Вирус бешенства. История открытия вакцины против бешенства. Кто открыл вакцину от бешенства

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ УКРАИНЫ

Харьковский национальный медицинский университет

Кафедра микробиологии, иммунологии и вирусологи

Реферат на тему: Вирус бешенства. История открытия вакцины против бешенства

Выполнила:

Студентка 3 курса II мед. фак-та

16 группы

Алексеева Алена Сергеевна

Преподаватель:

Коваленко Наталья Ильинична

29.12.2012План:

1. Введение…………………………………………………………………………….3
2. Характеристика возбудителя………………………………………………………3
3. Химический состав и свойства вируса…………………………………………….5
4. Патогенез…………………………………………………………………………….7
5. Клиническая картина………………………………………………………………..9
6. Лабараторная диагностика и лечение.…………………………………………….10
7. История получения вакцины……………………………………………………….11

Введение

Домашние животные – милые существа, которые приносят радость не только детям, но и взрослым. Все мы их очень любим, и, кажется, знаем о них все. Однако не всегда все так просто как кажется на первый взгляд. Животные бывают разными. Одни – мурлычут и ласкаются, другие же – готовы искусать и зацарапать тебя до полусмерти. Насколько уверены Вы в Вашем любимом домашнем питомце? Сколько голодных собак Вы каждый день видите на улице? Уверены ли Вы в том, что в один прекрасный день они не искусают Вас? Наверняка ни один из Вас не сможет дать положительного ответа на все вышеперечисленные вопросы. А известно ли Вам, что укус бешеной собаки – это прямой путь к Вашей погибели?

Бешенство (Rabies) — остропротекающая вирусная болезнь, опасная для всех теплокровных животных и человека (зооантропоноз). Характеризуется передачей возбудителя через укус и признаками диссеминированного полиоэнцефаломиелита (необычное поведение животных, непровоцируемая агрессивность, параличи).

История

Еще Аристотель обращал внимание на распространение бешенства среди собак. Цельс в I в. н.э. указывал на частые заболевания собак и других животных. Он заметил и другие факты: заболевания бешенством людей, возможность передачи болезни со слюной животного в момент укуса. В 1271 году описана крупная эпизоотия бешенства среди собак и волков в Германии, в 1500 году в Бельгии и Испании. В 1590 году Отмечена эпизоотия бешенства среди волков.Изучение бешенства в 19 веке тесно связано с достижениями Пастера, Мечникова, Гамалеи. В 1885 г. Л. Пастер получил и с успехом использовал вакцину для спасения людей, укушенных бешеными животными. Вирусная природа болезни доказана в 1903 г. П. Ремленже, который произвел фильтрование заразного материала через бактериальные фильтры. XIX

Таксономия

Возбудитель бешенства РНК-содержащий вирус Neuroryctes rabid относится к группе миксовирусов рода Lyssavirus семейства Rhabdoviridae.

Морфология

Вирион бешенства в препаратах инфицированного мозга и культур ткани под электронным микроскопом имеет пулевидную форму с одним плоским и одним закругленным концом. Имеет спиральный нуклеокапсид, окруженный белково-липидной оболочкой с поверхностными выступами. Диаметр вириона 75-80 нм, длина 180 нм. Геном – однонитчатая РНК с молекулярной массой 3,5-4,6 106. Вирионы содержат 5 структурных белков и РНК-зависимую полимеразу. В поперечных срезах вириона бешенства виден центральный стержень, окруженный плотной оболочкой. Для морфогенеза вируса бешенства характерно первоначальное формирование матрикса; филаментозной субстании в цитоплазме инфицированных клеток. В последующем из матрикса образуется нуклеокапсид вириона.

^

Существование вируса бешенства за счет различных животных и на различных территориях привело к тому, что он оказался неоднороден: у отдельных представителей имеются различия по вирулентности, по характеру вызываемого инфекционного процесса и патологоанатомических изменений. В антигенном отношении популяция вируса более или менее однотипна, хотя некоторые различия у разных вирусов теперь обнаружены. В частности, оказалось, что пастеровский вакцинный фиксированный штамм (PV-11) по антигенной структуре полноценнее, универсальнее многих выделяемых сейчас от человека и животных.

^

1.Типичный (уличный) вирус бешенства, в популяции которого обнаружены в свою очередь определенные различия. В частности, лисьи штаммы отличаются по патогенности. Патологоанатомические изменения в мозгу при бешенстве, которое вызывается укусом лисицы, отличаются тем, что тельца Бабеша—Негри встречаются существенно реже, изменения в ЦНС носят более диффузный характер в виде очень мелких бесструктурных плазматических включений.

^ . Этот вирус слабопатогенен для лабораторных животных. Заболевания людей, вызванные этим вирусом, или не встречаются вовсе, или они чрезвычайно редки.

^ — болезни собак и песцов в северных тундровых районах. Человек болеет очень редко — описано заболевание одной девочки на Аляске. Имеются наблюдения о развитии в результате лабораторного заражения медленной нейроинфекции, закончившейся смертью.

3.^ — наиболее существенно отличающийся от основного вируса типичного бешенства. Среди вирусов, выделяемых от летучих мышей, встречается несколько разновидностей.

По современным представлениям все названные вирусы относятся к одному виду — вирусу Neuroryetes.

Известен еще один вариант вируса бешенства – 4.фиксированный, полученный Пастером при адаптации уличного вируса в организме кролика в измененных условиях заражения. Вирус бешенства патогенен для человека и всех видов теплокровных животных, а также птиц, но степень восприимчивости к вирусу бешенства у разных видов животных различна. Согласно экспериментальным данным наибольшей чувствительностью к вирусу бешенства обладают лисицы, среди лабораторных животных – сирийский хомяк. Фиксированный вирус не выделяется со слюной и не может быть передан во время укуса. Механизм вирусной персистенции в клеточных культурах связывается с образованием и накоплением Ди-частиц. Проникновение вируса в клетки происходит путем адсорбционного эндоцитоза - вирионы выявляются в виде включений, окруженных мембраной, адсорбированных на микротрубочках и в составе лизосом.

Штаммы вируса бешенства циркулирующие в различных географических зонах мира, обладают рядом общих биологических и антигенных характеристик (вариабельность инкубационного периода, поражения пи переферическом введении ЦНС, выделением вируса со слюной, тождественной антигенной структурой.) Наряду с этим установлено существование естественных биовариантов вируса бешенства. Биоварианты вируса бешенства различаются по степени патогенности при внемозговом заражении, распределению в органах зараженных животных, способности формировать включения. Вирусы подобные возбудителю бешенства, имеют частичное антигенное с ним родство, а также сходный тип репродукции, но отличаются по комплексу биологических характеристик.^

Очистка и концентрация культурального вируса позволили изучить химическую структуру и биологическую активность субвирусных компонентов. В состав вириона бешенства входят: РНК(1%), белки(72%), липиды(24%), углеводы(1%). Белки вириона бешенства представлены 4 высокомолекулярными и 1 низкомолекулярным полипептидами. Нуклеокапсид вириона содержит 96% белка, представляет собой однонитчатую правовращающуюся спираль РНК длиной 1 мкм и наружным диаметром 15-16 нм, окруженную оболочкой. Состоящей из гликопротеина и глюколипидов. Нуклеокапсид вириона бешенства обладает константой седиминтации 200S, плавучей плотностью 1,32 г/см3, молекулярным весом 1,5 × 108 дальтонов и константу седиментации 45S.

Свойства

Вирус бешенства обладает антигенным, имунногенными и гемагглютинирующим свойствами, однако биологическая и антигенная активность различных субвирусных структур неодинакова. Белки оболочки обладают выраженной иммуногенной активностью, в то время как белки «ядра» вириона мало иммуногены. Гликопротеин оболочки вириона обладает гемагглютинирующей активностью. Очищенная вирусная РНК, нуклеокапсид и вирусные компоненты «ядра» вириона не инфекциозны, что может быть связано с отсутствием в их составе гликопротеина оболочки, необходимого для адсорбции вируса на поверхности клетки. В составе вириона бешенства обнаружены собственные ферментные системы: протеинкиназа, ДНК-полимераза. Синтез вириона происходит как в веществе матрикса, так и в окружающих его интрацитоплазматических мембранах. В цитоплазме нейронов зрелые вирионы освобождаются путем почкования от поверхности филаментозного матрикса. В культуре клеток зрелые вирионы отпочковываются от клеточной поверхности. Размножение вируса вызывает в аммоновом роге головного мозга и среднем мозге поражение сосудов с образованием в цитоплазме нейронов специфических включений – телец Бабеша-Негри. Выделяется со слюной.

Размножение вируса бешенства in vivo и in vitro, сопровождается фрмированием специфических включений – телец Бабеша-Негри. Тельца Бабеша-Негри размером 0,5-25 мкм расположены в цитоплазме нейронов, имеют округлую, овальную, реже веретенообразную форму, базофильную внутреннюю структуру, окрашивающуюся кислыми красителями в рубиновый цвет. При цитохимическом исследовании телец установлено, что они содержат РНК. Электронномикроскопическое исследование телец выявило, что их эозинофильная основа соответствует специфическому филаментозному матриксу инфицированных клеток, а внутренние базофильные структуры состоят из вирусных нуклеокапсидов, связанных с компонентами клеток. Степень формирования телец Бабеша-Негри при заражении различных штаммов вируса бешенства определяется численностью локальных очагов вирусного синтеза в цитоплазме инфицированных клеток .

Резистентность

Устойчивость вируса бешенства невелика. Некоторые детергенты вызывают распад вирионов. Вирус устойчив к фенолу, антибиотикам. Разрушается кислотами, щелочами, нагреванием (при 56°С инактивируется в течение 15 мин, при кипячении - за 2 мин. Чувствителен к ультрафиолетовым и прямым солнечным лучам, к этанолу к высушиванию. Быстро инактивируется сулемой (1:1000), лизолом (1-2%), карболовой кислотой (3-5%), хлорамином (2-3%). Вирус хорошо сохраняется лишь при низкой температуре и после вакуумного высушивания и в замороженном состоянии.

Эпидемиология

Бешенство типичный зооноз, от человека к человеку вирус передается крайне редко. Источником заражения являются инфицированные животные (лисы, волки, собаки, кошки, летучие мыши, грызуны, лошади, мелкий и крупный рогатый скот). Заражение человека происходит при укусе или ослюнении животным поврежденной кожи или слизистой оболочки. Вирус выделяется во внешнюю среду со слюной инфицированного животного или человека. Описаны случаи заболевания людей в результате укусов внешне здоровым животным, продолжающим оставаться таковым в течение длительного времени. В последние годы доказано, что помимо контактного возможны аэрогенный, алиментарный и трансплацентарный пути передачи вируса. Не исключается передача вируса от человека к человеку. Описаны несколько случаев заражения людей в результате операции по пересадке роговой оболочки глаза.Различают эпизоотии бешенства природного и городского типов. Естественными являются природные эпизоотии бешенства, поддерживаемые дикими плотоядными животными из семейства собачьих, кошачьих и рукокрылых. В городских очагах источником бешенства являются домашние животные.

Заразными считаются животные за 3-10 дней до появления признаков болезни и далее в течение всего периода заболевания. Часто больных бешенством животных можно отличить по обильному слюно-и слезотечению, а также при наблюдении признаков водобоязни. Заражение человека происходит при укусе «бешеным» животным

Анализ заболевания показывает, что 53,5% заболевших бешенством в нашей стране вовремя не обратились за медпомощью и не получили антирабические прививки. Локализация укуса имеет решающее значение в частоте заболеваемости. Среди заболевших 67% были укушены в верхние конечности, 12% в нижние, 1,9% в туловище.

В настоящее время вызывает опасения серьезный рост заболеваемости бешенством среди животных и людей. возрастает количество безнадзорных собак и кошек и неудовлетворительно осуществляется их отлов и изоляция. До сих пор не приняты правовые акты, регламентирующие правила содержания домашних животных. Только за 2009 число тех, кто пострадал от животных с диагнозом бешенство, составило более шести тысяч человек.

^

У людей погибших от бешенства, выявляется отек и набухание головного и спинного мозга с выраженной гиперемией, сопровождающейся петихиальными кровоизливаниями. Однако воспалительные процессы в тканях мозга часто являются ограниченными. Микроскопически воспалительный процесс обнаруживают в тройничных нервах, гассеровых узлах, межпозвоночных и верхних шейных симпатических ганглиях и в сером веществе головного мозга. В периферических нервах отмечают лимфоидные и моноцитарные инфильтраты, локализующиеся около расширенных сосудов. Вокруг гибнущих или распавшихся ганглиозных клеток возникает гиперплазия олигодендроглиальных элементов, в результате чего образуются так называемые узелки бешенства. Они, однако, не являются специфичными для бешенства, так как для бешенства так как встречаются и при других заболеваниях(энцефалит)Характерными для бешенства считают появление цитоплазматических включений-телец Бабеша-Негри, которые чаще всего обнаруживаются в клетках гипокампа и в грушевидных нейроцитах мозжечка.Во внутренних органах особых изменений не возникает. Слюнные железы иногда увеличиваются. В них обнаруживаются периваскулярные инфильтраты. Отмечается полнокровие и некоторая раздутость легких. Селезенка не увеличена.

Патогенез

Вирус бешенства попадает в организм человека при укусе либо ослюнении бешеным животным через рану или микроповреждения кожи, реже слизистой оболочки. Далее вирус бешенства распространяется по нервным стволам центростремительно, достигает центральной нервной системы, а затем опять-таки по ходу нервных стволов центробежно направляется на периферию, поражая практически всю нервную систему. Таким же периневральным путем вирус попадает в слюнные железы, выделяясь со слюной больного. Нейрогенное распространение вируса доказывается опытами с перевязкой нервных стволов, которая предупреждает развитие болезни. Тем же методом доказывается центробежное распространение вируса во второй фазе болезни. Скорость распространения вируса по нервным стволам составляет около 3 мм/ч.Одна из гипотез объясняет распространение вируса бешенства по аксоплазме периферических нервов к ЦНС влиянием электромагнитного поля организма на отрицательно заряженные вирионы [Аnnаl N., 1984]. В опытах на мышах удается достичь лечебного эффекта, подвергая животных воздействию электрического поля, создающегося путем фиксации отрицательного электрода на голове, а положительного - на лапке. При обратном расположении электродов наблюдается стимуляция инфекции.

Нельзя отрицать также роль гематогенного и лимфогенного пути распространения вируса в организме. Интересно, что последовательность аминокислот гликопротеида вируса бешенства аналогична с нейротоксином змеиного яда, избирательно связывающимся с ацетилхолиновыми рецепторами. Возможно, этим обусловливается нейтротропность вируса бешенства, а связыванием его со специфическими нейротрансмиттерными рецепторами или другими молекулами нейронов объясняется развитие аутоиммунных реакций и селективное поражение некоторых групп нейронов.Размножаясь в нервной ткани (головной и спинной мозг, симпатические ганглии, нервные узлы надпочечников и слюнных желез), вирус вызывает в ней характерные изменения (отек, кровоизлияния, дегенеративные и некротические изменения нервных клеток). Разрушение нейронов наблюдается в коре большого мозга и мозжечка, в зрительном бугре, подбугорной области, в черном веществе, ядрах черепных нервов, в среднем мозге, базальных ганглиях и в мосту мозга. Однако максимальные изменения имеются в продолговатом мозге, особенно в области дна IV желудочка. Вокруг участков пораженных клеток появляются лимфоцитарные инфильтраты (рабические узелки). В цитоплазме клеток пораженного мозга (чаще в нейронах аммонова рога) образуются оксифильные включения (тельца Бабеша-Негри), представляющие собой места продукции и накопления вирионов бешенства.

^

Инкубационный период (период от укуса до начала заболевания) в среднем составляет 30-50 дней, хотя может длится 10-90 дней, в редких случаях — более 1 года. Причем чем дальше место укуса от головы, тем больше инкубационный период. Во время инкубационного периода самочувствие у укушенных не страдает. Особую опасность представляют собой укусы в голову и руки. Дольше всего длится инкубационный период при укусе ноги. Выделяют 3 стадии болезни: I — начальную, II — возбуждения, III — паралитическую. Первая стадия начинается с общего недомогания, головной боли, небольшого повышения температуры тела, мышечных болей, сухости во рту, снижения аппетита, болей в горле, сухого кашля, может быть тошнота и рвота. В месте укуса появляются неприятные ощущения — жжение, покраснение, тянущие боли, зуд, повышенная чувствительность. Больной подавлен, замкнут, отказывается от еды, у него возникает необъяснимый страх, тоска, тревога, депрессия, реже — повышенная раздражительность. Характерны также бессонница, кошмары, обонятельные и зрительные галлюцинации. Через 1-3 дня у больного бешенством наступает вторая стадия — возбуждения. Появляется беспокойство, тревога, и, самое характерное для этой стадии, приступы водобоязни. При попытке питья, а вскоре даже при виде и звуке льющейся воды, появляется чувство ужаса и спазмы мышц глотки и гортани. Дыхание становиться шумным, сопровождается болью и судорогами. На этой стадии заболевания человек становится раздражительным, возбудимым, очень агрессивным, «бешеным». Во время приступов больные кричат и мечутся, могут ломать мебель, проявляя нечеловеческую силу, кидаться на людей. Отмечается повышенное пото— и слюноотделение, больному сложно проглотить слюну и он постоянно ее сплевывает. Этот период обычно длится 2-3 дня. Далее наступает третья стадия заболевания, для начала которой характерно успокоение — исчезает страх, приступы водобоязни, возникает надежда на выздоровление. После этого повышается температура тела свыше 40-42°С, наступает паралич конечностей, нарушения сознания, судороги. Смерть наступает от паралича дыхания или остановки сердца. Таким образом, продолжительность заболевания редко превышает неделю. Иногда заболевание без предвестников сразу начинается со стадии возбуждения или появления параличей. У детей бешенство характеризуется более коротким инкубационным периодом. Приступы гидрофобии и резкого возбуждения могут отсутствовать. Заболевание проявляется депрессией, сонливостью, развитием параличей и коллапса. Смерть может наступить через сутки после начала болезни. В качестве вариантов течения выделяют бульбарные, паралитические (типа Ландри), менингоэнцефалитические и мозжечковые формы болезни.

^

Неблагоприятный. Имеется лишь несколько случаев выздоровления.Лабораторная диагностика

1. Вирусоскопический метод. Обнаружение телец Бабеша-Негри в клетках аммониевого рога (используется для посмертной диагностики).

2. Вирусологический метод. Выделение вируса из слюны больных, взвеси мозговой ткани или подчелюстных слюнных желез умерших путем заражения мышей (интрацеребрально) или хомяков (внутрибрюшинно), а также в культуре тканей.

3. Иммунофлуоресцентный метод. Исследуют срезы мозговой ткани, обработанные специфической люминесцирующей сывороткой, с целью обнаружения АГ вируса бешенства. Реакция иммунофлюоресценции, несмотря на то, что применяется уже более 50 лет, остается золотым стандартом в диагностике бешенства, так как обладает рядом достоинств: высокая чувствительность и специфичность; быстрота выполнения (2-3 часа) и относительная дешевизна. Но существуют и недостатки: отсутствие инструментального учета; субъективность оценки результатов, в связи с чем необходимо профессиональное обучение и приобретение оп В последние годы разработаны новые методы диагностики бешенства.Радиоиммунный метод основан на связывании меченных радионуклеидом специфических антител с рабическим антигеном в отпечатках мозга с последующим измерением радиоактивности образовавшегося комплекса.

Перспективно использование для экспресс-диагностики иммуноферментного анализа (ИФА) и метода выделения вируса из патологического материала в культуре клеток с последующим применением МФА. Перспективна и идентификация вируса с помощью наборов моноклональных антител.ыта работы.

ЛЕЧЕНИЕ

В настоящее время нет данных об успешном лечении болезни. Заболевание успешно профилактируется у человека введением антирабической вакцины, т.е., человек не заболевает.

У животных введение антирабических вакцин после укуса тоже разработано (вакцина "Рабикан" из штамма "Щелково-51"), но не практикуется. Заболевших животных немедленно изолируют и убивают, так как их передержка связана с риском заражения людей.

^

Первооткрывателем вакцины против бешенства можно по праву считать Луи Пастера.

Луи Пастер сумел за свою жизнь сделать чрезвычайно много. Он стал основоположником микробиологии, первым доказал возможность жизни без кислорода и то, что микробы – причина заразных болезней. Пастер заложил фундамент в учении об иммунитете. Он определил роль микроорганизмов в круговороте различных элементов в природе. И, наконец, Л. Пастер избавил человечество от болезни, долгое время считавшейся неизлечимой – бешенства. Вклад Пастера в сокровищницу знаний велик. История его жизни – это история открытий, которые перечислены на памятной доске у входа в его первую лабораторию в Париже. «Здесь была лаборатория Пастера: 1857 – брожение, 1860 – проблема самопроизвольного зарождения, 1865 – болезни шелковичных червей, 1885 – предохранение от бешенства, 1887 – вакцины

Бешенство – тяжёлое заболевание, передающееся человеку от больных животных, как домашних, так и диких. Связь между возникновением болезни и укусами диких и домашних животных была подмечена ещё в древности, что нашло отражение в работах римских поэтов Марона Публия Вергилия (70 – 19 до н. э.) и Публия Овидия Назона (ок. 43 до н. э. – 17 н. э.), древнегреческого философа Аристотеля (384 – 322 до н. э.), а также древнегреческого писателя и историка Плутарха (ок. 45 – ок. 127). Древнеримский врач, автор трактата «О медицине» Авл Корнелий Цельс (I в. до н.э.), заметил, что люди могут заражаться бешенством через слюну при укусе бешеного животного, а от человека к человеку болезнь практически не передаётся. У собаки, заболевшей бешенством, инкубационный период (скрытый период течения болезни) продолжается 14 – 30 дней. Крупные эпизоотии (массовое заболевание среди животных) бешенства среди собак и волков отмечались в 1271 г. В Германии, в 1500 г. – в Бельгии и Испании, в 1590 г. – среди волков во Франции. В течение XVIII и XIX вв. эпизоотии среди собак прокатились мощной волной почти через все страны Европы, Азии и Африки. Обычная цепочка передачи возбудителя бешенства – от диких животных, главным образом волков и лисиц, домашним животным, а затем человеку – нашла отражение в художественной литературе. На протяжении почти двух тысячелетий предлагались разнообразные способы лечения бешенства. Так, римский врач Цельс советовал выжигать укушенное место калёным железом. Римский учёный и писатель Плиний Старший (23 – 79) считал, что укушенному человеку надо съесть печень бешеного животного, а другой римский врач – Клавдий Гален (130 – 200) предлагал в качестве лекарства настой глаз улиток. Во Франции и Бельгии люди, пострадавшие от укусов животных, совершали паломничество к могиле святого Юбера: ниточка от его епитрахили (часть богослужебного облачения священника в виде широкой ленты, которая надевается на шею) якобы спасала от бешенства. В средние века во Франции существовал страшный обычай. Заболевших бешенством связывали и либо вскрывали им вены на руках и ногах, в результате чего несчастные умирали от потери крови, либо укладывали между двумя матрацами, и в этом случае смерть наступала от удушья. Только в начале XIX века в стране был издан закон, запрещавший подобную расправу с больными, а нарушители закона подвергались смертной казни. Бешенство было заболеванием, от которого нельзя было спастись. Каждому человеку, укушенному бешеным животным, грозила смерть. Луи Пастер долго размышлял о том, как избавить человечество от этой напасти. В отличие от всех прочих заболеваний, которые изучал Пастер, культуру возбудителя бешенства получить не удалось. Не обнаруживался возбудитель и под световым микроскопом: как было установлено позднее, это был вирус, изучение которого стало возможным гораздо позднее – после изобретения электронного микроскопа. Во дворе института, где проводились исследования, находились клетки для здоровых и бешеных собак. К больным собакам впускали здоровых, бешеные набрасывались на них. Искусанные становились новыми жертвами эксперимента: ведь надо было постоянно иметь под рукой больных животных. Поскольку бешенство передаётся через укус, можно было предположить, что возбудитель находится в слюне. Пастер вставлял в пасть бешеной собаки стеклянную трубочку и ртом высасывал немного слюны для исследования. Это были опыты лицом к лицу со смертью. Однако кролики, которым вводили слюну таких собак, погибали в большинстве случаев не от бешенства, а от посторонних бактерий, находящихся в слюне. Пастеру удалось установить, что возбудитель бешенства находится в нервных клетках. Это открытие позволило заражать кроликов и собак материалом, в котором не содержалось посторонних микроорганизмов. Для приготовления такого материала использовали высушенные клетки больных животных. Учёный открыл, что наиболее верный способ заражения бешенством лабораторных животных заключается во введении материала, содержащего возбудитель, непосредственно в мозг. Заражая кролика суспензией мозга бешеной собаки, а затем, перевивая (пассируя) вирус от кролика к кролику путём внутримозгового заражения суспензией мозга погибших от бешенства кроликов, Пастер установил, что после ряда последовательных заражений инкубационный период заболевания постепенно сокращался и, в конце концов, не превышал 7 дней. Полученный в этих опытах стабилизированный вирус, вирулентность которого уже больше не снижалась, был назван Пастером «фиксированным вирусом бешенства»  в отличие от «вируса уличного бешенства». Таким образом, были созданы предпосылки для экспериментального изучения этой болезни. Пастер заметил, что вирус, содержащийся в мозге, постепенно теряет свои вирулентные свойства в процессе высушивания кусочков мозга в стерильных условиях. Учёный подвешивал эти кусочки в стерильные флаконы с каустической содой на дне, которая поглощала влагу. По мере обезвоживания мозга вирулентность вируса всё более понижалась и через 14 дней полностью исчезала. Пастер произвёл следующий эксперимент: собакам под кожу вводили сначала суспензию мозга кролика, высушенного за 14 дней, на второй день – за 13 дней, на третий – за 12 и т.д., вводя в последний день вакцинации препарат мозга животных, погибших от бешенства, не заболевали. Пастер выявил, что вакцинация собак сразу после укуса их бешеным животным предохраняет их от заболевания. Таким образом, суспензию высушенного мозга кроликов Пастер рассматривал как ослабленную живую вакцину против бешенства. Он провёл серию опытов по предохранению животных от бешенства. Они дали блестящие результаты. Но вставал вопрос: предохранит ли вакцина от бешенства человека? После долгих размышлений и опасений с помощью и при моральной поддержке Ж. Гранше и других учёных Пастер решился на прививку человеку. Большую роль здесь сыграл случай с девятилетним мальчиком Жозефом Мейстером, укушенным двумя днями ранее бешеной собакой. Обезумевшая от страха за жизнь ребёнка мать умоляла Пастера сделать прививку её сыну. После мучительных колебаний Пастер решил применить для спасения пострадавшего спустя два дня свой метод вакцинации. В результате мальчик, не смотря на тяжесть укусов, бешенством не заболел. День 6 июля 1885 г., когда впервые был вакцинирован против бешенства человек, вошёл в историю науки, и в частности в историю пастеровских прививок против бешенства, как знаменательная дата. «Этот ребёнок,  писал Луи Пастер, был повален собакой на землю и получил много ран от укусов на руке, голенях, бёдрах; некоторые из них были настолько глубоки, что мешали ему ходить… Смерть этого ребёнка представлялась неизбежной, и я решил, не без сильных и мучительных сомнений, как легко себе представить, испытать на Мейстере метод, который мне всегда удавался на собаках». Несколько месяцев спустя вакцина против бешенства была введена пятнадцатилетнему пастуху Жюпилю, сильно искусанному бешеной собакой. Несмотря на то, что вакцинацию начали только спустя шесть дней после укусов, заболевания не наступило. Выздоровев, Жюпиль остался работать служителем в лаборатории Пастера. Весть о спасении Мейстера и Жюпиля быстро разнеслась по всему миру. Вскоре после опубликования первых сообщений Пастера о предохранительных прививках против бешенства к нему начали отовсюду приходить люди, пострадавшие от укусов бешеных животных. Уже к 1 марта 1886 года в Париже было с успехом вакцинировано 350 человек. В марте 1886 г. В Париж пешком прибыли 19 русских крестьян из Смоленской губернии. Большинство из них страдало от ужасных ран, нанесённых бешеным волком. Вакцинация, сделанная Пастером, дала блестящие результаты. Прививки против бешенства с успехом стали проводиться в России (июнь 1886 г., Одесса) и в других странах. Благодаря успеху вакцинации новое средство борьбы с самыми страшными инфекциями прошлого вызывало у врачей и населения доверие. Пастеровские прививки, т.е. использование микробов против микробов, явились поистине величайшим благодеянием для всех, кому угрожала гибель от бешенства. Однако были и противники метода вакцинации Пастера. В частности, известный бактериолог Роберт Кох (1843 – 1910) и его ученики считали, что человек, получивший предохранительную прививку, может умереть от бешенства, поскольку вирус в противоядии полностью не уничтожен. Поводом к такому недоверию послужила смерть девочки Луизы Пеллетье, которая, несмотря на прививки Пастера, умерла от укусов бешеной собаки в страшных мучениях. Оппонентов Пастера не интересовало то обстоятельство, что девочку всё равно никто не мог бы спасти (прошло 37 дней с момента укуса, а не 14, в которые можно «обогнать» начало заражения). Пастер сделал прививки только из чувства долга, сам не веря в исцеление. Против нападок противников друзья и коллеги Пастера выдвинули цифры, факты, примеры. Знаменитые медики доказывали правоту Пастера не менее горячо, чем свою правоту – нападавшие. Поддержка Пастеру неожиданно пришла от молодого австрийского врача Ульмана, ставшего впоследствии хирургом и профессором. Он явился к Пастеру и сказал: «Меня не кусала собака, ни бешеная, ни подозреваемая в бешенстве. Проведите на мне предохранительную прививку – мы увидим, умру ли я от этого. Я так убеждён в правильности прививок, что охотно предоставляю себя в ваше распоряжение». Пастер согласился, и тотчас же была произведена первая прививка. В последующие дни Ульману сделали ещё десять прививок, и он остался здоровым. Так была доказана безопасность вакцины против бешенства. Прежде чем Ульман покинул Париж, он получил от Пастера кролика, которому привили вирус бешенства. Этот кролик стал источником материала для предохранительных прививок, которые позднее были проведены в Вене. По справедливому мнению знаменитого русского учёного – ботаника К.А. Тимирязева (1843 – 1920), прививки против бешенства были «высшей точкой научной деятельности Пастера и его славы. Имя его стало достоянием всех людей, как ценящих науку, так и равнодушных к ней. Выражением всеобщего увлечения его открытиями явилась международная подписка на постройку достойной его лаборатории,  этого знаменитого Пастеровского института, которому суждено играть такую роль в будущих судьбах созданной Пастером новой науки». Работы великого французского естествоиспытателя находили доброжелательный отклик у русских учёных. Открытиями Пастера не только интересовались, их принимали и развивали. В 1886 г. В Одессе была открыта вторая в мире прививочная пастеровская станция. А чтобы досконально, «из первых рук», изучить метод прививок против бешенства, в Париж был отправлен Н.Ф.Гамалея (1858 – 1949), впоследствии известный русский микробиолог и эпидемиолог. Пастер не только передал все свои «секреты» русскому учёному, но и принял непосредственное участие в создании пастеровской станции в России: он снабдил Гамалею всеми необходимыми материалами. Многие другие микробиологи, которые впоследствии внесли большой вклад в науку, прошли обучение у Пастера. В 1888 г. в Париже на деньги, собранные по международной подписке, был основан специальный институт для вакцинации людей, укушенных бешеными собаками, для изучения инфекционных заболеваний и преподавания микробиологии. Россия внесла по международной подписке 200 тыс. франков на организацию этого института. По предложению Французской академии наук этот институт был назван институтом Пастера. Торжественное открытие его состоялось 14 ноября 1888 г. Л.Пастер был его первым директором. Институт состоял из шести отделов: бешенства (руководитель – профессор Ж. Гранше), общей микробиологии (руководитель – проф. П. Дюкло), промышленной микробиологии (директор – Э. Ру), микробиологии и гигиены (руководитель – Ш. Шамберлан), морфологической микробиологии (директор – И.И.Мечников), сравнительной микробиологии (руководитель – Н. Ф. Гамалея). В течение длительного времени институт Пастера был важнейшим мировым центром микробиологических исследований. В 1888 г. здоровье Пастера ухудшилось, он уже не мог работать сам, однако до самой смерти внимательно следил за работами своих сотрудников и учеников. Французская академия наук избрала его своим членом. В 1892 г., в день семидесятилетия, Пастеру в Сорбонне была вручена юбилейная медаль. Умер Луи Пастер в 1895 г. в маленьком домике на окраине Парижа. Около него были жена, его друзья и соратники, впоследствии продолжавшие исследования гениального учителя.

Список литературы:

1. Крупальник В.Л. Эпизоотологическая ситуация и эффективность проводимых мероприятий против бешенства в России. 2006.

2. Макаров В.В. Реальная эпизоотология бешенства. Вестник Российской академии сельскохозяйственных наук. 2002. 4.

3. Мовсеянц А.А. Современные проблемы бешенства. Ветеринарные и медицинские аспекты зооантропонозов. 2003.

4. Недосеков В.В. Современные вакцины против бешенства. Ветеринария. 2003. 8.

5. Грибенча С.В-//Вопросы вирусологии. 1988. 33, 4.

6. Заводских А.В. Видовая эволюция бешенства животных в Московской области Болезни диких животных / Всерос. науч.-исслед. ин-т ветеринар. вирусологии и микробиологии. -Покров, 2004. - С. 42-45

7. Недосеков В.В. ВНИИВВиМ Современные вакцины против бешенства животных Ветеринария, 2003; N 8. - С. 23-25

8. Макаров В.В.; Воробьев А.А. Актуальные проблемы бешенства: природная очаговость, методология исследований и контроля в центре России Журн.микробиологии,эпидемиологии и иммунобиологии, 2005; N 1. - С. 89-95

9. Эпизоотическая ситуация по бешенству в России (1991-2002 гг.). Сообщ.2. Эпизоотологические аспекты / Дудников С.А. Актуал.пробл.инфекц.патологии животных. -Владимир, 2003. - С. 108-112