способ получения вакцины против лихорадки ку. Вакцина против ку лихорадки
Вакцина Ку-лихорадки М-44 живая сухая
Ку-лихорадка – бактериальная инфекция, которая сопровождается поражением дыхательной и нервной систем. Подвержены люди, деятельность которых связана с животноводческими фермами. В организм человека возбудитель попадает пищевым путем с зараженным мясом и молоком. Болезнь протекает длительно и тяжело. Чтобы предотвратить возникновение данного заболевания, используются специальные профилактические препараты. Самый эффективный – вакцина М-44, обеспечивает длительный, специфический и надежный иммунитет. Название вакцины, ее состав и форма выпуска Вакцина Ку-лихорадки М-44 живая сухая используется для специфической профилактики возникновения Ку-лихорадки. Представлена в виде лиофилизата, который используется для приготовления суспензии. Применяется накожно, скарификационным методом. Имеет вид аморфной массы в форме таблетки розового цвета с коричневым, серым или желтым оттенком. Одна доза препарата содержит:
- Культура живых коксиелл Бернета штамм М-44 – от 5 х 107 до 5 х 109 минимальные инфицирующие дозы (МИД).
- Среда высушивания – сахароза 1%, питьевое пастеризованное молоко 49%.
В качестве растворителя используется раствор натрия хлорида 0,9%. Препарат выпускается в картонных коробках по 10 доз – по 5 ампул с лиофилизатом и растворителем. Характеристика вакцины В состав препарата входит живая культура коксиелл Бернета штамма М-44, которые выращены в желточных мешках эмбрионов курицы. После введения в организм вакцины, заболевание не возникает. Активные компоненты препарата способствуют развитию напряженного, надежного иммунитета против болезни. При проникновении в кровь, специфические антигены запускают выработку специальных, защитных структур, которые представляют собой хороший барьер против инфекционных агентов. После однократного введения прививки, специфический, стойкий иммунитет развивается через 28-30 суток. Препарат обладает большей специфичностью и иммуногенностью по сравнению с другими вакцинами. Формирует активный иммунитет, который работает в течение года. Показания для введения вакцины
Вакцина не входит в перечень Национального календаря иммунопрофилактики. Препарат вводят определенному контингенту лиц, к которым относятся: - Люди, которые работают в сфере животноводства. Это лица, контактирующие с сырьем и продуктами животноводства на хозяйствах, где обнаружены животных болеющие Ку-лихорадкой.
- Люди, работающие на территориях, где распространена Ку-лихорадка.
- Работники лабораторий, которые контактируют с культурами, содержащими возбудитель Ку-лихорадки.
Данному контингенту лиц вакцинация должна быть проведена обязательно, в соответствии с режимом дозировки и кратности приема. Это способствует снижению уровня заболеваемости населения, формированию надежного иммунитета. Способ применения вакцины и дозы Препарат вводят только накожно, с помощью скарификационной методики. Перед проведением прививки в ампулу с лиофилизатом вводят всю дозу ампулы с растворителем. В течение 120 секунд препарат растворяется, образуется гомогенная взвесь розового цвета, которая имеет желтый, серый или коричневый оттенок. Наружную поверхность плеча перед введением препарата обрабатывают антисептиком (эфир или спирт). Через 20 секунд наносят на обработанную кожу плеча препарат (2 капли на расстоянии 0,5 см). Через каждую каплю с помощью скарификатора наносят 3 насечки (по 9 мм, на расстоянии 3 мм друг от друга) и втирают вакцину. В течение 7 минут вакцина сохнет.
После введения препарата проводят регистрацию с указанием названия вакцины, даты проведения инъекции, дозы, номера и серии. Пациент находится под наблюдением врача в течение 30 минут после проведения вакцинации.
Совет врача! Если после введения препарата появляются побочные реакции, нужно обязательно обратиться к доктору
Противопоказания для введения вакцины Как и для других препаратов, для введения вакцины есть свои противопоказания. К ним относят: - Осложненный аллергический анамнез (дерматит, ринит, бронхиальная астма, поллиноз).
- Наличие аллергических реакций на куриные яйца.
- Хронические болезни дыхательной системы.
- Первичные и вторичные иммунодефициты.
- Период беременности и лактации.
- Онкологические заболевания.
- Острый период инфекционных и неинфекционных болезней.
Через 30 дней после окончания острого периода болезни или после выздоровления можно проводить прививку. Для определения противопоказаний к проведению вакцинации этим препаратом, перед инъекцией пациентов осматривает доктор. Побочное действие вакцины Введение лекарственного препарата переносится хорошо. У 40% привитых появляются незначительные местные отрицательные реакции. Через 2 суток, после вакцинации у пациентов наблюдается повышение температуры тела до субфебрильных цифр. Также отмечается недомогание, снижение работоспособности, головные и суставные боли. В зоне проведения инъекции появляется зудящая припухлость и покраснение. Узелковые образования в области насечек появляются у 90% пациентов, через несколько суток они бесследно исчезают.
Важно! Продолжительность этих реакций длится в течение 4-х суток. Не требует проведения лечения
Применение вакцины Специальной подготовки перед проведением вакцинации не требуется. Введением вакцины занимается специально обученный персонал медицинских учреждений. Вакцинация проводится с соблюдением всех мер антисептики и асептики. Детям младше 14-ти лет и людям старше 60-ти препарат не вводят. Также вакцинопрофилактика не показана лицам с болезнями соединительной ткани. В период беременности и лактации препарат вводить нельзя. Влияние лекарственного препарата на работу со сложными механизмами, управление транспортом недостаточно изучено. Вводят препарат только после консультации с врачом.
Особые указания Перед введением препарата внимательно осматривают ампулу на предмет трещин, изменение цвета лиофилизата. В случае повреждения ампулы, препарат не используют и обезвреживают, погружая в растворы для дезинфекции (хлорамин, перекись) после чего проводят кипячение препарата в течение 60 секунд. Также не применяют вакцину, если при взаимодействии лиофилизата с растворителем, получившаяся суспензия для введения неравномерно окрашивается. Непригодный препарат, который имеет патологические включения, примеси, если у него истек срок годности, он хранился в неправильных условиях. Взаимодействие с другими средствами для иммунопрофилактики После первого введения препарата, ревакцинацию проводят только через 30 дней, при условии, что в крови снизился титр защитных антител. Вакцину нельзя вводить с другими средствами для иммунопрофилактики. Также нельзя комбинировать введения вакцины и иммуномодулирующих препаратов. Одновременно данный препарат вводят только с бруцеллезной вакциной. При взаимодействии этих препаратов не наступает побочных реакций. Бруцеллезная вакцина вводится в соответствии с инструкцией по использованию лекарственного средства. Прививка от Ку-лихорадки и вакцина от бруцеллеза вводятся в разные руки.
Условия хранения вакцины Иммунопрофилактический препарат против Ку-лихорадки хранится в холодильнике прививочного кабинета больницы при температуре от плюс 2 до 8 ° С. Транспортировка проводится на оборудованном транспорте в специальных контейнерах, в которых поддерживается постоянная температура. Замораживание препарата не допускается. В открытом виде лекарственное средство хранить запрещено. Профилактическая доза 0,05 мл вводится полностью, не допускается многократное использование препарата из одной ампулы. Вакцина используется в течение 2-х лет. После истечения срока годности препарат использовать нельзя, он обеззараживается и утилизируется. simptomyinfo.ru
способ получения вакцины против лихорадки ку - патент РФ 2094057
Использование: биотехнология, вакцина для профилактики лихорадки Ку, антиген. Сущность изобретения: для получения высокоиммуногенной вакцины накопление риккетсий (коксиелл) Бернета проводят в селезенках белых мышей. Выделение их и очистку от тканей хозяина проводят в системе несовместимых полимеров. Используют часть полученного очищенного корпускулярного антигена в качестве первого компонента вакцины. Другую часть корпускулярного антигена подвергают ультразвуковой обработке и центрифугированию и получают растворимый антиген, как второй компонент вакцины. Компоненты 1 и 2 объединяют в соотношении: 16 мкг корпускул коксиелл и 0,5 мл растворимого антигена с титром 1:10 по РСК. Полученная вакцина обладает высокой иммуногенной активностью, длительностью сохранения иммунитета при однократной вакцинации, к тому же она безопасна. Изобретение относится к биотехнологии, в частности к способам изготовления вакцины для профилактики лихорадки Ку. Известен способ получения живой вакцины для профилактики лихорадки Ку, включающий накопление коксиелл Бернета II фазы при культивировании в куриных эмбрионах в течение 7 дней, приготовление суспензии на физиологическом растворе, центрифугирование с последующим забором и розливом надосадочной жидкости [1] Однако вакцина, полученная известным способом, обладает потенциальной возможностью спонтанной реверсии к фазе I и последующих вызываемых ею патологических изменений [2-5] Наиболее близким аналогом является способ получения вакцины против лихорадки Ку, включающий накопление коксиелл Бернета штамма Henzerling I фазы при культивировании в куриных эмбрионах в течение 7 дней, выделение и инактивацию полученной биомассы, ее очистку от тканей хозяина, приготовление суспензии в дистиллированной воде с последующей обработкой ее 6%-ной трихлоруксусной кислотой, центрифугированием, диализом надосадочной жидкости и отделением растворимого антигена (целевой продукт) из надосадка [6] Однако вакцина, полученная по данному способу, обладает низкой иммуногенной активностью, требующей многократного применения. Технический результат изобретения заключается в получении высокоиммуногенной вакцины. Технический результат достигается использованием: для накопления коксиелл белых мышей, для очистки антигенов коксиелл от ткани хозяина систем несовместимых полимеров, для получения растворимого компонента вакцины ультразвука, объединением коксиелл I фазы с растворимым антигеном. Пример 1. 200 белых мышей массой 12,0
1,0 г заражают внутрибрюшинно 0,5 мл 6%-ной суспензией инфицированных коксиеллами Бернета штамм "Луга-1" I фазы желточных мешков куриного эмбриона и на 6 день после их заражения убивают хлороформом, извлекают селезенки, объединяют и добавляют 0,9%-ный раствор хлорида натрия из расчета 15 мл/г селезеночного материала. Затем селезенки растирают в гомогенизаторе при скорости вращения 8000 об/мин в течение 10-15 мин, добавляют формалин до конечной концентрации 1% и суспензию инактивируют при 4oC в течение 14 дней. Инактивированную суспензию центрифугируют, отделяют осадок и проводят очистку коксиелл Бернета от тканей хозяина путем последовательной обработки сначала 0,75% -ным раствором трипсина, подогретого до 37oC, в течение 20-30 мин, затем 6%-ным раствором полиэтиленгликоля (ПЭТ) мол.м. 6000 или мол.м. 4000. Перемешивают до полного растворения и добавляют натрий сульфат декстрана 500 в количестве 0,3% на объем. Снова тщательно перемешивают до растворения всех компонентов. Выдерживают 30 мин при 4oC. Далее после центрифугирования супернатант обрабатывают 10%-ным раствором хлороформа. После многократного центрифугирования получают очищенную биомассу коксиелл. Полученную очищенную биомассу коксиелл делят на две части. Одну часть полученных высокоочищенных коксиелл Бернета используют при приготовлении вакцины как корпускулярный антиген (компонент 1). Другую часть используют для получения растворимого антигена (компонент 2). Для этого осадок коксиелл суспендируют в дистиллированной воде и многократно подвергают ультразвуковой обработке на диспергаторе УЗДН-А с частотой генератора и излучателя 22,0+1,65 кГц по 15 мин с 1-3 перерывами по 1 мин, центрифугируют при 1000 об/мин, отбирают надосадочную жидкость, затем центрифугируют при 18000 об/мин, отбирают, вновь обрабатывают и объединяют надосадочную жидкость. Полученный растворимый антиген доводят до титра 1:10 по РСК (реакция связывания комплемента), который и является вторым компонентом для приготовления вакцины. Для получения одной прививочной дозы используют 16 мкг корпускул коксиелл Бернета 1 фазы и 065 мл растворимого антигена с титром 1:10 по РСК. Пример 2. Полученную вакцину по примеру 1, содержащую 16 микрограмм корпускул коксиелл Бернета 1 фазы и 0,5 мл растворимого антигена с титром 1:10 по РСК, вводят морским свинкам массой 300 г подкожно. После введения вакцины морских свинок термомметрируют 14 дней. У некоторых животных отмечено повышение температуры на следующий день после введения вакцины до 39,8-40oC при норме 39,5oC. Во всех случаях не отмечены острая и хроническая токсичности. Клиническая картина крови у всех свинок была нормальной. Не отмечено влияние на центральную нервную систему и детоксицирующую функцию печени. Исследование сыворотки крови, взятой на 30 день после вакцинации, выявило специфические антитела у всех животных в титре от 1:40 до 1:320, которые сохранялись в высоком уровне в течение 2 месяцев (срок наблюдения). Спустя месяц вакцинорованным свинкам вводят 10,000 ИД вирулентных коксиелл Бернета штамма Henzerling. Все животные оказались иммунными, в то время как у контрольных невакцинированных животных наблюдалась лихорадка с температурой до 41oC, которая длилась в течение 4-7 дней. Представленные данные показывают, что вакцина против лихорадки Ку обладает высокой иммуногенной активностью, длительностью сохранения иммунитета при однократной вакцинации, к тому же она безопасна. Источники информации. 1. Гениг В. А. Вопросы инфекционной патологии и иммунологии. 1963, 3, 165. 2. Baca O.G. Paretsky D. Q fever and C. burnetii, Microb. Revus. 1983, 47, 127-149. 3. Brezina R. Urvolgyi Y. The study of C.burnetii antigenic structure. Acta virol. 1962, 6, 43-88. 4. Brezina R. Schramec S. Kazar J. Urvolgyi Y. q fever chemovaccine for human use. Acta virol. 1974, 18, 269. 5. Cracea E. Dumitrescu S. Botez D. et al. Local pathogenic effects of Q fever vaccines. Arch. Roum. Pathol. Exp. Microb. 1972, 313, 367-372. 5. Cracea E. Dumitrescu S. Botez D. et al. Immunization in man with a soluble Q fever vaccine. Arch. Roum. Pathol. Exp. Microb. 1973, 32, 1, 45-51.
ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Способ получения вакцины против лихорадки Ку, включающий накопление коксиелл Бернета, выделение и инактивацию полученной биомассы, ее очистку от тканей хозяина, суспендирование в дистиллированной воде, обработку полученной суспензии с последующим центрифугированием и отделением растворимого антигена из надосадочной жидкости, отличающийся тем, что накопление коксиелл проводят в селезенках белых мышей, очистку от тканей хозяина проводят путем последовательной обработки 0,3 1%-ным раствором трипсина, 4 10%-ным раствором полиэтиленгликоля с мол. м. 4000 или 6000 в присутствии 0,1 0,4% на объем суспензии натрия сульфат декстрана 500 и затем 5 15% хлороформа, очищенную биомассу коксиелл делят на две части, одну из которых используют как корпускулярный антиген, а другую после суспендирования обрабатывают ультразвуком и отделяют растворимый антиген, далее корпускулярный и растворимый антигены объединяют в соотношении 16 мг и 0,5 мл соответственно с титром 1 10 по РСК.
www.freepatent.ruСпособ получения вакцины против лихорадки ку
Использование: биотехнология, вакцина для профилактики лихорадки Ку, антиген. Сущность изобретения: для получения высокоиммуногенной вакцины накопление риккетсий (коксиелл) Бернета проводят в селезенках белых мышей. Выделение их и очистку от тканей хозяина проводят в системе несовместимых полимеров. Используют часть полученного очищенного корпускулярного антигена в качестве первого компонента вакцины. Другую часть корпускулярного антигена подвергают ультразвуковой обработке и центрифугированию и получают растворимый антиген, как второй компонент вакцины. Компоненты 1 и 2 объединяют в соотношении: 16 мкг корпускул коксиелл и 0,5 мл растворимого антигена с титром 1:10 по РСК. Полученная вакцина обладает высокой иммуногенной активностью, длительностью сохранения иммунитета при однократной вакцинации, к тому же она безопасна. Изобретение относится к биотехнологии, в частности к способам изготовления вакцины для профилактики лихорадки Ку. Известен способ получения живой вакцины для профилактики лихорадки Ку, включающий накопление коксиелл Бернета II фазы при культивировании в куриных эмбрионах в течение 7 дней, приготовление суспензии на физиологическом растворе, центрифугирование с последующим забором и розливом надосадочной жидкости [1] Однако вакцина, полученная известным способом, обладает потенциальной возможностью спонтанной реверсии к фазе I и последующих вызываемых ею патологических изменений [2-5] Наиболее близким аналогом является способ получения вакцины против лихорадки Ку, включающий накопление коксиелл Бернета штамма Henzerling I фазы при культивировании в куриных эмбрионах в течение 7 дней, выделение и инактивацию полученной биомассы, ее очистку от тканей хозяина, приготовление суспензии в дистиллированной воде с последующей обработкой ее 6%-ной трихлоруксусной кислотой, центрифугированием, диализом надосадочной жидкости и отделением растворимого антигена (целевой продукт) из надосадка [6] Однако вакцина, полученная по данному способу, обладает низкой иммуногенной активностью, требующей многократного применения. Технический результат изобретения заключается в получении высокоиммуногенной вакцины. Технический результат достигается использованием: для накопления коксиелл белых мышей, для очистки антигенов коксиелл от ткани хозяина систем несовместимых полимеров, для получения растворимого компонента вакцины ультразвука, объединением коксиелл I фазы с растворимым антигеном. Пример 1. 200 белых мышей массой 12,0 1,0 г заражают внутрибрюшинно 0,5 мл 6%-ной суспензией инфицированных коксиеллами Бернета штамм "Луга-1" I фазы желточных мешков куриного эмбриона и на 6 день после их заражения убивают хлороформом, извлекают селезенки, объединяют и добавляют 0,9%-ный раствор хлорида натрия из расчета 15 мл/г селезеночного материала. Затем селезенки растирают в гомогенизаторе при скорости вращения 8000 об/мин в течение 10-15 мин, добавляют формалин до конечной концентрации 1% и суспензию инактивируют при 4oC в течение 14 дней. Инактивированную суспензию центрифугируют, отделяют осадок и проводят очистку коксиелл Бернета от тканей хозяина путем последовательной обработки сначала 0,75% -ным раствором трипсина, подогретого до 37oC, в течение 20-30 мин, затем 6%-ным раствором полиэтиленгликоля (ПЭТ) мол.м. 6000 или мол.м. 4000. Перемешивают до полного растворения и добавляют натрий сульфат декстрана 500 в количестве 0,3% на объем. Снова тщательно перемешивают до растворения всех компонентов. Выдерживают 30 мин при 4oC. Далее после центрифугирования супернатант обрабатывают 10%-ным раствором хлороформа. После многократного центрифугирования получают очищенную биомассу коксиелл. Полученную очищенную биомассу коксиелл делят на две части. Одну часть полученных высокоочищенных коксиелл Бернета используют при приготовлении вакцины как корпускулярный антиген (компонент 1). Другую часть используют для получения растворимого антигена (компонент 2). Для этого осадок коксиелл суспендируют в дистиллированной воде и многократно подвергают ультразвуковой обработке на диспергаторе УЗДН-А с частотой генератора и излучателя 22,0+1,65 кГц по 15 мин с 1-3 перерывами по 1 мин, центрифугируют при 1000 об/мин, отбирают надосадочную жидкость, затем центрифугируют при 18000 об/мин, отбирают, вновь обрабатывают и объединяют надосадочную жидкость. Полученный растворимый антиген доводят до титра 1:10 по РСК (реакция связывания комплемента), который и является вторым компонентом для приготовления вакцины. Для получения одной прививочной дозы используют 16 мкг корпускул коксиелл Бернета 1 фазы и 065 мл растворимого антигена с титром 1:10 по РСК. Пример 2. Полученную вакцину по примеру 1, содержащую 16 микрограмм корпускул коксиелл Бернета 1 фазы и 0,5 мл растворимого антигена с титром 1:10 по РСК, вводят морским свинкам массой 300 г подкожно. После введения вакцины морских свинок термомметрируют 14 дней. У некоторых животных отмечено повышение температуры на следующий день после введения вакцины до 39,8-40oC при норме 39,5oC. Во всех случаях не отмечены острая и хроническая токсичности. Клиническая картина крови у всех свинок была нормальной. Не отмечено влияние на центральную нервную систему и детоксицирующую функцию печени. Исследование сыворотки крови, взятой на 30 день после вакцинации, выявило специфические антитела у всех животных в титре от 1:40 до 1:320, которые сохранялись в высоком уровне в течение 2 месяцев (срок наблюдения). Спустя месяц вакцинорованным свинкам вводят 10,000 ИД вирулентных коксиелл Бернета штамма Henzerling. Все животные оказались иммунными, в то время как у контрольных невакцинированных животных наблюдалась лихорадка с температурой до 41oC, которая длилась в течение 4-7 дней. Представленные данные показывают, что вакцина против лихорадки Ку обладает высокой иммуногенной активностью, длительностью сохранения иммунитета при однократной вакцинации, к тому же она безопасна. Источники информации. 1. Гениг В. А. Вопросы инфекционной патологии и иммунологии. 1963, 3, 165. 2. Baca O.G. Paretsky D. Q fever and C. burnetii, Microb. Revus. 1983, 47, 127-149. 3. Brezina R. Urvolgyi Y. The study of C.burnetii antigenic structure. Acta virol. 1962, 6, 43-88. 4. Brezina R. Schramec S. Kazar J. Urvolgyi Y. q fever chemovaccine for human use. Acta virol. 1974, 18, 269. 5. Cracea E. Dumitrescu S. Botez D. et al. Local pathogenic effects of Q fever vaccines. Arch. Roum. Pathol. Exp. Microb. 1972, 313, 367-372. 5. Cracea E. Dumitrescu S. Botez D. et al. Immunization in man with a soluble Q fever vaccine. Arch. Roum. Pathol. Exp. Microb. 1973, 32, 1, 45-51.Формула изобретения Способ получения вакцины против лихорадки Ку, включающий накопление коксиелл Бернета, выделение и инактивацию полученной биомассы, ее очистку от тканей хозяина, суспендирование в дистиллированной воде, обработку полученной суспензии с последующим центрифугированием и отделением растворимого антигена из надосадочной жидкости, отличающийся тем, что накопление коксиелл проводят в селезенках белых мышей, очистку от тканей хозяина проводят путем последовательной обработки 0,3 1%-ным раствором трипсина, 4 10%-ным раствором полиэтиленгликоля с мол. м. 4000 или 6000 в присутствии 0,1 0,4% на объем суспензии натрия сульфат декстрана 500 и затем 5 15% хлороформа, очищенную биомассу коксиелл делят на две части, одну из которых используют как корпускулярный антиген, а другую после суспендирования обрабатывают ультразвуком и отделяют растворимый антиген, далее корпускулярный и растворимый антигены объединяют в соотношении 16 мг и 0,5 мл соответственно с титром 1 10 по РСК.www.findpatent.ru
|
