Живая вакцина против колибактериоза свиней. Вакцина от колибактериоза свиней

признаки, диагноз, профилактика, лечение и меры борьбы. | Ветеринарная служба Владимирской области

Колибактериоз (эшерихиоз, колидиарея) поросят (Colibacteriosis suum) – остропротекающая инфекционная болезнь поросят сопровождающаяся диареей, явлениями токсемии, реже септицемии и высокой смертностью.

Возбудитель — энтеропатогенные серовары E. coli серогрупп: О8, О9, О20, О137, О138, О139, О141, О142, О147 и О149. Большинство из них содержат пил-антигены К88,987р и обладают гемолитическими свойствами. Часто они продуцируют как термолабильный, так и термостабильный экзотоксин. Антиген К88 почти всегда обнаруживают у гемолитических культур и чаще всего у штаммов серогруппы О149 и О141. Иногда при колибактериозе поросят выделяют штаммы, содержащие антиген К99, например: О9 :К35 :К99 :Н, О101 : К :30: К99 :Н.

Эпизоотические данные. Колибактериозом заболевают новорожденные поросята, поросята – сосуны 2-4 –недельного возраста и поросята в первые две недели после отъема. Болезнь протекает энзоотически, часто стационарно. Колибактериоз особенно распространен в крупных промышленных комплексах, где в период массовых опоросов возбудитель быстро распространяется от одного помета к другому, охватывая в хозяйстве большое количество поросят. Источником колибактериоза являются больные, переболевшие колибактериозом подсвинки и свиньи-бактерионосители энтеропатогеннх эшерихий. Основной путь заражения –алиментарный, реже аэрогенный. Известны случаи внутриутробного заражения поросят. Предрасполагающими факторами заболевания являются — неудовлетворительные условия содержания и неполноценное кормление супоросных свиноматок. Факторами передачи возбудителя колибактериоза могут быть контаминированные предметы ухода за животными, посуда, корм, одежда, а переносчиками – разные насекомые, обслуживающий персонал.

Патогенез. При ослаблении общей резистентности организма новорожденных энтеропатогенные эшерихии проникают в слизистую оболочку тонкого отдела кишечника и, интенсивно размножаясь, выделяют эндо- и экзотоксины. Термолабильный токсин (продуцируют почти все эшерихии) адсорбируется на ворсинках эпителиальных клеток тонкого отдела кишечника, стимулируя аденилатциклазу, что приводит к резкому очаговому увеличению концентрации циклического аденозинмонофосфата. Этот медиатор вызывает гиперсекрецию электролитов и дополнительную диффузию воды молодыми малодифференцированными клетками эпителия слизистой оболочки кишечника в просвет тонкой кишки и угнетает реабсорбцию натрия. Просвет кишечника переполняется жидкостью, усиливается перистальтика, и возникает диарея. В результате повышенной секреции из организма поросят выделяются вода и электролиты, что приводит к ацидозу и при тяжелом течении болезни может обусловить дигидротационный шок.

Из–за пониженной защитной функции стенок кишечника у больных поросят эшерихии проникают в лимфу, затем в кровь и ткани, вызывая септицемию. Иногда развитие септицемии с последующим летальным исходом опережает признаки диареи. Дополнительно, в результате действия эндотоксина и гемолизина, присущих возбудителю колибактериоза поросят, происходит нарушение порозности сосудов, что приводит к отекам с последующим нарушением функции нервной системы.

Клинические признаки. Колибактериоз у поросят протекает в трех формах: септической, энтеротоксемической(отечной) и энтеритной формах. Течение болезни сверхострое, острое, подострое и хроническое.

Септическая форма болезни присуща новорожденным поросятам и поросятам-сосунам. Течение ее сверхострое и острое, сопровождается высокой температурой тела и большой летальностью. Клинически болезнь проявляется отказом от корма, угнетением, нарушением координации движения, иногда поносом.

При энтеритной форме регистрируют профузный понос, угнетения и вялость.

Для энтеротоксемической формы характерны токсические явления и коллапс у поросят — сосунов и отеки у поросят-отъемышей. При отечной форме болезни отмечают короткий инкубационный период – от 3 до 12часов. Отечной формой колибактериоза обычно заболевают хорошо упитанные поросята. Они отказываются от корма, возбудимы, у них отмечаем шаткую походку, подергивание головой и конечностями. При внешнем осмотре отмечаем синюшность кожи ушей, пятачка, живота и конечностей. Болезнь протекает остро, и через несколько часов после появления признаков большинство животных погибает.

Патологоанатомические изменения. Патологоанатомические изменения при сверхостром течении колибактериоза у павших поросят отсутствуют. У поросят павших от острого и сверхострого колибактериоза отмечаем анемичность слизистых оболочек, задняя поверхность бедер и анальное отверстие запачкано фекальными массами. Слизистая оболочка желудка гиперемирована со студенистым инфильтратом, слизистая оболочка тонкого отдела кишечника набухшая, покрыта слизью, имеются признаки катарально – геморрагического воспаления. Регионарные брыжеечные лимфатические узлы увеличены, гиперемированы. Лимфатический аппарат прямой кишки (пейеровые бляшки, солитарные фолликулы) гиперплазированы и гиперемированы. Селезенка темно- серого цвета, слегка увеличена, плотная, бугристая. Печень и почки анемичны, под капсулой почек очень мелкие точечные кровоизлияния. В печени, мышце сердца, почках выражены дегенеративные изменения. Сосуды головного мозга кровенаполнены, мозговая ткань отечная. При отечной форме болезни находим отеки подкожной соединительной ткани, стенок желудка. В желудке находим большое количество корма твердой консистенции. Мезентериальные лимфатические узлы кишечника набухшие, увеличены, сочные, гиперемированы, наблюдается мраморность окраски. В тонких кишках желтоватая или темно – красная слизистая или водянистая жидкость. Легкие отечные.

Диагноз на колибактериоз ставится с учетом эпизоотологических, клинических данных, патологоанатомических изменений и результатов бактериологического исследования. В ветлабораторию направляют свежие трупы поросят или паренхиматозные органы (печень с желчным пузырем, селезенку, почку, сердце, мезентериальные узлы, трубчатую кость, головной мозг или голову целиком, участки пораженного отдела тонкого кишечника и желудок (от 2-3 трупов). Трупы направляют в водонепроницаемой таре. Части органов пересылают в чистой посуде (желудок и кишечник отдельно от других органов) не позднее 4-х часов после гибели животного, при этом патматериал направляют от животных не подвергавшихся лечению антибиотиками. При отсутствии трупов присылают фекалии от 3-4 больных поросят, которые не подвергались лечению. Положительный бактериологический диагноз при исследовании патологического материала от поросят ставят в случаях:

• выделения энтеропатогенных культур E. coli от поросят павших в период с первых дней жизни до отъема и в первые дни, после отъема;
• установление патогенности выделенной культуры кишечной палочки;
• серологического типирования набором типоспецифических колисывороток.

Порядок бактериологических исследований регламентирован наставлением, утвержденным Главным управлением ветеринарии Министерства сельского хозяйства СССР.

Дифференциальный диагноз. Колибактериоз поросят необходимо дифференцировать от вирусного (трансмиссивного) гастроэнтерита, анаэробной энтеротоксемии, сальмонеллеза, дизентерии и диспепсии.

Иммунитет. Иммунитет при колибактериозе у поросят пассивный, приобретенный с молозивом, выраженность которого тем сильнее, чем больше в молозиве и молоке свиноматки содержится иммуноглобулинов.

Резорбция иммуноглобулинов из молозива в кишечнике новорожденных поросят продолжается 72 часа, но наиболее интенсивно идет в течение первых суток. Высокой концентрации иммунных тел в молозиве ветспециалисты добиваются путем подкожной и внутримышечной иммунизации глубокосупоросных свиноматок. Оптимальные сроки вакцинации – 30-15 дней до опороса.

Специфическая профилактика. Из средств специфической вакцинации применяют поливалентную ГОА формолтиомерсаловую вакцину, содержащую 9 штаммов разных серогрупп эшерихий, часть из которых синтезируют адгезивные антигены К88ас, К88ав и продуцируют ТЛ и ТС экзотоксины и гемолизины. Вакцину вводят супоросным свиноматкам за 1,5 -2 месяца до опороса внутримышечно, двухкратно с интервалом 10-15 дней в дозах 4-5 и 5-6мл, а также поросятам за 10-20 дней перед отъемом по 1-1,5 и 1,5-2мл. Кроме того, с профилактической целью поросятам до 5-дневного возраста внутримышечно вводят поливалентную сыворотку против колибактериоза (эшерихиоза) в дозах 8-10мл, старше 5дней -10-15мл.

Лечение. Наиболее эффективными при колибактериозе являются антибиотики – неомицин, мономицин и левомицетин. Их рекомендуется назначать молодняку в более высоких дозах на 1кг массы, чем взрослым (неомицин внутрь поросятам до 6 месяцев -30мг, взрослым – 20мг). Для предупреждения устойчивости микрофлоры к антибиотикам их применяют в сочетанном виде.

Антибиотикотерапия больных поросят должна проводится одновременно с борьбой по обезвоживанию организма, путем внутрибрюшинного и перорального введении электролитов (раствор Рингера). Хороший результат дает внутрибрюшинное применение препарата дюфалак в дозе 10мл на поросенка.

Исходя из того, что антибактериальные препараты в организме больных поросят подавляют рост кишечной палочки, лишая при этом продуцента витаминов группы В, при проведении лечения колибактериоза, ветспециалистам необходимо при лечении использовать витаминные препараты группы В (В1 В12 и другие).

Рекомендуется применение иммуномодуляторов (Лидиум 2мг/кг массы). Хорошие результаты дает применение пробиотиков (Био Плюс 2В, Лакто-Сакк).

Поросятам заболевшим в более поздние сроки (старше 15 дней), достаточно применять с лечебной целью раствор калия перманганата (1:10 000), отвар дубовой коры или сулфаниламидные препараты. При лечение рекомендуется использовать ПАБК, а также настои и отвары тысячелистника, зверобоя и конского щавеля.

Профилактика и меры борьбы. Супоросных свиноматок за 10-15 дней до опороса необходимо переводить в предварительно очищенные и продезинфицированные индивидуальные клетки свинарника — маточника.

Перед переводом свиноматок чистят, загрязненные участки тела обмывают тепловой водой, нижние части конечностей дезинфицируют 0,5%-ным раствором лизола или), 5%-ным раствором формалина. Профилактическую санацию станков свинарников-маточников проводят методом орошения дезсредствами и соблюдением режима.

В промышленных свиноводческих комплексах после механической очистки помещения наиболее загрязненные объекты (полы, щелевые решетки, кормушки, нижние части стен, ограждающие конструкции и др.) орошают однократно горячим, не ниже 70°С 2%-ным раствором едкого натрия или демпа из расчета 0,5 литра на 1м² площади поверхностей (для орошения может быть использован горячий 5%-ный раствор кальцинированной соды, который наносят двухкратно с интервалом 30 минут). Через 25-30минут, не допуская высыхания обработанных объектов, проводят окончательную чистку и мойку всего помещения струей воды под давлением с помощью мобильных или стационарных установок.

Для дезинфекции помещения применяют одно из следующих средств: 4%-ный горячий раствор едкого натра,2%-ный раствор хлорамина, или гипохлора, содержащего 3% активного хлора. Расход растворов – 0,5л на 1м². Экспозиция -1час. После дезинфекции остатки дезсредств в участках, доступных для животных, тщательно смывают водой; помещения проветривают и просушивают.

За 5 дней до опороса рацион свиноматок постепенно уменьшают с таким расчетом, чтобы за день до опороса они получали корма в количестве не более половины суточной нормы. При появлении признаков опороса заднюю часть туловища свиноматок обмывают дезраствором (0,5 %-ным раствором хлорамина, раствором фурацилина 1:4000 или марганцовокислого калия 1: 1000) или протирают чистой салфеткой, смоченной одним из указанных дезрастворов.

Работник, принимающий поросят во время опороса, должен надеть чистый халат и фартук, тщательно вымыть и продезинфицировать руки. У родившегося поросенка зажимают пупочный канатик на расстоянии 5-6см от кожи брюшной стенки, затем обрывают перекручиванием или перевязывают продезинфицированной ниткой. Отрезают ножницами ниже лигатуры и культю погружают в стаканчик с 5%-ной настойкой йода. Чистым полотенцем (салфеткой) очищают от слизи рот, ноздри и уши поросенка, насухо вытирают туловище и помещают (до начала кормления) в предварительно очищенный и продезинфицированный ящик (клетку).

После опороса загрязненные участки свиноматки обмывают теплой водой, заменяют подстилку. Отделившийся послед, обрезки пупочного канатика помещают в оцинкованный ящик и уничтожают в специально отведенном месте. Соски и кожу молочной железы свиноматки протирают полотенцем (салфеткой), смоченным дезраствором, а затем подсаживают к свиноматке новорожденных поросят для кормления.

После опороса маток поят свежей водой, а через 4-6 ч кормят болтушкой (500-700г) из концентрированных кормов. Со второго дня после опороса свиноматкам постепенно увеличивают рацион и к четвертому дню доводят его до полной нормы.

Все молочные продукты, поступающие для кормления поросят, подвергают термической обработке (кипячению, пастеризации) непосредственно в хозяйстве независимо от обработки их на молочных заводах.

После отъема поросят от свиноматок их содержат в отдельном помещении (секции) изолированно от взрослых свиней и поросят старших возрастных групп. До начала заполнения помещения его очищают (от навоза и т.д.) и дезинфицируют.

При установлении диагноза на колибактериоз в первую очередь принимают меры по наведению ветеринарно-санитарного порядка в помещениях и изоляции больных. Самой радикальной мерой при вспышке колибактериоза является разрыв эпизоотической цепи – смена места проведения опоросов. В хозяйстве прекращают размещение супоросных маток на опорос в неблагополучных свинарниках. В последующем группу для опороса формируют в отдельном помещении или лагере. Если для этого нет условий, увеличивают время санации помещений в период «все пусто» на 2-3 дня больше технологического. Принимают срочные меры для улучшения кормления глубокосупоросных и подсосных маток, при этом подозрительные по качеству корма заменяются на доброкачественные.

При остром течении колибактериоза проводят вынужденную медикаментозную профилактику. Для этого поросятам с 1-го дня жизни внутрь задают на физиологическом растворе, специфической сыворотке, глобулине или овсяном отваре один из подтитрованных антибиотиков или сульфаниламидов, 1-2 раза в день на протяжении 2дней. Кроме этого, однодневным поросятам может быть применено однократное введение тривитамина с дибиомицином в дозе 30-40000 ЕД/1мл препарата внутримышечно. При снижении эффективности медикаментозной профилактики необходимо сменить применяемый антибиотик.

Больных поросят лечат антибактериальными средствами. При появлении колибактериоза среди значительного количества поросят в одном помещении (секции) больных лечат на месте, принимают меры по предотвращению разноса возбудителя.

Выздоровевших поросят, достигших отъемного возраста, переводят на доращивание или откорм, формируя из них отдельные группы.

Супоросных свиноматок немедленно вакцинируют вакциной против колибактериоза, согласно существующего наставления. При необходимости проводим вакцинацию и поросят старше 10 дневного возраста.

vetvo.ru

Колибактериоз (эшерихиоз) свиней: симптомы, лечение и профилактика

Каждый, кто решил заняться свиноводством, должен понимать, что его подопечные будут требовать особого ухода и внимания. И дело не только в организации процесса питания. Стоит иметь хотя бы минимальную теоретическую подготовку касательно особенностей анатомии поросят, профилактики, диагностики и лечения их заболеваний. Ведь нередко самый безобидный, на первый взгляд, понос у поросенка чреват летальным исходом, если вы не знаете, как его лечить.

С целью помочь вам рассмотрим особенности профилактики, диагностики, патогенеза и лечения самого распространенного заболевания свиней — колибактериоза, известного также под названиями эшерихиоз, колибациллез, колидиарея.

Что за болезнь и чем она опасна

Эшерихиоз распространен во многих странах, особенно тех, что отличаются неудовлетворительными санитарно-ветеринарными условиями. Колибактериоз у животных — это острое инфекционное заболевание молодняка. Что касается исключительно поросят, то чаще всего болезнь поражает «младенцев» — от 3 до 7 дней, немного реже от 7 до 14 дней. Также к заболеванию склонны двух-четырехмесячные поросята и те, которых только что отняли от свиноматки, что вызвано изменениями в процессе кормления. Инкубационный период колибациллеза составляет от нескольких часов до двух-трех суток. Заболевание имеет высокий коэффициент летального исхода. Выжившие поросята имеют истощенный вид, масса их тела резко снижается.

Знаете ли вы? Около 10–30 % поросят, заболевших колибактериозом в молочном возрасте (1–14 дней от рождения), гибнут.

Возбудитель и пути заражения

Возбудителем колидиареи является энтеропатогенная кишечная палочка эшерихия (Escherichia coli), принадлежащая к семейству Enterobacteriaceae, из рода Escherichia. Эшерихия обладает адгезивными (слипание клеток) и токсическими свойствами, известна в виде грамотрицательной палочки с закругленными концами. Палочка не склонна к образованию капсул и спор. Благоприятной средой для эшерихии является почва, навоз, вода; она прекрасно чувствует себя при температуре +37 °С. В перечисленных условиях палочка жизнеспособна на протяжении 1–2 месяцев. Помещения с животными — оптимальная среда обитания кишечной палочки.

Знаете ли вы? Из 250 видов эшерихий для поросят патогенными являются 30.

Патогенез

Множество свиноводов, впервые столкнувшись с колибактериозом у свиней, мечутся в панике в поисках ответа на вопрос, что это за болезнь, и при этом теряют драгоценное время. Для быстрой диагностики необходимо знать некоторые нюансы патогенеза коллепсиса. Высокий коэффициент заболеваемости новорожденных поросят объясняется их анатомо-физиологическими и иммунологическими особенностями их организма. У поросёнка-младенца ещё не налажены функции всех органов, организм плохо адаптирован к смене среды обитания. В кишечнике новорожденных поросят выделяется недостаточное количество слизи, кислотность и бактерицидность кишечного сока в пищеводных путях значительно снижена, а барьерная функция печени еще не активирована должным образом. Совокупность этих факторов провоцирует низкую резистентность организма к заболеваниям.

Важно! Созревание пищеварительного тракта поросят наступает где-то в двухмесячном возрасте. Именно поэтому на протяжении первых двух месяцев жизни поросят стоит очень ответственно подбирать их пищевой рацион и соблюдать санитарно-ветеринарные нормы ухода.

Признаки заражения

Симптоматику колибактериоза составляет диарея, обезвоживание организма, острая интоксикация, повышение температуры тела до 40–42 °С, септицемия (прогрессирующее распространение инфекции по всему организму с тяжелым поражением различных органов), быстрое истощение организма. Выделяют энтеритную (воспаление слизистых оболочек тонкого кишечника), энтеротоксемическую (отечную) и септическую формы протекания болезни. Относительно этапов заболевания, то выделяют следующие:

• подострый этап прослеживается у молодняка (3–5 дней от рождения) и сопровождается следующими симптомами: понос и обезвоживание организма;
• для острого этапа болезни характерны понос, обезвоживание, западание глазного яблока, резкие боли в брюшной полости, судороги, парезы. Отсутствие необходимого лечения приводит к летальному исходу через 3–4 суток. Выжившие особи могут поддаться рецидиву через 8–9 суток;
• сверхострый этап заболевания сопровождается резким повышением температуры, учащением пульса, отказом от еды, нарушением координации движения, коматозным состоянием. Смерть наступает через 1–2 суток.

Патологоанатомические изменения

Ветеринары-патологоанатомы отмечают, что практически у всех погибших поросят в желудке наблюдается свернувшееся молоко, жидкое содержимое кишечника, острый катаральный и геморрагический гастроэнтерит. В слизистой оболочке кишечника присутствуют кровоточащие воспаления и острый катар. Ветеринары отмечают, что среди последствий колидиареи присутствуют также деформация печени, почек и селезёнки, отёк мозга. Селезёнка приобретает тёмно-серый цвет.

Важно! Перечисленные факты дифференцируют эшерихиоз от вирусного гастроэнтерита, сальмонеллёза, дизентерии, энтеротоксемии.

Диагностика

Диагностировать колибактериоз в сельскохозяйственных комплексах и помещениях можно не только с учётом симптомов заболевания, но и на основании патологических данных, результатов эпизоотологических, клинических и бактериологических исследований. Для этого требуется направление на ветлабораторные исследования свежих трупов поросят или их органов (желчного пузыря, печени, почек, сердца, селезёнки, трубчатой кости, головы либо головного мозга, мезентеральных узлов, желудка, частей тонкого кишечника). Частицы органов направляют на исследования в плотно закрытых, водонепроницаемых ёмкостях. Отослать патматериалы на лабораторные исследования необходимо не позже четырёх часов после гибели. Если вашим свинкам удалось избежать летального исхода, то в целях диагностики болезни на анализы необходимо отправить фекалии от трёх-четырёх заболевших особей.

Важно! Отправлять на анализы в ветлабораторию можно материалы только от тех поросят, которые не подвергались лечению антибиотиками.

Лечение

Диагностировав симптомы колибактериоза свиней, необходимо немедленно приступать к лечению. Наиболее эффективным является лечебный процесс с использованием антибиотиков, в частности, левомицетина, мономицина и неомицина. Дозы препарата для молодняка должны превышать дозы для взрослых: для молодняка — 30 мг, для взрослых особей — 20 мг внутрь. С целью предотвращения обезвоживания организма поросёнку вводят электролиты, в частности, раствор Рингера. Отмечено также эффективное воздействие «Дюфалака» (10 мг на одну свинку). Приём антибиотиков необходимо назначать в сочетании с витаминами группы В.

Ветеринары советуют использовать в лечении колибактериоза пробиотики («Био Плюс 2В», «Лакто-Сак»), иммуномодуляторы (к примеру, «Лидиум» в соотношении 2 мг/кг массы). Существуют также народные средства лечения эшерихиоза: отвары тысячелистника, конского щавеля, зверобоя, дубовой коры. Но они эффективны в процессе лечения особей в возрасте 10–15 дней.

Профилактика

Профилактика колидиареи заключается в повышении резистентности организма беременной свиноматки и её будущего потомства. В этих целях за 10–15 дней до опороса свиноматку определяют в отдельное чистое помещение, в котором до этого были соблюдены все необходимые меры дезинфекции с использованием натра, хлорамина, фурацилина. Саму свиноматку тщательно вымывают, а её конечности дезинфицируют 0,5 % раствором лизола или 5 % раствором формалина. Опорос свиноматки должен происходить в стерильно чистом помещении. Работнику, который будет принимать поросят, необходимо строго придерживаться санитарно-гигиенических норм.

Важно! Рацион новорожденных поросят должен состоять исключительно из продуктов, подвергшихся термической обработке.

Была ли эта статья полезна?

Напишите в комментариях, на какие вопросы Вы не получили ответа, мы обязательно отреагируем!

Вы можете посоветовать статью своим друзьям!

Вы можете посоветовать статью своим друзьям!

Да

Нет

26 раз ужепомогла

agronomu.com

Колибактериоз свиней: симптомы, лечение

Чаще всего колибактериоз поражает поросят, у которых еще не сформирована иммунная система. Инфекция проявляется через 3-7 дней с момента заражения. Колибактериоз у свиней протекает в острой форме.

Больные свиньи

Что собой представляет колибактериоз свиней?

Заболевание вызывают энтеропатогенные кишечные палочки, которые относятся к группе Enterobacteriaceae. Эшерихии в процессе размножения выделяют большое количество токсинов. Диарея является ответной реакцией на проникновение патогенных микроорганизмов. С ее помощью организм свиньи пытается избавиться от вредных компонентов.

Важно! Вероятность заболевания колибактериозом повышается в осенне-зимний период. Инфекция достаточно быстро поражает все стадо.

Причины

Источником заражения является эшерихия, которая присутствует в почве и воде. Кишечная палочка способна выживать в течение 1-2 месяцев. Наибольшую активность патогенные микроорганизмы проявляют при температуре 37 градусов.

Особенно уязвимы к инфекции молодые особи. В организм поросят микробы попадают через грязную воду или корм. Кишечная палочка может присутствовать в навозе. Необходимо регулярно менять подстилку, так как на нее попадают загрязненные фекалии и моча животных. Ситуация усугубляется тем, что взрослые особи зачастую являются носителями опасной инфекции.

Симптомы и признаки

Больное животное страдает от обезвоживания организма. Активное размножение вредоносных бактерий приводит к сильной интоксикации. Температура у инфицированной свиньи повышается до 42 градусов. Эшерихии поражают важные органы животного. Инфекция проникает на поверхность слизистых кишечника.

Специалисты различают несколько стадий развития заболевания:

1. Признаком подострого этапа является понос. Свинья достаточно быстро теряет большое количество жидкости. Вместе с испражнениями организм лишается необходимых витаминов и минералов.
2. В дальнейшем у свиньи развивается острый этап, которые приводит к резким болям в брюшной полости. У свиньи западают глазные яблоки, начинаются судороги.
3. При отсутствии лечения болезнь переходит в сверхострую стадию. Свинья отказывается от корма. Колибактериоз сопровождается нарушением координации движений. У животное резко повышается температура. Обычно свинья погибает в течение 1-2 суток.

Эшерихии

На поверхности слизистой оболочки кишечника специалисты выявляют воспаленные участки. Колибактериоз вызывает деформацию тканей печени и почек. У свиньи отекают оболочки головного мозга.

Характерным признаком заболевания является изменение цвета селезенки. Она приобретает темно-серый оттенок. В процессе обследования ветеринары находят в желудке поросят свернувшееся молоко. У взрослых особей наблюдается гастроэнтерит, который протекает в катаральной форме.

Важно! Даже в случае выздоровления специалисты не исключают возникновение рецидивов.

Диагностика

Чтобы выявить колибактериоз используются бактериологические исследования. Специалисты производят забор кала свиней. Органы погибших особей упаковывают в специальные емкости и направляют в лабораторию.

Важно! На анализ можно направлять фекалии от животных, которые не принимали антибиотики. Антибактериальные препараты осложняют постановку диагноза.

Лечение

Чтобы помочь больному животному дают антибактериальные препараты (Левомицетин, Неомицин). Дозировка зависит от возраста свиньи. Справиться с обезвоживанием можно за счет раствора Рингера. Для уничтожения опасных бактерий используется Дюфюлак.

В процессе лечения антибиотики подавляют деятельность не только вредоносных микроорганизмов. После приема сильных препаратов у животного нарушается микрофлора кишечника.

Чтобы восстановить работу пищеварительной системы используются пробиотики. В корм больным животным добавляют Лакто-Сак и Био Плюс 2В. Размножение опасных бактерий сопровождается падением иммунитета. Поднять сопротивляемость организма можно за счет иммуномодуляторов (Лидиум). Для лечения колибактериоза используются специальные вакцины (Порцилис Коли, Дилювак Форте).

Отвар из дубовой коры

Специалисты рекомендуют сочетать прием антибиотиков с травяными отварами. Ускорить выздоровлением можно, если поить свиней настоем из зверобоя или тысячелистника. Благотворное воздействие на организм свиньи оказывает отвар из дубовой коры.

В случае осложнения ветеринары рекомендуют использовать Цефалоспорин или Гентамицин. При лечении поросят воду подкисляют молочной кислотой. Для терапии можно использовать фумаровую кислоту. В сочетании с антибактериальными препаратами такой способ лечения позволяет добиться положительных результатов.

Избавиться от неприятных симптомов можно с помощью гипериммунной сыворотки. Особенно быстро болезнь прогрессирует у молодых особей. Потеря жидкости приводит к обезвоживанию организма. Чтобы восстановить водно-солевой баланс используются сульфаниламидные средства. Они способствуют нормализации кислотно-щелочного равновесия. Препараты нейтрализуют токсины, которые провоцируют развитие диареи.

Профилактика

Заводчик должен принять меры по увеличению иммунитета свиноматок. Многие животные являются носителями опасной инфекции. Для опороса свиней лучше всего выделить отдельное помещение. Уничтожить кишечную палочку можно за счет процедуры дезинфекции. Для этого используются Хлорамин или Фурацилин.

Чтобы избежать заражения будущего потомства специалисты рекомендуют производить обработку свиноматки. Ее конечности тщательно моют с применением раствора Хлорамина. Человек, который участвует в процессе опороса, должен соблюдать гигиенические требования. В рационе новорожденных поросят не должно быть продуктов, не прошедших термическую обработку.

Как предотвратить заражение молодняка? Ошибки заводчиков приводят к негативным последствиям. Кишечная палочка быстро поражает большую часть стада. После появления поросят на свет свиноматок нужно поить свежей водой. В качестве корма используется концентрированный корм. В дальнейшем рацион свиней доводят до нормы.

Молочные продукты, которые дают поросят, нужно кипятить перед кормлением. Особое внимание нужно уделить раздельному содержанию животных. Молодняк не должен находиться в одном помещении с остальным стадом.

Строение, в котором находятся поросята, нужно предварительно очистить от навоза. Владелец животных должен провести процедуру дезинфекции. При выявлении колибактериоза необходимо изолировать больных особей. Обратите внимание на качество корма.

В случае острого колибактериоза нужно дать поросятам специальную сыворотку. Для восстановления пищеварительной системы используется отвар из овса. Слизистая жидкость обволакивает стенки кишечника и защищает их от воздействия патогенных микроорганизмов.

Заключение

Колибактериоз у свиней развивается из-за заражения эшерихиями. Патогенные микроорганизмы вызывают у животных приступы диареи, которые приводят к быстрому обезвоживанию организма. Отсутствие лечения может стать причиной массовой гибели свиней. Особенно чувствительны к эшерихиям поросята, так как у них еще не сформирована иммунная система.

fermhelp.ru

Колибактериоз поросят. | OMEDVET

Диарея у поросят одна главных причин экономических потерь в свиноводстве. Она появляется в первые дни жизни поросят, в период приспособления желудочно-кишечного тракта к новому виду корма (3-4 день жизни), а также в послеотъемый период. Частой причиной диареи являются кишечные палочки.

Этиология. Этиологическим фактором колибактериоза являются патогенные штаммы Escherichia coli. Штаммы, вызывающие диарею, можно классифицировать на основе факторов патогенности и выделить:

1. энтеротоксичные Е. coli (ЕТЕС)

2. энтероинвазионные Е. coli (EIEC).

3. энтеропатогенные Е. coli (ЕРЕС)

4. энтерогеморрагические Е. coli ЕНЕС)

5. энтероагрегационные Е. soli (ЕАЕС)

У поросят почти все случаи колибактериоза вызываются штаммами ЕТЕС, иногда штаммами ЕРЕС или STEC. В возникновении болезни главную роль отводят фимбриальным антигенам F4 (К88), F5 (К99), F6 (987Р), F41. Благодаря им, кишечные палочки прикрепляются к соответствующим рецепторам слизистой оболочки тонкого кишечника и защищаются от механического удаления перистальтикой. Наиболее распространен у штаммов ЕТЕС фимбриальный антиген. Его продуцируют около 70% изолятов, выделяемых от животных с признаками кишечной формы -колибактериоза. У поросят обнаружены два вида кишечного эпителия, с наличием или отсутствием типичных рецепторов для фимбрий F4. Это значит, что поросята без типичных рецепторов невосприимчивы к патогенным штаммам Е. coli с фимбриями F4. Селекция соответствующих линий свиней дает шанс исключить из воспроизводства животных с рецепторами к адгезивным антигенам, что позволит ограничить потери от инфицированных патогенными штаммами ЕТЕС.

Эпизоотологические данные. Колибактериоз проявляется прежде всего там, где ведется интенсивное выращивание свиней. Наибольшие проблемы с колибактериозом поросят наблюдаются в осенне-зимний период, что связано с ухудшением условий среды (большая амплитуда температур) в родильных отделениях. Благодаря вакцинации против колибактериоза острота проблемы заметно снижается.

Патогенез. Заселение слизистой оболочки тонкого кишечника штаммами с адгезивными фимбриями является конечным этапом, но это непосредственно не приводит к проявлению болезни. Фактором, определяющим возникновение диареи, являются энтеротоксины патогенных штаммов Е. coli. Различают две основные группы энтеротоксинов: термолабильные (LT) и термо- стабильные (ST). Термолабильные энтеротоксины являются высокомолекулярными белками, состоящими из 5 нетоксичных субъединиц В, выполняющих рецепторную функцию, и одной субъединицы А с токсическими свойствами, определяющими появление диареи. Термолабильные энтеротоксины LT являются сильными антигенами, благодаря чему индуцируют синтез специфических антитоксических антител. Кроме инфекции, вызванной штаммами ЕТЕС, иногда диарею вызывают энтеропатогенные штаммы (ЕРЕС) или цитотоксичные (STEC).

Клинические признаки. Первые клинические признаки наблюдаются у новорожденных поросят уже через 2-3 часа после рождения у отдельных поросят в помете, а иногда и во всем помете, наблюдается диарея. Чаще всего колибактериоз наблюдается в пометах у ремонтных свинок. Фекалии больных поросят вначале кашеобразные желтого цвета, затем становятся  серо-белого цвета. У заболевших поросят наблюдается быстрая потеря веса из-за обезвоживания, в течение нескольких десятков часов они могут терять до 40% массы тела. Кожа поросят приобретает серый цвет, становится шероховатой, матовой. Нелеченные поросята бесцельно блуждают по загону, затем впадают в кому и гибнут. Потери в некоторых случаях касаются целых пометов, чаще гибнет только часть поросят помета, остальные очень медленно выздоравливают.

Патологоанатомические изменения. При вскрытии отмечается острый катаральный или геморрагический гастроэнтерит. Содержимое тонкого и толстого кишечника жидкое. Характерным является сильная гиперемия брыжейки. Почти всегда в тонком кишечнике встречается непереваренное свернувшееся молоко. Взятие и пересылка материала для исследовании Для бактериологических исследований берут и пересылают в охлажденном виде мазки из прямой кишки или перевязанный тонкий кишечник от нелеченных поросят. При лабораторном исследовании выясняют, имеют ли выделенные культуры E. coli факторы патогенности (фимбриальные антигены, способность к образованию энтеротоксина). Чувствительность к антибиотикам определяют только у выделенных культур E. coli, так как делать это в отношении изолированных из фекальных масс непатогенных штаммов нецелесообразно. Меры борьбы Вакцинация свиноматок в последнем периоде беременности вакцинами, содержащими инактивированные бактериальные взвеси или изолированные фимбрии, стимулирует выработку антифимбиальных антител, которые с молозивом передаются поросятам и предохраняют их от диареи, блокируя рецепторы, специфичные для фимбрий, и инактивируя энтеротоксины. В нашей стране зарегистрировано много вакцин против колибактериоза поросят, различающихся по эффективности. К наиболее известным относят Colivac S, Porcilis Coli, eocokipor. Польскую вакцину Colivac S вводят свиноматкам за 5-2 недели перед опоросом, 5 мл однократно. Поросят можно прививать в возрасте старше шести недель, двукратно через две недели, в дозе 2 мл. Вакцины Porcilis Coli. Xeocopolipo. Coliporce предназначены для создания колострального иммунитета у поросят. Для этого свиноматкам в третьем триместре супоросности в первом цикле двукратно с промежутком 4-6 недель, а в каждом последующем однократно, примерно за 2 недели перед опоросом, вводят одну из указанных вакцин. Нецелесообразно и экономически невыгод- но применять две названные выше вакцины поросятам. Если болезнь вызвана серотипом, которого нет в вакцине, целесообразно заменить фирменные биопрепараты аутовакциной против коли- бактериоза. Для повышения эффективности вакцинации необходимо постоянно контролировать смену серотипов E. coli, циркулирующих на ферме. При использовании антибиотиков необходимо определять чувствительность к ним у изолированных штаммов. Наблюдения показывают, что патогенные штаммы E. coli наиболее чувствительны к гентамицину, норфлоксацину и цефалоспорину. Антибиотикотерапия должна сочетаться борьбой с обезвоживанием путем внутрибрюшинного или перорального введения электролитов (раствор Рингера). Очень хороший результат дает внутрибрюшинное применение препарата дюфалак в дозе 10 мл на поросенка. Целесообразно подкислять воду для питья (молочная кислота 0,5% или фумаровая кислота в 1 кг/100 л воды). Лучший результат дают композиции кислот, например, Ацид-Пак. В терапии и профилактике колибактериоза все шире используются растительные препараты, например, Фарматан на основе танина. Его применяют с водой или кормом (3-5 кг/т корма). Рекомендуется применение иммуномодуляторов (Лидиум 2 мг/кг массы. Для профилактики и при лечении болезни хорошие результаты дают пробитики (Био Плюс 2В, Лакто-Сакк). Антибиотики можно применить только после того, как поросята сосали молозиво. Для профилактики колибактериоза у отъемышей хорошие результаты дает Суибикол в дозе 1кг/100 кг корма. Во время лечения обеспечивают в помещении температуру 30°-34°С и постоянный доступ к чистой подкисленной и «отстоявшейся» воде. Поросятам с признаками колибактериоза противопоказаны препараты железа.

Автор: doctor

Нашли ошибку? Сообщите, пожалуйста, о ней. Выделите ошибку и нажмите ctrl+enter.

25.02.2014 @ 15:46

просмотров 3032

www.omedvet.ru

Живая вакцина против колибактериоза свиней

Изобретение относится к ветеринарной микробиологии и биотехнологии. Живая вакцина представляет собой суспензию, содержащую растворитель и антиген из штамма E.coli в виде бактериальной массы колониеобразующих микробных клеток. Вакцина содержит в качестве растворителя - физиологический раствор, а в качестве антигена - антиген из штамма E.coli "Б-5" с содержанием 2,4×108-2,4×109 микробных клеток в 1 см3 физиологического раствора. Живая вакцина обладает высокоиммуногенными свойствами, безопасна. 3 табл.

Изобретение относится к ветеринарной микробиологии и биотехнологии и может быть использовано для получения живых вакцин против колибактериоза сельскохозяйственных животных.

Колибактериоз (эшерихиоз) - инфекционная болезнь, вызываемая энтеропатогенными эшерихиями, широко распространен во многих странах мира и наносит значительный экономический ущерб животноводству за счет высокой смертности телят и поросят.

Известна вакцина против колибактериоза сельскохозяйственных животных (см. патент РФ №1149466 по кл. А 61 К 39/108, опуб. 10.12.95), содержащая антигены эшерихий, консервант на основе формалина, адъювант, бульон Хоттингера и физиологический раствор. Вакцина изготовлена на основе штаммов, продуцирующих термолабильные и термостабильные токсины, обладает выраженными антигенными свойствами, широким спектром иммуногенности.

Однако эффективность данной вакцины невысока, поскольку она, являясь инактивированной, теряет свою иммуногенность при инактивации. Кроме этого, изготовление данной вакцины требует значительных трудозатрат, и она является дорогостоящей, так как предусматривает использование нескольких штаммов.

Известна также живая вакцина против колибактериоза сельскохозяйственных животных для внутримышечного введения (см. Wilson R.A., Jotila J.W. Experimental neonatal colibacillosis caws. Serological studies // J. Infection and Jmmunity. - 1976. - V.13. - №1 - Р.92), содержащая бульонную культуру штамма “В-44” (E.coli 0,9:K:H) с содержанием 3×1010 микробных клеток в см3 и адъювант. Вакцину вводят один раз подкожно, а второй - внутримышечно.

Однако вирулентность данной вакцины достаточно высока. Кроме этого, вакцина является многокомпонентной системой, поскольку включает адъювант, а необходимость двукратного введения увеличивает трудозатраты.

Наиболее близкой к заявляемой является живая вакцина против колибактериоза поросят (см. Nagy L.K., Phogal B.S. The effect of colostrums on the adhesion of Escherihia coli to the small intenstine of the pig.// Research in Veterinery sience. - 1976 - v.21. - p.303-308), содержащая суспензию штамма 0149:К91:К88, при этом суспензия содержит 1×1010 колониеобразующих микробных клеток в см3. Штамм ресуспензирован в кислотном гидролизате казеина. Вакцина предназначена для пероральной иммунизации новорожденных поросят.

Однако данная вакцина обладает остаточной вирулентностью. Кроме того, использование гидролизата казеина может приводить к появлению аллергических реакций, отвлечению иммунной системы на дополнительный раздражитель, а также появлению воспалительного процесса на месте введения вакцины.

Изобретение направлено на решение задачи создания безопасной живой вакцины против колибактериоза свиней для внутримышечного введения, обладающей высокоиммуногенными свойствами.

Для решения поставленной задачи живая вакцина против колибактериоза свиней, представляющая собой суспензию, содержащую растворитель и антиген из штамма Е.coli в виде бактериальной массы колониеобразующих микробных клеток, согласно изобретению содержит в качестве растворителя - физиологический раствор, а в качестве антигена - антиген из штамма Е.coli “Б-5” с содержанием 2,4×108-2,4×109 микробных клеток в 1 см3 физиологического раствора.

В известных авторам источниках патентной и научно-технической литературы не описано авирулентных живых вакцин против колибактериоза свиней, обладающих высокоиммуногенными свойствами за счет использования антигена из штамма Е.coli “Б-5”, представляющего собой бактериальную массу с содержанием 2,4×108-2,4×109 микробных клеток в см3.

Сказанное позволяет сделать вывод о наличии в заявляемом изобретении критерия “изобретательский уровень”.

Штамм, предназначенный для изготовления вакцины, характеризуется следующими свойствами.

Культуральные и морфологические признаки.

Культивирование осуществляют вначале на мясопептонном бульоне (МПБ), затем на мясопептонном агаре (МПА) при температуре 37°С в течение от 18 до 48 часов при аэробных условиях. При этом на МПБ колонии растут диффузно, образуя интенсивную муть и легко разбивающийся осадок, на МПА вначале образуются гладкие, выпуклые, блестящие с ровными краями колонии S-формы. В последующем возможно образование переходных от S- к R-форме колоний и суховатых с неровными краями R-форм колоний (до 50%). На агаре Эндо формируются темно-красные с металлическим блеском колонии.

Ферментативные свойства.

Микроорганизм обладает подвижностью, проявляет каталазную активность, дает положительную реакцию с метилротом, продуцирует индол, ферментирует глюкозу с газообразованием, а также лактозу, арабинозу, маннит, мальтозу, ксилозу, сорбит, дульцит.

Условия и состав сред для токсинообразования: бульон Хоттингера.

Антигенные свойства.

Продукт, синтезируемый штаммом Escherichia coli Б-5 - термолабильный экзотоксин, не подверженный нейтрализации поливалентной антитоксической сывороткой против колибактериоза (эшерихиоза) сельскохозяйственных животных.

Молекулярно-генетическая особенность штамма - треки штамма как в S-, так и в R-формах имеют репликон размером около 0,3 кв, в данном репликоне имеется ген, кодирующий В-субъединицу термолабильного токсина (ЛТ), обуславливающий иммуногенную активность штамма. Структурные гены ЛТ дополнительно интегрированы и в хромосому микробной клетки. В клетках штамма имеется репликон, несущий генетическую информацию регуляторного свойства, необходимую для синтеза ЛТ-продукции. У штамма имеется в наличии иммуногенный эпитоп, но отсутствует репликон, ответственный за реактогенность эшерихий.

Чувствительность к антибиотикам (зона задержки роста в мм): полимиксин - 11, стрептомицин - 25, левомицетин - 25, рифампицин -9, карбенициллин - 15; не чувствителен к: оксациллину, доксициклину, линкомицину, тетрациклину, олеандомицину, ампициллину, пенициллину.

Вирулентные свойства.

Внутрибрюшинное введение культуры штамма в концентрации 5·108 м.к./см3 и объеме 0,5 мл гибели белых мышей не вызывает. LД50 - 1,2·1010 м.к./см3. Гибель белых мышей наступает в течение суток.

Определение энтеротоксигенных свойств штамма.

Для определения токсинообразования культивирование штамма проводили в питательном составе Mundeli в течение 20 часов. Полученную бульонную культуру разделяли на токсиносодержащий материал и бакмассу методом стерилизующей фильтрации. Культуральная жидкость, лишенная бактериального компонента, служила материалом, содержащим экзотоксин Е.coli.

Устойчивость к температуре определяли прогреванием токсиносодержащего материала в течение 10-минутного кипячения при 100°С и последующим его введением белым мышам.

Определение ТЛ-токсина проводили с использованием: прогретого токсиносодержащего материала, не прогретого и питательной среды Mundeli - в качестве отрицательного контроля.

Культивирование штамма можно осуществлять, например, на разработанной и запатентованной Саратовской НИВС (патент №2142505) питательной среде следующего состава, мас.%: аминокровин 5-20; пептон 0,6-1,5; хлористый аммоний 0,08-0,18; хлористый натрий 0,09-0,11; гидролизат казеина 9-20; питательная среда “ИГЛА” 52-61; дистиллированная вода - остальное. На данной среде культивирование осуществляют в течение 7 суток при температуре 37°С, затем суспензию центрифугируют при 6000 об/мин в течение 30 минут. Надосадочная жидкость являлась энтеротоксигенным материалом.

Пример 1.

Способ изготовления живой вакцины против колибактериоза свиней заключается в следующем.

Осуществляют культивирование штамма. Для этого штамм Е.coli “Б-5” засевают в пробирки вначале на мясопептонном бульоне (МПБ), затем на мясопептонном агаре (МПА) при температуре 37°С в течение 18 часов при аэробных условиях.

Полученную бактериальную массу смывают физиологическим раствором и получают суспензию с содержанием микробных клеток 1,2×1010 в 1 см3 раствора. Затем добавлением к полученной суспензии физиологического раствора доводят содержание микробных клеток до 2,4×108-2,4×109 в 1 см3 физиологического раствора.

При этом суспензию с содержанием микробных клеток 2,4×108 в 1 см3 используют для вакцинации поросят, а с содержанием микробных клеток 2,4×109 в 1 см3 - для вакцинации свиноматок.

Пример 2. Оценку иммуногенных свойств вакцины проводили путем определения титра специфических антител в сыворотке крови кроликов, иммунизированных заявляемой вакциной.

Для этого ставили реакцию агглютинации (РА) с сыворотками крови иммунизированных и интактных кроликов. В серологических пробирках осуществляли разведение сывороток, начиная с 1:25 до 1:6400 в объеме 1 мл. В каждое разведение сывороток вносили по 2 капли антигена, в качестве которого использовали 10 млрд. взвеси микробных тел Е.coli (живой и инактивированной). Сыворотки перемешивали с антигеном, встряхивая пробирки, после чего их помещали в термостат и выдерживали вначале в течение 4 часов при 37°С, а затем 18-24 часа при комнатной температуре. Учет реакции осуществляли по степени просветления сывороток и образованию конгломерата (осадка в виде “зонтика”) на дне каждой пробирки. Результат определения титра специфических антител в сыворотках крови иммунизированных и интактных кроликов представлен в таблице 1, где характер агглютинации представлен следующим образом:

++++ - полная агглютинация,

+++ - почти полная агглютинация,

++ - неполная агглютинация,

+ - незначительная агглютинация,

- отсутствие агглютинации.

Таким образом, однократное введение живой вакцины обеспечивает повышение уровня иммунитета как в отношении Н- (жгутикового), так и O- (соматического) антигенов по сравнению с контролем в 8 раз.

Пример 3. Для оценки напряженности иммунитета использовали две группы белых мышей. Первую группу мышей (10 голов) подвергли однократной иммунизации культурой штамма E.coli Б-5, вторая группа мышей (10 голов), которым вводили физиологический раствор в тех же дозах, была контрольной. Через 14 дней обе группы животных заразили внутрибрюшинно вирулентной культурой эшерихий с концентрацией 5×108 микробных клеток в 1 см3 физиологического раствора в дозе 0,5 мл. Результаты исследований представлены в таблице 2, из которой следует, что сохранность иммунизированных животных составляет 100%, в контрольной группе все животные погибли.

Пример 4.

Для доказательства авирулентности вакцины ее вводили мышам в концентрации 5×108 микробных тел. Гибели мышей не наступало.

Пример 5.

Производилась отработка дозы вакцины как для свиноматок, так и для поросят. Свиноматкам вводили вакцину с концентрацией 2,4×109 микробных клеток в 1 см3, а поросятам - с концентрацией 2,4×108 в 1 см3 физиологического раствора.

Для этого одной группе свиноматок в количестве 7 голов вакцину вводили внутримышечно в дозе 2 мл, а другой группе в количестве 6 голов - в дозе 3 мл. В результате проведенных экспериментов была подобрана доза 2 мл, которая обеспечивала наиболее эффективную защиту животных и их сохранность - 98,5%, при этом родившиеся поросята колибактериозом не болели. На месте введения вакцины у животных воспалительных реакций не регистрировалось. Введение вакцины свиноматкам в дозе 3 мл не оказывало особого влияния на эффективность вакцинации.

Аналогичным образом была испытана вакцина в концентрации 2,4×108 на поросятах. Результат исследований представлен в таблице 3, из которой следует, что сохранность поросят в опытной группе на 6,9% больше, чем в контрольной. При этом наилучшая эффективность достигалась при введении вакцины в дозе 2 мл.

Проведены широкие производственные испытания вакцины на свиноматках и отдельно - на поросятах.

Вакцину вводили 4783 свиноматкам внутримышечно в дозе 2 мл однократно на 104-105 день супоросности. В контрольной группе животных (в количестве 852 головы) использовали общепринятые методы профилактики колибактериоза. Сохранность поросят-сосунов от вакцинированных свиноматок в опытной группе была на 8,7% выше, чем в контрольной.

Введение вакцины 5194 поросятам в возрасте 2-7 дней внутримышечно однократно в дозе 2 мл показало повышение сохранности на 10,8% по сравнению с контрольной группой (в количестве 7148 поросят), которым осуществляли профилактику принятыми в хозяйствах методами.

Таким образом, заявляемая вакцина высокоиммуногенна, не обладает реактогенностью, аллергогенностью, не вызывает воспалительных реакций на месте введения и обеспечивает защиту поросят от колибактериоза.

Живая вакцина против колибактериоза свиней, представляющая собой суспензию, содержащую растворитель и антиген из штамма E.coli в виде бактериальной массы колониеобразующих микробных клеток, отличающаяся тем, что она содержит в качестве растворителя физиологический раствор, а в качестве антигена - антиген из штамма Е.coli "Б-5" с содержанием 2,4×108-2,4×109 микробных клеток в 1 см3 физиологического раствора.

www.findpatent.ru

Колибактериоз поросят (Colibacteriosis)

Колибактериоз – острое инфекционное заболевание, протекающее с признаками диареи, интоксикации, расстройства сердечно-сосудистой и центральной нервной системы, сопровождающееся высокой смертностью.

Возбудитель – энтеропатогенная кишечная палочка с закругленными концами, длиной 1-3 мкм и шириной 0,4-0,6 мкм, относится к сем. Enterobacteriaceae, трабу Escherichieae, роду Escherichia, виду E.coli. Это факультативный анаэроб, спор и капсул не образует, грамотрицателен, часто обладает подвижностью за счет перетрихиально расположенных жгутиков. Обладает высокой ферментативной активностью – ферментирует с образованием кислоты и газа глюкозу, лактозу, маннит, образует индол, не образует сероводород, не разлагает мочевины, не разжижает желатин. Встречаются варианты, медленно сбраживающие или совсем не сбраживающие лактозу. E. coli не усваивает нитраты, дает положительную реакцию с метилротом, редуцирует нитраты в нитриты.

У энтеропатогенных эшерихий сложная антигенная структура, содержат они соматический О-антиген, поверхностный (капсульный, оболоченный) К-антиген и жгутиковый Н-антиген. Известно около 170 серогрупп эшерихий, различающихся по О-антигену, 100 разных вариантов К-антигена и около 60 типов Н-антигенов.

О-антиген представляет собой термостабильный липополисахаридно-белковый комплекс, не разрушающийся при нагревании до 100оС в течение 2,5 ч. Белковый компонент ответственен за иммуногенные, липоидный – за эндотоксические свойства, а полисахаридный – за серологическую специфичность О-антигена.

Капсульный К-антиген – полисахаридной природы, включает группу поверхностных антигенов трех видов – L, В и Д, которые отличаются один от другого чувствительностью к нагреванию и некоторым химическим веществам. Капсульные антигены L и В – термолабильны, Д-антиген – термостабилен и разрушается при 100оС за 2,5 ч. Помимо К-антигенов, которые являются кислыми или нейтральными полисахаридами, имеются антигены, представляющие собой белковый компонент клеточной стенки и обуславливающие адгезивные свойства эшерихий. Их можно рассматривать как один из факторов, способствующих проявлению вирулентных свойств эшерихии. К ним относятся фибриллярные или пилиантигены К 88, К 98, 987р, F 41, проявляющие все свойства L-антигена.

Антигены К88, 987р находят преимущественно у штаммов, выделенных от больных и павших от колибактериоза поросят, К 98 – от телят и ягнят и F-41 – от ягнят. Адгезивные антигены обладают выраженными иммуногенными свойствами и могут играть роль протективных антигенов. Синтез их кодируется геномом, расположенным на эписоме.

Н-антигены эшерихии белковой природы, и в отличие от О- и К-антигенов относятся к типоспецифическим. Патогенные эшерихии одних и тех же серогрупп могут вызывать заболевания у животных разных видов и человека.

Основным фактором патогенности эшерихий является способность синтезировать адгезины, энтеротоксины, гемолизины, колицины, контролирующиеся внехромосомными генетическими детерминантами – плазмидами.

Адгезины – длинные тонкие образования на поверхности бактерий, называемые фимбриями или пили. У E.coli выявлены общий и специфические адгезины. Общий адгезивный антиген обеспечивает прилипание клеток бактерий к клеткам слизистой кишечника поросят.

Эндотоксины – это биомолекулы, обуславливающие основной специфический синдром инфекционного заболевания. Известно 8 типов эшерихиозных эндотоксинов, относящихся к энтеротропным ядам.

Эшерихии продуцируют экзотоксин двух типов – термолабильный (ТЛ) и термостабильный (ТС). ТЛ токсин – вещество белковой природы, иммуногенен, разрушается при 56оС за 10-30 мин, обладает некротизирующим и нейротропным действием. ТС токсин не иммуногенен, представляет собой гетерогенный полипептид и содержит две фракции – ТСа и ТСв. Различаются они по биологической активности в тестах на изолированной петле кишечника кролика и вызывают отек лапок мышей.

Свежевыделенные штаммы E. coli обладают ярко выраженной гемолитической активностью. L-гемолизин непрочно связан с микробной клеткой и переходит в ростовую жидкость, активен в отношении эритроцитов человека, лошади, быка, барана, свиньи, кролика, морских свинок, мышей, цыплят.

Колицины обладают способностью ингибировать рост других бактерий, что обеспечивает E. coli селективное преимущество в экологических нишах.

Эпизоотологические данные. Особенность колибактериоза как инфекционного заболевания характеризуется двумя эпизоотологическими признаками: 1. заболевают преимущественно поросята новорожденные, 2-4-месячного возраста и в первые недели отъема; 2. возбудитель принадлежит к группе условно-патогенных микробов. Заболевание широко распространено. Без применения лечебных средств гибель поросят достигает 100%, заболеваемость – от 40-50% до 80%. Инфекция может проявляться как спорадически, когда заболевают поросята отдельных пометов, так и в виде крупных экзоотических вспышек с поражением до тысячи поросят. Заболевание чаще всего носит стационарный характер и может возникнуть в любое время года.

Источник возбудителя – больные, переболевшие колибактериозом подсвинки и свиньи-бактерионосители энтеропатогенных эшерихий. Носителями энтеропатогенной кишечной палочки являются 40% взрослых свиней, 92,3% - подсосных свиноматок. Основной путь заражения – элементарный, реже аэрогенный. Известны случаи внутриутробного заражения поросят. Предрасполагающие факторы в неблагополучных хозяйствах – неудовлетворительные условия кормления и содержания свиноматок в период супоросности. Факторами передачи возбудителя могут быть контаминированные предметы ухода за животными, посуда, корм, одежда, а переносчиками – разные насекомые, обслуживающий персонал. Одним из факторов передачи возбудителя может явиться сырье для комбикормов: мясокостная мука, мясная, рыбная, зернофураж, обсемененные энтеропатогенной кишечной палочкой.

Наряду с этим, необходимо учитывать, что пищеварительный тракт у поросят созревает в 2-месячном возрасте. В связи с этим, поросята очень чувствительны к просчетам в кормлении, содержании, нуждаются во внимательном уходе.

Важную роль в возникновении болезни играет уровень инфицированности помещения, при котором поросенок может получить необходимую дозу возбудителя.

Патогенез. В результате ослабления общей резистентности организма новорожденных энтеропатогенные эшерихии проникают в отдел тонких кишок и, интенсивно размножаясь, выделяют эндо- и экзотоксины. Термолабильный токсин (продуцируют почти все эшерихии) адсорбируется на ворсинках эпителиальных клеток тонких кишок, стимулируя аденилатциклазу, что приводит к резкому очаговому увеличению концентрации циклического аденозинмонофосфата. Это медиатор вызывает гиперсекрецию электролитов и дополнительную диффузию воды молодыми малодифференцированными клетками эпителия слизистой оболочки кишечника в просвет тонкой кишки и угнетает реабсорбцию натрия. Просвет кишки переполняется жидкостью, усиливается перистальтика и возникает диарея. В результате повышенной секреции из организма выделяются вода и электролиты, что приводит к ацидозу и при тяжелом течении болезни может обусловить дигидротационный шок.

Из-за пониженной защитной функции стенок кишечника эшерихии проникают в лимфу, затем в кровь и ткани, вызывая септицемию. Иногда развитие септицемии с последующим летальным исходом опережает признаки диареи. Кроме того, в результате действия эндотоксина и гемолиза, нарушается порозность сосудов, что сопровождается отеками и нарушением функции нервной системы.

Клинические признаки. Колибактериоз поросят протекает в трех формах: энтеритной, энтеротоксемической (отечной) и септической. Течение болезни сверхострое, острое, подострое и хроническое.

Септическая форма болезни присуща новорожденным поросятам и поросятам-сосунам. Течение ее сверхострое и острое, сопровождается высокой температурой тела и высокой летальностью. Отмечают отказ от корма, угнетение, нарушение координации движения, иногда понос. Из-за расстройства работы сердечно-сосудистой системы в области пятачка, подгрудка, живота кожа приобретает синюшный оттенок. Колисепсисом болеют лучшие, хорошо упитанные поросята. Больные животные погибают в течении 1-2 суток.

При энтеритной форме регистрируют профузный понос, вялость, угнетение. Смертность невысокая, болезнь протекает подостро и хронически. Для энтеротоксемической формы характерны токсические явления и коллапс у поросят-сосунов, отеки у поросят-отъемышей. Эти формы болезни протекают несколько легче и более растянутые во времени. При отечной форме болезни отмечают короткий инкубационный период – от 3 до 12 ч. Обычно заболевают хорошо упитанные поросята. Они отказываются от корма, возбудимы, регистрируют шаткую походку и подергивания головой и конечностями, параличи. Отмечают синюшность кожи ушей, пятачка, живота и конечностей, отечность век, часто диарею. Дыхание может быть сопящим из-за отека слизистой носа. Агония у поросят бывает длительной (до суток и более). Болезнь протекает остро, и через несколько часов после появления признаков большинство животных погибает.

Патологоанатомические изменения. Трупы павших поросят первой недели жизни истощены, волосяной покров, кожа хвоста, задней части туловища покрыты фекальными массами.

Патологоанатомические изменения, характерные для колибактериоза при сверхостром течении, не успевают развиться. При остром и подостром течениях у новорожденных и поросят-сосунов они характеризуются анемичностью слизистой оболочки, кожа в области анального отверстий и хвоста загрязнена фекалиями. Слизистая желудка гиперемирована со студенистым инфильтратом, слизистая тонких кишок с признаками катарально-геморрагического воспаления, набухшая, покрыта слизью. Регионарные брыжеечные лимфатические узлы увеличены, гиперемированы. Лимфатический аппарат прямой кишки (пейеровы бляшки, солитарные фолликулы) гиперплазированы и гиперемированы. Селезенка темно-серого цвета, слегка увеличена, плотная, бугристая. Печень и почки анемичны. Сосуды головного мозга кровенаполнены, ткань отечна.

При отечной болезни отмечают выраженные отеки подкожной соединительной ткани, стенок желудка. В желудке обнаруживают большое количество пищи твердой консистенции. Мезентериальные лимфатические узлы кишечника набухшие, гиперемированы. В тонких кишках желтоватая или темно-красная слизистая или водянистая жидкость. Характерны мозговые и легочные отеки.

Легкие бледно-розового цвета, мягкие на ощупь, на разрезе из трахеи и бронхов выступает пенистая жидкость.

Сердце дряблое, под эпикардом заметны точечные или полосчатые кровоизлияния.

Из данных патологической морфологии следует, что при колибактериозе поросят в организме развиваются тяжелые структурные изменения не совместимые с жизнью животных.

Диагностика. Диагноз ставится на основании эпизоотологических данных, клинических признаков болезни и патоморфологических изменений. Окончательный диагноз подтверждается результатами бактериологических исследований. Для этого в лабораторию от свежепавшего не леченного антибактериальными средствами поросенка направляют голову, трубчатую кость, кусочки печени, селезенки, участок тонкой кишки, брыжеечные лимфоузлы. Дифференцировать колибактериоз необходимо от острых расстройств пищеварения незаразного происхождения (диспепсия, отравление), инфекционных заболеваний – омфалогенный сепсис, сальмонеллез, пастереллез, диплококкоз, анаэробная энтеротоксемия, ТГС, РВБС, ЭВИС, инвазионных болезней – криптоспоридиоз.

Меры борьбы. Основные мероприятия по борьбе с колибактериозом поросят должны быть направлены на своевременную оценку эпизоотической ситуации, предотвращение возможности распространения возбудителя в стаде, на строгое соблюдение и выполнение общих технологических, зоотехнических, ветеринарно-санитарных мероприятий.

Многолетние практические наблюдения позволяют рекомендовать организацию раздельного получения опоросов от основных и разовых маток, а также подбор на опорос свиноматок с одинаковым иммунным фоном, что будет способствовать получению здоровых поросят с колостральным иммунитетом одного уровня. Наряду с этим необходимо строго соблюдать принцип «пусто-занято» при заполнении секции. Обязательным технологическим ветеринарно-санитарным приемом должна стать борьба с патогенной кишечной палочкой в помещениях для опоросов.

Дезинфекция должна проводиться самым тщательным способом с использованием современных высококачественных дезинфектантов.

Лечение и профилактика. Лечение колибактериоза в виду сложности и особенностей патогенеза инфекции должно быть направлено на ликвидацию возбудителя в организме, повышение общей резистентности, сорбцию токсинов, регидратацию.

Важнейшим моментом в терапии является применение противомикробных препаратов, подобранных по чувствительности к ним выделенных микроорганизмов. В последние годы с положительным эффектом применяются антибиотики пролангированного действия (амоксициклин, кобактан), цефалосифины (кубольтан, экопцеф), хостоциклин, хостамокс, неопен и др. Наряду с антибиотикотерапией применяется высокоспецифичная, обладающая стимулирующим действием иммунотерапия. Это препараты, содержащие специфические антитела против возбудителя инфекции – поливалентная сыворотка против колибактериоза сельскохозяйственных животных, сыворотка крови реконвалесцентов, сыворотка крови забойных животных, сыворотка крови привитых против колибактериоза свиноматок.

С профилактической целью поросятам до 5-дневного возраста внутримышечно вводят поливалентную сыворотку против колибактериоза (эшерихиоза) в дозах 8-10 мл, старше 5 дней – 10-15 мл. С лечебной целью ее применяют поросятам соответственно указанному возрасту в дозах 15-20 и 20-30 мл.

Для снижения действия токсинов в желудочно-кишечном тракте задают активированный уголь, используют 4,5%-40% растворы глюкозы. Однако проводимые мероприятия не окажут должного эффекта без применения водно-солевых растворов, способствующих восстановлению водно-солевого равновесия организма больного поросенка. Водно-солевые растворы применяют в зависимости от стадии болезни и степени обезвоживания организма. Рекомендованы физиологический раствор бикарбоната натрия, раствор Рингер-Локка, раствор Филипса и др.

Расстройство пищеварения – это основной патогенетический признак болезни, поэтому следует назначить полуголодную диету с уменьшением дачи белковых концентратов до 50% и заменой их травяной мукой.

Для более быстрого заживления слизистой оболочки желудочно-кишечного тракта показано применение вяжущих, обволакивающих, противовоспалительных средств, витаминов и т.д.

Однако, при сильном обезвоживании, расстройствах сердечно-сосудистой системы выздоровление животных достаточно затруднено из-за происходимых в больном организме разрушительных изменений на клеточном уровне.

Поэтому первостепенное значение приобретает специфическая профилактика колибактериоза поросят.

Иммунная система поросят первых дней жизни характеризуется состоянием пониженной иммунологической реактивности и в значительной степени зависит от поступления защитных антител с молозивом и молоком матери. Уровень полученного колострального (пассивного) иммунитета оказывает непосредственное влияние на предохранение и защиту новорожденных поросят от колисепсиса. Поросята, переболевшие колибактериозом, приобретают стойкий и длительный иммунитет (сывороточные О-антитела обнаруживались в титрах 1:40-1:80). К 7-10-дневному возрасту поросята уже способны вырабатывать активный иммунитет.

Средства специфической профилактики колибактериоза разрабатываются с учетом особенностей развития иммунной системы новорожденных поросят и основаны на иммунизации супоросных свиноматок.

Из средств специфической профилактики применяют поливалентную ГОА формолтиомерсаловую вакцину, содержащую 9 штаммов разных серогрупп эшерихий, часть из которых синтезируют адгезивные антигены К88ас, К88ав и продуцируют ТЛ и ТС экзотоксины и гемолизины. Вакцину вводят супоросным свиноматкам за 1,5-2 мес. до опороса внутримышечно, двукратно с интервалом 10-15 дн. В дозах 4-5 и 5-6 мл, а также поросятам за 10-20 дн. Перед отъемом по 1-1,5 и 1,5-2 мл. В связи с тем, что в биофабричные вакцины включены только О-серогруппы кишечной палочки, их эффективность невысокая.

В БелНИИЭВ им. С.Н.Вышелесского (Гутковский А.А. и др.) разработана и успешно применяется в практической ветеринарии формолквасцовая вакцина против колибактериоза поросят, в основу которой взяты выделенные местные (эпизоотические) штаммы. Свежевыделенные штаммы эшерихий продуцируют адгезины К-88, К-99, термолабильный энтеротоксин. Однако, зачастую, вакцины реактогенны, вызывают осложнения в виде рвоты, угнетения, повышение температуры. Важным является разработка вакцин против колибактериоза поросят, состоящих из субклеточных пилисодержащих компонентов. Для профилактики смешанных вирусно-эшерихиозных инфекций производятся ассоциированные инактивированные вакцины против трансмиссивного гастроэнтерита, ротавирусной болезни и колибактериоза поросят, которые вводятся супоросным свиноматкам за 45-55 дней до опороса дважды с интервалом в 21 день и обладают выраженной эпизоотической эффективностью. В БелНИИЭВ им. С.Н.Вышелесского разработана также инактивированная вакцина против рота-, энтеровирусных инфекций и колибактериоза поросят, которая обеспечивает защиту 82,5-87,3% поросят от заражения возбудителями названных заболеваний.

studfiles.net

Живая вакцина против колибактериоза свиней

Изобретение относится к ветеринарной микробиологии и биотехнологии и может быть использовано для получения живых вакцин против колибактериоза сельскохозяйственных животных.

Колибактериоз (эшерихиоз) - инфекционная болезнь, вызываемая энтеропатогенными эшерихиями, широко распространен во многих странах мира и наносит значительный экономический ущерб животноводству за счет высокой смертности телят и поросят.

Известна вакцина против колибактериоза сельскохозяйственных животных (см. патент РФ №1149466 по кл. А 61 К 39/108, опуб. 10.12.95), содержащая антигены эшерихий, консервант на основе формалина, адъювант, бульон Хоттингера и физиологический раствор. Вакцина изготовлена на основе штаммов, продуцирующих термолабильные и термостабильные токсины, обладает выраженными антигенными свойствами, широким спектром иммуногенности.

Однако эффективность данной вакцины невысока, поскольку она, являясь инактивированной, теряет свою иммуногенность при инактивации. Кроме этого, изготовление данной вакцины требует значительных трудозатрат, и она является дорогостоящей, так как предусматривает использование нескольких штаммов.

Известна также живая вакцина против колибактериоза сельскохозяйственных животных для внутримышечного введения (см. Wilson R.A., Jotila J.W. Experimental neonatal colibacillosis caws. Serological studies // J. Infection and Jmmunity. - 1976. - V.13. - №1 - Р.92), содержащая бульонную культуру штамма “В-44” (E.coli 0,9:K:H) с содержанием 3×1010 микробных клеток в см3 и адъювант. Вакцину вводят один раз подкожно, а второй - внутримышечно.

Однако вирулентность данной вакцины достаточно высока. Кроме этого, вакцина является многокомпонентной системой, поскольку включает адъювант, а необходимость двукратного введения увеличивает трудозатраты.

Наиболее близкой к заявляемой является живая вакцина против колибактериоза поросят (см. Nagy L.K., Phogal B.S. The effect of colostrums on the adhesion of Escherihia coli to the small intenstine of the pig.// Research in Veterinery sience. - 1976 - v.21. - p.303-308), содержащая суспензию штамма 0149:К91:К88, при этом суспензия содержит 1×1010 колониеобразующих микробных клеток в см3. Штамм ресуспензирован в кислотном гидролизате казеина. Вакцина предназначена для пероральной иммунизации новорожденных поросят.

Однако данная вакцина обладает остаточной вирулентностью. Кроме того, использование гидролизата казеина может приводить к появлению аллергических реакций, отвлечению иммунной системы на дополнительный раздражитель, а также появлению воспалительного процесса на месте введения вакцины.

Изобретение направлено на решение задачи создания безопасной живой вакцины против колибактериоза свиней для внутримышечного введения, обладающей высокоиммуногенными свойствами.

Для решения поставленной задачи живая вакцина против колибактериоза свиней, представляющая собой суспензию, содержащую растворитель и антиген из штамма Е.coli в виде бактериальной массы колониеобразующих микробных клеток, согласно изобретению содержит в качестве растворителя - физиологический раствор, а в качестве антигена - антиген из штамма Е.coli “Б-5” с содержанием 2,4×108-2,4×10 9 микробных клеток в 1 см3 физиологического раствора.

В известных авторам источниках патентной и научно-технической литературы не описано авирулентных живых вакцин против колибактериоза свиней, обладающих высокоиммуногенными свойствами за счет использования антигена из штамма Е.coli “Б-5”, представляющего собой бактериальную массу с содержанием 2,4×108-2,4×109 микробных клеток в см3.

Сказанное позволяет сделать вывод о наличии в заявляемом изобретении критерия “изобретательский уровень”.

Штамм, предназначенный для изготовления вакцины, характеризуется следующими свойствами.

Культуральные и морфологические признаки.

Культивирование осуществляют вначале на мясопептонном бульоне (МПБ), затем на мясопептонном агаре (МПА) при температуре 37°С в течение от 18 до 48 часов при аэробных условиях. При этом на МПБ колонии растут диффузно, образуя интенсивную муть и легко разбивающийся осадок, на МПА вначале образуются гладкие, выпуклые, блестящие с ровными краями колонии S-формы. В последующем возможно образование переходных от S- к R-форме колоний и суховатых с неровными краями R-форм колоний (до 50%). На агаре Эндо формируются темно-красные с металлическим блеском колонии.

Ферментативные свойства.

Микроорганизм обладает подвижностью, проявляет каталазную активность, дает положительную реакцию с метилротом, продуцирует индол, ферментирует глюкозу с газообразованием, а также лактозу, арабинозу, маннит, мальтозу, ксилозу, сорбит, дульцит.

Условия и состав сред для токсинообразования: бульон Хоттингера.

Антигенные свойства.

Продукт, синтезируемый штаммом Escherichia coli Б-5 - термолабильный экзотоксин, не подверженный нейтрализации поливалентной антитоксической сывороткой против колибактериоза (эшерихиоза) сельскохозяйственных животных.

Молекулярно-генетическая особенность штамма - треки штамма как в S-, так и в R-формах имеют репликон размером около 0,3 кв, в данном репликоне имеется ген, кодирующий В-субъединицу термолабильного токсина (ЛТ), обуславливающий иммуногенную активность штамма. Структурные гены ЛТ дополнительно интегрированы и в хромосому микробной клетки. В клетках штамма имеется репликон, несущий генетическую информацию регуляторного свойства, необходимую для синтеза ЛТ-продукции. У штамма имеется в наличии иммуногенный эпитоп, но отсутствует репликон, ответственный за реактогенность эшерихий.

Чувствительность к антибиотикам (зона задержки роста в мм): полимиксин - 11, стрептомицин - 25, левомицетин - 25, рифампицин -9, карбенициллин - 15; не чувствителен к: оксациллину, доксициклину, линкомицину, тетрациклину, олеандомицину, ампициллину, пенициллину.

Вирулентные свойства.

Внутрибрюшинное введение культуры штамма в концентрации 5·108 м.к./см3 и объеме 0,5 мл гибели белых мышей не вызывает. LД50 - 1,2·1010 м.к./см3 . Гибель белых мышей наступает в течение суток.

Определение энтеротоксигенных свойств штамма.

Для определения токсинообразования культивирование штамма проводили в питательном составе Mundeli в течение 20 часов. Полученную бульонную культуру разделяли на токсиносодержащий материал и бакмассу методом стерилизующей фильтрации. Культуральная жидкость, лишенная бактериального компонента, служила материалом, содержащим экзотоксин Е.coli.

Устойчивость к температуре определяли прогреванием токсиносодержащего материала в течение 10-минутного кипячения при 100°С и последующим его введением белым мышам.

Определение ТЛ-токсина проводили с использованием: прогретого токсиносодержащего материала, не прогретого и питательной среды Mundeli - в качестве отрицательного контроля.

Культивирование штамма можно осуществлять, например, на разработанной и запатентованной Саратовской НИВС (патент №2142505) питательной среде следующего состава, мас.%: аминокровин 5-20; пептон 0,6-1,5; хлористый аммоний 0,08-0,18; хлористый натрий 0,09-0,11; гидролизат казеина 9-20; питательная среда “ИГЛА” 52-61; дистиллированная вода - остальное. На данной среде культивирование осуществляют в течение 7 суток при температуре 37°С, затем суспензию центрифугируют при 6000 об/мин в течение 30 минут. Надосадочная жидкость являлась энтеротоксигенным материалом.

Пример 1.

Способ изготовления живой вакцины против колибактериоза свиней заключается в следующем.

Осуществляют культивирование штамма. Для этого штамм Е.coli “Б-5” засевают в пробирки вначале на мясопептонном бульоне (МПБ), затем на мясопептонном агаре (МПА) при температуре 37°С в течение 18 часов при аэробных условиях.

Полученную бактериальную массу смывают физиологическим раствором и получают суспензию с содержанием микробных клеток 1,2×1010 в 1 см3 раствора. Затем добавлением к полученной суспензии физиологического раствора доводят содержание микробных клеток до 2,4×108-2,4×109 в 1 см3 физиологического раствора.

При этом суспензию с содержанием микробных клеток 2,4×10 8 в 1 см3 используют для вакцинации поросят, а с содержанием микробных клеток 2,4×109 в 1 см3 - для вакцинации свиноматок.

Пример 2. Оценку иммуногенных свойств вакцины проводили путем определения титра специфических антител в сыворотке крови кроликов, иммунизированных заявляемой вакциной.

Для этого ставили реакцию агглютинации (РА) с сыворотками крови иммунизированных и интактных кроликов. В серологических пробирках осуществляли разведение сывороток, начиная с 1:25 до 1:6400 в объеме 1 мл. В каждое разведение сывороток вносили по 2 капли антигена, в качестве которого использовали 10 млрд. взвеси микробных тел Е.coli (живой и инактивированной). Сыворотки перемешивали с антигеном, встряхивая пробирки, после чего их помещали в термостат и выдерживали вначале в течение 4 часов при 37°С, а затем 18-24 часа при комнатной температуре. Учет реакции осуществляли по степени просветления сывороток и образованию конгломерата (осадка в виде “зонтика”) на дне каждой пробирки. Результат определения титра специфических антител в сыворотках крови иммунизированных и интактных кроликов представлен в таблице 1, где характер агглютинации представлен следующим образом:

++++ - полная агглютинация,

+++ - почти полная агглютинация,

++ - неполная агглютинация,

+ - незначительная агглютинация,

- отсутствие агглютинации.

Таким образом, однократное введение живой вакцины обеспечивает повышение уровня иммунитета как в отношении Н- (жгутикового), так и O- (соматического) антигенов по сравнению с контролем в 8 раз.

Пример 3. Для оценки напряженности иммунитета использовали две группы белых мышей. Первую группу мышей (10 голов) подвергли однократной иммунизации культурой штамма E.coli Б-5, вторая группа мышей (10 голов), которым вводили физиологический раствор в тех же дозах, была контрольной. Через 14 дней обе группы животных заразили внутрибрюшинно вирулентной культурой эшерихий с концентрацией 5×108 микробных клеток в 1 см3 физиологического раствора в дозе 0,5 мл. Результаты исследований представлены в таблице 2, из которой следует, что сохранность иммунизированных животных составляет 100%, в контрольной группе все животные погибли.

Пример 4.

Для доказательства авирулентности вакцины ее вводили мышам в концентрации 5×108 микробных тел. Гибели мышей не наступало.

Пример 5.

Производилась отработка дозы вакцины как для свиноматок, так и для поросят. Свиноматкам вводили вакцину с концентрацией 2,4×109 микробных клеток в 1 см3, а поросятам - с концентрацией 2,4×108 в 1 см3 физиологического раствора.

Для этого одной группе свиноматок в количестве 7 голов вакцину вводили внутримышечно в дозе 2 мл, а другой группе в количестве 6 голов - в дозе 3 мл. В результате проведенных экспериментов была подобрана доза 2 мл, которая обеспечивала наиболее эффективную защиту животных и их сохранность - 98,5%, при этом родившиеся поросята колибактериозом не болели. На месте введения вакцины у животных воспалительных реакций не регистрировалось. Введение вакцины свиноматкам в дозе 3 мл не оказывало особого влияния на эффективность вакцинации.

Аналогичным образом была испытана вакцина в концентрации 2,4×108 на поросятах. Результат исследований представлен в таблице 3, из которой следует, что сохранность поросят в опытной группе на 6,9% больше, чем в контрольной. При этом наилучшая эффективность достигалась при введении вакцины в дозе 2 мл.

Проведены широкие производственные испытания вакцины на свиноматках и отдельно - на поросятах.

Вакцину вводили 4783 свиноматкам внутримышечно в дозе 2 мл однократно на 104-105 день супоросности. В контрольной группе животных (в количестве 852 головы) использовали общепринятые методы профилактики колибактериоза. Сохранность поросят-сосунов от вакцинированных свиноматок в опытной группе была на 8,7% выше, чем в контрольной.

Введение вакцины 5194 поросятам в возрасте 2-7 дней внутримышечно однократно в дозе 2 мл показало повышение сохранности на 10,8% по сравнению с контрольной группой (в количестве 7148 поросят), которым осуществляли профилактику принятыми в хозяйствах методами.

Таким образом, заявляемая вакцина высокоиммуногенна, не обладает реактогенностью, аллергогенностью, не вызывает воспалительных реакций на месте введения и обеспечивает защиту поросят от колибактериоза.

bankpatentov.ru

Смотрите также

• 
  Вакцина от вич существует
• 
  Вакцина против гриппа комаровский
• 
  Вакцина от рака простаты
• 
  Вакцина после укуса клеща
• 
  Вакцина от гриппа алматы
• 
  Вакцина от гриппа кормящим
• 
  Алгоритм введения бцж вакцины
• 
  Отзывы о вакцине полиорикс
• 
  Вакцина польза или вред
• 
  Вакцина от гриппа аллергикам
• 
  Вакцина вред или польза