Вакцина, ассоциированная против сальмонеллеза и энтерококковой инфекции нутрий. Вакцина против энтерококковой инфекции телят
Ветеринарная клиника "ГорВетЗдрав" - Вакцина против энтерококковой инфекции телят, ягнят и поросят инактивированная
Вакцина против энтерококковой инфекции телят, ягнят и поросят инактивированная Инструкции по препаратам: А Б В Г Д Е Ё Ж З И Й К Л М Н О П Р С Т У Ф Х Ц Ч Ш Щ Э Ю Я ВАКЦИНА ПРОТИВ ЭНТЕРОКОККОВОЙ ИНФЕКЦИИ У ТЕЛЯТ, ЯГНЯТ И ПОРОСЯТ СОСТАВ И ФОРМА ВЫПУСКА Вакцина изготовлена на основе культуры стрептококков серологического варианта D, сорбированной на геле гидроокиси алюминия и инактивированной формалином. По внешнему виду представляет собой прозрачную суспензию желто-коричневого цвета с незначительным бело-серым осадком. Расфасовывают по 50, 100 и 200 мл в стеклянные герметически закрытые флаконы.
ФАРМАКОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА Вакцина индуцирует выработку специфических антител к возбудителям энтерококковой инфекции у молодняка сельскохозяйственных животных через 6-8 дней после повторной вакцинации. Напряженность иммунитета у животных составляет 4 месяца. ПОКАЗАНИЯ Назначают телятам, ягнятам и поросятам в целях специфической профилактики энтерококковой инфекции в неблагополучных или угрожаемых по данному заболеванию хозяйствах и индивидуальном секторе. ДОЗЫ И СПОСОБ ПРИМЕНЕНИЯ Перед иммунизацией необходимо простерилизовать шприцы и иглы. Для каждого животного используют отдельную стерильную иглу. Перед использованием флакон с вакциной необходимо энергично встряхнуть. Препарат вводят внутримышечно с внутренней поверхности бедра двукратно, с интервалом 10-14 дней в дозе: Вид животного |
Доза препарата на 1 животное, мл | Первая вакцинация | Вторая вакцинация | Телята | 5 | 10 | Ягнята | 5 | 5 | Поросята | 5 | 5 |
В стационарно неблагополучных хозяйствах телят, ягнят и поросят прививают с первого дня жизни специфической энтерококковой сывороткой в профилактической дозе, а на 6-7 сутки их вакцинируют. При выявлении в ранее благополучном пункте заболевания молодняка энтерококковой инфекцией лечебные и профилактические мероприятия проводят в следующем порядке: больных и подозрительных в заболевании животных изолируют и проводят лечение энтерококковой сывороткой в комплексе с антибактериальными препаратами, клинически здоровых животных моложе 8-дневного возраста первоначально иммунизируют энтерококковой сывороткой в профилактических дозах, согласно инструкции по применению, а затем через 7-8 дней вакцинируют. Все клинически здоровые животные старше 8-дневного возраста подлежат профилактической иммунизации указанной выше вакциной.
ПОБОЧНЫЕ ДЕЙСТВИЯ После применения вакцины у животных могут наблюдаться повышение температуры тела на 0,5-1,5 °С в течение первых 1-2 суток и незначительная отечность в месте введения препарата, которая самопроизвольно рассасывается в течение 3-4 дней и не требует дополнительного лечения. ПРОТИВОПОКАЗАНИЯ Вакцинации не подлежат клинически больные энтерококкозом, с инфекционными и паразитарными заболеваниями, ослабленные и истощенные животные. ОСОБЫЕ УКАЗАНИЯ При проведении манипуляций с препаратом следует пользоваться резиновыми перчатками, особенно в случае наличия на руках ссадин и других повреждений кожи. При попадании вакцины на кожу или слизистые оболочки ее тотчас необходимо смыть струей воды или снять тампоном и затем отмыть водой. По окончании обработки руки следует тщательно вымыть теплой водой с мылом. Флаконы с остатками препарата утилизируют. Транспортировка и вывоз животных из хозяйства допускается через 12 дней после повторной иммунизации. Продукты убоя от вакцинированных животных реализуются без ограничений.
УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ В сухом, защищенном от света и недоступном для детей и животных месте при температуре от 5 до 15 °С. Срок годности — 2 года. ПРОИЗВОДИТЕЛЬ ФГУП «Ставропольская биофабрика», Россия. www.gorvetzdrav.ru Каталог: Вакцина против энтерококковой инфекции телят, ягнят и поросят
СОСТАВ И ФОРМА ВЫПУСКА
Вакцина изготовлена на основе культуры стрептококков серологического варианта D, сорбированной на геле гидроокиси алюминия и инактивированной формалином. По внешнему виду представляет собой прозрачную суспензию желто-коричневого цвета с незначительным бело-серым осадком. Расфасовывают по 100 мл в стеклянные герметически закрытые флаконы.
ФАРМАКОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА
Вакцина индуцирует выработку специфических антител к возбудителям энтерококковой инфекции у молодняка сельскохозяйственных животных через 6 − 8 дней после повторной вакцинации. Напряженность иммунитета у животных составляет 4 месяца.
ПОКАЗАНИЯ
Назначают телятам, ягнятам и поросятам в целях специфической профилактики энтерококковой инфекции в неблагополучных или угрожаемых по данному заболеванию хозяйствах и индивидуальном секторе.
ДОЗЫ И СПОСОБ ПРИМЕНЕНИЯ
Перед иммунизацией необходимо простерилизовать шприцы и иглы. Для каждого животного используют отдельную стерильную иглу. Перед использованием флакон с вакциной необходимо энергично встряхнуть. Препарат вводят внутримышечно с внутренней поверхности бедра двукратно, с интервалом 10 − 14 дней в дозе:
Вид животного
|
Доза препарата на 1 животное, мл
|
Первая вакцинация
|
Вторая вакцинация
|
Телята
|
5
|
10
|
Ягнята
|
5
|
5
|
Поросята
|
5
|
5
|
В стационарно неблагополучных хозяйствах телят, ягнят и поросят прививают с первого дня жизни специфической энтерококковой сывороткой в профилактической дозе, а на 6 − 7 сутки их вакцинируют. При выявлении в ранее благополучном пункте заболевания молодняка энтерококковой инфекцией лечебные и профилактические мероприятия проводят в следующем порядке: больных и подозрительных в заболевании животных изолируют и проводят лечение энтерококковой сывороткой в комплексе с антибактериальными препаратами, клинически здоровых животных моложе 8-дневного возраста первоначально иммунизируют энтерококковой сывороткой в профилактических дозах, согласно инструкции по применению, а затем через 7 − 8 дней вакцинируют. Все клинически здоровые животные старше 8-дневного возраста подлежат профилактической иммунизации указанной выше вакциной.
ПОБОЧНЫЕ ДЕЙСТВИЯ
После применения вакцины у животных могут наблюдаться повышение температуры тела на 0,5 − 1,5 °С в течение первых 1 − 2 суток и незначительная отечность в месте введения препарата, которая самопроизвольно рассасывается в течение 3 − 4 дней и не требует дополнительного лечения.
ПРОТИВОПОКАЗАНИЯ
Вакцинации не подлежат клинически больные энтерококкозом, с инфекционными и паразитарными заболеваниями, ослабленные и истощенные животные.
ОСОБЫЕ УКАЗАНИЯ
При проведении манипуляций с препаратом следует пользоваться резиновыми перчатками, особенно в случае наличия на руках ссадин и других повреждений кожи. При попадании вакцины на кожу или слизистые оболочки ее тотчас необходимо смыть струей воды или снять тампоном и затем отмыть водой. По окончании обработки руки следует тщательно вымыть теплой водой с мылом. Флаконы с остатками препарата утилизируют. Транспортировка и вывоз животных из хозяйства допускается через 12 дней после повторной иммунизации. Продукты убоя от вакцинированных животных реализуются без ограничений.
УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ
В сухом, защищенном от света и недоступном для детей и животных месте при температуре от 5 до 15 °С. Срок годности — 2 года.
ПРОИЗВОДИТЕЛЬ
ФГУП «Ставропольская биофабрика», Россия.
areal-bio.com способ изготовления ассоциированной вакцины против колибактериоза, стрептококкоза и энтерококковой инфекции телят и поросят - патент РФ 2429012
Изобретение относится к области ветеринарной медицины. Способ заключается в том, что проводят выделение из пораженных органов телят и поросят эпизоотических штаммов Escherichia coli, продуцирующих термолабильный, термостабильный и шигаподобный токсины, а также гемолитических штаммов Streptococcus bovis и Enterococcus faecalis. Раздельно выращивают культуры Escherichia coli, Streptococcus bovis и Enterococcus faecalis на питательном бульоне при температуре 37°С. При этом культуры Escherichia coli выращивают в течение 7 дней, а культуры Streptococcus bovis и Enterococcus faecalis в течение 24 ч до концентрации 5-6 млрд микробных тел в 1 мл. Затем раздельно инактивируют выращенные культуры формалином до концентрации 0,3-0,4% в течение 14 суток. После чего смешивают культуры в равных объемах, фасуют и укупоривают. Полученная вакцина обладает высокой иммуногенностью и специфичностью, безвредна. 4 табл.
Изобретение относится к ветеринарной медицине, в частности к методам изготовления вакцин, и может быть использовано для профилактики смешанных кишечных инфекций у молодняка животных. Разработка средств специфической профилактики инфекционных болезней животных была и остается одним из актуальных направлений ветеринарной медицины. Установлено, что в последние годы в нозологическом профиле инфекционной патологии телят и поросят, сопровождающихся диарейным синдромом, доминируют колибактериоз, стрептококкоз и энтерококковая инфекция (Субботин В.В., Сидоров М.А. Профилактика желудочно-кишечных болезней новорожденных животных с симптомокомплексом диареи. / Ветеринария, 2001. - № 4. - С.3-4; Шахов А. и др. Профилактика желудочно-кишечных болезней поросят бактериальной этиологии. / Свиноводство, 2008. - № 1. - С.23-25; Терехов В.И. и др. Видовой состав и антигенная структура микроорганизмов, обуславливающих смешанные кишечные инфекции у новорожденных телят. / Труды Кубанского государственного аграрного университета. Серия: Ветеринарные науки, 2009. - № 1 (ч.1). - С.98-99). Данные заболевания чаще всего протекают в виде ассоциированных инфекций, поэтому применение ассоциированных вакцин, включающих антигены разных возбудителей, является более предпочтительным, чем моновакцины, поскольку они позволяют создать у животных напряженный иммунитет в сжатые сроки, а кроме того, снизить стрессовые ситуации у прививаемых животных и уменьшить трудозатраты. В связи с вариабельностью возбудителей кишечных инфекций состав средств специфической профилактики должен включать антигены, аналогичные антигенному составу бактерий, выделенных от больных и павших животных в эпизоотическом очаге.
Известна вакцина, ассоциированная против анаэробной энтеротоксемии и эшерихиоза поросят (патент РФ на изобретение № 2129441 от 10.12.97). Данная вакцина содержит клостридиозный компонент, представленный штаммом Clostridium perfingens, активно продуцирующий токсин типа С. Она также содержит сложный эшерихиозный компонент, включающий набор полисахаридных О, К антигенов, адгезивных антигенов, ТЛ- и ТС-анатоксинов в соотношении 1:1. Однако данная вакцина обеспечивает спектр иммуногенности против возбудителей анаэробной энтеротоксемии и эшерихиоза у поросят и, естественно, не создает иммунитета против стрептококкоза и энтерококковой инфекции у животных. Известна вакцина, ассоциированная против диареи телят (патент РФ на изобретение № 2035916 от 27.05.1995), которая содержит 3 штамма E.coli, Salmonella typhimurium, S.dublin, S.enteritidis, 2 штамма Klebsiella pneumoniae, Proteus vulgaris и P.mirabilis. Эта вакцина предназначена для профилактики колибактериоза, сальмонеллеза, клебсиеллеза и протейной инфекции у телят, но она также не защищает животных от стрептококковой и энтерококковой инфекции. Известен способ изготовления вакцины, ассоциированной против колибактериоза, сальмонеллеза, стрептококкоза и энтерококковой инфекции нутрий (патент РФ на изобретение № 2316345 от 19.07.2006 - прототип). Способ заключается в том, что осуществляют отбор пораженных органов от павших нутрий из местного эпизоотического очага. Готовят суспензию из патологического материала и делают посев на дифференциально-диагностические среды. Выделяют чистые культуры Escherichia coli, Salmonella typhimurium. Streptococcus pneumoniae и Streptococcus fecalis. Раздельно выращивают выделенные культуры в мясопептонной питательной среде с добавлением 0,2% глюкозы до достижения концентрации микробных клеток - 4-5 млрд в 1 см3. Инактивируют формалином до 0,4-0,6%-ной конечной концентрации. Выдерживают при температуре 37°С в течение 72-96 часов. Смешивают культуры в равных соотношениях. Вносят 3%-ный раствор гидроокиси алюминия в количестве 20% к объему культуры и тщательно смешивают. После чего полученную вакцину фасуют и укупоривают. Способ прост в исполнении, позволяет повысить специфичность и иммуногенность полученной вакцины. Однако данный способ позволяет получать вакцину против колибактериоза, сальмонеллеза, стрептококкоза и энтерококковой инфекции только для нутрий и не предусматривает использования для телят и поросят, поскольку возбудители, вызывающие у них болезни, существенно отличаются по своим антигенным свойствам от возбудителей болезней нутрий.
Техническим результатом изобретения является повышение эффективности специфической профилактики колибактериоза, стрептококкоза и энтерококковой инфекции у телят и поросят путем введения в вакцинный препарат культур возбудителей болезней специфичных для крупного рогатого скота и свиней. Решение задачи достигается тем, что в способе изготовления вакцины, ассоциированной против колибактериоза, стрептококкоза и энтерококковой инфекции телят и поросят, включающем получение антигенов и инактивацию формалином, проводят выделение из пораженных органов телят и поросят эпизоотических штаммов Escherichia coli, продуцирующих термолабильный, термостабильный и шигаподобный токсины, гемолитических штаммов Streptococcus bovis и Enterococcus fecalis раздельно их выращивают на питательном бульоне при температуре 37°С, при этом культуры Escherichia coli в течение 7 дней, а культуры Streptococcus bovis и Enterococcus fecalis в течении 24 ч до концентрации 5-6 млрд микробных тел в 1 мл, раздельно инактивируют формалином до концентрации 0,3-0,4% в течение 14 суток, смешивают культуры в равных объемах, фасуют и укупоривают. Новизна заявляемого предложения заключается в том, что в качестве антигена используют эпизоотические штаммы Escherichia coli, продуцирующие термолабильный, термостабильный и шигаподобный токсины, гемолитические штаммы Streptococcus bovis и Enterococcus fecalis, которые получают путем отбора пораженных органов от павших телят и поросят из местного эпизоотического очага с последующим выделением из них чистых культур возбудителей колибактериоза, стрептококкоза и энтерококковой инфекции животных и обработкой их при определенных режимах. Способ обеспечивает получение безвредной, иммуногенной и специфичной вакцины для защиты телят и поросят от поражения колибактериозом, стрептококкозом и энтерококковой инфекции. В патентной и научно-технической литературе не обнаружена аналогичная заявляемой совокупность признаков, что позволяет судить об изобретательском уровне и новизне заявляемого предложения. Пример конкретного осуществления способа изготовления вакцины, ассоциированной против колибактериоза, стрептококкоза и энтерококковой инфекции телят и поросят. Для изготовления вакцины ассоциированной против колибактериоза, стрептококкоза и энтерококковой инфекции первоначально проводят отбор пораженных органов от павших животных в период их заболевания колибактериозом, стрептококкозом и энтерококковой инфекцией из местного эпизоотического очага, осуществляют бактериологический посев с целью выделения чистых культур возбудителей. Для определения культуральных свойств возбудителя колибактериоза делали посевы выделенной культуры из патологического материала в МПБ, на среду Эндо, МПА и инкубировали в термостате при 37°С в течение 18-24 ч. На чашках Петри с МПА росли влажные колонии с ровными краями и гладкой поверхностью серого цвета. В пробирках с МПБ наблюдали равномерное помутнение питательной среды с образованием на поверхности пленки и небольшим придонным осадком, разбивающимся при встряхивании. На среде Эндо наблюдали рост колоний малиново-красного цвета с бронзовым отливом, характерный для E.coli. При микроскопии препаратов, окрашенных по Граму, под иммерсионной системой микроскопа наблюдали толстые палочки с закругленными концами красного цвета, расположенные одиночно, характерные для E.coli. Для подтверждения видовой принадлежности выделенных изолятов устанавливали их биохимические свойства с использованием микротест-систем «ENTEROtest» фирмы PLIVA-Lachema Diagnostika (Чехия). При подтверждении принадлежности чистых культур к Escherichia coli определяли способность их к токсинообразованию с помощью биотеста на инфузориях-стилонихиях по пат. РФ 2262529. При наличии в культуральной среде экзотоксинов количество погибших инфузорий должно быть не менее 70-80%, в то время как количество погибших инфузорий в контрольной пробе, не содержащей токсин, не должно превышать 5%. Токсинпродуцирующие изоляты отбирали для получения вакцины. Для определения культуральных свойств возбудителей стрептококкоза и энтерококковой инфекции делали посевы выделенных культур из патматериала в чашки Петри с мясопептонным агаром (МПА) с добавлением глюкозы до 1%-ной конечной концентрации и 5% дефибринированной крови барана. Через 18-20 ч инкубирования в термостате при температуре 37°С наблюдали в чашках Петри с кровяным МПА рост мелких, мутноватых с ровными краями колоний, окруженных зеленоватой зоной гемолиза. При микроскопии препаратов, окрашенных по Грамму, под иммерсионной системой микроскопа наблюдали диплококки или кокки в виде коротких цепочек, окрашенные в фиолетовый цвет, характерные для рода Streptococcus и Enterococcus. Принадлежность выделенных изолятов к Streptococcus bovis и Enterococcus fecalis подтверждали исследованиями биохимических свойств и активности пирролидонилариламидазы с использованием «PYRAtest», «STREPTOtest» и «EN-COCCUStest» фирмы PLIVA-Lachema Diagnostika (Чехия). Выделенные таким образом чистые культуры возбудителей колибактериоза (Escherichia coli), стрептококкоза (Streptococcus bovis) и энтерококковой инфекции (Enterococcus fecalis) используют для получения баксырья. Для этого из культур каждого изолята, выросших на чашках Петри, отбирают по 2-3 изолированные колонии и засевают по отдельности в пробирки с 10 мл питательного бульона, приготовленного по пат. РФ № 2342425, после культивируют при 37°С в течение 6-8 ч до появления легкой мути, свидетельствующей о росте микроорганизмов. Далее проводят микроскопию мазков, окрашенных по Граму, для подтверждения чистоты выросших культур и засевают каждый штамм во флаконы с 200-300 мл питательного бульона, приготовленного по пат. РФ № 2342425, и культивируют при 37°С: культуры возбудителя колибактериоза в течение 7 суток, а культуры возбудителей стрептококкоза и энтерококковой инфекции - 24 ч. Концентрацию микробных клеток в бактериальной массе определяли по стандарту мутности и разводили стерильным физиологическим раствором до концентрации 5-6 млрд в 1 см3. Инактивацию полученного баксырья проводили внесением формалина до конечной концентрации 0,3-0,4%, выдерживали при температуре 37°С в течение 14 суток при периодическом перемешивании. Затем равные объемы инактивированных баккультур объединяют и тщательно перемешивают. После чего полученную вакцину фасуют по стерильным флаконам, укупоривают и проверяют на стерильность и безвредность. При контрольных высевах на МПА, МПБ, среды Китт-Тароцци, Сабуро, Эндо рост бактериальной и грибной флоры отсутствовал, что свидетельствовало о стерильности вакцины. При внутрибрюшинном введении вакцины в дозе 0,3 мл белым мышам массой 20-22 г, состояние угнетения и гибели их в течение 10 дней не отмечали, что является показателем безвредности данной изготовленной вакцины. Иммуногенные свойства вакцины проверяли на 5 кроликах массой 2,5-3 кг, при этом оценивали накопление в сыворотке крови животных антитоксических антител и антител к стрептококку и энтерококку в реакции преципитации в агаровом геле. Кроликов иммунизировали дважды с интервалом 7 дней в дозе 1,0+1,0 мл. Перед второй иммунизацией и спустя 7 дней после второй иммунизации у животных отбирали кровь и исследовали на наличие специфических антител. Результаты представлены в таблице 1, из данных которой видно, что после введения вакцины у кроликов появляются специфические антитела к токсинам кишечной палочки и антигенам Streptococcus bovis и Enterococcus fecalis. После повторного введения вакцины уровень специфических антител к вакцинным антигенам увеличился в 4-8 раз, что свидетельствует о выраженных иммуногенных свойствах препарата. Таблица 1 | Иммуногенные свойства вакцины против колибактериоза, стрептококкоза и энтеровокковой инфекции | Антиген | Титры антител | до иммунизации | после 1-й иммунизации | после 2-й иммунизации | Токсины Escherichia coli | - | 1:4-1:8 | 1:16-1:32 | Streptococcus bovis | 0-1:1 | 1:8-1:16 | 1:32-1:64 | Enterococcus fecalis | 1:1-1:2 | 1:4-1:8 | 1:16-1:32 |
Защитные свойства ассоциированной вакцины против колибактериоза, стрептококкоза и энтерококковой инфекции проверяли на модели острой инфекции при внутрибрюшинном заражении белых мышей суточными бульонными культурами соответствующих возбудителей (токсигенный изолят Escherichia coli, Streptococcus bovis, Enterococcus fecalis). Для этого было сформировано 6 групп по 10 мышей в каждой. Мышей 1-3 групп дважды с интервалом 7 дней иммунизировали вакциной ассоциированной против колибактериоза, стрептококкоза и энтерококковой инфекции телят и поросят в дозе 0,1 мл, а мышей 4-6 групп иммунизировали в той же дозе и по такой же схеме вакциной ассоциированой колибактериоза, сальмонеллеза, стрептококкоза и энтерококковой инфекции нутрий. Через 14 дней после последней вакцинации всех животных заражали суточными бульонными культурами в дозе 2ЛД50 и в течение 10 дней вели наблюдение, учитывая при этом количество павших мышей. Результаты опыта представлены в таблицах 2-4. Из материалов данных таблиц видно, что вакцина, изготовленная по предлагаемому способу, обеспечивает защиту 80-100% животных при их экспериментальном заражении. Она более специфична и эффективна чем прототип, поэтому может быть предложена для использования в ветеринарии в качестве биопрепарата для профилактики колибактериоза, стрептококкоза и энтерококковой инфекции у телят и поросят. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Способ изготовления вакцины, ассоциированной против колибактериоза, стрептококкоза и энтерококковой инфекции телят и поросят, включающий получение антигенов и инактивацию их формалином, отличающийся тем, что проводят выделение из пораженных органов телят и поросят эпизоотических штаммов Escherichia coli, продуцирующих термолабильный, термостабильный и шигаподобный токсины, гемолитических штаммов Streptococcus bovis и Enterococcus faecalis, раздельно их выращивают на питательном бульоне при температуре 37°С, при этом культуры Escherichia coli в течение 7 дней, а культуры Streptococcus bovis и Enterococcus faecalis в течение 24 ч до концентрации 5-6 млрд микробных тел в 1 мл, раздельно инактивируют формалином до концентрации 0,3-0,4% в течение 14 суток, после чего смешивают культуры в равных объемах, фасуют и укупоривают. www.freepatent.ru Вакцина, ассоциированная против сальмонеллеза и энтерококковой инфекции нутрий
Изобретение относится к ветеринарной медицине, в частности к вакцинам, и может быть использовано в научно-исследовательских и производственных учреждениях, занимающихся конструированием биопрепаратов, а также на предприятиях биологической промышленности. Вакцина в качестве антигенов содержит суспензию клеток чистой культуры возбудителя сальмонеллеза Salmonella typhimurium и энтерококковой инфекции Streptococcus fecalis, полученных путем отбора пораженных органов от павших нутрий из местного эпизоотического очага, приготовления суспензии, посева на дифференциально-диагностические среды, выделения чистых культур возбудителей, выращивание проводят раздельно в мясопептонном бульоне с глюкозой с концентрацией микробных клеток 4-5 млрд. в 1 см3, смешивают их в соотношении 1:2, вносят формалин и гидроокись алюминия при следующем соотношении компонентов, мас.%: суспензия клеток чистой культуры возбудителя сальмонеллеза Salmonella typhimurium, выделенного из местного эпизоотического очага, в питательной среде с титром 4-5 млрд. микробных клеток в 1 см3 25,5-27,5; суспензия клеток чистой культуры возбудителя энтерококковой инфекции Streptococcus fecalis, выделенного из местного эпизоотического очага, в питательной среде с титром 4-5 млрд. микробных клеток в 1 см3 50,5-55,0; глюкоза 2,0-1,0; формалин 2,0-1,5; гидроокись алюминия остальное. Изобретение обеспечивает повышение специфичности и эффективности ассоциированной вакцины против сальмонеллеза и энтерококковой инфекции нутрий и исключает отрицательное побочное действие на животных. 1 табл. Изобретение относится к ветеринарной медицине, в частности к вакцинам, и может быть использовано в учреждениях, занимающихся конструированием биологических препаратов, а также на предприятиях биологической промышленности. Известна ассоциированная вакцина против диареи телят, содержащая бактериальные клетки эшерихий, штаммы: 0138 К88, 09К99, 200; сальмонелл, штаммы: ГИСК № 195, ГИСК № 196, ГИСК № 197; протеи, штаммы: ГИСК № 198, ГИСК № 199; клебсиелл, штаммы: ГИСК № 201, ГИСК № 202 (патент на изобретение РФ № 2035916 от 17.06.93, МКИ А 61 39/125, 39/135). Данная вакцина предназначена для профилактики инфекционных заболеваний у телят, вызываемых эшерихиями, сальмонеллами, протеями и клебсиеллами, для нутрий не применяется. Известна вакцина против стрептококкоза и пастереллеза нутрий (патент РФ на изобретение № 2099084 от 30.09.94, МКИ А61K 39/125, 39/135). Данная вакцина содержит в качестве антигена суспензию штамма Streptococcus zooepidemicus ВГНКИ № К-ДЕП с титром 2,5-3,0 млрд. микробных клеток в 1 мл в культуральной среде, суспензию клеток штаммов Pasteurella multosida ВГНКИ № 6011, Pasteurella multosida ВГНКИ № 2394 и Pasteurella multocida ВГНКИ № 1015 в равных соотношениях общим содержанием 2,5-3,0 млрд. микробных клеток в 1 мл питательной среды глюкозу, формалин, гидроокись алюминия и сапонин. Данная вакцина применяется для профилактики стрептококкоза и пастереллеза нутрий. Сырье получают путем культивирования штаммов возбудителей стрептококкоза и пастереллеза нутрий в питательной среде с низкой активностью. Использование сапонина в вакцине может вызывать у привитых животных различные поствакцинальные осложнения (воспалительные процессы, абсцессы на месте введения, хромоту и др.) Техническим решением задачи изобретения является устранение перечисленных недостатков, в частности повышение специфичности, эффективности вакцины против сальмонеллеза и энтерококковой инфекции у нутрий, путем введения новых чистых культур возбудителей, компонентов, исключая отрицательного и побочного влияния. Решение задачи достигается тем, что вакцина, ассоциированная против сальмонеллеза и энтерококковой инфекции нутрий, включающая инактивированные антигены, адъювант, в качестве антигенов содержит суспензию клеток чистых культур возбудителей сальмонеллеза Salmonella typhimurium и энтерококковой инфекции Streptococcus fecalis, полученных путем отбора пораженных органов от павших нутрий из местного эпизоотического очага, приготовления суспензии, посева на дифференциально-диагностические среды, выделения чистых культур возбудителей, выращивание проводят раздельно в мясопептонном бульоне с глюкозой до концентрации микробных клеток 4-5 млрд. в 1 см3, смешивают их в соотношении 1:2, вносят формалин и гидроокись алюминия при следующем соотношении компонентов, мас.%: суспензия клеток чистой культуры | | возбудителя сальмонеллеза Salmonella | | typhimurium, выделенного из местного | | эпизоотического очага, в питательной | | среде с титром 4-5 млрд. микробных | | клеток в 1 см3 | 25,5-27,5 | суспензия клеток чистой культуры | | возбудителя энтерококковой инфекции | | Streptococcus fecalis, выделенного | | из местного эпизоотического очага, | | в питательной среде с титром 4-5 млрд. | | микробных клеток в 1 см3 | 50,5-55,0 | глюкоза | 2,0-1,0 | формалин | 2,0-1,5 | гидроокись алюминия | остальное |
Новизна заявляемого технического решения обусловлена тем, что в отличие от известных вакцин для получения сырья проводят отбор пораженных органов от павших нутрий из местного эпизоотического очага, приготовление суспензии, посев на дифференциально-диагностические среды, выделение чистых культур возбудителей Salmonella typhimurium и Streptococcus fecalis, выращивание чистых культур возбудителей проводят раздельно на мясопептонном бульоне, что позволяет повысить специфичность и иммуногенность вакцины. При раздельном культивировании чистых культур возбудителей и добавление в питательную среду глюкозы до 0,2%-ной концентрации позволяет получать концентрацию микробных клеток не менее 4-5 млрд. в 1 мл в течение 12-14 часов инкубирования. Инактивирование баксырья формалином в 0,4-0,5%-ной конечной концентрации при температуре 37°С в течение 72-96 часов позволяет подавить патогенность возбудителей и сохранить их иммуногенные свойства в течение 12 месяцев. Смешивание инактивированных антигенов Salmonella typhimurium и Streptococcus fecalis в соотношении 1:2, внесение гидроокиси алюминия и тщательное перемешивание не вызывает у привитых нутрий поствакцинальных осложнений, позволяет обеспечить формирование напряженного иммунитета через 12-15 суток после однократного введения продолжительностью не менее 9 месяцев (срок наблюдения). Использование чистых культур возбудителей Salmonella typhimurium и Streptococcus fecalis, выделенных из местного эпизоотического очага от больных и павших нутрий, позволяет значительно повысить специфичность вакцины, после однократной вакцинации обеспечивает защиту животных сразу от двух опасных инфекционных болезней сальмонеллеза и энтерококковой инфекции. По данным патентной и научно-технической литературы не обнаружена аналогичная совокупность признаков, компонентов, что позволяет судить об изобретательском уровне заявленного технического решения. Что касается критерия «промышленная применимость», то компоненты, входящие в состав вакцины, известны и широко применяются в ветеринарной практике при изготовлении инактивированных вакцин: формолквасцовая вакцина против паратифа (сальмонеллеза) телят ТУ 46-21-166-75, утверждено 10.05.75 г., инструкция по изготовлению и контролю данной вакцины утверждена Главным управлением ветеринарии МСХ СССР 28.03.80 г.; вакцина против паратифа (сальмонеллеза) поросят ТУ 46-21-952-74, утверждено 15.07.74 г., инструкция по изготовлению и контролю данной вакцины утверждена Главным управлением ветеринарии МСХ СССР 23.10.96 г.; ассоциированная вакцина против сальмонеллеза, пастереллеза и энтерококковой инфекции поросят ТУ 10.09-62-90, утверждено 01.08.90 г., инструкция по изготовлению и контролю данной вакцины утверждена Главным управлением ветеринарии 16.07.90 г.; вакцина против энтерококковой инфекции телят, ягнят и поросят ТУ 10.09-91-90, утверждено 15.12.90 г., представлены все необходимые сведения о микроорганизмах рода Salmonella и рода Streptococcus. Однако для нутрий эти вакцины не применяются. Методы выделения и характеристика сальмонелл описаны в методических указаниях «Лабораторная диагностика сальмонеллезов человека и животных, обнаружение сальмонелл в кормах, продуктах питания и объектах внешней среды». Москва, ВО «Агропромиздат», 1990 г., а также в справочнике «Определитель зоопатогенных микроорганизмов» под редакцией профессора Сидорова М.А., Москва. - Колос, 1995, стр.201-204. В «Практикуме по ветеринарной микробиологии и иммунологии» авторы: Костенко Т.С., Родионова В.Б., Скородумов Д.И., М.: Колос, 2001, на стр.222-231. Методы выделения и характеристика стрептококков представлены в «Методических указаниях по лабораторной диагностике стрептококкоза животных», утвержденных 25.09.1990 г. Главным управлением ветеринарии с государственной инспекцией при Государственной комиссии СМ СССР по продовольствию и закупкам, а также в справочнике «Определитель зоопатогенных микроорганизмов» под редакцией профессора Сидорова М.А., Москва. - Колос, 1995, стр.90-95. Предложенная вакцина, ассоциированная против сальмонеллеза и энтерококковой инфекции нутрий, проста в исполнении, доступна и является промышленно применимой. Вакцина, ассоциированная против сальмонеллеза и энтерококковой инфекции нутрий, содержит инактивированные формалином чистые культуры возбудителей Salmonella typhimurium и энтерококковой инфекции нутрий Streptococcus fecalis, адсорбированные на гидрате окиси алюминия. По внешнему виду вакцина представляет собой жидкость светло-желтого цвета с рыхлым осадком, который при встряхивании легко разбивается в гомогенную взвесь. Срок хранения в сухом, темном месте при температуре от 2 до 10°С 1 год. Вакцина предназначена для профилактики опасных инфекционных заболеваний нутрий против сальмонеллеза и энтерококковой инфекции нутрий. Она вызывает образование специфического иммунитета против сальмонеллеза и энтерококковой инфекции нутрий. Вакцина безвредна и ареактогенна. Иммунитет у нутрий, привитых вакциной против сальмонеллеза и энтерококковой инфекции нутрий, формируется через 12-15 суток после вакцинации и сохраняется не менее 9 месяцев. Вакцину применяют в благополучных, неблагополучных и угрожаемых по сальмонеллезу и энтерококковой инфекции нутрий хозяйствах. В благополучных и угрожаемых по сальмонеллезу и энтерококковой инфекции нутрий хозяйствах вакцину вводят однократно, внутримышечно в область бедра, молодняку с 45-дневного возраста по 1,0 см3, а взрослым животным по 1,5 см3. В неблагополучных хозяйствах вакцину вводят внутримышечно в область бедра с 2-месячного возраста двукратно с интервалом 7-10 дней: первая вакцинация в дозе 1,0 см3, вторая - в дозе 1,5 см3. Продукты убоя вакцинированных нутрий используют без ограничений независимо от сроков вакцинации. К факторам, обуславливающим получение вакцины заданного свойства, относятся последовательность изготовления и процентное соотношение между компонентами, входящими в препарат. Приведено пять примеров, содержащих компоненты в различных соотношениях на 100 мл вакцины. Пример 1. Берут пораженные органы от павших нутрий из местного эпизоотического очага, из которых приготавливают суспензию, делают посев на дифференциально-диагностические среды, выделяют чистые культуры возбудителей сальмонеллеза Salmonella typhimurium и энтерококковой инфекции нутрий Streptococcus fecalis, раздельно культивируют, получают, инактивируют и смешивают (мас.%) суспензию микробных клеток 74,5 с титром 4-5 млрд. и содержанием глюкозы 0,5, инактивируют внесением формалина 1,0, затем добавляют гидроокись алюминия - остальное, тщательно смешивают и получают вакцину следующего состава при следующем соотношении компонентов, мас.%: суспензия клеток чистой культуры | | возбудителя Salmonella typhimurium, | | выделенного из местного эпизоотического | | очага, в питательной среде с титром 4-5 млрд. | | микробных клеток в 1 см3 | 24,5 | суспензия клеток чистой культуры возбудителя | | Streptococcus fecalis, выделенного из местного | | эпизоотического очага, в питательной среде с | | титром 4-5 млрд. микробных клеток в 1 см3 | 50,0 | глюкоза | 0,5 | формалин | 1,0 | гидроокись алюминия | остальное |
При данном соотношении компонентов вакцина, ассоциированная против сальмонеллеза и энтерококковой инфекции нутрий, обладает слабой иммуногенной активностью. Пример 2. Берут пораженные органы от павших нутрий из местного эпизоотического очага, из которых приготавливают суспензию, делают посев на дифференциально-диагностические среды, выделяют чистые культуры возбудителей сальмонеллеза Salmonella typhimurium и энтерококковой инфекции нутрий Streptococcus fecalis, раздельно культивируют, получают, инактивируют и смешивают (мас.%) суспензию микробных клеток 75,5 с титром 4-5 млрд. и содержанием глюкозы 1,0, инактивируют внесением формалина 1,5, затем добавляют гидроокись алюминия - остальное, тщательно смешивают и получают вакцину следующего состава при следующем соотношении компонентов, мас.%: суспензия клеток чистой культуры возбудителя | | сальмонеллеза Salmonella typhimurium, выделенного | | из местного эпизоотического очага, в питательной | | среде с титром 4-5 млрд. микробных клеток в 1 см3 | 25,0 | суспензия клеток чистой культуры возбудителя | | энтерококковой инфекции Streptococcus fecalis, | | выделенного из местного эпизоотического очага, | | в питательной среде с титром 4-5 млрд. микробных | | клеток в 1 см3 | 50,5 | глюкоза | 1,0 | формалин | 1,0 | гидроокись алюминия | остальное |
При данном соотношении компонентов вакцина, ассоциированная против сальмонеллеза и энтерококковой инфекции нутрий, обладает иммуногенной активностью. Пример 3. Берут пораженные органы от павших нутрий из местного эпизоотического очага, из которых приготавливают суспензию, делают посев на дифференциально-диагностические среды, выделяют чистые культуры возбудителей сальмонеллеза Salmonella typhimurium и энтерококковой инфекции нутрий Streptococcus fecalis, выделенные из местного эпизоотического очага, раздельно культивируют, получают, инактивируют и смешивают (мас.%) суспензию микробных клеток 79,0 с титром 4-5 млрд. и содержанием глюкозы 1,7, инактивируют внесением формалина 1,3, затем добавляют гидроокись алюминия - остальное, тщательно смешивают и получают вакцину следующего состава при следующем соотношении компонентов, мас.%: суспензия клеток чистой культуры возбудителя | | сальмонеллеза Salmonella typhimurium, | | выделенного из местного эпизоотического | | очага, в питательной среде с титром 4-5 млрд. | | микробных клеток в 1 см3 | 26,5 | суспензия клеток чистой культуры возбудителя | | энтероокковой инфекции Streptococcus fecalis, | | выделенного из местного эпизоотического очага, | | в питательной среде с титром 4-5 млрд. | | микробных клеток в 1 см3 | 52,5 | глюкоза | 1,7 | формалин | 1,3 | гидроокись алюминия | остальное |
При данном соотношении компонентов вакцина, ассоциированная против сальмонеллеза и энтероокковой инфекции нутрий, обладает незначительной иммуногенной эффективностью. Пример 4. Берут пораженные органы от павших нутрий из местного эпизоотического очага, из которых приготавливают суспензию, делают посев на дифференциально-диагностические среды, выделяют чистые культуры возбудителей сальмонеллеза Salmonella typhimurium и энтерококковой инфекции нутрий Streptococcus fecalis, выделенные из местного эпизоотического очага, раздельно культивируют, получают, инактивируют и смешивают (мас.%) суспензию микробных клеток 82,2 с титром 4-5 млрд. и содержанием глюкозы 1,0, инактивируют внесением формалина 1,5, затем добавляют гидроокись алюминия - остальное, тщательно смешивают и получают вакцину следующего состава при следующем соотношении компонентов, мас.%: суспензия клеток чистой культуры возбудителя | | сальмонеллеза Salmonella typhimurium, | | выделенного из местного эпизоотического очага, | | в питательной среде с титром 4-5 млрд. | | микробных клеток в 1 см3 | 27,5 | суспензия клеток чистой культуры возбудителя | | энтероокковой инфекции Streptococcus fecalis, | | выделенного из местного эпизоотического очага, | | в питательной среде с титром 4-5 млрд. | | микробных клеток в 1 см3 | 55,0 | глюкоза | 1,0 | формалин | 1,5 | гидроокись алюминия | остальное |
При данном соотношении компонентов вакцина, ассоциированная против сальмонеллеза и энтерококковой инфекции нутрий, обладает иммуногенной активностью, формирует после вакцинации выраженный напряженный иммунитет, не вызывает поствакцинальных осложнений, стабильна при хранении в течение 12 месяцев (таблица 1). Пример 5. Берут возбудитель сальмонеллеза Salmonella typhimurium, возбудитель энтерококковой инфекции нутрий Streptococcus fecalis, выделенные из местного эпизоотического очага, раздельно культивируют, получают, инактивируют и смешивают (мас.%) суспензию микробных клеток 84,5 с титром 4-5 млрд. и содержанием глюкозы 2,0, инактивируют внесением формалина 1,5, затем добавляют гидроокись алюминия - остальное, тщательно смешивают и получают вакцину следующего состава при следующем соотношении компонентов, мас.%: суспензия клеток чистой культуры возбудителя | | сальмонеллеза Salmonella typhimurium, | | выделенного из местного эпизоотического очага, | | в питательной среде с титром 4-5 млрд. | | микробных клеток в 1 см3 | 28,5 | суспензия клеток чистой культуры возбудителя | | энтероокковой инфекции Streptococcus fecalis, | | выделенного из местного эпизоотического очага, | | в питательной среде с титром 4-5 млрд. | | микробных клеток в 1 см3 | 56,0 | глюкоза | 2,0 | формалин | 1,5 | гидроокись алюминия | остальное |
При данном соотношении компонентов вакцина, ассоциированная против сальмонеллеза и энтерококковой инфекции нутрий, обладает слабой иммуногенной активностью, формирует напряженный иммунитет, у отдельных животных на месте введения препарата вызывает слабое раздражение. Из данных таблицы видно, что предлагаемая вакцина, ассоциированная против сальмонеллеза и энтерококковой инфекции нутрий, имеет значительные преимущества в сравнении с вакциной по прототипу. Вакцина, ассоциированная против сальмонеллеза и энтерококковой инфекции нутрий, содержащая инактивированные антигены, адъювант, отличающаяся тем, что в качестве антигенов содержит суспензию клеток чистых культур возбудителей сальмонеллеза Salmonella typhimurium и энтерококковой инфекции Streptococcus fecalis, полученных путем отбора пораженных органов от павших нутрий из местного эпизоотического очага, приготовления суспензии, посева на дифференциально-диагностические среды, выделения чистых культур возбудителей, выращивание проводят раздельно в мясопептонном бульоне с глюкозой до концентрации микробных клеток 4-5 млрд. в 1 см3, смешивают их в соотношении 1:2, вносят формалин и гидроокись алюминия при следующем соотношении компонентов, мас.%: Суспензия клеток чистой культуры | | возбудителя сальмонеллеза Salmonella | | typhimurium, выделенного из местного | | эпизоотического очага, в питательной | | среде с титром 4-5 млрд. микробных | | клеток в 1 см3 | 25,5-27,5 | Суспензия клеток чистой культуры | | возбудителя энтерококковой инфекции | | Streptococcus fecalis, выделенного | | из местного эпизоотического очага, | | в питательной среде с титром 4-5 млрд. | | микробных клеток в 1 см3 | 50,5-55,0 | Глюкоза | 2,0-1,0 | Формалин | 2,0-1,5 | Гидроокись алюминия | Остальное |
www.findpatent.ru
|