Забыли пароль?
Регистрация
О компании
Доставка
Каталог товаров  
Контакты
Задать вопрос
Как сделать заказ
Рекомендации
Партнёрам
Получить консультацию

7. Сущность понятий минимальная ингибирующая (подавляющая) концентрация и минимальная бактерицидная концентрация. Минимальная ингибирующая концентрация антибиотика


7. Сущность понятий минимальная ингибирующая (подавляющая) концентрация и минимальная бактерицидная концентрация.

Минимальная ингибирующая концентрация (МИК)– минимальная концентрация химиотерапевтического или антисептического вещества, вызывающаяПолное подавлениезаметного невооруженным глазомРостаданного микроорганизма на средах в стандартных условиях опыта.

Измеряется в мкг/мл или в ед. действия. Устанавливается посевом испытуемой культуры на плотные или жидкие среды, содержащие различные концентрации препарата.

Минимальная бактерицидная концентрация (МБК)– минимальная концентрация химиотерапевтического или антисептического средства, вызывающаяПолную гибельбактерии в стандартных условиях опыта.

Измеряется в мкг/мл или ед. действия. Устанавливается посевом испытуемой культуры на плотные или жидкие питательные среды, содержащие различные концентрации препарата. Для отличия от МИК из стерильных зон или прозрачных пробирок делают высев на среды без препарата (появление роста указывает на статическое действие, отсутствие его – на цидное).

МБК и МИК используют в химиотерапии и антисептике для выбора эффективных для данного больного препаратов и доз.

8.Сущность понятий чувствительность и резистентность возбудителя, постантибиотический эффект.

Чувствительность возбудителя– отсутствие у него механизмов резистентности к ХС; при этом размножение возбудителя подавляется средней терапевтической дозой, превышающей минимальную ингибирующую концентрацию в 2-4 раза.

Резистентность возбудителя– наличие механизмов резистентности к ХС; рост возбудителя не подавляется концентрацией препарата, оказывающей токсический эффект in vivo.

Постантибиотический эффект - персистирующее ингибирование жизнедеятельности бактерий после их кратковременного контакта с антибактериальным препаратом.

9. Детерминанты избирательной токсичности химиотерапевтических средств.

1) ХС накапливаются в микробных клетках в концентрациях во много раз больших, чем в клетках млекопитающих

2) ХС действуют на структуры, которые имеются только в микробной клетке (клеточная стенка, ДНК-гираза II типа) и отсутствуют в клетке млекопитающих

3) ХС действуют на биохимические процессы, протекающие исключительно в микробных клетках и отсутствующие в клетках млекопитающих.

10. Сущность различия фармакодинамических и химиотерапевтических свойств.

1. Фармакодинамическая терапия оперирует на уровне архитектуры функциональных систем, ее эффекты, как правило, обратимы. Для химиотерапии же наиболее ценны агенты с максимально необратимым действией.

2. Фармакодинамические средства вызывают градуальный ответ системы организма, для химиотерапевтических средств наиболее желательные эффекты «все или ничего».

3. Химиотерапия имеет этиотропную стратегию, направленную на уничтожение возбудителя или на трансформированные клетки организма, а фармакодинамическая терапия может быть как этиотропной, так и патогенетической.

11. Основные принципы рациональной химиотерапии.

1. Возбудитель должен быть чувствителен к АБ

Правило «наилучшего предложения» - референтные таблицы с учетом региональных популяционных особенностей антибактериальной чувствительности.

2. АБ должен созадвать терапевтическую концентрацию в очаге.

3. Преимущественно адекватный режим дозирования в зависимости от:

ü возбудителя

ü динамики клинического течения инфекции

ü локализации инфекции

ü длительности и характера течения инфекции (острая, хроническая или бактерионосительство)

4. Оптимальная продолжительность противомикробной химиотерапии (пример: стрептококковый фарингит излечим за 10 сут, острый неосложеннный гонококковый уретрит за 1-3 дня, острый несоложненный цистит за 3 дня).

Для предупреждения побочных реакций, развития суперинфекции или резистентности продолжительность лечения должна соответствовать периоду эрадикации возбудителя.

5. Учет факторов пациента:

ü аллергоанамнез, иммунокомпетентность

ü функция печени и почек

ü переносимость АБ при пероральном приеме; комплаентность

ü тяжесть состояния

ü возраст, пол, наличие беременности или вскармливания ребенка, прием пероральных контрацептивов

ü побочные эффекты

6. Комбинированная антибиотикотерапия.

studfiles.net

Дополнительный материал к занятию. Критериями антимикробной активности препарата являются минимальная ингибирующая

Критериями антимикробной активности препарата являются минимальная ингибирующая концентрация (МИК) и минимальная бактерицидная концентрация (МБК). МИК – это наименьшая концентрация антибиотиков, которая invitro полностью подавляет видимый рост бактерий. Она выражается в мг/л или мкг/мл. МБК – это наименьшая концентрация антибиотика, которая вызывает бактерицидный эффект. Для её определения необходимо провести высев из пробирок, в которых визуально отсутствует рост, на плотный питательный агар, не содержащий антибиотик. Этот показатель имеет большое клиническое значение. На основе метода серийных разведений созданы микрометоды, предусматривающие использование меньшего объёма питательной среды. В настоящее время для проведения такого рода исследований выпускаются многочисленные коммерческие наборы, состоящие из высушенных стабилизированных разведений антибиотиков в питательной среде, которые разбавляются суспензией тест-микроба. Данные наборы могут храниться в обычных условиях, вследствие чего исключается необходимость в приготовлении разведений среды и антибиотиков в лабораторных условиях. Достоинством тестов микроразведений является также то, что они включаются в автоматизированную систему.

На основании полученных данных (диаметра зоны задержки роста или величины МИК) микроорганизмы подразделяют на чувствительные, умеренно-резистентные и резистентные. Для разграничения этих категорий используют так называемые пограничные концентрации антибиотиков, которые не являются неизменными величинами. Они пересматриваются по мере изменения чувствительности популяции микроорганизмов. Разработкой и пересмотром критериев интерпретации занимаются ведущие специалисты (химиотерапевты, микробиологи), входящие в специальные комитеты. Одним из них является национальный комитет по клиническим лабораторным стандартам (NationalCommitteeforClinicalLaboratoryStandards – NCCLS), организованный в США. В настоящее время стандарты NCCLS используются как международные для оценки результатов определения чувствительности бактерий при многоцентровых микробиологических и клинических исследованиях.

Определение чувствительности бактерий к антибиотикам.Критерием чувствительности микроорганизмов к антибиотикам является минимальная ингибирующая концентрация (МИК) антибиотика, задерживающая рост возбудителя при стандартных условиях постановки опыта.

Для определения лекарственной устойчивости используют суточную чистую культуру возбудителя, выделенную из организма больного, и стандартную питательную среду (АГВ или Мюллер-Хинтон агар) для её посева.

Определение чувствительности микроорганизмов к антибиотикам проводят диско-диффузионным методом или методом серийных разведений антибиотика в жидких или плотных средах.

Диско-диффузионный метод.Определение чувствительности к антибиотикам методом бумажных дисков основано на диффузии антибиотика в питательную среду. Концентрация антибиотиков в дисках подобрана таким образом, чтобы диаметры зон задержки роста стандартных тест-микроорганизмов соответствовали международным стандартам. Эта концентрация соответствует средней терапевтической дозе для стандартных штаммов микроорганизмов.

Приготовленную взвесь микроорганизмов засевают на поверхность специальной среды (АГВ или агар Мюллер-Хинтона) в чашки Петри. Затем стерильным пинцетом на засеянную поверхность помещают на равном расстоянии друг от друга, от краёв и центра чашки стандартные бумажные диски, пропитанные растворами различных антибиотиков (также можно использовать специальные устройства и диспенсеры). Засеянные чашки выдерживают в термостате при температуре, оптимальной для роста исследуемых бактерий. Если бактерии чувствительны к данному антибиотику, то вокруг диска образуется зона задержки роста. Диаметр зоны задержки роста соответствует степени чувствительности исследуемого микроорганизма к данному антибиотику. Окончательный результат оценивается по специальным таблицам, в которых указаны диаметры зон задержки роста стандартных культур, чувствительных, устойчивых и умеренно-устойчивых.

Метод дисков не даёт надежных данных при определении чувствительности микроорганизмов к плохо диффундирующим в агар полипептидным антибиотикам (например, полимиксину, ристомицину). Также этот метод не позволяет определить минимальную подавляющую концентрацию антибиотика.

Метод серийных разведений.Данным методом определяют минимальную концентрацию антибиотика, ингибирующую рост исследуемой культуры бактерий (МПК, МИК). Для этого вначале готовят основной раствор, содержащий определенную концентрацию антибиотика (мкг/мл или ед/мл) в специальном растворителе или буферном растворе. Далее из основного раствора готовят все последующие разведения в бульоне (в объёме 1 мл), после чего к каждому разведению добавляют 0,1 мл исследуемой бактериальной суспензии, содержащей 106-107 бактериальных клеток в 1 мл. В последнюю пробирку вносят 1 мл бульона (без антибиотика) и 0,1 мл суспензии бактерий (контроль культуры). Посевы инкубируют при 370С до следующего дня, после чего отмечают результаты опыта по помутнению питательной среды, сравнивая с контролем. Последняя пробирка с прозрачной питательной средой указывает на задержку роста исследуемой культуры бактерий, под влиянием содержащейся в ней минимальной подавляющей (ингибирующей) концентрации (МПК, МИК) антибиотика. Для оценки минимальной бактерицидной концентрации (МБК) производят высев на плотную питательную среду без антибиотика из пробирок с отсутствием роста. За МБК принимают минимальную концентрацию антибиотика, вызывающую гибель микроорганизма, что характеризуется отсутствием роста на чашках Петри с питательной средой.

Метод серийных разведений антибиотика в агаризованной среде.В этом случае можно в одном опыте проверить чувствительность к разным концентрациям данного антибиотика нескольких культур микроорганизмов. Различные разведения антибиотика готовят в стерильной агаризованной среде. Для этого в неё добавляют требуемое количество исходного раствора антибиотика, тщательно перемешивают и заливают в стерильные чашки Петри. После застывания агара дно чашки с наружной стороны делят маркером на сектора. Каждую исследуемую культуру засевают штрихом с помощью бактериологической петли на определённый сектор в чашки с разными концентрациями антибиотика. Посев исследуемых культур на чашки с различными концентрациями антибиотика можно сделать с помощью аппликатора, позволяющего засевать одновременно 12-15 культур на одну чашку. Затем чашки помещают в термостат при температуре, оптимальной для роста и развития изучаемых бактерий. Результаты учитывают по наличию или отсутствию роста бактерий в сравнении с ростом на среде в контрольной чашке. Бактерии считаются чувствительными к антибиотику в такой его концентрации, при которой их рост полностью подавляется.

Метод Е-тестов.Данный метод сочетает в себе достоинства метода серийных разведений и метода дисков. Вместо дисков используются полоски («линейки») фильтровальной бумаги, пропитанные антибиотиком, причем у основания полоски концентрация антибиотика будет минимальной, а на «верхушке» – максимальной. Полоски помещают на поверхность питательного агара, засеянного исследуемой культурой. Если бактерии чувствительны к действию данного препарата, вокруг участков полоски, содержащих его ингибирующие концентрации, возникает эллипсовидная зона задержки роста. Числовое значение концентрации антибиотика у основания этой зоны указывает на МПК данного антибиотика для данной культуры.

К чувствительным относятся штаммы микроорганизмов, рост которых подавляется при концентрациях препарата, обнаруживаемых в сыворотке крови больного при использовании обычных доз антибиотиков.

К умеренно устойчивым относятся штаммы, для подавления роста которых требуются концентрации, создающиеся в сыворотке крови при введении максимальных доз препарата.

Устойчивыми являются микроорганизмы, рост которых не подавляется препаратом в концентрациях, создаваемых в организме при использовании максимально допустимых доз.

 

Контрольные вопросы.

Дайте определение понятия «антибиотики». Основные группы антибиотиков в зависимости от способа получения: природные, полусинтетические, синтетические. Назовите фамилию учёного, разработавшего теорию химиотерапии. Какие свойства являются определяющими при выборе химиотерапевтического препарата? Что такое химиотерапевтический индекс, напишите его формулу, каким он должен быть? Укажите первые антиспирохетозные препараты; первый антибактериальный препарат и фамилию учёного, получившего его. Назовите фамилии русских учёных, впервые обнаруживших антибактериальные свойства зелёной плесени. Назовите фамилию учёного, изучавшего антибактериальные свойства плесневого гриба Penicillium и сделавшего попытку выделить пенициллин. Учёные, впервые получившие препараты пенициллина. Продуценты антибиотиков - приведите примеры. Классификация антибиотиков по происхождению, химическому составу, по спектру действия. Механизм действия антибиотиков: мишени (точки приложения антибиотиков различных групп). Типы действия - бактерицидное и бактериостатическое; как в опыте in vitro определить их? Противовирусные антибиотики, механизмы их действия. В каких единицах измеряется активность антибиотиков? Условия хранения антибиотиков.

Назовите и охарактеризуйте возможные побочные явления при антибиотикотерапии. Дайте определение понятия «лекарственная устойчивость микробов». Виды лекарственной устойчивости. Природная и приобретённая (первичная и вторичная). Генетические механизмы лекарственной устойчивости: хромосомная и плазмидная. Фенотипические механизмы лекарственной устойчивости - назовите и охарактеризуйте. Рациональное применение антибиотиков - назовите способы. Назовите препараты - ингибиторы ферментов, разрушающих антибиотики. Опишите методы определения чувствительности микробов к антибиотикам.

 

megaobuchalka.ru

минимальная ингибирующая концентрация - это... Что такое минимальная ингибирующая концентрация?

 минимальная ингибирующая концентрация minimal inhibiting concentration - минимальная ингибирующая концентрация.

Показатель действия антибиотика на бактериальную культуру, равный его минимальной концентрации, при которой происходит полное угнетение роста бактерий.

(Источник: «Англо-русский толковый словарь генетических терминов». Арефьев В.А., Лисовенко Л.А., Москва: Изд-во ВНИРО, 1995 г.)

.

  • minimal inhibiting concentration
  • minimal medium

Смотреть что такое "минимальная ингибирующая концентрация" в других словарях:

  • минимальная ингибирующая концентрация — Показатель действия антибиотика на бактериальную культуру, равный его минимальной концентрации, при которой происходит полное угнетение роста бактерий. [Арефьев В.А., Лисовенко Л.А. Англо русский толковый словарь генетических терминов 1995 407с.] …   Справочник технического переводчика

  • Минимальная ингибирующая (биостатическая, подавляющая) концентрация (МИК, МПК) — минимальная концентрация химиотерапевтического или антисептического вещества, вызывающая полное подавление заметного невооруженным глазом роста данного микроорганизма на средах в стандартных условиях опыта. Измеряют в мкг/мл или в ед. действия… …   Словарь микробиологии

  • минимальная ингибирующая (подавляющая) концентрация — МИК Наименьшая концентрация лекарственного препарата, угнетающая рост микроорганизмов при культивировании. [Англо русский глоссарий основных терминов по вакцинологии и иммунизации. Всемирная организация здравоохранения, 2009 г.] Тематики… …   Справочник технического переводчика

  • Монурал — МОНУРАЛ® MONURAL® Регистрационный номер: П № 012976X01 Торговое название: Монурал Международное непатентованное название: Фосфомицин Лекарственная форма: гранулы для приготовления раствора для внутреннего применения. Состав: 1 пакет содержит:… …   Википедия

  • Монурал — Действующее вещество ›› Фосфомицин* (Fosfomycin*) Латинское название Monural АТХ: ›› J01XX01 Фосфомицин Фармакологическая группа: Другие антибиотики Нозологическая классификация (МКБ 10) ›› N30 Цистит ›› N34 Уретрит и уретральный синдром ›› N999* …   Словарь медицинских препаратов

  • minimal inhibiting concentration — minimal inhibiting concentration. См. минимальная ингибирующая концентрация. (Источник: «Англо русский толковый словарь генетических терминов». Арефьев В.А., Лисовенко Л.А., Москва: Изд во ВНИРО, 1995 г.) …   Молекулярная биология и генетика. Толковый словарь.

  • ЭНДОКАРДИТ ИНФЕКЦИОННЫЙ — мед. Инфекционный эндокардит (ИЭ) воспалительное заболевание эндокарда (клапанов, реже пристеночного) в результате инфицирования микроорганизмами (бактерии, грибы и риккетсии). Частота 0,03 0,3% всех госпитализированных больных. Классификация.… …   Справочник по болезням

  • MIC — abbr. comp. Message Integrity Check comp. Microelectronic Integrated Circuit comp. Microwave Integrated Circuit comp. Middle In Chain comp. Monolithic Integrated Circuit med. Minimum Inhibitory Concentration – минимальная ингибирующая… …   Dictionary of English abbreviation

  • МиК — Маркетинг и консалтинг информационное агентство http://www.iamik.ru/​ МИК Московская инвестиционная корпорация Москва, организация Словарь: С. Фадеев. Словарь сокращений современного русского языка. С. Пб.: Политехника, 1997. 527 с …   Словарь сокращений и аббревиатур

  • МИК — (МБК) аббревиатура понятия «минимальная ингибирующая (биостатическая) концентрация». (Источник: «Словарь терминов микробиологии») …   Словарь микробиологии

dic.academic.ru

Минимальная бактерицидная концентрация (мбк)

Наименьшая концентрация антибиотика, которая при исследовании in vitroвызывает гибель 99,9% микроорганизмов от исходного уровня в течение определенного периода времени, бактерицидные (МБК) в отношении популяции микроорганизмов в целом. Измеряется в мкг/мл или мг/л.

Минимальная подавляющая концентрация (МПК)

Наименьшая концентрация антибиотика, способная подавить видимый рост микроорганизма in vitro. Измеряется в мкг/мл или мг/л.

МПК50

Минимальная подавляющая концентрация антибиотика для 50% исследованных штаммов. Измеряется в мкг/мл или мг/л.

МПК90

Минимальная подавляющая концентрация антибиотика для 90% исследованных штаммов. Измеряется в мкг/мл или мг/л.

Метициллинорезистентный S.aureus (MRSA)

Штаммы S.aureus, резистентные к метициллину (оксациллину). Истинные MRSA содержат ген резистентностиmecA, обусловливающий изменениеПСБ. MRSA нечувствительны ко всем β-лактамным антибиотикам:пенициллинам, в том числеингибиторозащищенным,цефалоспоринам I-IV поколенийикарбапенемам. Кроме того, MRSA обычно резистентны к антибиотикам других классов (макролидам,линкоcамидам,тетрациклинам,аминогликозидами др.), поэтому их иногда называют "множественно-резистентные стафилококки".

Национальный Комитет по клиническим лабораторным стандартам, США

Национальный комитет по клиническим лабораторным стандартам США- организация, занимающаяся разработкой стандартов лабораторных исследований для лабораторий различного профиля, в том числе микробиологических лабораторий. Стандарты NCCLS наиболее широко используются в мире.

Неферментирующие бактерии

Грамотрицательные бактерии, не ферментирующие глюкозу. К этой группе относятся Pseudomonasspp.,Acinetobacterspp.,Stenotrofomonasspp. и некоторые другие.

Пенициллинорезистентный S.pneumoniae

Штаммы S.pneumoniae, обладающие сниженной чувствительностью кпенициллину. Выделяют пневмококки умереннорезистентные (МПКпенициллина0,12-1,0 мг/л) и резистентные (МПК2 мг/л).

Пенициллинорезистентный S.aureus

Штаммы S.aureus, резистентные кпенициллинуи другим β-лактамазо-нестабильнымпрепаратам пенициллинового ряда(ампициллин, амоксициллин, карбенициллин, азлоциллин и др.) за счет продукции стафилококковыхβ-лактамаз(пенициллиназ).

Пенициллиносвязывающий белок (ПСБ)

Мишень действия β-лактамных антибиотиков. ПСБ называют ферменты микроорганизмов (транспептидазы и карбоксипептидазы), отвечающие за синтез пептидогликана клеточной стенки бактерий. β-лактамы, связываясь с ПСБ, блокируют их действие, нарушая таким образом синтез клеточной стенки бактерий.

Перекрестная резистентность (ПР)

Резистентность микроорганизма к антимикробным препаратам одного химического класса (например, к нескольким представителям аминогликозидов, несколькимфторхинолонами т.д.).

Пограничные значения (ПЗ)

Пограничные значения диаметров зон подавления роста микроорганизмов или МПК антибиотиков, в соответствии с которыми штаммы подразделяют на три категории: чувствительные, умереннорезистентные и резистентные.

Постантибиотический эффект (ПАЭ)

Временное прекращение размножения микроорганизмов (в сравнении с контрольной популяцией, содержащей такое же число микроорганизмов) после ограниченного периода воздействия антибиотика. Измеряется в единицах времени - минутах или часах (мин и ч).

"Привередливые" ("прихотливые") микроорганизмы

Микроорганизмы, не растущие на простых питательных средах и требующие обогащения их специальными добавками (кровью, сывороткой крови, витаминами и т.п.) и создания особого состава атмосферы инкубации (5% CO2). К ним относятсяStreptococcusspp., включаяS.pneumoniae, гемофильная палочка, гонококки и др.

Резистентный микроорганизм

Микроорганизм считается резистентным к антибиотику, если он имеет механизмы резистентности к данному препарату, и при лечении инфекций, вызванных этим возбудителем, нет клинического эффекта от терапии даже при использовании максимальных терапевтических доз антибиотика.

S.aureus с промежуточной резистентностью к ванкомицину или S.aureus с промежуточной резистентностью к гликопептидам

Штаммы S.aureusс промежуточной резистентностью кгликопептидным антибиотикам(ванкомицину и тейкопланину). Характеризуются значениямиМПКванкомицина8-16 мг/л.

Умереннорезистентный микроорганизм

Микроорганизм считается умеренно-резистентным к антибиотику, если по своей чувствительности он занимает промежуточное положение между чувствительными и резистентными штаммами, и при лечении инфекций, вызванных этим возбудителем, хорошая клиническая эффективность наблюдается только при использовании высоких терапевтических доз препарата, или при локализации инфекции в месте, где антибиотик накапливается в высоких концентрациях.

Фармакодинамика антибактериальных препаратов

Один из основных разделов клинической фармакологии, изучающий фармакологические, терапевтические и токсические эффекты лекарственных средств, механизмы их действия, связь структуры и активности, соотношение доза-эффект или концентрация-эффект. Так как антибиотики представляют собой уникальную группу лекарственных средств, действующих в системе "организм человека - микроорганизм - лекарственный препарат", то их фармакодинамика заключается в действии на микроорганизмы, а также в изменении их активности в зависимости от механизмов резистентности. Непосредственные и опосредованные эффекты на клетки и физиологические функции организма человека следует рассматривать как НР или побочные эффекты.

studfiles.net

Способ определения минимальной ингибирующей концентрации антибиотиков

 

СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ШНКМАЛЬНОЙ ИНГИБИРУЩЕЙ КОНЦЕНТРАЦИИ АНТИБИОТИКОВ , включающий их кратное разведение , стабилизацию, высушивание, добавление культуры микроорганизмов и термостатирование, отличающийся тем, что, с целью ускорения и упрощения способа, раствор антибиотика стабилизируют смесью, содержащей глюкозу, фенолрот, сахарозу , поливиниловый спирт, буферный раствор, при следующем соотношении компонентов, мас.%: Антиби.отик 0,00000025-0,000016 1,4-1,6 Глюкоза 0,015-0,025 Фенолрот О,14-0,16 Сахароза Поливиниловый 0,9-1,1 спирт Буферный Остальное раствор затем полученную смесь наносят на Ь гидрофобную поверхность бумажного диска, высушивают на воздухе, далее добавляют каплями суспензию микроорганизмов и по изменению цвета инди-каторной бляшки определяют минимальную ингибирующую концентрацию антибиотика . СП tc ел

„„SU„„11 1 A

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (SlI4 С 12 Q 1/04

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К ABTQPGHOMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ зу, поливиниловый спирт, буферный раствор, при следующем соотношении компонентов, мас.7:

Антибиотик 0,00000025-0,0000 16

1,4-1,6

0,015-0,025

О, 14-0, 16

0,9 — 1,1

Буферный раствор

Остальное затем полученную смесь наносят на гидрофобную поверхность бумажного диска, высушивают на воздухе, далее добавляют каплями суспензию микроорганизмов и по изменению цвета инди-каторной бляшки определяют минимальную ингибирующую концентрацию антибиотика.

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 3679329/28-13 (22) 27. 12. 83 (46) 07.08.85. Бюл. М 29 (72) В.M. Никитин и С.И. Замфир (71) Кишиневский государственный медицинский институт (53) 576.8(088.8) (56) Патент СПА Н 3957583, кл. С 12 q 1/04, 1976.

Патент США N 4153512, кл. 195-103.5, 1976 (прототип). (54) (57) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ МИНИМАЛЕН>НОЙ ИНГИБИРУЮЩЕЙ КОНЦЕНТРАЦИИ АНТИБИОТИКОВ, включающий их кратное разведение, стабилизацию, высушивание, добавление культуры микроорганизмов . и термостатирование, о т л и ч а ю— шийся тем, что, с целью ускорения и упрощения способа, раствор антибиотика стабилизируют смесью, содержащей глюкозу, фенолрот, сахароГлюкоза

Фенолрот

Сахароза

Поливиниловый спирт

1171525

Составитель Л. Покрышкина

Редактор Н. Гунько Техред М.Гергель Корректор С. Шекмар

Заказ 4820/28 Тираж 525 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4

Изобретение относится к микробиологии и предназначено для ускоренного определения минимальной ингибирующей концентрации (МИК) антибиотика в отношении исследуемых культур микроорганизмов.

Цель изобретения — ускорение и упрощение способа.

Способ осуществляется следующим образом. 1О

Из бумаги, покрытой полимерной пленкой, вырезают диск диаметром

10 см и на его гидрофобной поверх— ности наносят 22 квадратных зоны площадью 1,5õ1,5 см, как указано на 15 чертеже. В фарфоровую ступку берут навеску следующих порошков, r: глюкоза 1,5; сахароза 0,15; фенолрот

0,02; поливиниловый спирт 1, растирают до получения мелкодисперсной щ пудры красного цвета, которую растворяют в 98 мл фосфатного буферного раствора рН 8,0 на водяной бане при подогревании до 100 С. о

Отобранные антибиотики в стандарт-2 ных флаконах разводят стерильной дистиллированной водой с таким расчетом, чтобы после добавления 0,1 мл раствора антибиотика в 0,9 мл приготовленного ранее субстратно-индикаторноклеющего раствора со стабилизатором в 1 мл полученной смеси содержалось соответственно ?00, 100, 50, 25 и 12,5 ЕД. В центр каждой зоны микропипеткой наносят по 0,02 мл смеси с антибиотиком согласно обозначениям

35 на диске, за исключением контрольных зон КК и КФ, где размещают только субстратно-индикаторно-клеющий раствор со стабилизатором (0,02 мл). Подо, сушивают при 20 С до полного высыхания микрокапель, затем готовые тест-системы складывают в картонную коробку и хранят в холодильнике при

4-8 С.

В крышку чашки Петри укладывают готовую тест-систему и на каждую бляшку наносят по одной капле испытуемой микробной культуры. Применяют

18-часовую агаровую микробную кульз туру концентрацией 2 10 м. т. в 1 мл.

В контрольную зону КФ наносят каплю стерильного физиологического раствора. Чашку с пробами закрывают, предварительно размещая внутри по окружности смоченную водопроводной водой полоску фильтровальной бумаги, ино кубируют в термостате при 37 С 5 ч.

Учет результатов проводят визуально.

Изменение цвета капли из красного в желтый указывает на устойчивость испытуемой микробной культуры к соответствующим концентрациям данного антибиотика, а сохранение первоначального красного цвета — на ингибицию ферментативной активности и размножения микробной культуры соответствующей дозой антибиотика. Минимальную ингибирующую концентрацию антибиотика в отношении исследуемой микробной культуры определяют по величине ингибирующей дозы. Например, в каплях с концентрацией пенициллина от 0,25 до 1 ЕД окраска стала желтой, а с 2 ЕД и выше-красной, следовательно МИК пенициллина равняется 2 ЕД.

  

www.findpatent.ru


Смотрите также




г.Самара, ул. Димитрова 131
[email protected]