 |
|
|
|||||||||
|
37. Вакцинопрофилактика и вакцинотерапия. Вакцины химическиеЖивые, убитые, химические вакциныВакцинами, по предложению Л. Пастера, названы все прививочные препараты, получаемые из микроорганизмов, их антигенов и токсинов, которые применяются для активной иммунизации людей и животных с профилактическими и лечебными целями. Вакцины готовят из специально отобранных штаммов микроорганизмов, которые называют вакцинными. Эти штаммы прежде всего должны обладать полноценными иммуногенными свойствами и обеспечивать образование достаточного количества антител в организме человека. Большинство вакцин выпускается в форме лиофилизированных препаратов, т. е. высушенных из замороженного состояния в глубоком вакууме. Это обеспечивает их длительное сохранение без потери биологической активности. Каждая серия получаемой вакцины в производственных условиях подвергается тщательному контролю согласно регламенту, прежде всего на стерильность, иммуногенность и реактогенность. Живые вакцины. Вакцины этого типа приготавливают из специально полученных вакцинных штаммов микроорганизмов с резко ослабленной вирулентностью и хорошо сохранившимися иммуногенны-ми свойствами. В отличие от убитых живые вакцины создают более напряженный иммунитет, так как по существу они воспроизводят легко протекающий, не всетда уловимый инспекционный процесс, при котором функционируют все те же механизмы, которые участвуют в формировании посгинфекционною иммунитета. При этом напряженность поства-кцинального иммунитета зависит как от качества живой вакцины, так и 01 реактивности иммунной системы организма. Убитые вакцины. Данный тип вакцин представляет собой суспензию убитых микроорганизмов в растворе натрия хлорида. Их готовят из соогветствуютих видов микробов, обладающих максимально выраженными иммуногенными свойствами. Ипактивация вакцины проводится разными методами — высокой температурой, УФ-лучами, ультразвуком, химическими веществами (формалин, фенол, спирт и др.) — в условиях, исключающих денатурацию антигенов бактериальной клетки или вирусной частицы. К убитым вакцинам относятся вакцины против брюшного тифа и паратифов, холеры, коклюша, гриппа, клещевого энцефалита и др. Химические вакцины. Их готовят из отдельных антигенных компонентов микробной клетки, которая, как уже отмечалось, содержит большое количество различных антигенов. Однако не все они в одинаковой степени способствуют формированию иммунитета. Однако при введении подобных антшенов в организм они быстро рассасываются и не обеспечивают необходимого длительного иммуногенного раздражения. Поэтому к ним добавляют различные адъюванты (adjuvans - помогающий, ппддерживаюший). В качестве адъювантов применяют гидрат окиси алюминия, алюминиево-калиевые квасцы, кальция хлорид, минеральные я животные масла и др. Наиболее широко используются химические вакцины, полученные из брюшнотифозных и паратифозных бактерий, бацилл сибирской язвы. Анатоксины. Иммунитет при ряде заболеваний (дифтерия, столбняк, ботулизм и др.) носит преимущественно антитоксический характер. Поэтому для профилактики данных заболеваний вызывают образование не антимикробного, а антитоксическою иммунитета. Анатоксины очищают от балластных белков питательной среды и адсорбируют на депонирующих веществах (гидрат окиси алюминия, фосфат алюминия и др.). В настоящее время выпускают столбнячный, дифтерийный, ботулинический и другие анатоксины. По количеству содержащихся в вакцине антигенов различают моновакцины, приготовленные из одного возбудителя или антигена, дивакцины содержат два антигена, тривакцины — три антигена и т. д. Вакцины, содержащие антигены против нескольких инфекций, называются поливакцинами. Ассоциированные вакцины готовят из антигенов различных бактерий и анатоксинов. Например, дифтерийно-коклюшная вакцина содержит дифтерийный анатоксин и убитые бактерии коклюша. В ассоциированную коклюшно-дифтерийно-столбнячную вакцину (АКДС) добавляют столбнячный анатоксин. Ассоциированная тифопаратифозная вакцина содержит О-антигены бактерий брюшного тифа и паратифов и столбнячный анатоксин. Аутовакцина — особый вид вакцин. Ее готовят из микробов, выделенных от больного, и используют для лечения только данного больного. Чаще всего аутовакцины применяются для лечения хронических инфекций, вызванных стафилококками и другими бактериями. Принципы применения вакцин. Напряженность иммунитета при вакцинации взрослых и детей зависит от состояния иммунной системы организма, а также места, кратности и интервалов введения вакцин. Вакцинацию проводят различными путями: накожно, внутрикожно, подкожно, энтерально, на слизистую оболочку носа, аэрогенно и комбинированными методами. Безболезненным методом введения, который наиболее предпочтителен при иммунизации детей, является энтеральный способ. Широко используют в последнее время безыгольный внутрикожный метод введения вакцин, который совершенно безболезнен. Живые вакцины вводят чаще однократно (вакцина против паротита, полиомиелита и др.) или с последующей ревакцинацией (вакцины БЦЖ, против кори и др.). При употреблении некоторых видов вакцин даже с созданием депо однократное введение антигена не обеспечивает напряженного иммунитета, поэтому проводят ревакцинацию через определенные интервалы. Дозы антигена, условия и правила хранения вакцин указаны в специальных инструкциях, прилагаемых ко всем бактерийным препаратам. В связи с тем что искусственный иммунитет после вакцинации сохраняется сравнительно недолго, прививки против одного и того же заболевания проводят неоднократно. Вакцины применяют главным образом для профилактики инфекционных заболеваний: некоторые из них (вакцины против полиомиелита, АКДС и др.)— в обязательном порядке, другие — только по эпидемическим показаниям среди ограниченных групп населения, которым угрожает опасность заражения (вакцина против клещевого энцефалита, туляремии и т. д.). Для лечебных целей (вакцинотерапия) вакцины используют при хронических, вяло протекающих заболеваниях: фурункулез и другие стафилококковые инфекции, хроническая гонорея, бруцеллез и др. В этих случаях применяют стафилококковую аутовакцину, стафилококковый анатоксин, гонококковую, бруцеллезную убитые вакцины. Их лечебный эффект связан со стимуляцией иммунной системы и десенсибилизацией организма. Иммунные сыворотки и иммуноглобулины Введение специфических, антител в начальной стадии заболевания (серотерапия) или при непосредственной угрозе заражения (серопрофилактика) облегчает течение болезни в первом случае или предупреждает ее возникновение во втором. Иммунные сыворотки, содержащие специфические антитела, получают путем многократной иммунизации (гипериммунизации) лошадей или других животных, у которых можно взять сравнительно большое количество крови. Кроме того, сыворотка крови лошадей менее токсична для человека, чем сыворотка других животных. Из крови получают сыворотку, которую консервируют, проверяют на стерильность, безвредность, количество белка, прозрачность. Приготовленные таким методом нативные лечебные сыворотки содержат балластные белки, которые при введении человеку могут вызвать довольно тяжелые реакции (повышение температуры тела, боли) и сенсибилизацию организма. Для устранения этих осложнений разработаны методы концентрации сывороток и их очистки от альбуминов и других балластных белков путем осаждения аммония сульфатом, электрофорезом, ферментативным гидролизом, спирто-водными осадителями при низкой температуре и т. д. Антитоксические сыворотки выпускают с определенным содержанием антитоксинов, измеряемым в международных единицах (ME). Они обладают способностью нейтрализовать циркулирующие в организме токсины бактерий (например, возбудителей дифтерии, столбняка, анаэробной инфекции, ботулизма). Чем раньше от момента заражения вводят сыворотку, тем эффективнее ее действие. При запоздалом введении сыворотки, когда токсин соединился с клетками и вызвал в них необратимые изменения, лечебный эффект проявляется в меньшей степени или отсутствует. Сыворотку в организм человека вводят разными путями. Наиболее распространены внутримышечный и внутривенный способы введения. Дозы сыворотки определяют в зависимости от сроков ее введения от начала заболевания, состояния больного и клинического течения инфекционного заболевания. В настоящее время нативные антимикробные сыворотки используют для получения иммуноглобулинов. Иммуноглобулины приготовляют из сыворотки крови доноров, не иммунизированных или иммунизированных против различных болезней (гомологичные иммуноглобулины), а также из сыворотки гипериммунизированных животных (гетерологичные иммуноглобулины) методом водно-спиртового осаждения 7-глобулиновой фракции на холоду. Иммуноглобулины широко применяются для профилактики и лечения коклюша, скарлатины, кори, гриппа, вирусного гепатита и других инфекций у взрослых и детей. С этими же целями используют сывороточный полиглобулин (СПГ), содержащий смесь иммуноглобулинов к различным антигенам. Вводят иммуноглобулины в организм в небольших дозах (1—2 мл). Все иммуноглобулины, так же как нативные сыворотки, обладают аллергизирующим свойством, хотя оно выражено у них в меньшей степени. biofile.ru 91. Химические (субклеточные) вакцины. Получение. Преимущества. Применение. Роль адъювантов.Химическими вакцинами принято называть препараты, содержащие наиболее активные по иммунологическим свойствам антигены, извлекаемые из микробных клеток различными методами (например, ферментативным перевариванием с последующим осаждением антигена этиловым спиртом). Следует помнить, что термин «химическая» вакцина не вполне оответствует своему названию, так как такие вакцины не являются химическими веществами в чистом виде, а представляют собой группы антигенов, эндотоксины и т. д. Преимущество химических вакцин в том, что, во-первых, из микробных клеток выделяются иммунологически активные субстанции — изолированные антигены (комплекс—-липополисахариды с полипептидами или протективные антигены), во-вторых, они менее реактогенны, в-третьих, стабильны и легче подвергаются стандартизации, что дает возможность более точно дозировать, и, наконец, четвертое — химические вакцины можно вводить в больших дозах и в виде ассоциированных препаратов. Одним из недостатков химической вакцины являются не- большие размеры вводимых комплексов, что приводит к быстрому выведению их из организма и краткому антигенному раздражению. Поэтому химические вакцины вводятся на адъювантах (лат. adjuvans — помогающий), в качестве которых используются различные минеральные адсорбенты(гидрат окиси алюминия, фосфат кальция), минеральные масла. Адъюванты способствуют повышению эффективности вакцинации, так как они укрупняют антигенные частицы, создают в месте введения «депо», из которого происходит замедленная резорбция антигена, что приводит к перманентному антигенному раздражению. Кроме того, депонирующие вещества являются неспецифическими стимуляторами, вызывая приток плазматических клеток, непосредственно участвующих в выработке антител, что связано с развитием местного воспалительного процесса и стимуляции пролиферативной и фагоцитарной активности ретикуло-эндотелиальной системы. 92. Анатоксины, их получение, титрование и практическое применение.Анатоксины (anatoxinum от греч.— «an» — отрицание и toxo» — отравляю) представляют собой препараты, полученные из бактериальных экзотоксинов, полностью лишенные т ксических свойств, но сохранившие антигенные и иммуногенные свойства. Метод получения анатоксина предложил в 1923 году крупнейший французский ученый Рамон (G. Ramon).При приготовлении анатоксинов культуры бактерий — возбудителей токсинемических инфекций, продуцирующих экзотоксины, выращивают в жидких питательных средах (реакто- рах большой емкости) для накопления токсина. Затем фильтруют через бактериальные фильтры для удаления микробных тел. К фильтрату добавляют 0,3—0,4 % —формалина и помещают в термостат при температуре 37°—40°С н а 3—4 недели до полного исчезновения токсических свойств. Полученный анатоксин проверяют на стерильность, безвредность и иммуногенность. Такие препараты получили название нативных анатоксинов, т. к. они содержат большое количество веществ питательной среды, которые являются балластными и могут способствовать развитию нежелательных реакций организма при введении препарата. Нативные анатоксины необходимо вводить в больших дозах из-за их невысокой удельной активности. Поэтому в настоящее время применяются преимущественно очищенные анатоксины, для чего нативные анатоксины подвергают обработке различными физическими и химическими методами (ионнообменной хромотографии, кислотному осаждению и др.), чтобы освободить от всех балластных веществ и сконцентрировать препарат в меньшем объеме. Однако уменьшение размеров частиц анатоксина сделало необходимым адсорбировать препарат на адъютантах Таким образом, применяющиеся анатоксины являются адсорбированными высокоочищенными концентрированными препаратам:'Специфическую активность или силу анатоксина определяют в реакции флоккуляции в так называемых единицах флоккуляции— (Lf) или по реакции связывания анатоксинов, выражающуюся в единицах связывания— (ЕС). Титрование анатоксинов в реакции флоккуляции (по методу Рамона) производят по стандартной флоккулирующей антитоксической сыворотке, в которой известно количество международных антитоксических единиц (ME, см. с. 23) в 1 мл. Одна антигенная единица анатоксина обозначается Limes flocculationis (Lf — порог флоккуляции), это то количество анатоксина, которое вступает в реакцию флоккуляции с одной единицей дифтерийного антитоксина. Определив дозу анатоксина, давшую инициальную (первичную) реакцию флоккуляции с одной антитоксической единицей сыворотки, рассчитывают количество Lf препарата в 1 мл. Антигенные свойства столбнячного анатоксина (и некоторых других) обозначают в единицах связывания (ЕС). Для определения ЕС необходимы:испытуемый препарат анатоксина, стандартная антитоксическая сыворотка (с содержанием 0,1 ME в 1 мл), опытная доза токсина (вытитрованная к 0,1 ME стандартной сыворотки), белые мыши.Реакцию связывания проводят следующим образом: в ряд пробирок с одинаковым объемом стандартной сыворотки добавляют различные разведения испытуемого анатоксина.Смесь для связывания выдерживают в термостате 45 минут,затем в каждую пробирку добавляют опытную дозу токсина и вновь оставляют в термостате на 45 минут. После этого из каждой пробирки вводят смесь (сыворотки — анатоксина —токсина) 2—4 мышам и наблюдают за состоянием животных в течение 4 суток. Если весь анатоксин, добавленный к сыворотке, связался ею, то добавление токсина и последующее заражение мышей ведет к их гибели. При недостаточной дозе анатоксина для связывания всей сыворотки, добавленный токсин нейтрализуется сывороткой, и мыши остаются живыми. Для расчета ЕС в 1 мл определяемого анатоксина берется то разведение анатоксина, при котором происходит гибель 50% белых мышей на 4-е сутки. Это количество анатоксина содержит дозу, связывающую 0,1 ME сыворотки. Анатоксины применяются для профилактики и реже для лечения токсинемических инфекций (дифтерия, газовая ган- грена, ботулизм, столбняк) и некоторых заболеваний, вызванных стафилококками. studfiles.net 37. Вакцинопрофилактика и вакцинотерапия.Вакцинопрофилактика – введение препаратов с целью предотвращения развития инфекционных заболеваний. Вакцинотерапия – введение препаратов лечебными целями. Вакцинные препараты вводят внутрь, подкожно, внутрикожно, парентерально, интраназально и ингаляционно. Способ введения определяют св-ва препарата. По степени необходимости выделяют плановую вакцинацию и вакцинацию по эпидемиологическим показаниям. Первую проводят в соответствии с регламентированным календарем иммунопрофилактики наиболее распространенных или опасных инфекций. Вакцинацию по эпидемиологическим показаниям проводят для срочного создания иммунитета у лиц, подвергающихся риску развития инфекции, например, у персонала инфекционных больниц, при вспышке инфекционного заболевания в населенном пункте или предполагаемой поездке в эндемичные районы (желтая лихорадка, гепатит А) 38. Живая вакцина: получение, требование к вакцинным штаммам, достоинства и недостатки.Получение: Получают при использовании двух основных принципов: Принцип Дженнера – использование штаммов возбудителей инфекционных заболеваний животных генетически близкородственных сходным болезням человека. На основе этого принципа были получены осповакцина и вакцина БЦЖ. Протективные агенты (иммуногены) этих микробов оказались практически идентичными. Принцип Пастера – получение вакцин из искусственно ослабленных (аттенуированных) вирулентных штаммов возбудителей инфекции человека. Метод основан на селекции штаммов с измененными наследственными признаками. Эти штаммы отличабтся от исходных тем, что они утратили вирулентность, но сохранили иммуногенные св-ва. Так была получена Пастером вакцина против бешенства, позднее вакцина против сибирской язвы, чумы, туляремии. Применяют следующие методы получения аттенуированных штаммов патогенных микробов:
Требования к вакцинным штаммам: селекция спотанных мутантов с пониженной вирулентностью и сохраненными иммуногенными свойствами путем культивирования их в определенных условиях или пассирования через организм устойчивых к донной инфекции животных. Достоинства – полностью сохраненный набор Аг возбудителя, что обеспечивает развитие длительной невосприимчивости даже после однократной иммунизации. Недостатки – риск развития манифестной инфекции в результате снижения аттенуации вакцинного штамма. 39. Убитые вакцины. Принцип получения. Химические вакцины.Убитые вакцины. Производят из типичных по антигенному строению высоковерулентных штаммов возбудителей инфекции. Бактериальные штаммы выращивают на плотных или жидких питательных средах (штаммы вирусов – в организме животных или культурных клетках). нагревание, обработка фармалином, ацетоном, спиртом обеспечивает надежную инактивацию возбудителей и минимальное повреждение Аг. Проводится производственный контроль на стерильность, безвредность, реактогенность, иммуногенность. Вакцины стерильно разливаются в ампулы, затем высушиваются в вакууме при низкой температуре. Высушивание вакцин обеспечивает высокую стабильность препаратов (хранение 2 и более года) и снижает концентрацию некоторых примесей (формалина, фенола). Хранятся вакцины при температуре 4-8 градусов. Иммунизация убитыми вакцинами приводит к созданию активного антимикробного иммунитета. Оценка эффиктивности иммунизации проводится в эпидемиологических опытах путем сравнения частоты заболеваемости у привитых и непривитых людей, а также по уровню защитных Ат, определяемых у привитых. Эффективность данных вакцин в целом ниже, по сравнению с живыми, но при повторном введении они создают достаточно стойкий иммунитет, наиболее частый способ введения – парентеральный. Химические вакцины Состоят из Аг, полученных из микроорганизмов различными, преимущественно химическими методами. Для этого применяют и кислотный гидролиз, экстрагироание трихлоруксусной кислотой. Однако наиболее часто используется метод ферментативного переваривания по Райстрику и Топли. Этапы приготовления:
Химические вакцины содержат примесь отдельных органических соединений, состоящих из белков, полисахаридов и липидов. В некоторых случаях используются рибосомальные фракции микробов. Основной принцип получения данных вакцин заключается в выделении и очистке протективных Аг, обеспечивающих развитие надежного иммунитета. Разновидность хим. вакцин являются расщепленные и субъединичные вакцины. В расщепленных вакцинах содержатся разъедененные на фракции – внутренние и наружние белки вируса. Субъединичные вакцины содержат только наружные белки вируса, остальные Аг удалены. Хим вакцины обладают слабой реактогенностью. Могут вводится в больших дозах и многократно. Применение адъювантов, как усилителей иммунного ответа, повышает эффективность вакцин. Хим. Вакцины, особенно сухие устойчивы к влиянию внешней среды, хорошо стандартизируются и могут применятся в различных ассоциациях, направленных на одновременно против ряда инфекций. studfiles.net |
 г.Самара, ул. Димитрова 131 [email protected] |
 |