ВНИВИ» и Главного управления ветеринарии КМ РТ.

Материалы одобрены Министерством сельского хозяйства и продовольствия РТ.

А.В.Иванов - Директор ФГУ «Федеральный центр токсикологической

и радиационной безопасности животных», доктор

биологических наук, профессор, заслуженный деятель

науки РФ

Г.Н.Спиридонов - Заведующий лабораторией по изучению болезней

молодняка сельскохозяйственных животных ФГУ

«ФЦТРБ-ВНИВИ», кандидат ветеринарных наук

Х.З.Гаффаров - Заведующий лабораторией вирусологии ФГУ

«ФЦТРБ-ВНИВИ», доктор ветеринарных наук,

профессор, заслуженный деятель науки РФ

Х.Н.Макаев - Заведующий отделом биологической безопасности ФГУ

«ФЦТРБ-ВНИВИ», доктор ветеринарных наук,

профессор, заслуженный деятель науки РТ

Н,Н,Хазипов - Заместитель министра сельского хозяйства и продо-

вольствия РТ по животноводству, кандидат

биологических наук

Ф.Г.Ахметов - Директор ГУ «Республиканская ветеринарная

лаборатория РТ», кандидат биологических наук

Предназначены для специалистов ветеринарной службы, ветеринарных

лабораторий, научных сотрудников, аспирантов, студентов и слушателей курсов повышения квалификации.

Методические рекомендации рассмотрены и одобрены научно-методическим советом ФГУ «ФЦТРБ-ВНИВИ» (протокол №12 от 12 мая 2010 г.).

^

Инфекционный кератоконъюнктивит крупного рогатого скота (ИКК) – острое контагиозное заболевание, характеризующееся слезотечением, гиперемией сосудов конъюнктивы, светобоязнью, серозно-гнойным истечением, помутнением и изъязвлением роговицы, деформацией глазного яблока в виде кератоглобуса или кератоконуса, частичной или полной потерей зрения пораженного глаза животного.

Инфекционным кератоконъюнктивитом заражается крупный и мелкий рогатый скот, а согласно некоторым авторам – все виды животных. Отдельные случаи заболевания отмечены у лошадей, свиней и собак, имевших контакт с больными животными, но у них болезнь проявляется спорадически.

Болезнь распространена во всех странах мира и наносит скотоводческим хозяйствам значительный экономический ущерб за счет выбраковки животных из-за потери племенной ценности, снижения удоев и прироста массы тела, затрат на проведение лечебных и оздоровительных мероприятий. Частота ее проявления наиболее высока среди молодняка на откормочных площадках с высокой плотностью поголовья, охватывая 60-85% животных.

Этиология

Причиной инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота является сочетание физического фактора и биологического возбудителя. Ведущая роль при его возникновении принадлежит гемолитическим бактериям Moraxella bovis, относящимся к роду Moraxella, семейству Neisseriaceae, на фоне солнечного ультрафиолетового облучения или других возможных предрасполагающих факторов. В качестве сопутствующей микрофлоры часто встречаются β-гемолитические диплококки, стрептококки и стафилококки, осложняющие инфекционный процесс. На течение болезни как у отдельных животных, так и у всего поголовья неблагополучного стада влияют: недостаток витамина А, интенсивное УФ-облучение (солнечный свет), пыль и высокая трава на пастбище, травмирующая глаза. Возбудитель может выделять эндотоксин, который при введении в роговицу глаза вызывает типичные для кератоконъюнктивита изменения.

Бактерии M. bovis обычно обнаруживаются в конъюнктивальном мешке глаз и выделениях из носа крупного рогатого скота, пораженного инфекционным кератоконъюнктивитом. Источником инфекции являются больные или инфицированные животные. Некоторые здоровые особи крупного рогатого скота являются носителями бактерий M. bovis в зимние месяцы. Жизнеспособные бактерии сохраняются в глазных и носовых выделениях в течение многих месяцев после клинического выздоровления.

Перемещение инфицированного скота или животных-носителей возбудителя из одного хозяйства в другое – обычный путь распространения заболевания. Возбудитель ИКК крупного рогатого скота легко переносится внутри стада на восприимчивых животных механически с экссудатом и выделениями из пораженных глаз. В весенние и летние месяцы домашние мухи и мухи-жигалки, поедая слезную жидкость из инфицированных глаз и затем, перелетая на здоровых животных, увеличивают вероятность распространения заболевания. Фактором передачи могут служить также носовые истечения: инфицированные капельки при усиленном дыхании и кашле попадают в воздух и на глаза других животных. Использование общих кормушек и поилок способствует непрямому контакту и распространению возбудителя заболевания среди животных.

По наблюдениям многих авторов наиболее подвержены к болезни молодые и с непигментированной кожей вокруг глаз животные шортгорнской, голштинфризской и герефордской пород.

Эпизоотология

Заболевание обычно возникает весной, достигает максимальной интенсивности в начале лета и несколько уменьшается к осени, а отдельные случаи могут быть и зимой, что обусловлено снижением резистентности организма, нарушением зоогигиенических условий содержания животных.

Установлено также, что в свежих очагах энзоотия ИКК протекает остро и в течение 20-35 дней охватывает 50-85% поголовья. В стационарно неблагополучных очагах заболевают не все животные, а только телята, родившиеся в текущем году и вновь поступившие в хозяйство. Молодые животные, переболевшие острой и хронической формами ИКК, резистентны к повторному заражению в старшем возрасте. Следовательно, у переболевших животных формируется иммунитет, который предотвращает реинфекции или обусловливает, по меньшей мере, легкую форму болезни.

Говоря о патогенезе болезни, следует отметить, что инфекционный агент проникает через эпителий конъюнктивы и вызывает серозно-катаральный воспалительный процесс, который быстро переходит на поверхность роговицы. Нарушение целостности эпителиальных клеток создает условие для вторичной инфекции, вызванной гноеродными и другими микроорганизмами.

В результате микроскопии мазков выделенных культур бактерий из патологического материала с последующей их идентификацией и дифференциацией был определен видовой состав микроорганизмов:

Видовой состав микроорганизмов, выявленных с пораженной конъюнктивы глаз телят

• Moraxella bovis – 59%
• Diplococcus septicus – 11%
• Strept. bovis, faecalis – 9%
• Staphilococcus aureus – 7%
• Proteus vulgaris – 5%
• Escherichia. coli – 2%
• Другие микроорганизмы – 7%

^

Инкубационный период длится от 2 до 10 дней и зависит от сезона года и внешней температуры. Инфекция затрагивает один или оба глаза животного.

При клиническом осмотре больных животных наблюдается отечность век, конъюнктивит и слезотечение вначале серозно-слизистое, а несколько позже истечение гнойного экссудата. Зрение у животных ослабляется, они ищут темное и прохладное место. Из-за снижения потребления корма и воды животные худеют. При пальпации обнаруживается болезненность век, повышение местной температуры. Через 24-72 часа на роговице образуется помутнение молочно-белого цвета (рис. 1).

Рис. 1. Обильное слезотечение, отечность конъюнктивы век и помутнение роговицы глаза теленка

Вследствие распада клеток роговицы на 3-5 день появляется эрозия около 1 мм в диаметре, которая вскоре превращается в язву (рис. 2). В течение последующих 10-15 дней по краю очага поражения наблюдается развитие сосудистой сети, а в отдельных случаях она окружает всю роговицу по периферии, образуя яркое сплетение сосудов (рис. 3). В ряде случаев наблюдается прорастание сосудов к центру роговицы и образование сосцевидного возвышения.

Рис. 2. Помутнение и образование эрозии в центре роговицы глаза теленка

Рис. 3. Развитие сосудистой сети по периферии роговицы глаза теленка

У 10-15% телят 6-8-месячного возраста все слои роговицы в результате ее изъязвления перфорируются и стекловидное тело с хрусталиком вытекает, в результате чего наступает слепота (рис. 4).

Среди дойного стада и молодняка от 6 до 10-месячного возраста наблюдается деформация глазного яблока в виде кератоглобуса или кератоконуса вследствие увеличения внутриглазного давления (рис. 5).

Рис. 4. Стадия изъязвления и васкуляризации

Рис. 5. Деформация глазного яблока (кератоглобус) вследствие увеличения внутриглазного давления

Несмотря на высокую заболеваемость (16-85%) смертность животных незначительна. Очень редко у отдельных телят инфекция может распространиться на зрительный нерв и далее на подпаутинное пространство головного мозга, вызывая менингит с летальным исходом. В ряде случаев заболевание затихает после 1-2-х недель, а зрение у животных заметно улучшается и перфорация на роговице нормализуется после 5-6 недель. Изменения в обоих глазах выражены чаще всего неодинаково. При отсутствии осложнений обратное развитие патологических процессов длится неделями и месяцами. В тех случаях, когда возникают осложнения на фоне действия предрасполагающих факторов и вторичных возбудителей, нередко наступает одно- или двухсторонняя слепота.

диагноз

Предварительный диагноз на ИКК крупного рогатого скота в случаях возникновения болезни устанавливают на основании клинических и эпизоотологических данных. Важными диагностическими признаками являются острый конъюнктивит, светобоязнь, истечения из глаз, эрозия роговицы, быстрое распространение инфекции и ухудшение зрения. Глубокое изъязвление и прободение роговицы также указывают на кератоконъюнктивит.

Лабораторная диагностика ИКК крупного рогатого скота проводится ветеринарными лабораториями субъектов Российской Федерации, районов и городов. Для проведения отдельных, более детальных исследований, могут быть привлечены специализированные учреждения, находящиеся в ведении Россельхознадзора.

Материалы для исследования. При подозрении на заболевание животных кератоконъюнктивитом в ветеринарную лабораторию направляют нарочным с сопроводительными документами 6-10 проб слезной жидкости от телят в острой стадии болезни. Взятие проб слезной жидкости из пораженных глаз животных производится путем введения сухого стерильного ватного тампона в конъюнктивальный мешок. Тампоны вращательным движением проводят по конъюнктивальному мешку и по поверхности глазного яблока, погружают их по отдельности в пробирки со стерильным 0,85%-ным физиологическим раствором. Полученные пробы клинического патологического материала доставляют в лабораторию в термосе со льдом.

Бактериологическое исследование.

1-ый день. Выделение чистой культуры предполагаемого возбудителя – бактерий Moraxella bovis осуществляют путем первичного посева смывов из глаз больных телят на мясопептонный агар с добавлением 5-10% дефибринированной крови кролика или барана. Посевы инкубируют в термостате при 370С в течение 24-х часов.

2-ой день. Макроскопически изучают выросшие на чашке Петри колонии бактерий: определяют величину, формы их очертаний, степень прозрачности, цвет, поверхность, наличие зоны β-гемолиза, затем выявляют под микроскопом структуру и края колоний. Наряду с характерными колониями предполагаемого возбудителя обнаруживают рост колоний разнообразной условно-патогенной и сапрофитной микрофлоры: диплококков, стрептококков, стафилококков, диплококков, стрептококков, стафилококков, E.coli, коринебактерий и др. Затем тщательно отбирают характерные S-формы (гладкие) колоний с зоной β-гемолиза и делают высевы на твердые и жидкие питательные среды.

3-ий день. На кровяном мясопептонном агаре возбудитель ИКК крупного рогатого скота образует гладкие, круглые, выпуклые в центре, блестящие, серовато-белого цвета колонии от 1 до 3 мм в диаметре с шириной зоны β-гемолиза 0,5-2,0 мм.

Из отдельных колоний готовят мазок и окрашивают по Граму. При микроскопии устанавливают морфологические особенности бактерий и отношение к окраске по Граму. В положительных случаях при обработке спиртом грамотрицательные бактерии обесцвечиваются и окрашиваются дополнительно разведенным фуксином в розово-красный цвет.

При просмотре мазков, приготовленных из суточных колоний, окрашенных по Граму и Романовскому-Гимзе, бактерии Moraxella bovis представляют собой короткие толстые палочки длиной 1,5-2,0 мкм и шириной 0,5-1,0 мкм с округленными концами, расположенных парами или в виде коротких цепочек. Старые культуры и культуры после 48-72-часовой инкубации прогрессивно становятся полиморфными, проявляя вариабельность в размерах и форме клеток.

На МПБ через 24-48-часовой инкубации при 370С наблюдается помутнение бульона с образованием небольшого осадка.

4-ый день. Выделенную культуру идентифицируют по морфологическим, тинкториальным, культуральным, ферментативным (биохимическим) свойствам, а также по иммунологическим реакциям с положительной сывороткой. Для этого чистую культуру высевают в пробирки с соответствующими средами для определения сахаролитических свойств (среды Гисса), протеолитических (МПЖ, лакмусовое молоко), гемолитических (кровяной мясопептонный агар), восстанавливающих свойств (нитратная среда), а также на каталазную и оксидазную активность.

О протеолитических свойствах культур бактерий судят по их способности разжижать желатину. Для обнаружения протеолитических ферментов производят посев чистой культуры бактерий методом укола в столбик мясопептонного желатина. Посевы выдерживают при комнатной температуре (20-220С) в течение 3-х суток. Разжижение бывает слоистое, в основном в верхней части пробирки, которое при длительной инкубации спускается ниже, образуя воронку.

Для установления способности микроорганизмов вырабатывать оксидазу на поверхность 18-часовой агаровой культуры бактерий наносят каплю 1% раствора парааминодиметиланилина гидрохлорида и каплю 1% спиртового раствора α-нафтола. При положительной реакции через 1-3 минуты культура бактерий окрашивается в ярко-синий цвет. Положительная проба на оксидазу является характерным признаком для микроорганизмов семейства Neisseriaceae и роду Moraxella.

Для определения ферментации каталазы изучаемой культурой бактерий на поверхность 24-часовой культуры на скошенном МПА наливают 1-2 мл 1% раствора перекиси водорода. Появление пузырьков газа при наклонном положении пробирки регистрируется как положительная реакция. Культуры бактерий рода Moraxella являются каталазоотрицательными.

При выявлении образования индола культурой бактерий предполагаемого возбудителя ИКК крупного рогатого скота используют способ Мореля. Узкие полоски фильтровальной бумаги смачивают горячим насыщенным раствором щавелевой кислоты (индикаторная бумага). При выделении индола на 1-3-й день нижняя часть полоски бумаги вследствие соединения индола со щавелевой кислотой приобретает розовый цвет. Как правило, бактерии рода Moraxella индола не образуют.

В средах Гисса культуры бактерий Moraxella bovis не оказывают ферментирующего действия на сахара. При посеве их в нитратную среду также изменений не наблюдают, а это значит – не редуцируют нитраты в нитриты.

Бактерии Moraxella bovis патогенны для белых мышей: вызывают их гибель в течение суток после внутрибрюшинного введения суточной агаровой культуры в дозе 0,5 мл с концентрацией 106 микробных клеток.

Основными критериями для идентификации выделенных культур бактерий – предполагаемых возбудителей ИКК крупного рогатого скота являются: они неподвижны, не образуют спор, окрашиваются грамотрицательно, факультативные аэробы, не ферментируют сахаров, не редуцируют нитраты в нитриты, не образуют индол, разжижают желатину, т.е. обладают протеолитической активностью, пептонизируют лакмусовое молоко, показывают положительную реакцию на оксидазу.

Окончательный диагноз по факту заболевания крупного рогатого скота устанавливают по результатам бактериологических исследований клинического и патологического материалов, полученных от телят в острой стадии болезни. Диагноз на ИКК крупного рогатого скота считают подтвержденным, если:

• выделена чистая культура гладких колоний бактерий Moraxella bovis с зоной β-гемолиза;
• определена родовая и видовая принадлежность их на основе результатов испытания морфологических, тинкториальных, культуральных и ферментативных свойств;
• выявлено их антигенное родство относительно референтного штамма бактерий Moraxella bovis (АТСС 10900) в иммунологической реакции с позитивной сывороткой;
• подтверждена патогенность гемолитических форм бактерий Moraxella bovis по отношению белых мышей.

^ среди крупного рогатого скота наблюдаются летом: в июне – августе месяцах. Животные заражаются при непосредственном контакте с промежуточными хозяевами на пастбище или водопое. Срок паразитирования телязий 10 - 12 месяцев. Возбудителем телязиоза являются нематоды, не превышающие в длину 25 мм, белого цвета. Они паразитируют в выводных протоках слезных желез, конъюнктивальном мешке глаз и слезовыводящих каналах носа. Промежуточными хозяевами являются различные виды мух.

При появлении случаев кератита или хронического конъюнктивита, животных считают подозрительными по заболеванию телязиозом. С целью подтверждения диагноза инфицированный глаз промывают 2-3% раствором борной кислоты с помощью резинового баллона или большого шприца, стараясь, чтобы жидкость под сильной струей попала главным образам под третье веко, где обычно находятся паразиты. Раствор борной кислоты, выливаясь обратно из конъюнктивального мешка, увлекает с собой телязии. Стекающую из глаза жидкость собирают в черные ванночки и затем тщательно просматривают. Личинок телязий удается обнаруживать и при исследовании слез крупного рогатого скота на предметном стекле. Подтверждают или исключают факт заболевания животных телязиозом на основе данных эпизоотологии, клинических признаков и результатов ларвоскопии слезной жидкости из конъюнктивальных мешков.

^ (герпесвирус типа 1) спусти 2-3 дня после инфицирования, глаз наблюдают покраснение конъюнктивы века и обильное слезотечение. Температура тела повышается до 40,50С. В последующие дни слезотечение становится серозно-гнойным. Из внутреннего угла глаза вытекает большое количество секрета. Носослезный канал зачастую закупоривается не только из-за повышения вязкости секрета, но и вследствие воспалительных процессов в эпителии канала, так как в нем размножается вирус.

На отечной конъюнктиве обнаруживают наложения серого цвета, которые придают слизистой оболочке зернистый вид, а иногда пустулы и бляшки некротического налета. После 5-10 дней течения глазной формы у других животных в стаде может появляться респираторная форма. При массовых вспышках конъюнктивита у животных отмечают помутнение роговицы. Установлено, что герпесвирус типа 1 крупного рогатого скота может быть возбудителем лишь конъюнктивита, но не кератоконъюнктивита. Герпесвирус типа 1создает лишь благоприятную среду для развития инфекционного процесса при ИКК крупного рогатого скота, вызываемого бактериями Moraxella bovis. Подобную вспомогательную роль могут играть и другие микроорганизмы, например, микоплазмы.

^ проявляется резко выраженным воспалением слизистых оболочек ротовой и носовой полостей с одновременным поражением конъюнктивы и роговицы. Наиболее характерный симптом – внезапное повышение температуры тела до 41,5-42,00С, мышечный тремор и отказ от корма. При сверхостром течении заболевания животное погибает спустя несколько дней, при длительном течении у животных наблюдают конъюнктивиты, переходящие в кератиты и иридоциклиты. Причем, злокачественной катаральной горячкой заболевает крупный рогатый скот (в том числе и буйволы) в возрасте от одного до 7-8 лет.

Приведенные выше особенности эпизоотологии болезни, клинические симптомы и характерные патологоанатомические изменения позволяют безошибочно установить диагноз на злокачественную горячку крупного рогатого скота.

^ , ставят на основании результатов микроскопического исследования мазков-соскобов, взятых с поверхности пораженной конъюнктивы на ранней стадии инфекции, выявления комплементсвязывающих антител у больных и переболевших животных, а также выделения возбудителя на куриных эмбрионах с последующей его идентификацией.

Mycoplasma bovoculi, как типичный представитель семейства Mycoplasmataceae, класса Mollicutes, отличается по ряду биологических свойств от бактерий, риккетсий, хламидий и вирусов. Чистая культура штаммов M. bovoculi, выделяемая из экссудата глаз воспаленной конъюнктивы, при экспериментальном заражении телят вызывает конъюнктивит. Воспалительный процесс роговицы развивается лишь при участии бактерий Moraxella bovis. Диагноз устанавливают на основании результатов изоляции Mycoplasma bovoculi и бактерий Moraxella bovis

Дифференцируют болезнь от механических повреждений глаз.

Лабораторная диагностика ИКК крупного рогатого скота проводится ветеринарными лабораториями субъектов РФ, районов и городов.

^

Ответственность за состояние здоровья, содержание и кормление животных несут их владельцы. Владельцы животных обязаны:

• Осуществлять хозяйственные, зоотехнические и ветеринарные мероприятия, обеспечивающие предупреждение возникновения заболеваний телят и взрослого поголовья крупного рогатого скота.
• Представлять специалистам в области ветеринарии по их требованию животных для осмотра.
• Выполнять указания специалистов в области ветеринарии о проведении мероприятий по профилактике и борьбе с инфекционным кератоконъюнктивитом крупного рогатого скота, вызываемого бактериями Moraxella bovis.

Контроль выполнения мероприятий по профилактике и борьбе с ИКК крупного рогатого скота организациями и гражданами-владельцами животных осуществляют государственные инспекторы субъектов Российской Федерации.

Для охраны хозяйств от заноса возбудителя инфекции необходимо следующее:

- Комплектовать хозяйства здоровыми животными из хозяйств, благополучных по инфекционным болезням. В течение 30 дней вновь поступившие животные считаются в карантине.

- В строгом соответствии с документом «Ветеринарные требования при импорте в Российскую Федерацию племенного и пользовательного крупного рогатого скота», утвержденного Департаментом ветеринарии Минсельхоз-прода России 23.12.1999 г., № 13-8-01/1-1, к ввозу в Российскую Федерацию допускается здоровый племенной скот только в том случае, если хозяйства и административная территория страны экспортера свободны от ИКК крупного рогатого скота (pink eye) в течение последних 12 месяцев.

- В строгом соответствии с документом «Ветеринарные требования при импорте в Российскую Федерацию спермы быков-производителей», утвержденного Департаментом ветеринарии Минсельхозпрода России 23.12.1999 г., № 13-8-01/1-2, к ввозу в РФ допускается сперма быков-производителей, полученная на предприятиях искусственного осеменения страны-экспортера в том случае, если сперма происходит с предприятия и административной территории, официально свободных от заразных болезней животных, в том числе инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота (pink eye) в течение последних 12 месяцев.

- В строгом соответствии с документом «Ветеринарные требования при импорте в Российскую Федерацию эмбрионов крупного рогатого скота», утвержденного Департаментом ветеринарии Минсельхозпрода России 23.12.1999 г., № 13-8-01/1-3, к ввозу в РФ допускают эмбрионы, полученные от здоровых племенных животных, содержащихся в центрах, пунктах, фермах поставщика, официально свободных от заразных болезней животных, в том числе инфекционного кератоконъюнктивита (pink eye) крупного рогатого скота в том случае, если территория страны-экспортера свободна от этой инфекции в течение последних 12 месяцев.

Профилактика ИКК крупного рогатого скота основывается на проведении комплекса организационно-хозяйственных, ветеринарно-санитарных и специфических мероприятий, направленных на предотвращение заражения животных, особенно молодняка, возбудителем болезни через объекты внешней среды.

В каждом животноводческом хозяйстве должно проводиться отслеживание распространения возбудителя ИКК крупного рогатого скота.

Поддерживают в помещениях нормальный микроклимат, регулярно проводят профилактическую аэрозольную дезинфекцию воздуха, механическую очистку стен, перегородок, полов и кормушек с их последующей дезинфекцией.

С целью предупреждения возникновения ИКК крупного рогатого скота, вызываемого бактериями Moraxella bovis, применяют «Ассоциированную вакцину против инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота инактивированную, гидроокисьалюминиевую на основе антигенов бактерий Moraxella bovis и герпесвируса типа 1» (ФГУ «ФЦТРБ-ВНИВИ»). Вакцинируют весь молодняк в возрасте 30- 35 дней независимо от времени года, а также все поголовье крупного рогатого скота перед выгоном на пастбище. Вакцину вводят подкожно в среднюю треть шеи, двукратно с интервалом 21-30 дней, в дозах для первой и второй прививки: 3 см3 – телятам в возрасте от 1 до 6 месяцев; 5см3 – молодняку в возрасте от 6 месяцев до года; 10 см3 – молодняку старше года, коровам и быкам-производителям.

Вакцина обеспечивает создание у молодняка и взрослого поголовья крупного рогатого скота иммунитета, который сохраняется в течение одного года.

^

При подозрении на заболевание работники хозяйств (ферм) обязаны немедленно сообщить об этом ветеринарному врачу, который проводит клинический осмотр животных, выявляет больных, получает от них материалы и направляет в лабораторию для установления диагноза.

При установлении диагноза больных и подозрительных по заболеванию животных изолируют и лечат. При ИКК крупного рогатого скота, вызываемого бактериями Moraxella bovis, с определенным успехом применяют капли или мази сульфаниламидов и различных антибиотиков. Ранее лечение, предпринимаемое при первых признаках усиливающегося слезотечения и появления легкого помутнения роговицы, позволяет быстро и без осложнений оздоравливать больных животных. Рекомендуется многократные лечебные циклы через 4-5 дней путем нанесения на пораженную конъюнктиву различных концентраций антибиотиков; 10-30% раствор гентамицина, который интенсивно проникает в толщу роговицы, тетрациклиновые и левомицетиновые капли, изготовленные на 0,5% растворе новокаина, закапывают пипеткой или шприцем без иглы в оба глаза 3-5 раз в день по 10-20 капель.

Более эффективно закладывание за веки с помощью небольшого шпателя антисептических мазей (сульфацилнатриевой, тетрациклиновой, левомицетиновой, синтомициновой эмульсии) или сложный порошок, состоящий из биомицина, синтомицина, сульфантрола, взятых поровну. После обработки каждого животного шпатель протирают тампоном, смоченным 5% спиртовым раствором йода. Длительность лечения составляет 7-10 дней.

Положительные результаты получают при лечении энроксилом, относящегося к группе фторхиноловых препаратов. Причем фторхинолоны действуют на все виды микробов, прекращая их размножение и жизнедеятельность. Полезно также назначение витамина А в дозе 1 млн ИЕ на одно животное.

Инфицированные глаза животных следует защищать от света, пыли и мух. Вслед за применением лекарственного средства глаза должны быть закрыты в течение 5-7 дней, что обеспечивается наложением лейкопластыря и бинта на закрытые веки.

Больных животных содержат в прохладном затемненном загоне, где имеется свежая вода и корм. Одновременно усиливают меры борьбы с мухами путем опрыскивания 1% эмульсией хлорофоса.

Хозяйство объявляют неблагополучным по этой болезни и вводят ограничения. При этом запрещают ввод в хозяйство и вывод из него животных, а также перегруппировку их внутри хозяйства, вывозу фуража и предметов ухода.

Всех животных, за исключением больных, вакцинируют «Ассоциированной вакциной против инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота на основе антигенов бактерий Moraxella bovis и герпесвируса типа 1 инактивированной гидроокисьалюминиевой» (ФГУ «ФЦТРБ-ВНИВИ»).

Хозяйство объявляют благополучным по ИКК крупного рогатого скота, если в течение 12 месяцев оно свободно от этой болезни. Перед снятием ограничений помещения, где находились больные животные, подвергают заключительной дезинфекции, о чем составляют акт.

zrenielib.ru

ассоциированная вакцина для специфической профилактики инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота на основе антигенов бактерий moraxella bovis и герпесвируса типа i - патент РФ 2264227

Изобретение относится к области ветеринарной микробиологии, вирусологии и биотехнологии. В качестве антигенов вакцина содержит (об.%): инактивированные суспензии клеток гемолитических штаммов бактерий M.bovis с суммарной концентрацией 100-120 млрд. м.к. в 1 см3: шт. M.bovis "Г97-ВНИВИ" - 4,0-5,0, шт. M.bovis "Ш3-01" - 4,0-5,0, инактивированную культуральную суспензию шт. Herpesvirus bovis типа I "ТКА-ВИЭВ-В2" с инфекционным титром 107,0-107,5 ТЦД 50/мл - 78,0-83,0, гель гидроокиси алюминия, 6%-ный раствор - остальное. Вакцина способна повышать уровень накопления специфических защитных антител в сыворотке крови вакцинированных животных и обеспечивать создание иммунитета против инфекционного кератоконъюнктивита, который сохраняется в течение года. 4 табл.

Изобретение относится к области ветеринарной микробиологии, вирусологии и биотехнологии, в частности к производству вакцины для специфической профилактики инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота. Установлено, что основными этиологическими возбудителями заболевания являются гемолитические формы бактерий Moraxlla bovis на фоне интенсивного солнечного УФ-излучения. Инфекционный кератоконънктивит широко распространен во всех странах мира. Частота его проявления в РФ наиболее высока среди молодняка крупного рогатого скота на откормочных площадках с высокой плотностью поголовья и интенсивность развития эпизоотического процесса зависит от степени облучения животных в летние месяцы экстремальным потоком солнечных УФ-лучей и при этом заболевание охватывает от 25 до 90% поголовья.

Наряду с этим, доказано, что вирус инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота (герпесвирус типа 1) также может вызвать острый конъюнктивит у этого вида животных. Однако воспалительный процесс при этом не прогрессирует до помутнения роговицы и ее изъязвления, как это имеет место при инфекционном кератоконъюнктивите (Дженсен Р., Маккей Д. Болезни крупного рогатого скота при промышленном откорме. М.: Колос, 1977, - с.127-129; Abinanti F.R., Plumer G.J.: The isolation of Infectious Bovine Rhinotracheitis Virus from Cattle Affected with Conjunctivitis-Observations on the Experimental Infection. // Am. J.Vet Res., 1961, 22, - p.13-17; Hughes J.P. et al. Keratoconjunctivitis Associated with Infectious Bovine Rhinotracheitis. // Am. J. Vet. Med. Ass., 1964, 45, - p.32-42; George W. et al. Bovine Infectious Keratoconjunctivitis: Interaction of Moraxella bovis and Infectious Rhinotrachitis Virus. // Am. J. Vet. Res., 1970, 31, №4 - p.653-662).

Результаты исследований, проведенные в 80-е годы по проблеме инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота, показали, что вирус инфекционного ринотрахеита является одним из возбудителей, который вместе с бактериями Moraxella bovis вызывает эту болезнь (Штрауб О.Х. Инфекции крупного рогатого скота, вызываемые вирусом герпеса. - М.: Колос, 1981, - с.33-35).

Другие литературные источники также указывают на то, что вирус инфекционного ринотрахеита может быть первичным возбудителем конъюнктивита, но не кератоконъюнктивита (Rebnun W. et al. Anoutbreak of the conjunctivitis form of infectious bovine rhinotraheitis. // Cornell. Veter., 1978, 68, 3, - p.297-307). В ряде работ высказывается мнение, что вирус инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота создает особо благоприятную среду для патогенного действия основного возбудителя кератоконъюнктивита - бактерий Moraxella bovis.

Позднее было доказано, что менее выраженную этиологическую роль при инфекционном кератоконъюнктивите крупного рогатого скота могут играть также хламидии (Wehr I. et al. Untersuchungen zur Bedeutung der Chlamidien bei der infektiosen Keratokonjunctivitis des Rindes. // Wissensch. Humbold. Univ. Berlin, 1980, 29, 1, - p.61-65), Mycoplasma bovoculi (Langford E.V. Characterization of mycoplasma isolated from infectionus bovine keratoconjunctivitis: M. bovoculi sp. nov. // Can. J. Microbiol., 1973, 19, - p.1435-1444), риккетсии и условно-патогенные бактерии, участвуя преимущественно в формировании смешанных инфекций.

Нерасшифрованность этиологии инфекционного кератоконъюнктивита в нашей стране, отсутствие каких-либо нормативных документов по его диагностике и мерам борьбы, завоз племенного поголовья из стран Западной Европы - скрытых носителей возбудителя, привели к появлению стационарно неблагополучных по инфекционному кератоконъюнктивиту обширных очагов и сохранению тенденции дальнейшего распространения болезни, наносящей значительный экономический ущерб вследствие снижения удоев и прироста живой массы животных из-за частичной или полной потери зрения (Бобырь В.К. Инфекционные кератоконъюнктивиты крупного рогатого скота в хозяйствах Гомелевской области. // Болезни с.-х. животных и птиц, их профилактика и лечение./УСборник работ ЛВИ, выпуск 39. - Л., 1974, - с.167-179; Андрисян В.Б. Инфекционный кератоконъюнктивит крупного рогатого скота в Северо-Западной зоне РСФСР // Сборник научных трудов ЛВИ. - Л., 1988, - с.6-11; Какоулин Т.Е. Инфекционный кератоконъюнктивит телят в Иркутской области. // И книге: Профилактика болезней молодняка с.-х. животных Сибири и Дальнего Востока. Новосибирск, 1982, - с.73-75; Гаффаров Х.З. соавт. Эпизоотологические аспекты инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота. // Материалы Международной научной конференции, посвященной 125-летию КГАВМ. Казань, 1998, - с.29-31; Гаффаров Х.З., Спиридонов Г.Н., Валебная Л.В. Штамм бактерий Moraxella bovis "Г97-ВНИВИ", используемый для изготовления диагностикумов и вакцин против инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота. // Патент на изобретение РФ №2145353, приоритет от 15.09.1998 г.; Гаффаров Х.З., Валебная Л.В., Спиридонов Г.Н. Инфекционный кератоконъюнктивит крупного рогатого скота в регионе Среднего Поволжья и Предуралья. // Актуальные проблемы болезней молодняка в современных условиях. Материалы международной научно-практической конференции 23-25 сентября 2002 г., Воронеж, - с.188-191).

Осуществленный эпизоотологический мониторинг в отношении ИКК в 48 хозяйствах 12 районов Республики Татарстан и 29 хозяйствах 8 районов Республики Башкортостан и Удмуртской Республики показал, что заболеваемость телят 1-5 месячного возраста составляет 50-85%, у телят более старшего возраста - 20-25% и среди дойного стада она колеблется в пределах 12-15% (Гаффаров Х.З., Валебная Л.В., Спиридонов Г.Н. Инфекционный кератоконъюнктивит крупного рогатого скота в регионе Среднего Поволжья и Предуралья. // Актуальные проблемы болезней молодняка в современных условиях. Материалы международной научно-практической конференции 23-25 сентября 2002 г., Воронеж, - с.188-191).

Учитывая, что инфекционный кератоконъюнктивит имеет широкое распространение и поражает всех возрастных групп животных, особенно молодняк, вакцинация рассматривается как весьма эффективный метод борьбы с ним. Следует отметить, что проблема специфической профилактики инфекционного кератоконъюнктивита во многих странах мира уже решена в 70-90-е годы прошедшего столетия (Hughes D.et. al. Experimenally Induced Bovine Infectious Keratoconjunctivitis: Effectivenes of Intramuscular Vaccination with Viable Moraxella bovis Culture. // Am. J. Vet. Res., 1971, 32, №6, - p.879-886; Pugh G.W. et al. Infectious bovine keratoconjunctivitis in cattle vaccinated and medicated against Moraxella bovis befare parturition. // Am. J. Vet. Res., 1982, 43 №2, - p.320-325; Gwin R. Medicament and method for prodicing immunity the infectious bovine keratoconjunctivitis. // Патент США №4539201 от 3 сентября 1985). Поэтому проблема создания вакцины против инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота в РФ является весьма актуальной. Отечественных аналогов вакцин против инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота, изготовленных на основе гемолитических форм бактерий Moraxella bovis до наших исследований не существует. Наиболее близким аналогом по отношению к предложенной "Ассоциированной вакцины для специфической профилактики инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота на основе антигенов бактерий Moraxella bovis и герпесвируса типа 1" может служить патент США "Moraxella bovis infectious bovine keratoconjunctivitis steam-killed bacterin" 3401219 от 10.1968 г. в котором описывается факт использования иммунизируещего антигена Moraxella bovis, в частности бактерина, который применяется в качестве профилактического средства против инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота. Бактерии представляют собой инактивированную текучим паром в течение одного часа суспензию бактерий Moraxella bovis. Бактерии способен создать иммунитет против инфекционного кератоконъюнктивита на 6 месяцев. Недостатком данной вакцины является то, что она не защищает животных от кератоконъюнктивита герпесвирусной этиологии.

Задачей изобретения является создание ассоциированной вакцины на основе гемолитических форм бактерий Moraxella bovis и герпесвируса типа 1, предназначенной для создания специфической профилактики инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота на территории РФ, и увеличение продолжительности иммунитета до 12 месяцев.

Технический результат изобретения заключается в получении ассоциированной вакцины, обладающей высокой иммуногенной активностью, и расширении ее иммуногенного спектра.

Сущность изобретения заключается в следующем: ассоциированная вакцина против инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота содержит антигены гемолитических форм бактерий Moraxella bovis и герпесвируса крупного рогатого скота, депонированные на гидроокиси алюминия, при следующем соотношении компонентов, об.%:

Для изготовления ассоциированной вакцины для специфической профилактики инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота на основе антигенов бактерий Moraxella bovis и герпесвируса типа 1 используют запатентованный штамм бактерий Moraxella bovis "Г97-ВНИВИ" (Патент РФ на изобретение №2145353 с приоритетом от 15.09.1998 г.) и новый штамм бактерий Moraxella bovis "Ш3-01", полученный от больного инфекционным кератоконъюнктивитом теленка. Штамм бактерий Moraxella bovis "Ш3-01" характеризуется следующими свойствами: это короткие толстые палочки длиной 1,5-2,0 и в диаметре 0,5-1,0 мкм с округленными концами, расположенные парами или в виде коротких цепочек, спор не образуют, неподвижные, окрашиваются грамотрицательно. На кровяном МПА при рН 7,2-7,6 после 24 часовой инкубации при 37°С образуют колонии диаметром от 1 до 3 мм с зоной -гемолиза шириной 0,5-2,0 мм. Колонии гладкие, круглые, блестящие, серовато-белые. На МПБ через 24-48 часовой инкубации при 37°С наблюдается помутнение бульона с образованием небольшого осадка. Штамм факультативный аэроб, не ферментирует сахаров, не восстанавливает нитраты в нитриты, не образует индол, разжижает желатину, т.е. обладает протеолитической активностью, пептонизирует лакмусовое молоко, дает положительную реакцию на оксидазу, которые являются характерными признаками для микроорганизмов семейства Neisseriaceae, рода Moraxella. Штамм вирулентен для белых мышей, вызывает их гибель в течение 24 часов после внутрибрюшинного введения им суточной агаровой культуры в дозе 500 млн. м.к.

Пример 1. Получение матровой расплодки каждого штамма бактерий Moraxella bovis.

Для изготовления вакцины берут ампулы с лиофилизированными культурами производственных штаммов М.bovis; "Г97-ВНИВИ" и "Ш3-01 ", которые растворяют в 0,5-2,0 см3 МПБ и переносят в чашки Петри с 10%-ным кровяным МПА. Выращивание проводят в течение 16-18 часов, затем культуры проверяют на соответствие морфологических, культуральных, ферментативных и вирулентных свойств. Если они соответствуют гемолитическим формам бактерий М.bovis, то их используют для получения бактериальной массы, необходимой для изготовления ассоциированной вакцины.

Штаммы хранят в лиофилизированном виде. Для этого суспензию суточной культуры бактерий Moraxella bovis с концентрацией 50 млрд. м. к. в 1 см3 смешивают защитной средой (снятое молоко с сахарозой 5%, желатиной 1,5%) в соотношении 1:1, расфасовывают в ампулы по 1 см3, высушивают методом сублимации, запаивают ампулы под вакуумом и хранят при температуре +2-8°С.

Пример 2. Выращивание бактериальной массы каждого штамма бактерий Moraxella bovis в отдельности и ее инактивация.

Для получения биомассы культур М. bovis используют МПА, содержащий 10% дефибринированной крови барана. С этой целью указанную среду в стерильных условиях разливают в 1,5 литровые матрасы по 250-300 см, после застывания среды делают посев указанных штаммов путем внесения в каждый матрас по 2 см3 бактериальной суспензии, содержащей по 1 млрд, м. к. в 1 см3. Посевы выдерживают в термостате при температуре 37°С. Через 36-48 ч выросшие колонии культур М.bovis смывают 0,02%-ным раствором натрия хлорида, готовят суспензию с концентрацией 100-120 млрд. м.к. в 1 см 3 по бактерийному или оптическому стандарту мутности ГИСК им. Тарасевича. Культуру проверяют на чистоту, морфологическую и серологическую типичность.

Инактивацию бактериальной взвеси осуществляют формалином. Для этого в микробную взвесь добавляют формалин с содержанием 37-38% активного формальдегида 0,5 см3 на 100 см3 суспензии. Перемешивают и ставят в термостат на 72 ч. Затем берут пробу на полноту инактивации, которую проводят путем посева инактивированных микробных взвесей на кровяной МПА.

Пример 3. Приготовление нативной суспензии герпесвируса крупного рогатого скота и ее инактивация.

Герпесвирус крупного рогатого скота (шт. "ТКА-ВИЭВ-В2") размножают в перевиваемой культуре клеток трахеи эмбриона коровы (линия TR), выращенной в роллерных трехлитровых бутылях на комбинированной ростовой среде, состоящей из среды 199 - 10%, ГЛА - 40%, среды Игла МЭМ - 40% и сыворотки крупного рогатого скота - 10%. Культуру выращивают в течение 3-4 суток при посевной концентрации 140-150 тыс. клеток в 1 см3 среды. Ростовую среду сливают, вносят поддерживающую среду (среды 199 - 20%, ГЛА - 40% и Игла МЭМ - 40%) в количестве 350-370 см3, в которую предварительно вносят герпесвирус из расчета 10 см3 на 500 см 3 среды, 3%-ный раствор глутамина - 5 см3 и антибиотики (стрептомицин - 100 мкг/см3, пенициллин - 100 ЕД./см3). Бутыли инкубируют в роллерной установке при 37-38°С в течение 3-4-х дней. Сбор культуральной жидкости производят путем трехкратного замораживания и размораживания в период выраженного цитопатического эффекта - максимального накопления вируса. Полученные вирусные суспензии объединяют и с целью инактивации вируса добавляют формалин с содержанием активного формальдегида 37-38% из расчета 0,5 см3 на 100 см 3 вирусной суспензии, перемешивают и оставляют на 24-36 ч при комнатной температуре, после чего проверяют на бактериальную и грибковую контаминацию. Для приготовления вакцины берут вирусную суспензию без посторонней контаминации. Контроль полноты инактивации герпесвируса крупного рогатого скота проводят путем 3-х последовательных пассажей пробы инактивированной вирусной суспензии, используемой для изготовления ассоциированной вакцины против кератоконъюнктивита крупного рогатого скота, на перевиваемой культуре клеток трахеи эмбриона коровы (линия TR) с интервалом 5-6 суток. Вирусную суспензию считают инактивированной, если в третьем пассаже не обнаруживается цитопатическое действие вируса.

Пример 4. Приготовление ассоциированной вакцины для специфической профилактики инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота на основе антигенов бактерий Moraxella bovis и герпесвируса типа 1.

Вакцину готовят из антигена герпесвируса крупного рогатого скота с инфекционным титром 107,0-7,5 ТЦД50/мл и производственных штаммов бактерий Moraxella bovis: "Г97-ВНИВИ", "Ш3-01".

Берут герпесвирусную суспензию, к ней добавляют 100-120 млрд.-ную суспензию бактерий Moraxella bovis исходя из расчета 4-5 см3 каждого штамма на 100 см3 вакцинного препарата, а также 6%-ный гель гидроокиси алюминия из расчета 10 см3 на 100 см3 вакцины. Доводят рН вакцины до 7,2-7,4 и расфасовывают при тщательном периодическом перемешивании во флаконы, которые потом закрывают резиновыми пробками, обкатывают металлическими колпачками и этикетируют. В таблице 1 приведен состав вакцины.

Пример 5. Контроль вакцины на стерильность, безвредность и на антигенную активность.

Для проверки на стерильность из 6 флаконов вакцины каждой серии делают посевы по 0,2 см 3 на МПБ, МПА, кровяной МПА, МППБ под вазелиновым маслом и агар Сабуро по 2 пробирки на каждый флакон. Посевы со всеми средами выдерживают в термостате при 37°С, а с агаром Сабуро - при 20-22°С в течение 15 суток. Питательные среды должны оставаться стерильными.

Для проверки на безвредность отбирают 10 белых мышей живой массой 17-18 г и вводят им вакцину подкожно в дозе 0,5 см3. Вакцину считают безвредной, если мыши в течение 10 суток после введения вакцины остаются живыми и клинически здоровыми.

Антигенную активность вакцины контролируют на 3-х кроликах живой массой 2,0-2,5 кг, которым вводят препарат подкожно в дозе 2 см3 двукратно с интервалом 14 дней. Через 14 дней после последней вакцинации у кроликов из ушной вены берут кровь и исследуют сыворотку с целью установления уровня специфических антител к герпесвирусу типа 1 и антигенам бактерий Moraxella bovis. Титры антител к герпесвирусу крупного рогатого скота должен быть в пределах 1:320-1:640 в ИФА, к штаммам бактерий Moraxella bovis - 1:400-1:1600 в реакции ИФА.

Результаты контроля 24 экспериментальных серий вакцины показали, что все серии биопрепарата были стерильными, безвредными и антигенно-активными. Показатели антигенной активности ассоциированной вакцины представлены в таблице 2.

Производственное испытание экспериментальных серий вакцины было проведено в 8 хозяйствах Республики Татарстан и в одном - Чувашской Республики, неблагополучных по инфекционному кератоконъюнктивиту крупного рогатого скота, где заболеваемость телят до 6 месячного возраста составляла 24-56%, молодняка до 12 месячного возраста - 19-35% и молодняка старше года и взрослого поголовья 8-22%. Все поголовье крупного рогатого скота в этих хозяйствах вакцинировали ассоциированной вакциной перед выгоном на пастбище двукратно с интервалом 21-30 дней в дозах: телят до 6 месячного возраста - 3 см3, молодняка от 6 до 12 мес. - 5 см3, молодняка старше года и взрослого поголовья - 10 см3. Результаты испытаний вакцины в этих хозяйствах представлены в таблице 4. Из таблицы следует, что ассоциированная вакцина обладает высокой иммуногенной активностью. Применение ее с профилактической целью в 9 стационарно неблагополучных хозяйствах позволило полностью искоренить заболевание в 6 хозяйствах, а в остальных трех - снизить заболевание до единичных случаев.

Пример 6. Назначение, общие сведения и порядок применения ассоциированной вакцины для специфической профилактики инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота на основе антигенов бактерий Moraxella bovis и герпесвируса типа 1.

Вакцина предназначена для специфической профилактики инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота, вызываемого смешанной инфекцией, обусловленной бактериями Moraxella bovis и вирусом инфекционного ринотрахеита (герпесвирус тип 1) на фоне повышенной солнечной ультрафиолетовой радиации в летние месяцы.

Вакцина представляет собой смесь концентрированных антигенов гемолитических форм бактерий М.bovis и культуральной суспензии герпесвируса типа 1 в оптимальных соотношениях.

По внешнему виду вакцина, депонированная гидроокисью алюминия, непрозрачная жидкость с белым осадком, который при встряхивании флакона легко разбивается, образуя гомогенную взвесь бледно-розового цвета.

Вакцину выпускают в стеклянных флаконах по 100, 200 и 500 см3 с плотно закрытыми резиновыми пробками, обкатанными металлическими колпачками, и этикетируют в соответствии с ТУ.

Вакцина пригодна для применения в течение 12 месяцев со дня изготовления при условии хранения и транспортировки при температуре 2-10°С.

Вакцину применяют с профилактической целью в угрожаемых и стационарно неблагополучных хозяйствах по инфекционному кератоконъюнктивиту крупного рогатого скота. Вакцинируют весь нарождающийся молодняк в возрасте 30-35 дней независимо от времени года, а также все поголовье крупного рогатого скота перед выгоном на пастбище. Вакцину вводят подкожно в среднюю треть шеи двукратно с интервалом 21-30 дней в дозах:

- 3 см3 - телятам в возрасте от 1 до 6 мес.;

- 5 см3 - молодняку в возрасте от 6 мес. до года;

- 10 см3- молодняку старше года, коровам и быкам производителям.

Вакцина обеспечивает создание у молодняка и взрослого поголовья крупного рогатого скота иммунитета, который сохраняется в течение года.

За период 1999-2003 гг. изготовлено 814,5 литров ассоциированной вакцины, которая использована в хозяйствах Республики Татарстан, Марий Эл, Башкортостана, Удмуртии и Чувашии, неблагополучных по инфекционному кератоконъюнктивиту крупного рогатого скота (таблица 3).

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

Ассоциированная вакцина для специфической профилактики инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота на основе антигенов бактерий Moraxella bovis и герпесвируса типа I, отличающаяся тем, что в качестве антигенов она содержит инактивированные суспензии клеток гемолитических штаммов бактерий Moraxella bovis "Г97-ВНИВИ" и Moraxella bovis "Ш3-01" с суммарной концентрацией 100-120 млрд м.к. в 1 см3, инактивированную культуральную суспензию герпесвируса типа I шт. "ТКА-ВИЭВ-В2" с инфекционным титром 107,0-7,5 ТЦД50/мл, в качестве адъюванта - 6%-ный раствор геля гидроокиси алюминия при следующем соотношении компонентов, об.%:

штаммов бактерий M.bovis с суммарной концентрацией

Инактивированная культуральная суспензия

Herpesvirus bovis типа I "ТКА-ВИЭВ-В2" с

www.freepatent.ru

Смотрите также

• 
  Вакцина от гриппа при эпилепсии
• 
  Вакцины против гемофилезного полисерозита свиней
• 
  Вакцина от свиного гриппа 2016
• 
  Вакцина от герпеса 6 типа
• 
  Лучшие вакцины для кошек 2017
• 
  Куда делают вакцину от столбняка
• Контаминация вакцины может быть причиной
• 
  Вакцина против энтерококковой инфекции телят
• 
  Вакцина от гриппа перед беременностью
• 
  Томский институт вакцин и сывороток
• 
  Вакцина от кальцивироза для кошек