 |
|
|
|||||||||
|
способ усиления иммунного ответа при вакцинации крупного рогатого скота против бруцеллеза. Вакцина штамм 82 против бруцеллеза инструкцияВакцина РБ-51 / Вакцина против Бруцеллез РБ-51, RB-51Важнейшим и перспективным методом борьбы с инфекционными болезнями является иммунопрофилактика. Первой массово применяемой вакциной против бруцеллеза была вакцина из штамма Brucella abortus 19, которая широко применялась в СССР, США и многих других странах мира. В СССР долгое время использовали вакцину из штамма B. abortus 82. Существенным недостатком этих вакцин является наличие в крови вакцинированных животных антител, таких же, как и у истинно больных животных. Патогенные (вызывающие заражение животных и человека) бруцеллы имеют на своей поверхности S-антиген. Но точно такой же S-антиген имеется и у бактерии вакцинных штаммов (№19 и №82). Поэтому при вакцинации вакцинами шт.19 и шт.82 у животных в крови появляются антитела к S-антигену. Эти антитела обнаруживаются у животных около года при исследовании сыворотки крови методом РСК (реакция связывания комплемента) и в течении нескольких лет при исследовании методом ИФА (ИФА-иммуноферментный анализ – реакция в несколько раз чувствительная чем РСК). В случаях, когда исследуемая кровь оказалась положительной в РСК или ИФА специалисты ветеринарной лаборатории не могут твердо ответить, чем вызвана положительная реакция: вакциной, или животное заражено патогенными бруцеллами. Если посчитать, что положительная реакция вызвана вакциной, то животное будет считаться здоровым. Но нет гарантии, что это животное не больное (положительная реакция вызвана патогенными бруцеллами). Тогда это животное, оставленное в стаде, будет продолжать перезаражать остальных животных. Но возможен вариант, когда вакцинированное животное посчитают больным и отправят на забой. В нынешних постперестроечных условиях большинство поголовья скота находится в мелких хозяйствах и пасется на общих выпасах, усилилась миграция скота между областями. В таких условиях отследить вакцинированных животных и доказать что это вакцинированные а не больные животные становится невозможным. Обидно будет тем фермерам, кто купит скот, вакцинированный шт.82 или шт.19, отрицательный при продаже, но в дальнейшем этот скот могут признать положительно реагирующим на бруцеллез в ИФА. А ведь этот скот может оказаться больным, замаскированным вакциной. Вакцина РБ-51. Более 20 лет в США была разработана оригинальная вакцина на основе штамма B. abortus RB-51. Эта вакцина отличается тем, что в отличии от штаммов 19 и 82, не имеет в своем составе S-антиген. То есть при введении вакцины РБ-51 не образуются антитела к S-антигену. Если при исследовании крови реакция РСК или ИФА будут положительными (обнаружены антитела к S-антигену), то это животное заражено патогенными бруцеллами. То есть введение вакцины не мешает постановке точного диагноза. Да и сам факт введения вакцины РБ-51 не определяется никакой серологической реакцией из применяемых в ветлабораториях, при этом обеспечивая иммунитет в стаде крупного рогатого скота при уровне защиты в диапазоне от 75 до85% в зависимости от возраста, способа введения вакцины и преобладание бруцеллеза в вакцинированном стаде. Применение вакцины РБ-51 позволило полностью оздоровить США и Канаду - а это сотни миллионов голов скота. Сейчас вакцина РБ-51 широко применяется в Бразилии, Мексике, Аргентине – странах с многомиллионным поголовьем скота. Вакцина РБ-51 запатентована и производится американской компанией «Колорадо Серум». Вакцина РБ-51 одобрена и разрешена к применению Департаментом сельского хозяйства США (USDA) для молочного и мясного крупного рогатого скота. Вакцина признана Международным Эпизоотическим Бюро (МЭБ) и Европейским Союзом. После проведенных регистрационных испытаний, вакцина РБ-51 зарегистрирована в Реестре ветеринарных препаратов РК и разрешена к применению Комитетом ветеринарного надзора и контроля МСХ РК (№РК-ВП-1-2043-12 от 22.10.2012). Вакцина РБ-51 применяется однократно (не требуется ежегодной повторной вакцинации). Желательно вакцинировать животных в первом году жизни начиная с 4-месячного возраста, так как у молодых животных лучше вырабатывается иммунитет. Допускается вакцинация взрослых животных. Разрешена и повторная вакцинация – это только усилит иммунную защиту организма. Животным всех возрастов вводится одинаковый объем вакцины РБ-51 – 2мл (1 разведенная доза). Подкожно, в нижнюю треть шеи. Перед вакцинацией необходимо провести серологическое исследование крови на бруцеллез. Вакцинировать только отрицательно реагирующих животных Внимание: вакцина РБ-51 профилактирует бруцеллез, но не излечивает. Поэтому, если Вы вакцинировали больное животное, то оно останется больным. Если Вы вакцинировали животное, которое ранее было вакцинировано вакциной шт.19 или шт.82, то антитела от прежних вакцин будут присутствовать в организме животного. При исследовании сыворотки крови в ветлаборатории будет наблюдаться положительная реакция на бруцеллез. Противопоказания: в связи с небольшим возможным риском (около 1%) аборта не рекомендуется прививать глубоко стельных животных. Риск возникновения абортов у вакцин шт.19 и шт.82 значительно выше. Нельзя вакцинировать больных, ослабленных, истощенных животных.
rb-51.kz способ усиления иммунного ответа при вакцинации крупного рогатого скота против бруцеллеза - патент РФ 2203680
1. Способ усиления иммунного ответа при вакцинации крупного рогатого скота против бруцеллеза путем введения вакцины из штамма 82 Brucella abortus, отличающийся тем, что дополнительно вводят деполен. 2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что деполен вводят подкожно в дозе 2 мл на 100 кг живой массы. Штамм бактерии brucella авоrтus, используемый для изготовления вакцин против бруцеллезаABORTUS, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ИЗГОТОВЛЕНИЯ ВАКЦИН ПРОТИВ БРУЦЕЛЛЕЗА (57) Использование: микробиология, профилактика бруцеллеза, вакцина против бруцеллеза. Сущность изобретения; вакцину готовят из нового штамма Brucella abortus ВГНКИ N 20-1-ДЕП, Штамм отличается низкой остаточной вирулентностью отсутствием абортогенности и агглютиногенности. Для получения вакцины штамм выращивают, отделяют клетки, доводят их концентрацию до 10 млрд,кл/мл и расфасовывают. Вакцина по иммуногенным свойствам превосходит вакцинный штамм 19 и не вызывает образования агглютининов, что позволяет постинфекционные реакции от поствакцинальных, 1 табл. Недостатком прототипа является то, что вакцинный штамм 19 обладает высокими агглютиногенными свойствами, вызывает у привитых животных серопозитивные реакции, которые трудно отличить от серопозитивности у зараженных животных и вызывает аборты у стельных коров. Цель изобретения — получение штамма бруцелл для создания вакцины, обладающей высокой стабильностью, иммуногенно1761796 ют в пробирки с мясопептонным глюкозно55 стью, безвредностью, и слабой агглютиногенностью, неабортогенностью, Сущность изобретения. Новый штамм Br,àÜîrtus 21 — 5 получен из штамма Br.abortus 21 путем пассажирования через организм стельных коров и отселекционирован в стабильных P — формах. Штамм Вг.abortus 21-5 депонирован в лаборатории контроля и стандартизации бруцеллезных и кампилобактериозных препаратов ВГНКИ,. Штамм Вг,abortus ВГНКИ N 20-1-ДЕП характеризуется следующими культурально-морфологическими и физиолого-биологическими признаками. Морфологические: клетки штамма 21 — 5 представляют коккабактерии 1 — 1,5 мкм в длину, по Граму отрицательны, по Козлов.скому сохраняют красный цвет, по Романовскому — нежно-фиолетовый. Культуральные: бактерии штамма 21 — 5 хорошо растут на глюкозно-глицериновом печеночно-пептонном бульоне и агаре Д и других средах, имеющих нейтральную или слегка щелочную реакцию (рН 6,8 — 7,2) в аэробных условиях при температуре 37 С. На плотной среде образуют выпуклые, матовые, полупрозрачные колонии. Биохимические: штамм 21 — 5 представлен P — (100® колониями, при окраске по Уайт-Вилсону реакция с трипафлавином положительна, с P — сывороткой агглютинируют; сероводород не образует, каталазная активность незначительная, не ферментирует глюкозу, лактозу, маннит, рамнозу, инозит. Растет на среде с содержанием фуксина, а при аналогичном содержании тионина рост не отмечается. Серологические признаки, не вызывает агглютининов и комплементсвязывающих веществ в диагностических титрах, Агглютинируется R-сывороткой. Биологические признаки; непатогенен, неабортогенен (безвреден), и риживаемость на морских свинках при дозе 100 м.к. до 2-х мес., 2 млрд.м.к. — до 3 мес, пассажирован через организм пяти стельных коров и десчтикратно через организм морских свинок, Миграцией на привитых животных не обладает. Иммуногенные признаки: иммуногенность в эксперименте на морских свинках составила 63,6 — 83.3,, на крупном рогатом скоте 75 . Отличительные признаки штамма Бруцелла абортус 21-5: а) слабая агглютиногенность. При прививках лабораторных животных и крупного рогатого скота не вызывает образования аг10 50 глютиннов и комплементсвязывающих веществ в диагностических титрах; б) высокая иммуногенность у морских свинок до 83,3 через 3 месяца, а на крупном рогатом скоте до 75 спустя год после прививок; в) непатогенен: безвреден (неабортогенен). Приживаемость у морских свинок при дозе 100 м,к, до 2 мес„2 млрд м,к. до 3 мес; г) от вакцинированных животных на невакцинированных не мигрирует. II. Отличие штамма Br.abortus 21 — 5 от близких штаммов Штамм Br.abortus 21 — 5 отличается от слабогглютиногенного штамма Br.abortus 82 меньшей остаточной вирулентностью (отсутствием абортогенности), отсутствием сохранения агглютининов и комплементсвязывающих веществ. Отличается от агглютиногенного штамма N 19 отсутствием агглютиногенности, что позволяет отличать постинфекционные реакции от поствакцинальных. ! II. Пределы варьирования признаков (5 — 10 $) Селекционирован в P-форме из пятикратно пассажированной через организм стельных коров культуры.,Рост на глюкозноглицериновом МПА наблюдается в виде 100 колоний, содержащих Р-формы бруцелл по антигенным свойствам. Пример 1, Вакцинный штамм Бруцелла абортус 21 — 5 получен следующим образом, Методом неоднократных воздействий ультрафиолетовыми лучами из вирулентной культуры вначале получен штамм 21, Затем проведен пассаж культуры штамм 21 через организм 5 стельных коров (сроки от 3 до 8,5 мес), Дозы вакцины от 100 млрд (1-я корова), 2 — 3 коровы по 200 млрд, 4-я — 220 млрд, 5-я — 300 млрд. Спустя один месяц от вакцинированных неделей, выделяли культуры штамма Br.abortus, которых изолировали из региональных лимфатических узлов, предлр1аточных и надвыменных. Из 5-го пассажного варианта селекционирован вакцинный штамм 21 — 5 в Р-форме. Пример 2. Методика изготовления и контроля вакцины из штамма Бруцелла abortus 21 — 5. Культуру штамма 21 — 5 засеваглицериновым агаром, имевшим рН 6,8 — 7,0. После двухсуточного культивирования в термостате при 37 С в каждую пробирку вносят по 2 мл физраствора и смазывают бактериальную массу, Делают посевы на матровые колбы со скошенным мясо-пептонным глюкозоглицериновым агаром (M П ГТА). Поверхность агаровой пластинки тщательно увлажняют засеянной суспен1761796 зизй и матровые колбы помещают в термостат. После двухсуточного выдерживания при 37 С колбы вынимают и проводят визуальный осмотр с целью выявления загрязнения посевов. Затем в каждую колбу вносят по 40 — 50 мл физраствора и тщательно смывают бактериальную массу. Из смыва каждой колбы готовят мазки, окрашивают их по методу Грама, Козловского и микроскопируют для проверки чистоты смывов, Колбы, в которых обнаруживают постороннюю микрофлору, выбраковывают, а из остальных полученную взвесь сливают в мерный цилиндр для определения общего объема смыва. При установлении концентрации бруцелл вакционного штамма 21 — 5 в полученной взвеси используют оптические стандарты мутности. Доводят концентрацию бруцеллезных клеток до 10 млрд в 1 мл. После этого вакцину расфасовывают в стерильные флаконы по 250 мл, заливают пробки сургучом и хранят в холодильнике при 5 С до употребления. Помимо оптической устанавливают и биологическую концентрацию вакцины, Определение проводят путем приготовления последовательных разведений исходной взвеси с оптической концентрацией 10 млрд. м.к. в 1 мл в пробирках с 4,5 мл физраствора до получения конечного разведения .1:100 с последующим посевом 0,1 мл каждого из двух последних разведений (1:100 и 1;1000) на 3 — 4 чашки Петри с глюкозно-глицериновым агаром из рыбного гидролизата, Посевы выдерживают в термостате при 37 С в течение 4 — 6 дней, после чего проводят подсчет выросших колоний. Определяют среднее арифметическое число живых бруцелл, содержащихся в 1 мл каждого разведения. Полученные цифры складывают и делят на 2 (количество разведений). Данное число отражает сред5 40 нее количество живых клеток, содержащихся в 1 мл приготовленной вакцины. До употребления вакцину проверяют также на чистоту роста и безвредность, Чистоту культуры проверяли микроскопическим исследованием мазков, приготовленных из полученной вакцины и окрашенных по методам Грама и Козловского. Кроме того, еще йроводится высев на пластины МПГТА в чашки Петри для исключения загрязнения вакцины аэробными микроорганизмами, Из подозреваемых колоний готовят мазки, окрашивают и микроскопируют. Загрязненность анаэробными микроорганизмами исключается высевом вакцины на среду Китт-Тароцци, Безвредность проверяют подкожным введением вакцины двум беременным морским свинкам в дозе 1 млрд м.к. с последующим наблюдением за ними и исследованием от них сывороток крови через 2 недели в PA u РСК, Абортов и положительных результатов серологических реакций, как правило, не отмечалось, Данные приведены в таблице, Тестами для определения диссоциации служит трипафлавиновая проба, реакция термопреципитации и окраска колоний, выросших на пластине агара в чашках Петри по Уайту и Вилсону. Трипафлавиновая проба и реакция термопреципитации всегда были положительн ыми. Окраской колоний кристаллвиолетом по Уайту и Вилсону обнаруживали до 100 шероховатых R-форм колоний. Как видно из таблицы, штамм Бруцелла абортус 21 — 5 по иммуногенным свойствам превосходит коммерческий штамм Бруцелла абортус 19. Формула изобретения Штамм бактерий Brucella abortus ВГНКИ М 20-1-ДЕП, используемый для изготовления вакцин против бруцеллеза, 7! 1761796 8 У Сравнительные данные по иммуногенности противобруцеллезных вакцин Составитель Л.Малышева Редактор М.Самерханов Техред М.Моргентал, Корректор M,Ïåòðoâà Заказ 3235 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж-35, Раушская.наб„4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", r. Ужгород, ул.Гагарина, 101     www.findpatent.ru Штамм бактерий brucella авоrтus, используемый для приготовления вакцины против бруцеллеза крупного рогатого скотаИзобретение относится к ветеринарной микробиологии, в частности к получению биологических препаратов, и может быть использовано для приготовления вакцины против бруцеллеза крупного рогатого скота. Целью изобретения является штамм бруцелла абортус, обладающий стабильными свойствами, безвредностью и высокой иммуногенностью. Штамм бактерий Brucella abortus Ns 75/79A (35) депонирован в коллекции Всесоюзного государственного научноисследовательского института ветеринарных препаратов. Использование штамма Brucella abortus 75/79A(35) в качестве противобруцеллезной вакцины позволяет использовать ее в комплексе мер по профилактике бруцеллеза крупного рогатого скота любого возраста, без учета периода стельности. СП с СОЮЗ СОВЕТСКИХ СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ РЕСПУБЛИК (st)s С 12 N 1/20. А 61 К 39/10 ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ ПРИ ГКНТ СССР ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4603578/13 (22) 20.09,88 (46) 30.12,91. Бюл. М 48 (71) Алтайская научно-исследовательская ветеринарная станция (72) И.П.Никифоров (53) 619.616.24-002,5.6.36.22/28(088.8) (56) Сборник научных трудов. Алма-Ата, изд. Восточного отделения ВАСХНИЛ, 1986, с,105 — 106. Ветеринария, 1975. N7,,с,43-45, Ветеринария, 1975.М 11, с,32-33. (54) ШТАММ БАКТЕРИЙ BRUCELLA ABORTUS, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ПРИГОТОВЛЕНИЯ ВАКЦИНЫ ПРОТИВ БРУЦЕЛЛЕЗА КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА Изобретение относится к ветеринарной микробиологии, в частности к биологическим препаратам, и может быть использовано для приготовления вакцины против бруцеллеза крупного рогатого скота. Одним из средств для успешной профилактики бруцеллезной инфекции является применение в комплексе противобруцеллезных мер средств специфической профилактики бруцеллеза. В настоящее время для изготовления противобруцеллезной вакцины применяются штаммы бруцелла абортус hh 19 и шт. М 82. Штамм М 19 по культуральным призна-. кам является, стойким вариантом Bfucella abortus, хорошо растет на обычных пита„„5U ÄÄ 1701743 А1 (57) Изобретение относится к ветеринарной микробиологии, в частности к получению биологических препаратов, и может быть использовано для приготовления вакцины против бруцеллеза крупного рогатого скота. Целью изобретения является штамм бруцелла абортус, обладающий стабильными свойствами, безвредностью и высокой иммуногенностью. Штамм бактерий ВгосеИа abortus М 75/79А (35) депонирован в коллекции Всесоюзного государственного научноисследовательского института ветеринарных препаратов. Использование штамма Brucella abortus 75/79А(35) в качестве противобруцеллеэной вакцины позволяет испольэовать ее в комплексе мер по профилактике бруцеллеза крупного рогатого скота любого возраста, без учета периода стел ьности. тельных средах, умеренно продуцирует сероводород, растет на средах с основным фуксином 1:50000 и 1:100000 и не растет на средах в тех же разведениях, но с добавлением тионина, проявляет высокую чувствительность к пенициллину. Обладает сравнительно высокой иммуногенностью (75 — 80%).. .При окраске колоний по У-Вилсону шт.N 19 и полевых штаммов колонии в 3-6суточном возрасте имеют фиолетовый ободок и светло-желтый центр. а колонии R-штаммов — синий цвет. К недостаткам известного штамма следует отнести то. что штамм 1Ф 19 ВгисеИа аЬогмз высокоагглютиногенен. обладает длительной приживаемостью в организме 1701743 иммунизированных животных (5 — 8 лет), обладаетостаточнойвирулентностью, абортогенностью, Отсутствие способа дифференциации не позволяет применять его на взрослом поголовье скота в очагах инфекции и в угрожаемых по бруцеллезу стадах, Вакцина из шт-, N. 82 Bruceita abortus— живая, слабоагглютиногеннэя, обладет иммуногенностью 75-100% на морских свинках, зараженных через 5 мес после их ,иммунизации. У шт. N. 82 при окраске по У-Вилсону на 3-и сутки роста колонии мелкие и имеют фиолетовый ободок и светло-желтый центр, на 4-й день у них появляется исчерченность и включения в центре, к 5 — 6-му дню колонии при окраске становятся синими, При высеве на среду с агаром в чашках :Петри образует колонии SR-формы, круглые, гладкие, прозрачные с голубов òûì оттенком. Агглютинирует е растворах S- u R-специфических бруцеллезных сывороток, дает слабую пробу в трипафлавине, термоагглютинация слабая или не агглютинирует, Растет на средах с фуксином 1:50000 и не растет с тионином (1;25000). При росте на агаре образует сероводород, Обладает слабыми.агголютиногенными и вирулентными свойствами, Однако штамм N 82 ВгосеИа abortus в SR-форме не стабилен, абортогенен (10 — 20/ абортов у стельных коров и нетелей). Культура шт. М 82 в образцах производственных серий вакцины характеризу ется неоднородностью формы колоний, антигенные свойства субкультур генетически не закреплены, субкультуры в Я-, SR- u R-формах имеют различную вирулентность. У 0,4 — 0,8% вакцинированных животных сохраняются поствакцинальные реакции на длительный период, Целью изобретения является получение штамма бруцелла абортус, обладающего стабильными свойствами, безвредностью и высокой иммуногенностью. В результате отбора и исследований был селекционирован штамм бруцелла абортус 75/79-А, отвечающий основнь1м требованиям вакцинного штамма бруцеллеза крупного рогатого скота. Штамм l3rucella ebortus 75/79-А депонирован в коллекции Всесоюзного Государственного научно-исследовательскогоо института ветеринарных препаратов под номером 75/79-А(35). Штамм 75/79-А бруцелла абортус — диссоциированный штамм в SR-форме, выделен из высева надвымянного лимфоузла реагирующей на бруцеллез коровы в виде колоний бруцелла абортус в аназробных условиях на 7-е сутки инкубации в термостате. Полученной из заявляемо о штамма вакциной прививают крупный рогатый скот (например, стельных телок) в дозе 100 млрд. микробных клеток, Селекционированный штамм бруцелла абортус 75/79-А имеет следующие морфологические, культурально-биохимические характеристики, Морфологические признаки, Штамм бруцелла абортус 75/79-А — зто очень мелкие микроорганизмы, в микроскопических препаратах встречаются одновременно в кокковидных и пэлочковидных формах, при окраске по Козловскому окрашиваются в красный цвет, хорошо растет на твердых питательных средах: мясопептонном печеночном глюкоза-глицериновом агаре, печеночном глюкоза-глицериновом агаре как с добавлением перевара Хоттингера. так и без него. Культурально-биохимические признаки, Штамм 75/79-А полностью (75-100%) агглютинируется S- u R-бруцеллезными сыворотками, не агглютинируется с физраствором, дает положительную реакцию (++++) в пробе с акрифлавином. положительную или слабоположительную реакцию термоагглютинации. На агаре в чашках популяция однородная, колонии ровные, гладкие, выпуклые, блестящие. При окраске по Уайт-Вилсону 3 — 4-суточные колонии культуры исходного штамма и 5-го пассажа через организм морской свинки, выращенные на косяках агара Щелковского биокомбината, ВГНКИ и Алтайской НИВС, окрашиваются однородно в основном (до 80;ь) как SR-форма (по сине-фиолетовому фону желтая исчерненность по диагонали, середине, иногда по периметру колоний ближе к краю), 5-200/, колоний — как RS-форма. R- u S-формы колоний в популяции не наблюдались, Штамм и его субкультура хорошо растет на средах с тионином и фуксином 1;50 тыс. (++), не чувствителен к эритритолу и натриевой соли бензилпенициллина в концентрации до 50 ЕД в 1 мл среды. Продуцирует НгЯ (1-29 мм). По морфологическим, культуральным. агглютинабельным свойствам, реакции термоагглютинации и пробе с акрилфлавином штамм 75/79-А представляет собой диссоциант бруцелл, аналогичный штамму Bruceiia abortus!Ф 82. Отличием изучаемого штамма от последнего является относительная однороднсть популяции и отсутствие в ней микробных клеток, образующих на 3 — 4 — е сутки инкубирования колоний e S-или Я-форме. 1701743 40 робных клеток по оптическому стандарту 45 Пример 1. Приживаемость и возможность миграции штамма 75/79-А (5-й пассаж) изучены в опыте на 50 морских свинках, 25 из которых были иммунизированы в дозе 1 млрд. микробных клеток и содержались вместе с непривитыми в течение 4 мес. Морских свинок по 5 голов иэ каждой группы убивали через 15, 30, 60, 90, 120 дней и проводили бактериологическое и серологическое исследования материала на бруцеллез, В результате проведенных исследований установлено, что штамм 75/79-A приживается в организме иммунизированных морских свинок в генерализованной форме в течение 60 дней. При серологическом исследовании в РБП, РА, РСКс биофабричными антигенами и в РСК с R-антигеном КВИ сывороток крови от иммунизированных морских свинок положительная реакция с биофабричным антигеном была получена только у одного животного через 60 дней в Р БП и СК в титре 1:20. В PCK c R-антигеном КВИ все морские свинки положительно реагировали с 15 дня до 60 в титрах 1:5 — 1:80. Через 90 дней отмечена положительная РСК в титре 1 5 у двух морских свинок из пяти, через 120 дней все животные утратили серопозитивность к Rантигену. При совместном содержании в течение 120 дней иммунизированных морских свинок и животных контрольной группы не установлено явление миграции изучаемого штамма, что подтверждается результатами бактериологического и серологического исследований. Пример 2, Остаточная вирулентность и агглютинабельные свойства штамма 75/79-А (5 пассаж) изучали в опыте с ВГНКИ на 90 морских свинках в сравнении со штаммами М 82 и вирулентным шт. Вгисе!!а abortua 54. Животных иммунизировали взвесью двухсуточных агаровых культур в дозах 10, 100, 1 тыс., 10 тыс. и 1 млрд. микмутности. Морских свинок убивали через 20 и 40 дней, проводя бактериологическое и серологическое исследования на бруццелеэ, отмечая в эти сроки видимые патолого-анатомические изменения в лимфоузлах и органах животных, вычисляя индекс селезенки. В результате проведенных исследований установлено, что штамм 75/79-А обладает низкими вирулентными свойствами, так как в указанные строки генерализовано расселяется в организме морских свинок. привитых только в дозе 1 млрд.м.клеток,-а приживается в дозе от 1 тыс.м.клеток, в то время как шт. N. 82 — от 10 микробных клеток. При серологическом исследовании в РБП, PA u PCK на бруцеллез в сыворотке крови морских свинок, привитых разными дозами культуры штамма Bruceila abortus 75/79-А, отсутствовали антитела, выявляемые антигенами биофабричного производства. В PCKc R-антигеном в первый срок убоя выявлены специфические антитела у всех морских свинок, иммунизированных в дозе 1 млрд.м,клеток (титр 1:10-1;20), через 40 дней в аналогичной группе положительно реагировали все животные в высоком титре (1:40), в остальных группах — по 1-3 м.свинки в титре 1:5. Пример 3, Безвередность (абортогенность) штамма 75/79-А изучена на 8 бере-. менных морских свинках, привитых 1, 2, 7. 5, 10 млрд.м,клеток суспензией двухсуточной агаровой культуры исходного штамма и его пассажей. За период наблюдения в сроки 15, 20, 30, 60 сут перечисленные дозы штамма аборта не вызывали, а при послеубойном вскрытии из полостей маток 8 беременных морских свинок извлечено 26 сформировавшихся плодов. Пример 4. Абортогенность и агглютиноггеность штаммов 75/79-А и шт. N 82 изучены на 9 (2 — 3 мес. стельности) телках. иммунизированных в дозе 100 млрд. микробных клеток каждого штамма. За 7 мес. опыта установили следующее. В группе телок (4 головы), иммунизированных 100 млрд. микробных клеток двухсуточной суспензии штамма 75/79-А, аборта не отмечалось, Все телки, иммунизированные суспензией штамма 75/79-А, благополучно растелились, а из 5 телок, иммунизированных штаммом N 82 в дозе 100 млрд.м.к. биофабричной вакцины, через 2 мес после иммунизации одна телка абортлровала. Результатами серологических исследований сывороток крови животных обоих групп в сроки 12 дней, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 мес после иммунизации установлено, что у телок опытной группы sce реакции с биофабричными антигенами дали отрицательные результаты исследований на бруцеллез через 2 мес после иммунизации, à PCK c R-антигеном 16/4 ИЭВСиДВ через 3 мес, тогда как из 5 телок, иммунизированных шт. М 82, у одной сохранились реакции в РСК со стандартным антигеном (в титре 1:10++++ и РСК с R-16/4 антигеном ИЭВСиДВ 1:40++++), Пример 5. Иммуногенность штамма 75/79-А на морских свинках высокая и колеблется от 66,6 до 100;, при заражении через 3,5 мес. после их иммунизации. В опытах при апробации штамма совместно с ВГНКИ на 94 морских свинках иммуноген1701743 Составитель И.Никифоров Редактор Т.Лаэоренко Техред M,Moðãåíòàtl Корректор С.Черни Заказ 4512 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб„4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г, Ужгород, ул.Гагарина, 101 ность штамма 75/79-А (5 пассаж на морских свинках) в дозе 2 млрд. микробных клеток составила 88,8 при индексе инфицированности (ИИ) 8,3, у штамма hL 82 в той же дозе иммунитет составил 65ф> (ИИ 20,0), у шт, N 19 в дозе 1 млрд.м,к. иммуногенность составила 84,2 при ИИ 11,5. Использование штамма 75/79-А(35) Brucella abortus в качестве противобруцеллезной вакцины позволит применить ee e комплексе мер по профилактике бруцеллеза крупного рогатого скота лк>бого возраста и без учета стель ности, 5 Формула изобретения Штамм бактерий Brucella abortus ВГНКИ М 75/79A(35), ипользуемый для приготовления вакцины против бруцеллеза крупного рогатого скота.     www.findpatent.ru |
 г.Самара, ул. Димитрова 131 [email protected] |
 |