 |
|
|
|||||||||
|
Вакцина инактивированная против сальмонеллеза голубей и способ ее применения. Вакцина против сальмонеллеза птицВетеринарные препараты ВАКЦИНА ЖИВАЯ СУХАЯ ПРОТИВ САЛЬМОНЕЛЛЕЗА ВОДОПЛАВАЮЩЕЙ ПТИЦЫ | WebFermer-ВебФермер | бесплатные препараты - лекарства | СправочникВСЕ по-русски А Б В Г Д Е Ж З И Й К Л М Н О П Р С Т У Ф Х Ц Ч Ш Щ Э Ю Я A B C D E F G H I J K L M N O P Q R S T U V W X Y Z
Вакцина вызывает у птиц формирование специфического иммунитета к возбудителю сальмонеллезa Salmonella tуphimurium. Иммунитет у птицы вырабатывается через 3 — 5 суток после второй вакцинации и сохраняется в течение 3 месяцев, после чего вся ранее вакцинированная птица подлежит однократной ревакцинации. ПоказанияИспользуется с профилактической целью в неблагополучных по сальмонеллезу птиц хозяйствах. Дозы и способ применения Вакцинируют клинически здоровую птицу в неблагополучных по данному заболеванию хозяйствах в возрасте 3 — 5 дней. Вакцину вводят двукратно с интервалом в два дня. Утятам и гусятам 3-дневного возраста выпаивают первый раз дозу, второй раз две дозы вакцины. Рабочее разведение вакцины готовят следующим образом — рассчитывают количество ампул с препаратом, необходимое для вакцинации находящегося в птичнике поголовья птицы, исходя из количества доз в ампуле (флаконе). Ампулы (флаконы) с вакциной перед употреблением протирают спиртом, вскрывают. В ампулы (флаконы) с вакциной вносят по 5 мл физиологического pacтвора или кипяченой воды, легко встряхивают. Ампулы с не полностью растворившейся вакциной, а также с вакциной, содержащей хлопья или инородные частицы выбраковывают. Затем, растворенную вакцину переносят из ампул в чистую сухую бутыль. Ампулы (флаконы) из-под вакцины ополаскивают несколько paз для смыва оставшейся вакцины. Pacтворенную вакцину дополнительно разводят водой из расчета 10 мл воды на одну дозу вакцины и такое же количество воды на две дозы вакцины при второй иммунизации. Разведенную вакцину выливают в чистые емкости, используемые для поения утят. За два часа до выпойки вакцины прекращают выпойку птице воды. За день до иммунизации и в течение 7 дней после вакцинации из рациона птицы исключают кисломолочные продукты, антибиотики и другие лекарственные препараты, действующие на сальмонелл.
При нарушении целостности ампул (флаконов), изменении цвета вакцины, консистенции, а также в случае не использования разведенной вакцины в течение 6 часов, препарат выбраковывают и инактивируют кипячением в течение 10 минут. Ампулы из-под вакцины обеззараживают в том же режиме. Условия храненияВакцина пригодна для применения в течение 12 месяцев с даты изготовления при условии хранения и транспортировки в сухом теплом месте при температуре oт 2 до 10 °С. Продавец: Место Вашей рекламы По вопросам размещения информации в справочнике о Вашем предприятии пишите по электронной почте: написать письмо Если Вы обнаружили, на страницах нашего сайта материалы, нарушающие Ваши авторские или иные права - просьба сообщить информацию об оригинале в комментарии к материалу. www.lynix.biz Ветеринарные препараты ВАКЦИНА ВИРОСАЛЬМ ПРОТИВ САЛЬМОНЕЛЛЕЗА И БОЛЕЗНИ НЬЮКАСЛА ГОЛУБЕЙ И ДЕКОРАТИВНЫХ ПТИЦ | WebFermer-ВебФермер | бесплатные препараты - лекарства | СправочникВСЕ по-русски А Б В Г Д Е Ж З И Й К Л М Н О П Р С Т У Ф Х Ц Ч Ш Щ Э Ю Я A B C D E F G H I J K L M N O P Q R S T U V W X Y Z
Иммунитет против сальмонеллеза и болезни Ньюкасла формируется у голубей и декоративных птиц через 14 суток после повторной вакцинации и сохраняется не менее 11 месяцев. Лечебными свойствами вакцина не обладает. Назначают голубям, декоративным курам, уткам, гусям, индейкам, мускусным уткам, цесаркам, перепелам, фазанам, страусам, попугаям и другим декоративным птицам в целях профилактики сальмонеллеза и болезни Ньюкасла в угрожаемых и неблагополучных по данным заболеваниям хозяйствах и частном секторе. Дозы и способ применения Вакцину вводят внутримышечно в грудную мышцу двукратно с интервалом 28 – 30 дней в дозе 0, 5 мл птицам массой до 4 кг и по 1 мл птицам массой более 4 кг. Вакцину вводят с соблюдением правил асептики и антисептики, используя стерильные одноразовые или многоразовые стеклянные шприцы с тонкими иглами. При использовании многоразовых шприцев и игл, их необходимо перед использованием стерилизовать кипячением в течение 30 минут. Место инъекции обрабатывают 70 % раствором этилового спирта или другим антисептиком. Флакон с вакциной перед применением обязательно встряхивают. Вакциной следует прививать: молодняк птиц, начиная с 20-дневного возраста; птиц в период карантина, если они не были иммунизированы против сальмонеллеза и болезни Ньюкасла и при этом в общее стадо их выпускают не ранее чем через 14 дней после повторной вакцинации; птиц родительского стада за 25 – 30 дней до начала яйцекладки с целью создания трансовариального иммунитета у птенцов и птиц за 25 – 30 дней до выставок, спортивных состязаний, обмена, продажи, транспортировки и мероприятий, предусматривающих контакт с другими птицами, возможными носителями возбудителей сальмонеллеза и вируса болезни Ньюкасла. Взрослых птиц ревакцинируют каждые 10 месяцев двукратно с интервалом 28 – 30 дней. Рекомендуется за 10 – 12 дней до вакцинации провести дегельминтизацию взрослых птиц препаратами широкого спектра действия и обработать их инсекто-акарицидными средствами в соответствии с инструкцией по применению. Следует избегать нарушений схемы проведения вакцинации, поскольку это может привести к снижению эффективности иммунопрофилактики сальмонеллеза и болезни Ньюкасла. В случае пропуска очередного введения вакцины необходимо провести иммунизацию как можно скорее.
Убой птиц и использование птицеводческой продукции при использовании вакцины осуществляется без каких-либо ограничений. Все лица, участвующие в проведении вакцинации должны использовать спецодежду и индивидуальные средства защиты. При попадании вакцины на кожу или слизистые оболочки глаз, ее тотчас необходимо смыть большим количеством водопроводной воды. По окончании обработки руки следует тщательно вымыть теплой водой с мылом. При случайном введении вакцины человеку необходимо обработать место инъекции 5 % раствором йода или 70 % раствором этилового спирта и немедленно обратиться в медицинское учреждение, имея при себе инструкцию по применению или этикетку на препарат. В сухом, прохладном, защищенном от света и недоступном для детей и животных месте при температуре от 2 до 8 °С. Срок годности — 2 года. Флаконы с вакциной без этикеток, с истекшим сроком годности, с нарушением целостности, с измененным цветом и консистенцией содержимого, с наличием посторонних примесей, а также остатки вакцины, не использованные в течение 8 часов после вскрытия, подлежат выбраковке и кипячению в течение 30 минут с последующей утилизацией. Продавец: Место Вашей рекламы По вопросам размещения информации в справочнике о Вашем предприятии пишите по электронной почте: написать письмо Если Вы обнаружили, на страницах нашего сайта материалы, нарушающие Ваши авторские или иные права - просьба сообщить информацию об оригинале в комментарии к материалу. Похожий материалПохожий видео материалПохожие объявленияwww.lynix.biz Вакцина инактивированная против сальмонеллеза голубей и способ ее примененияГруппа изобретений относится к области биотехнологии. В качестве антигенов вакцина содержит инактивированные 0,3%-ным формалином и осажденные полиэтиленгликолем высокоиммуногенные штаммы Salmonella typhimurium М-5в t -ДЕП, Salmonella typhimurium Д-1в t-ДЕП и Salmonella enteritidis 25 Яв е-ДЕП с итоговой концентрацией каждого - 2 млрд. мкр. кл. в 1 см3 препарата. Вакцину вводят внутримышечно в толщу грудной мышцы в дозе 0,5 см3 с 25-30-дневного возраста дважды с интервалом 35-40 дней. Группа изобретений позволяет снизить поствакцинальные осложнения, повысить сохранность птицы и профилактировать ее заражение в течение 12 месяцев при двукратном введении вакцины, 2 н.п. ф-лы.
Изобретение относится к сельскому хозяйству, а именно к области ветеринарной биотехнологии. Целью изобретения является разработка и создание нового вакцинного препарата для профилактики сальмонеллеза голубей. Среди бактериальных инфекций голубей сальмонеллез занимает одно из ведущих мест. Летальность при этой инфекции может достигать 25-40%, а у молодняка - до 80-100% (Гусев, Вал. В. Сальмонеллезная инфекция у голубей / Вал. В. Гусев, Вик. В. Гусев. - Птицеводство, 2003. - №5. - С.48-53). Ущерб от сальмонеллеза также проявляется отставанием в росте и развитии переболевшей птицы, снижении оплодотворяемости голубок, недополучении приплода, ослаблении защитных сил организма голубей. Одновременно больные голуби и переболевшие голуби-бактерионосители являются возможным источником инфицирования животных и человека. Исследованиями установлено, что серовариант Salmonella typhimurium (S. typhimurium), относящийся к серогруппе В, - является доминирующим возбудителем сальмонеллеза у голубей (94-98%). В 2-4% случаев первичные сальмонеллезы у голубей вызывает серовариант S. enteritidis. Существующие способы профилактики сальмонеллеза голубей предусматривают проведение общих ветеринарно-санитарных мероприятий и ориентированы на широкое применение антимикробных препаратов (Бессарабов, Б.Ф. Болезни голубей. Монография /Бессарабов, Б.Ф. - М., 2004. - С.97-103; Шорохов, P.P. Меры борьбы и профилактики сальмонеллеза домашних голубей. / P.P.Шорохов, Е.В.Сусский, Г.А.Абарцумян. // Сб. статей ВГНКИ. - М., 2005. - Т.65. - С.135-140 и другие). Известные способы малоэффективны без активных средств специфической профилактики. Одним из основных способов защиты голубей от заболевания сальмонеллезом является вакцинопрофилактика. Для вакцинации необходимо применять высокоиммуногенную инактивированную вакцину. Вакцинация живыми вакцинами из штаммов S. typhimurium приводит к дегенеративным изменениям в половом аппарате самок голубей, снижению оплодотворяющей способности и выводимости молодняка - голубят. Кроме того, живые вакцины обладают иммунодепрессивным действием, могут вызвать поствакцинальную болезнь, а циркуляция вакцинного штамма дает положительные результаты периодических контрольных исследований и ограничения на деятельность голубеводов. Цель изобретения достигается созданием инактивированной вакцины против сальмонеллеза голубей. Технический результат заключается в снижении поствакцинальных осложнений, повышении сохранности птицы, высоком профилактическом эффекте в течение 12 месяцев при двукратном вакцинировании. Для достижения цели и изготовления вакцины использовали штаммы S. typhimurium М-5в t-ДЕП, S. typhimurium Д-1в t-ДЕП, S. enteritidis 25 Яв е-ДЕП, обладающие способностью индуцировать в организме привитых птиц высокую степень напряженности иммунитета. Штаммы получены выделением из трупов голубей с последующей селекцией в 2003-2004 гг., депонированы в коллекции ФГУ ВГНКИ ветпрепаратов в качестве производственных (справки о депонировании 2744/19 от 01.11.2007, 2741/19 от 01.11.2007, 2743/19 от 01.11.2007 соответственно). Штаммы обладали следующими свойствами: Salmonella typhimurium М-5в t-ДЕП и Salmonella typhimurium Д-1в t-ДЕП - грамотрицательные подвижные палочки, вызывающие при росте равномерное помутнение мясо-пептонного бульона (МПБ), на мясо-пептонном агаре (МПА) растущие в «S» форме (гладкие ограниченные колонии диаметром 2-5 мм), на агаре Эндо - прозрачные с фиолетовым оттенком, на висмут-сульфитном агаре - черные с металлическим блеском. Ферментируют с образованием кислоты и газа глюкозу, манит, мальтозу, сорбит, арабинозу, рамнозу, дульцит, не ферментируют сахарозу, лактозу, растут на среде Симонса, образуют сероводород, не образуют индол, оксидазоотрицательны, каталазоположительны. Агглютинируются монорецепторными сальмонеллезными сыворотками O4, H-i; 1,2. Патогенны для белых мышей, голубей, морских свинок. LD50 для белых мышей массой 14-16 г при подкожном инфицировании составила для штамма Salmonella typhimurium М-5в t-ДЕП - 647 микробных клеток (мкр. кл.), для штамма Salmonella typhimurium Д-1в t-ДЕП - 5495 мкр. кл. S. enteritidis 25 Яв е-ДЕП - грамотрицательные подвижные палочки, вызывающие равномерное помутнение при росте на МПБ, растущие в «S» форме (гладкие ограниченные колонии диаметром 2-5 мм) на МПА, на агаре Эндо - прозрачные с фиолетовым оттенком, на висмут-сульфитном агаре - черные с металлическим блеском. Ферментирует с образованием кислоты и газа глюкозу, манит, мальтозу, сорбит, арабинозу, рамнозу, дульцит, растет на среде Симонса, образует сероводород, не образует индол, оксидазоотрицательны, каталазоположительны. Не ферментируют сахарозу и лактозу. Агглютинируются монорецепторными сыворотками O9, Н-1 m,g. Патогенны для белых мышей, голубей, морских свинок и цыплят. LD50 для белых мышей массой 14-16 г при подкожном инфицировании составила 14125 мкр. кл. Препарат готовили, высевая лиофильно высушенные штаммы в пробирки с бульоном Хоттингера (с питательностью 120 мг% аминного азота). После восстановления свойств и проверки штаммов на отсутствие диссоциации проводили пересев во флаконы с той же средой. Через 18 часов инкубирования при 37°С расплодку пересевали в реакторы или бутыли в объеме не менее 10% от количества среды. В процессе культивирования и перед инактивацией проводили отбор проб для проверки чистоты роста сальмонелл. Чистые бульонные культуры инактивировали формалином в объеме 0,3% к общему объему в течение 21-22 дней. Осаждение проводили полиэтиленгликолем в течение 72 часов. Надосадочную жидкость удаляли, осадочную массу ресуспендировали в стерильном изотоническом растворе хлорида натрия до концентрации каждого штамма 6 млрд. мкр. кл. в 1 см3. Итоговая концентрация каждого штамма, используемого в изготовлении вакцины, - 2 млрд. мкр. кл. в 1 см3 препарата. Готовую вакцину проверяли на стерильность, чистоту, безвредность, иммуногенность. Стерильность определяли последовательными посевами из вакцины на питательные среды: МПБ, МПА, Китта-Тароцци, Сабуро. Проверку на чистоту осуществляли изучением мазков с вакциной, окрашенных по Граму. Безвредность изучали путем внутривенного и внутримышечного введения вакцины в 2-кратной дозе с последующим 10-дневным наблюдением, убоем птицы и изучением места введения при вскрытии. Пример конкретного применения Вакцину инактивированную полиэтиленгликолевую против сальмонеллеза голубей инъецировали внутримышечно в грудную мышцу в дозе 0,5 см3. Вакцинацию проводили с 25-30-дневного возраста дважды с интервалом 35-40 дней. Пример 1 применения препарата Лабораторное испытание вакцины инактивированной полиэтилен-гликолевой против сальмонеллеза голубей (контроль иммуногенности) проводили на 20 голубях, беспородных, массой 250-280 г.Для этого были созданы две группы (по 10 голубей) 25-30-дневного возраста: опытная и контрольная, которых кормили и содержали по принципу аналогов. Голубей опытной группы прививали вакциной инактивированной полиэтиленгликолевой против сальмонеллеза голубей в дозе 0,5 см3, голубям контрольной группы вводили стерильный изотонический раствор хлорида натрия в той же дозе. Через 21 день проводили инфицирование голубей обеих групп внутримышечно штаммом S. typhimurium М-2ф t-ДЕП (производственно контрольный) в дозе 5 млн. мкр. кл. Инфицирующую дозу определяли, используя оптический стандарт мутности энтеробактерий ГИСК им. Л.А.Тарасевича. Наблюдение вели 14 дней, учитывали заболевших, павших, проводили бактериологический анализ из патологического материала от трупов (печень, селезенка, кровь из сердца, красный костный мозг). Сохранность в опытной группе составила 90% при 80%-ной летальности в контроле. Клинические признаки заболевания характеризовались потерей аппетита, одышкой, угнетением, взъерошенностью оперения, диареей. От всех трупов (8 голубей контрольной группы и 1 голубя опытной группы) при бактериологическом исследовании патологического материала: окраска мазков-отпечатков по Граму, культивирование на МПА, МПБ, агаре Эндо, висмут-сульфитном агаре, определение ферментативных свойств на средах Гисса, реакция агглютинации - выделена S. typhimurium во всех пробах. Т.о. вакцина инактивированная полиэтиленгликолевая против сальмонеллеза голубей обладает высокой иммуногенностью. Пример 2 применения препарата Определение эффективности вакцины инактивированной полиэтиленгликолевой против сальмонеллеза голубей в полевых условиях проводили на частной голубятне г.Москвы в сентбяре 2006 года. Общее поголовье голубей составляло 160 птиц, в том числе молодняка до года - 104 головы. В течение предшествующего исследованию года у птиц периодически отмечали случаи болезни со следующими клиническими признаками: отказ от корма, угнетение различной степени, расстройство дефекации с появлением зеленой окраски фекалий, истощение. У взрослых голубей болезнь носила хронический характер, проявляясь поражением суставов ног и крыльев и, как следствие, - адинамией и неспособностью к полету, периодическими расстройствами работы желудочно-кишечного тракта. У молодняка в возрасте до 3-4 месяцев болезнь проявлялась быстро наступающим угнетением, отказом от корма, нервными явлениями. В результате проведенных бактериологических иследований трупов павших голубей, а также патологического материала, полученного при вскрытии внутрисуставных абсцессов больных птиц, поставлен диагноз - сальмонеллез. Для оздоровления данной голубятни в сентябре 2006 года проводили наряду с комплексом ветеринарно-санитарных мероприятий вакцинацию птицы вакциной инактивированной полиэтиленгликолевой против сальмонеллеза голубей двукратно с интервалом 40 дней в дозе 0,5 см3. В качестве контроля на ферме было оставлено 20 взрослых голубей без вакцинации, имевших до лечения поражения, характерные для сальмонеллеза. После лечения антибиотиками они были помечены и оставлены в общем помещении с основным вакцинированным поголовьем. В течение срока наблюдения среди контрольных птиц периодически наблюдали признаки заболевания в виде угнетения, отказа от корма, появления артритов и т.д. При проведении бактериологического исследования фекалий и содержимого внутрисуставных абсцессов от заболевших голубей выделяли S. typhimurium - всего от 6 птиц. При этом два голубя были вынужденно убиты. При бактериологическом исследовании из печени, селезенки, красного костного мозга выделена S. typhimurium от обоих голубей. Остальных клинически здоровых голубей с 25-дневного возраста вакцинировали. Больных и подозрительных в заболевании голубей лечили антибиотиками, предварительно подтитрованными к выделеному от птиц изоляту S. typhimurium, в течение 10 дней. Всего вакцинировано 140 птиц. В результате проведенной работы на ферме в течение 9 месяцев наблюдения среди птиц родительского стада не было выявлено голубей с поражением суставов и другими признаками, характерными для сальмонеллеза. Кроме того, необходимо отметить, что период наблюдения приходился на сезон размножения птиц. Полученные от предварительно вакцинированных родителей голубята, были привиты тем же препаратом в дозе 0,5 см3 в возрасте 25-30 дней. Случаев заболевания сальмонеллезом среди привитого молодняка голубей также не было выявлено. Из представленных данных видно, что проведенная вакцинация голубей вакциной инактивированной полиэтиленгликолевой позволила обеспечить 100% сохранность птицы родительского стада и молодняка в неблагополучной по сальмонеллезу голубятне. Применение вакцины позволит повысить сохранность птицы, предотвращая заболеваемость голубей сальмонеллезом. Кроме того, вакцинация голубей будет способствовать нераспространению опасного зооантропоноза - сальмонеллеза среди птиц, животных и человека. 1. Вакцина инактивированная против сальмонеллеза голубей, включающая антигены сальмонелл, отличающаяся тем, что содержит в качестве антигенов инактивированные 0,3%-ным формалином и осажденные полиэтигленгликолем высокоиммуногенные штаммы Salmonella typhimurium М-5в t-ДЕП, Salmonella typhimurium Д-1в t-ДЕП и Salmonella enteritidis 25 Яв е-ДЕП с итоговой концентрацией каждого 2 млрд. мкр. кл. в 1 см3 препарата. 2. Способ применения вакцины инактивированной против сальмонеллеза голубей по п.1, отличающийся тем, что вакцину вводят внутримышечно в толщу грудной мышцы в дозе 0,5 см3 с 25-30-дневного возраста дважды с интервалом 35-40 дней. www.findpatent.ru Сравнительная характеристика инактивированных вакцин против сальмонеллеза птиц отечественного и импортного производстваСмирнов Д.Д. (ППЗ «Смена») Рождественская Т.Н. (НПП «АВИВАК») Кононенко Е.В. (НПП «АВИВАК»)
1. Введение Сальмонеллез птиц – инфекционное заболевание, протекающее в острой или хронической форме, может быть вызвано одним или несколькими представителями рода Salmonella. В последние годы значительно расширился спектр серовариантов сальмонелл, циркулирующих в организме птиц, наряду с увеличением процента выделения Salmonella enteritidis все чаще регистрируются положительные находки по Salmonella gallinarum-pullorum и S. infantis. По данным Кафтыревой Л.А. (Санкт-Петербургский НИИЭМ им. Пастера) из мяса, яйца и смывов из них выделяется до 7 сероваров сальмонелл. Доминирующим является Salmonella enteritidis. Доля этого возбудителя достигает 81,3% из мяса кур и 88,3% из яиц . Проблемы с проявлением сальмонеллезной инфекции связаны с двумя причинами: птица может переболевать в легкой форме без видимых клинических признаков, может являться носителем сальмонелл длительное время, т.е. быть резервуаром возбудителя. Кроме кур, резервуаром инфекции служит и остальная домашняя птица, особенно водоплавающая (гуси, утки), голуби, а также грызуны (мыши и крысы), насекомые (тараканы), домашние животные и человек (Аронов В. М., 1999). Все это создает стойкое эпизоотическое неблагополучие в окружающей среде, связанное с высоким риском контаминации сальмонеллами промышленной птицы. Поэтому сальмонеллез птиц независимо от сероварианта возбудителя, вызвавшего его, причиняет промышленному птицеводству и обществу значительный социально-экономический ущерб, который складывается из снижения яйценоскости кур-несушек, количества оплодотворенных яиц, повышенной летальности эмбрионов, потери привесов молодняка, значительных затрат на проведение ветеринарно-санитарных, диагностических и лечебно-профилактических мероприятий (Борисенкова А.Н. и соавт., 2008). Помимо этого штаммы S. enteritidis и S. tiphimurium могут вызывать пищевые токсикоинфекции у людей, часто заканчивающиеся летальным исходом, особенно у детей и лиц престарелого возраста (Кафтырева Л.А., При промышленном выращивании птицы антибактериальная терапия против сальмонеллеза проводится в стадах, где выявляются положительно реагирующие на сальмонеллез особи, но при этом не регистрируются клинические признаки заболевания. Однако, по мнению многих исследователей и комитета экспертов ВОЗ по сальмонеллезу EFSA (Европейское агентство по пищевой безопасности) проблема не может быть решена только применением антибиотиков и химиопрепаратов. Их постоянное применение приводит к возникновению полирезистентных расс микроорганизмов (Kolasa A. и др. 2007). Инфицированные продукты птицеводства становятся источником генов множественной лекарственной устойчивости для возбудителей опасных для человека. По этой причине в США и многих странах Европы применение антибиотиков в птицеводстве строго регламентируется. В комплексе профилактических мероприятий активно рекомендуется использовать методы специфической профилактики. В отечественном птицеводстве для профилактики сальмонелла-энтеритидис инфекции птиц в последние годы все чаще используются инактивированная вакцина и сальмофаги. На примере хозяйства мясного направления, где с положительным эффектом в течение длительного времени применяется инактивированная вакцина против сальмонеллеза птиц зарубежного производства были проведены сравнительные испытания эффективности импортной и отечественной вакцины «АВИВАК-Сальмовак». 2. Материалы и методы В промышленных условиях в двух птичниках было иммунизировано 14 000 гол кур-несушек в возрасте 90 дн., один птичник - импортной вакциной, второй - отечественной «АВИВАК-Сальмовак». За период содержания птица обеих групп была клинически здорова и при проведении бактериологических исследований культуры сальмонелла-энтеритидис не выделяли. Из инкубационного яйца получили клинически здоровых цыплят, из которых было сформировано 2 группы 2, 5, 10,14, 17 и 20-суточного возраста, по 72 особи в каждой. Цыплята методом случайной выборки были разделены на шесть подгрупп по 12 особей в каждой - подгруппы № 1-6 и 7-12. Цыплят каждой подгруппы содержали в отдельной клетке. До заражения у 2 убитых цыплят каждой подгруппы отбирали пробы печени, селезенки и кишечника, которые исследовали на наличие сальмонелл. Для заражения опытных (иммунных) и контрольных (не иммунных) бройлеров использовали штамм S. enteritidis 92 Rif/R, устойчивый к рифампицину (МПК >200 мкг/мл), вирулентный для белых мышей (LD 50=500 КОЕ) и способный колонизировать кишечник, печень и селезенку цыплят-бройлеров в любом возрасте. Штамм получен и поддерживался в музее ФГУН ГНЦ ПМБ. Предварительно готовили суспензию штамма, используя для этого стандарт мутности (10 ед., производство ГНКИ им. Тарасевича, г. Москва). Окончательную концентрацию живых клеток (КОЕ), вводимых птицам, определяли путем высева взвеси сальмонелл на плотные среды с последующим подсчетом выросших колоний штамма S. enteritidis 92 Rif/R. Цыплят заражали перорально, вводя каждой особи заранее определенные дозы штамма S. enteritidis 92 Rif/R: для 1-2-сточных - 1-2 млрд. КОЕ/гол и 5-30-суточных – от 3 до 5 млрд. КОЕ/гол. В качестве контроля взяли 30 цыплят аналогичного возраста из хозяйства, где не проводится иммунизация родительских стад против сальмонеллеза. Бройлеров разделили на 6 подгрупп по 5 гол в каждой, и в период всего эксперимента содержали в отдельном изоляторе. За цыплятами из опытных и контрольных групп, зараженных штаммом S. enteritidis 92 Rif/R, наблюдали в течение 14 сут. У павших цыплят, а также оставшихся в живых и убитых по истечении срока наблюдения, исследовали печень, селезенку и подвздошную кишку на наличие штамма S. еnteritidis 92 Rif/R. Для изучения антиинвазивных свойств вакцин из печени павших или убитых птиц вырезали стерильными ножницами кусочки массой около 1 г, селезенку отбирали полностью, а от подвздошной кишки отрезали кусок длиной 1,5-2,0 см (массой около 1 гр) и вскрывали его по длине. Навески печени, селезенки и кишечника измельчали ножницами, помещали в стерильные пробирки и взвешивали. В пробирки с образцами вносили 4,5 мл стерильного изотонического раствора хлорида натрия и гомогенизировали содержимое пипеткой. Приготовленную таким образом суспензию органов титровали методом десятикратных разведений до разведения – 10-5. Суспензию из разведений 100, 10-3 и 10-5 высевали в объеме 0,1 мл на чашки с селективной питательной средой - агар Эндо с добавлением рифампицина в концентрации 100 мкг/мл для выявления штамма S. enteritidis 92 Rif/R. Посевы выращивали в течение 24 и 48 ч при температуре 370 С в условиях термостата. После 24 ч инкубирования проводили предварительный учет результатов, а через 48 ч – окончательный, подсчитывая количество выросших колоний штамма S. enteritidis 92 Rif/R. Затем определяли обсемененность внутренних органов цыплят в КОЕ на 1 г навески органа (КОЕ/г). В том случае, когда в посевах на среде Эндо с рифампицином не регистрировали колоний, характерных для сальмонелл, образцы засевали в неселективные и селективные среды обогащения (см. ниже). При наличии хотя бы одной характерной для S. enteritidis 92 Rif/R колонии, проводили дальнейшее их изучение. Для подтверждения принадлежности выделенных культур к роду Salmonella и сероварианту Enteritidis использовали биохимическую тест-систему для идентификации энтеробактерий ENTEROtest 24 (Lachema, Чехия) и специфические агглютинирующие сальмонеллезные сыворотки (Санкт-Петербургский институт вакцин и сывороток). Характерный для сальмонелл рост на среде Эндо, устойчивость культуры к рифампицину, биохимические и серологические свойства позволяли окончательно судить о принадлежности выделенной культуры к штамму S. enteritidis 92 Rif/R. Средний титр бактерий (Тср) , его относительную ошибку (δ) в органах цыплят, зараженных штаммом S. enteritidis 92 Rif/R, вычисляли общепринятыми методами (Лакин Г.Ф., 1990). Эффективность примененных вакцинных препаратов оценивали по относительному титру, который вычисляли по формуле: , где Тср – средний титр S.enteritidis 92 Rif/R в инфицированных органах цыплят опытных групп; Тсро – соответствующий средний титр в контроле. Все вычисления проводили с помощью программы Microsoft Excel 2007.
Проведенные исследования проб печени, селезенки и кишечника от цыплят опытных и контрольной групп до заражения их штаммом S. enteritidis 92 Rif/R не выявили наличия бактерий рода Salmonella spp. Результаты определения антиинвазивных свойств вакцин представлены на рис. 1-3. Установлено, что у цыплят, полученных от стада привитого вакциной зарубежного производства после заражения патогенным штаммом S. enteritidis 92 Rif/R в возрасте 2 и 6 сут, печень и селезенка не были инфицированы бактериями рода Salmonella spp., и только у одного цыпленка из 10 был инфицирован кишечник. При заражении 10 и 14-суточных цыплят были инфицированы все органы у 20-40% особей, а в возрасте 17 и 20 сут этот показатель повысился до 70-100%. В группе цыплят, родители которых были иммунизированы инактивированной вакциной « АВИВАК-Сальмовак», при заражении в возрасте 2 и 6 сут были инфицированы бактериями рода Salmonella spp. печень по 1 пробе и кишечник в 2 и 3 пробах из 10. В пробах селезенки, в эти сроки исследования, бактерии не выделены. На более поздних сроках заражения различий в инфицировании внутренних органов обеих групп цыплят не обнаружено. У контрольных цыплят в первый срок заражения (возраст 2 сут) была выявлена 100% инфицированность бактериями рода Salmonella spp. печени и кишечника, а также селезенки у 90% особей, однако в более позднем возрасте у зараженных цыплят регистировали 100% инфицированность всех исследуемых органов. Рис. 1. Зависимость инфицирования печени штаммом S. enteritidis 92 Rif/R от возраста зараженных цыплят в опытных и контрольной группах. Рис.2. Зависимость инфицирования селезенки штаммом S. enteritidis 92 Rif/R от возраста зараженных цыплят в опытных и контрольной группах. Рис. 3. Влияние возраста зараженных цыплят опытных и контрольной групп на инфицирование кишечника штаммом S. enteritidis 92 Rif/R В табл. 1 представлены результаты определения среднего титра бактерий (КОЕ) и его средней ошибки (%) выделенных из внутренних органах цыплят, полученных от вакцинированных родительских стад, при заражении в разные возрастные периоды (2, 6, 10, 14, 17 и 20 сут) патогенным штаммом S. enteritidis 92 Rif/R. Показано, что самый высокий инфекционный титр штамма S. enteritidis 92 Rif/R был установлен в печени при заражении цыплят контрольной группы в возрасте 6 сут - 5,8х106, титр возбудителя в селезенке и кишечнике, составил 2,8х106 и 1,5х106 КОЕ/г, соответственно. По сравнению с этими данными у цыплят, родители которых были привиты вакциной «АВИВАК-Сальмовак», титр бактерий в печени при заражении в 2-суточном возрасте был в 100 раз ниже, а к концу эксперимента он снизился в 50 раз. Таблица 1 Средний титр бактерий S. enteritidis 92 Rif/R (Тср) в органах зараженных опытных и контрольных цыплят
Примечание: 1- пробы печени; 2- пробы селезенки; 3- пробы кишечника. Для дополнительного сравнения эффективности примененных вакцинных препаратов против сальмонеллеза кур были определены отношения средних титров бактерий S. enteritidis 92 Rif/R в инфицированных органах (печень, селезенка и кишечник) цыплят, полученных от родительских стад привитых вакцинами «АВИВАК-Сальмовак» и зарубежного производства к контрольным образцам (табл. 2).
Таблица 2 Степень инфицированности внутренних органов цыплят при разных сроках заражения
Как видно из данных табл. 2, за исключением показателя инфицированности печени и кишечника у зараженных 2-суточных цыплят, полученных от родителей, привитых инактивированной вакциной «АВИВАК-Сальмовак», в другие сроки заражения во всех исследуемых органах достоверной разницы по сравнению с вакциной зарубежного производства не установлено. Выводы
zoovetcnab.ru |
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
 г.Самара, ул. Димитрова 131 [email protected] |
 |