Забыли пароль?
Регистрация
О компании
Доставка
Каталог товаров  
Контакты
Задать вопрос
Как сделать заказ
Рекомендации
Партнёрам
Получить консультацию

Вакцина для специфической профилактики хламидиоза крупного и мелкого рогатого скота. Вакцина против хламидиоза крс


вакцина для специфической профилактики хламидиоза крупного рогатого скота - патент РФ 2092188

Использование: ветеринарная микробиология, специфическая профилактика хламидиозной инфекции крупного рогатого скота, вакцина. Сущность изобретения: вакцина содержит инактивированный формальдегидом в присутствии глутарового альдегида, очищенный антиген из штамма Chlamydia psittaci "250" - возбудителя аборта коров, выращенный одновременно в желточный и аллантоисной оболочках куриных эмбрионов, с концентрацией 15-20 мкг/мл, адсорбированный на алюмокалиевых квасцах и эмульгированный в маслоланолиновой смеси. Использование вакцины уменьшает количество абортов и мертворождений у коров и нетелей, снижает заболеваемость и гибель телят от хламидиозной инфекции. 4 табл. Изобретение относится к ветеринарной микробиологии и может быть использовано для специфической профилактики хламидиозной инфекции крупного рогатого скота. Хламидиоз крупного рогатого скота инфекционная болезнь, которая проявляется преимущественно абортами у коров и нетелей преждевременным рождением слабых и нежизнеспособных телят, воспалительными явлениями органов генитальной системы у коров и быков-производителей и заболеваемостью молодняка крупного рогатого скота гастроэнтеритом, пневмонией, полиартритом, менингоэнцефалитом и другими синдромами. Хламидиоз крупного рогатого скота в последние годы получил широкое распространение в животноводческих комплексах и племпредприятиях страны. Для хламидиозной инфекции в целом характерна слабая иммунологическая реакция, тенденция к хроническому и латентному течению с сохранением возбудителя в организме даже после острого переболевания и клинического выздоровления [1] Меры борьбы с хламидиозом крупного рогатого скота как у нас в стране, так и за рубежом до недавнего времени были основаны на применении медикоментозных средств, ветеринарно-санитарных и ограничительных мероприятий. Недостатком указанной вакцины является низкая эффективность ее для иммунизации крупного рогатого скота против хладиоза из-за существующих между штаммами хламидий антигенных различий. Известно, что существующие между штаммами хламидий антигенные различия значительно влияют на эффективность иммунизации против заболеваний, вызываемых хламидиями (Ata F.A. Storz J. 1973). Наиболее близким по сущности к предлагаемому изобретению (прототип) является "Вакцина против хламидиоза сельскохозяйственных животных", содержащая в качестве антигена возбудитель хламидиозного аборта, выращенный в желточной оболочке куриных эмбрионов, инактивированный мертиолятом, а в качестве адъюванта служат раствор тригидрооксиметиламинометана и тетраметилдиамина, раствор акриламинда и метилбисакриламида, раствор персульфата аммония и раствор глутарового альдегида [2] Состав вакцины, взятой в качестве прототипа, следующий, мл: Антигенная жидкость из 20-40%-ной суспензии желточных мешков, зараженных хламидиями (ЭЛД50 10-6,5-7,0) 8-10 Смесь растворов тригидрооксиметиламинометана (36,3%-ного) с тетраметилдиамином (0,23%-ным) 1-2 Смесь растворов акриламида (30%-ного) и метилбисакриламидом (0,8%-ным) - 3-4 1,4%-ный раствор персульфата аммония 1-2 25% -ный раствор глутарового альдегида до конечной концентрации 0,05% - 0,038 Недостатком известной вакцины является неочищенность от компонентов желточной оболочки куриных эмбрионов исходной биомассы хламидий в качестве которой используют 20-40%-ную суспензию возбудителя хламидиозного аборта коров (штамм "250") и низкая концентрация хламидийного антигена в инактивированной вакцине и как следствие этого слабая иммуногенная активность вакцины необеспечивающая формирование длительного и напряженного иммунитета против хламидиоза крупного рогатого скота. Целью изобретения является разработка противохламидиозной вакцины, обеспечивающей повышение напряженности и длительности иммунитета за счет щадящей инактивации возбудителя, очистки, концентрации, адсорбции на алюмокалиевых квасцах и эмульгирования биомассы хламидий в масляно-ланолиновой смеси. Поставленная цель достигается тем, что возбудитель хламидиозного аборта коров (штамм "250") выращивают одновременно в желточной и хорионаллантоисной оболочках куриных эмбрионов (согласно авт.св. N 1641883 от 15 декабря 1990 г. ), биомассу хламидий инактивируют 0,2%-ным формальдегидом в присутствии 0,1% глутарового альдегида в течение 24 ч, антиген подвергают очистке и концентрированию до 30-40 мкг/мл хламидий дифференциальным центрифугированием, адсорбируют на алюмокалиевых квасцах и эмульгируют в масляно-ланолиновой смеси при следующих соотношениях компонентов мас. Антиген из штамма Chlamydia psittaci "250" 45-50 Масло-ланолиновый адъювант 45-50 Формальдегид 0,04-0,06 Сопоставительный анализ с прототипом позволяет сделать вывод, что предлагаемая вакцина против хламидиоза крупного рогатого скота отличается от известной новым способом выращивания специфического хламидийного антигена одновременно в желточной и аллантоисной оболочках куриного эмбриона, новым ускоренным способом инактивации хламидий путем комбинированного воздействия на возбудителя формальдегидом (0,2% ) в присутствии глутарового альдегида (0,1%), очисткой биомассы от компонентов куриных эмбрионов, концентрацией до 30-40 мк/мл специфического хламидийного антигена и введением в состав вакцин новых компонентов, а именно: алюмокалиевых квасцов, минерального масла (ПЭС-3) и в качестве консерванта формальдегида. Таким образом предлагаемое техническое решение соответствует критерию "новизна". Анализ составов известных вакцин против хламидиоза сельскохозяйственных животных (авт.св. N N 826744, 690128) показал, что некоторые введенные в предлагаемом решении вещества известны, например, возбудитель хламидиозного аборта коров (штамм "250"), масляный адъювант. Однако их применение в этих препаратах в сочетании с другими компонентами не обеспечивает вакцинам такие свойства, которые они проявляют в предложенном решении, а именно: значительное усилие иммуногенных свойств и, как следствие повышение напряженности и длительности противохламидийного иммунитета у вакцинированного крупного рогатого скота. Таким образом, данный состав компонентов придает вакцине новые свойства, что позволяет сделать вывод о соответствии предлагаемого решения критерию "существенные отличия". В качестве антигена в вакцине используют штамм (Chlamydia psittaci "250" возбудитель хламидиозного аборта коров. Штамм выделен от абортированного плода коровы и депонирован в коллекции микроорганизмов Всесоюзного государственного научно-контрольного института ветеринарных препаратов под номером 5 от 3 октября 1990 г. Штамм Chlamydia psittaci "250" обладает следующими свойствами: Морфологические признаки. Культура штамма представляет собой мелкие элементарные тельца хламидий, имеющие сферическую форму размером 200-400 нм. которые хорошо воспринимают карбол-фуксин Циля в разведении 1:5 и окрашиваются по модифицированному методу Стемп в ярко-красный цвет. Культуральные свойства. Штамм хламидий "250" хорошо культивируется в желточной оболочке 6-7 суточных и аллантоисной оболочке 8-9-суточный развивающихся куриных эмбрионов. Специфическая гибель куриных эмбрионов, инфицированных в желточную полость, отмечается на 5-9 сутки после заражения; возбудитель накапливается при этом в титре 106,5-10-7,5ЭЛД50 в 0,3 мл. Патогенные свойства. Штамм хламидий "250" обладает токсичностью и высокой вирулентностью для лабораторных и восприимчивых животных. При внутрибрюшинном и интраназальном заражении белых мышей и морских свинок в дозе соответственно 0,5 и 1 мл 10%-й свежеполученной суспензией инфицированных желточных оболочек, вызывает заболевание и гибель животных на 4-16 сутки после введения материала. У нетелей после внутреннего заражения в дозе 8 мл 10-7,5ЭЛД50 в 0,3 мл штамм обусловливает аборты и рождения слаборазвитого приплода на 20-60 сутки после инфицирования. Иммуногенные свойства. Использование в качестве антигена биомассы, приготовленной из штамма Chlamydia psittaci "250" в инактивированной адсорбированно-эмульгированной вакцине обеспечивает формирование у 100% привитых животных напряженного и длительного иммунитета. В экспериментальных опытах при двукратной иммунизации нетелей вакцина предохраняла 100% животных от развития хламидиозной инфекции и абортов после искусственного заражения их вирулентным штаммом возбудителя хламидиозного аборта коров. Использование вакцины в полевых опытах в неблагополучных по хламидиозу хозяйствах существенно уменьшает количество абортов и мертворождений у коров и нетелей, снижает заболеваемость и гибель телят от хламидиозной инфекции и тем самым в 4-5 раз сокращает потери молодняка крупного рогатого скота и уменьшает напряженность эпизоотической ситуации по хламидийным инфекциям. Для экспериментальной проверки предлагаемой вакцины, ее готовят следующим образом. Куриные эмбрионы 7-дневного возраста заражают в желточную полость суспензией свежепассированного штамма хламидий "250" возбудителя хламидиозного аборта коров, разведенной до 10-4 в дозе 0,3 мл. Инфицированные эмбрионы инкубируют при 37-38oC в течение двух дней, затем проводят овоскопию, отбирают и уничтожают павших (неспецифическая гибель), а живые эмбрионы заражают повторно в аллантоисную полость суспензий штамма "250", разведенной до 10-3 в дозе 0,3 мл. Далее зараженные эмбрионы инкубируют при 37-38oC в течение 7-8 дней. Специфическая гибель 90-95% инфицированных эмбрионов происходит на 6-9 дни после первичного заражения. Павшие эмбрионы охлаждают и вскрывают. От каждого эмбриона отсасывают 4-4,5 мл хламидосодержащей аллантоисной жидкости и отбирают 1-2 г хорионаллантоисной и желточной оболочек вместе с сопутствующим желтком. Хламидосодержащий материал до использования хранят в замороженном при минус 20-30oC состоянии. Аллантоисную жидкость перед заморозкой осветляют центрифугированием при 3 тыс. об/мин в течение 30 мин. Для получения полуфабриката вакцины из хламидиосодержащего материала готовят 10%-ю исходную суспензию на фосфатно-буферном физиологическом растворе (ФБР) pH 7,2-7,4 следующим образом: хламидиосодержащие оболочки взвешивают подвергают термолизису путем трехкратного замораживания и оттаивания, и суспензируют до 20% -й концентрации на коллоидной мельнице добавив расчетное количество ФБР. Суспензию центрифугируют при 3000 об/мин в течение 30 мин и отсасывают средний слой центрифугата взвесь хламидий. Осадок тканей и верхний желточный слой повторно гомогенизируют в таком же количестве ФБР, центрифугируют в тех же условиях и снова отсасывают суспензию хламидий. Замороженную хламидиосодержащую аллантоисную жидкость размораживают по возможности быстро в водяной бане при температуре 37oC интенсивно встряхивая флакон с целью предотвращения образования крупных хлопьев. Размороженную слегка опалесцирующую аллантоисную жидкость разводят в соотношении 1:1 с ФБР. Хламидиосодержащие суспензии инфицированных оболочек и аллантоисной жидкости объединяют в соотношении 1:1 и добавляют сначала глутаровый альдегид в конечной концентрации 0,1% затем через 30 минут, формальдегид в конечной концентрации 0,2% Суспензию после добавления реагентов перемешивают и выдерживают в течение 24 ч при температуре плюс 20-24o (комнатная температура) для инактивации хламидий. Хламидии из инактивированной суспензии осаждают путем центрифугирования ее при 18-20 тыс. об/мин в течение 60 мин. Надосадочную жидкость вместе с верхним желточным слоем удаляют, осадок элементарных телец хламидий взвешивают и ресуспендируют в соотношении 1:10 с ФБР, содержащим 0,1% формальдегида. Стандартизацию суспензии по содержанию элементарных телец хламидий осуществляют путем определения ее оптической плотности. Для этого из приготовленной взвеси хламидий готовят разведение 1:10 (к 0,5 мл взвеси добавляют 4,5 мл ФБР) и измеряют коэффициент поглощения на ФЭК 56М при длине волны 540 нм в кюветах с рабочей длиной 10 мм. Оптимальным для получения иммуногенной вакцины является коэффициент поглощения, равный 2,4-2,6 единиц, что соответствует содержанию 30-40 мкг антигена в одном мл суспензии. Стандартизованную взвесь хламидий пропускают через коллоидную мельницу, добавляют алюмо-калиевые квасцы в конечной концентрации 0,5% и снова гомогенизируют в течение 5 мин, затем взвесь сливают в стеклянные баллоны и помещают в рефрижератор при 4-6oC на 1-2 суток. В этих условиях хламидии адсорбируются на алюмокалиевых квасцах и осаждаются в виде хлопьев. Надосадочную жидкость осторожно отсасывают и удаляют, а осадок ресуспендируют до исходного объема фосфатно-буферным раствором, содержащим 0,1% формальдегида. Процедуру отмывки хламидий от избытка алюмо-калиевых квасцов повторяют 2-3 раза. Полученный полуфабрикат вакцины с консервантом хранят до использования в рефрижераторе при 4-6oC. Пример 1. Для изготовления 1 л вакцины берут 500 мл инактивированного антигена Chlamydia psittaci "250", содержащего 30 мкг/мл хламидий адсорбированных на алюмо-калиевых квасцах с 0,08% формальдегида. Добавляют 500 мл стерильной масло-ланолиновой смеси в соотношении 84:16. Пропускают через коллоидную мельницу и расфасовывают в стерильные флаконы по 100 мл. Средний арифметический титр комплементсвязывающих антител в сыворотке крови вакцинированных морских свинок составляет не ниже 1:20. Пример 2. Для изготовления 1 л вакцины берут 450 мл инактивированного антигена Chlamydia psittaci "250", содержащего 40 мкг/мл хламидий адсорбированных на алюмо-калиевых квасцах с 0,12% формальдегида. Добавляют 550 мл стерильной масло-ланолиновой смеси в соотношении 85:15. Пропускают через коллоидную мельницу и расфасовывают в стерильные флаконы по 100 мл. Средний арифметический титр комплементсвязывающих антител в сыворотке крови вакцинированных морских свинок составляет не ниже 1:20. При изменении минимума и максимума в соотношениях компонентов при изготовлении вакцины происходит расслоение эмульсии на водную и масляную фракции, что снижает иммуногенность эмульсионной вакцины. Контроль вакцины на стерильность, стойкость эмульсии и безвредность проводится по общепринятым методам. Контроль иммуногенности проводят на морских свинках. Животных вакцинируют в дозе 0,5 мл подкожно в области лопатки справа и слева (по 0,25 мл). Вакцинация способствует выработке специфических хламидийных комплементсвязывающих антител на 30-35 день в титрах 1:5 1:80 (средний арифметический титр не ниже 1:20). Вакцину применяют с профилактической целью в хозяйствах и племпредприятиях неблагополучных или угрожаемых по хламидиозу крупного рогатого скота. Вакцинируют все серонегативное поголовье крупного рогатого скота однократно один раз в год с трехмесячного возраста. Телок случного возраста и коров вакцинируют за 20-25 дней до осеменения или случки. Больных хламидиозом животных перед вакцинацией подвергают лечению с использованием антибиотиков тетрациклинового ряда и вакцинируют после выздоровления. Вакцину вводят крупному рогатому скоту в асептических условиях подкожно в область подгрудка или верхней трети шеи из расчета не более 1,5 мл в одно место в следующих дозах: 1 мл телятам в возрасте от 3 до 6 месяцев; 2 мл телятам в возрасте от 6 до 12 месяцев; 3 мл телятам старше года, коровам и быкам-производителям. У вакцинированных животных на месте введения вакцины образуется уплотнение размером до 3х4 см, которое постепенно рассасывается в течение 4-8 месяцев. Иммунитет у привитых животных создается через 30 сут. после вакцинации и сохраняется в течение 12 месяцев. Срок годности вакцины 1,5 года. Проведены испытания 6 экспериментальных и 3 опытно-промышленных серий инактивированной эмульсионной вакцины против хламидиоза крупного рогатого скота на антигенную и иммуногенную активность. Экспериментальные серии вакцины были испытаны в опытах на лабораторных животных и нетелях. Белых мышей массой 16-18 г вакцинировали двукратно подкожно с интервалом 7 дней в дозе 0,1-0,15 мл. Через 21-28 дней после вакцинации мышей заражали возбудителем хламидиозного аборта коров (штамм "250") внутрибрюшинно в дозе 0,3-0,5 мл 10%-й взвесью возбудителя. Одновременно с иммунизированными мышами инфицировали интактных (контрольных) мышей аналогичного возраста. Результаты проведенных шести серий опытов (табл. 1) показали, что выживаемость предварительно вакцинированных мышей после контрольного заражения вирулентной культурой хламидий колебалась в пределах 86-92,3% (88,6вакцина для специфической профилактики хламидиоза крупного рогатого скота, патент № 2092188
1,2% ). При этом в контрольной группе отмечалась гибель от 66,7 до 88% мышей (78,7% ). Следовательно, вакцина обладает высокой иммуногенностью и обеспечивает устойчивость вакцинированных мышей к искусственному заражению вирулентной культурой хламидий. В опытах на нетелях в экспериментальных условиях было установлено, что двукратное подкожное введение вакцины в дозе по 1,5 мл нетелям предохраняет их от развития хламидиозного аборта крупного рогатого скота после контрольного заражения вирулентным штаммом хламидий "250" (табл. 2). В условиях Херсонской биофабрики согласно разработанной нами технологии было изготовлено 3 опытно-промышленные серии вакцины против хламидиоза крупного рогатого скота. Производственный контроль стерильности, безвредности и иммуногенной активности, их приемку, а также заключение о промышленном производстве было сделано согласно приказу ГУВ СССР N 57 от 5.06.90 г. При этом было установлено, что все три изготовленные опытно-промышленные серии вакцины являются стерильными, безвредными и иммуногенными препаратами (Акт Херсонской биофабрики от 24 мая 1990 г.). Производственные испытания вакцины, изготовленной на Херсонской биофабрике, проводили в девяти неблагополучных по хламидиозу хозяйствах ТССР и Владимирской области. При этом было вакцинировано 6862 гол. крупного рогатого скота, в том числе 3715 коров, 79 быков-производителей и 3068 телят и телок случного возраста. Результаты испытания вакцины в полевых условиях обобщены в табл. 3 и 4. Из приведенных в табл. 3 данных видно, что через месяц после вакцинации у 100% вакцинированных животных выявлена серопозитивность в РСК к хламидийному антигену. Средний арифметический титр специфических хламидийных антител при этом колебался в пределах 1:65 1:87. Через 6 месяцев положительно на хламидиоз по РСК реагировали от 90 до 93,6% вакцинированных животных со средним арифметическим титром 1:12 1:14. Через 12 месяцев серопозитивность к хламидиозному антигену сохранилась у 50-60% крупного рогатого скота со средним комплементсвязывающих антител 1:7 1:10. Таким образом вакцинация животных обусловливает их серопозитивность к хламидиозному антигену. Максимальный уровень антител (титры 1:10 1:160) формируется через 30-35 дней после вакцинации и сохраняется на высоком уровне у 90-93,6% животных в течение 6 месяцев; затем происходит постепенное снижение уровня серопозитивности к 12 месяцам после иммунизации. Оценку эффективности вакцинации крупного рогатого скота в полевых условиях проводили сравнивая количество абортов и мертворождений среди коров и нетелей, а также количества падежа и вынужденного убоя телят в неблагополучных хозяйствах до вакцинации (1989 г.) и после вакцинации (1990, 1991 гг. ). Из приведенных в табл. 4 данных видно, что количество абортов и мертворождений в пяти хозяйствах до вакцинации составили в среднем 6% падеж и вынужденный убой 10% Общие потери молодняка составили в среднем 16% После применения вакцины количество абортов и мертворождений в этих же хозяйствах уменьшилось в 5,4 раза и составило лишь 1,1% Одновременно в 3,7 раза сократилась заболеваемость и вынужденный убой телят от хламидиозной инфекции. Общие потери молодняка после вакцинации составили 3,7% что в 4,2 раза меньше, чем до применения вакцины в этих хозяйствах. Следовательно, вакцина в условиях неблагополучного по хламидиозу крупного рогатого скота хозяйства до минимума сокращает количество абортов и мертворождаемости, значительно уменьшает заболеваемость и гибель телят от хламидиозной инфекции, улучшает эпизоотическую обстановку по хламидиозу и таким образом обеспечивает повышение продуктивности животных. Ввиду того, что предлагаемое изобретение обладает признаками патентоспособности вакцина для специфической профилактики хламидиоза крупного рогатого скота может быть представлена для загранпатентования. Внедрение вакцины в ветеринарную практику позволит животноводческим хозяйствам предотвратить экономические потери, обусловленные недополучением до 20% телят за счет абортов, мертворождений у коров и нетелей, падежа и вынужденного убоя телят, а также стабилизации привесов на откорме животных и сохранение уровня удоя молока лактирующими коровами.

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

Вакцина для специфической профилактики хламидиоза крупного рогатого скота, содержащая инактивированный антиген Chlamydia psittaci, адъювант и консервант, отличающаяся тем, что содержит инактивированный и очищенный хламидийный антиген из штамма Chlamydia psittaci "250" возбудителя аборта коров в концентрации 15 20 мг/мл, адсорбированный на алюмокалиевых квасцах и эмульгированный в масляно-ланолиновом адъюванте, а в качестве консерванта - формальдегид при следующих соотношениях компонентов, мас. Инактивированный и очищенный хламидийный антиген из штамма Chlamydia psittaci "250" возбудителя аборта коров 45 50 Алюмокалиевые квасцы 0,2 0,3 Масляно-ланолиновый адъювант 45 55 Формальдегид 0,04 0,06о

www.freepatent.ru

диагностика, лечение, карантин на ферме

Хламидиоз – заболевание, которое имеет инфекционную природу. Контагиозная зооантропонозная инфекция, свойственная всем разновидностям животных, и способная развиваться в человеческом организме, имеет множество проявлений. У сельскохозяйственных, выращиваемых для потребительских нужд птиц и животных болезнь зарегистрирована абсолютно во всех государствах мира, и все хозяйства по разведению скота и птицы несут из-за нее ощутимый ущерб в экономическом плане.

Хламидиоз у животныхХламидиоз у животных

Хламидиоз у животных

Содержание статьи

Виды и признаки

Болезнь диагностируют по набору определенных признаков ее сопровождающих, многие из которых проявляются родственными с симптомами других заболеваний, а некоторые свойственны исключительно данному заболеванию.

  1. Поражение дыхательных путей.
  2. Энтерит.
  3. Кератоконъюнктивит. КератоконъюнктивитКератоконъюнктивит

    Кератоконъюнктивит

  4. Трахома.
  5. Поражение полового аппарата.
  6. Пневмония.
  7. Полиартрит. Артрит скакательного суставаАртрит скакательного сустава

    Артрит скакательного сустава

  8. Поражение кишечника.
  9. Эндометрит.
  10. Энцефалит.
  11. Самопроизвольный выкидыш у самок.
  12. Затяжной выход последа.
  13. Мастит. МаститМастит

    Мастит

  14. Рождение мертвого или нежизнеспособного детеныша.

Возбудитель болезни хламидиоз – это одноименные клеточные организмы хламидиалес, которые принадлежат бактериально-вирусному семейству хламидиацеа и относятся к роду хламидиа. Эти уникальные микроорганизмы, по сути, паразиты. Позиция между вирусами и бактериями, которую занимает хламидиа, придает ей вид микроскопических кокков, несущих молекулы одновременно ДНК и РНК. Сегодня известно шесть видов.

Микроб хламидия трахоматис под микроскопомМикроб хламидия трахоматис под микроскопом

Микроб хламидия трахоматис под микроскопом

Таблица. Виды и описание

ВидОписание
ПситтакиПситтаки

Пситтаки

Присуща птицам в большей степени, но может распространяться и среди животных, особенно собак. Человек болеет ею в исключительных случаях.

Сопровождающие болезни: полиартриты, пневмонии, аборты, кератоконъюнктивиты, энтериты, энцефаломиелиты, маститы.

ПекорумПекорум

Пекорум

Болезнь, преимущественно, животных. Вызывает самопроизвольные выкидыши и аборты, может привести к полиартриту, кератоконъюнктивиту, пневмонии, энцефалиту, маститам и энтеритам.
АбортусАбортус

Абортус

Болезнь овец, коров, коз, лошадей, свиней и кроликов. Также болеют ею мыши, которые являются переносчиком инфекции. Как понятно из названия, способствует абортам, угнетению половой функции и послеродовым проблемам, а также появлению мертворожденных детенышей.
ФелисФелис

Фелис

Болезнь исключительно кошек, причем, наблюдается как у домашних, так и у диких представителей кошачьих.
ТрахоматисТрахоматис

Трахоматис

Ею болеют исключительно люди. Приводит болезнь к трахоме, цервициту, лимфогранулеме и конъюнктивиту.
ПневмониаПневмониа

Пневмониа

Тоже человеческое заболевание, вызывающее различные дыхательные болезни, от ОРВИ до пневмонии, а также конъюнктивит.

Опасность и источники заражения

Микроскопические кокки поражают открытые участки организма птиц, скота или человека. На них обычно присутствует множество микроорганизмов различной природы. Они являются катализаторами, провоцируя болезнь, поскольку хламидиа паразитирует в клетках. В результате прямого действия на клеточную оболочку слизистой возникает нужный фон для зарождения и развития патогенной микрофлоры. Именно это становится причиной того, что наиболее часто после возбуждения первичной инфекции у носителей возникает смешанная или вторичная, которая усложняет и отягощает течение болезни.

ХламидииХламидии

Хламидии

Таблица. Сколько могут жить хламидии

УсловияКоличество суток
Температура комнаты10
Повышенная температура – до +38°С7
В почве20
В снегу18
В молоке23
При -60°С600
При -20°С180

Кстати. Бактерии не боятся низких температур, и наиболее хорошо сохраняются при минусовых температурных показателях. В то время как при нагревании до +70°С они погибают полностью в течение десяти минут.

Воздействие дезинфицирующих средств на бактерии этого рода зависит от температуры применяемого раствора. Так, если проводить дезинфекцию холодным раствором, гибель бактерий будет на уровне 20% от популяции. Если раствор подогреть до +60°С, бактерии погибнут полностью.

Дезинфекция подогретым раствором более эффективнаДезинфекция подогретым раствором более эффективна

Дезинфекция подогретым раствором более эффективна

Для дезинфекции применяют вещества в растворенном виде:

  • 4% натр;
  • 3% известь; ИзвестьИзвесть

    Известь

  • 4% хлорамин;
  • 4% формалин; ФормалинФормалин

    Формалин

  • 5% лизол;
  • 5% карболка в кислоте. Карболовая кислотаКарболовая кислота

    Карболовая кислота

Источниками заражения могут стать:

  • животные, инфицированные и пролеченные – в течение года являются потенциальными носителями вируса-возбудителя;
  • заболевшие животные (птицы) – в активном периоде размножения бактерий;
  • последы либо абортированные эмбрионы больных животных;
  • околоплодные воды при родах вирусоносителя или половые выделения;
  • любые выделения из глаз, носа, фекалии, моча, сперма, молоко – у больного или переболевшего вирусом.
Животные и их молоко могут переносить инфекциюЖивотные и их молоко могут переносить инфекцию

Животные и их молоко могут переносить инфекцию

Любые выделения, содержащие хламидий, попадая в среду, контактируют с воздухом, стенами помещения, поверхностью пола и потолка, кормушками, емкостями для питья, подстилкой, а также с кормом и питьевой водой. Затем они передаются здоровым животным. Заразиться можно аэрогенным путем, алиментарным или половым.

Инфекция может распространиться по воздуху, в итоге заболеют все животныеИнфекция может распространиться по воздуху, в итоге заболеют все животные

Инфекция может распространиться по воздуху, в итоге заболеют все животные

Кстати. Содержание с несоблюдением санитарии, неудовлетворительные нормы или качество кормления, пониженные температуры, которые ведут к охлаждению, сырость, способствуют процентному росту инфицирования.

Человек заражается в следующих случаях.

  • в процессе ухода за хламидиозными животными и птицами;
  • при убое зараженных животных, снятии шкуры, разделке туш;
  • при родовспоможении;
  • при уборке и утилизации павших особей.
Человек может заразиться, ухаживая за больными животнымиЧеловек может заразиться, ухаживая за больными животными

Человек может заразиться, ухаживая за больными животными

Этот вид заболевания на фермах имеет определенную ярко выраженную сезонность. Случаи учащаются в процессе массовых отелов скота или во время абортирования. В птичниках пик болезни приходится на окончание весенней миграции пернатых. Обычно весенне-летний период дает двойную, а то и тройную статистику всплесков хламидиоза.

Весной и летом пик заболеваемости у скотаВесной и летом пик заболеваемости у скота

Весной и летом пик заболеваемости у скота

Таблица. Формы и процент заболеваемости

Форма заболеванияЗаболеваемость (%)Летальность (в %)
Респираторная70-8015-25
Генитальная25-6020-25
Кишечная30-7020-30
Энцефалитная20-55100

Как распознать хламидиоз

Заболевание очень важно не допустить, проводя своевременную профилактику, санитарные обработки, осуществляя тщательный уход за животными. Но на 100% застраховаться от проникновения даже в самую стерильную среду вируса хламидиа невозможно. Поэтому не менее важна в борьбе с последствиями болезни своевременная диагностика.

Все слизистые оболочки организма животных, птиц и человека служат пропускными воротами вирусу. К ним относятся не только дыхательный и пищеварительный тракт, но и плацентная ткань, и половые органы.

На первом этапе проникновения хламидии концентрируются в лимфоузлах, из которых расходятся повсеместно в теле. В бронхиальном эпителии, хорионе, альвеолярных и лимфоидных клетках бактерии размножаются наиболее активно. Клетки разрушаются. Активный возбудитель проникает в кровеносную систему. Начинается токсикологизация, аллергизация бактеризация.

Основные клинические синдромы и признаки хламидиоза крупного рогатого скотаОсновные клинические синдромы и признаки хламидиоза крупного рогатого скота

Основные клинические синдромы и признаки хламидиоза крупного рогатого скота

Основные клинические симптомы

Для болезни показателен симптоматический полиморфизм. Разные признаки формируются в силу преобладающего поражения тех или иных систем и у различных родов животных. Также признаки могут дифференцироваться по возрастным категориям.

Таблица. Дифференциация клинических признаков

Вид и возраст животныхПризнаки
КРС – взрослое поголовьеаборт КРС
Овцы, козы – взрослое поголовьеаборт овец и коз
КРС – молоднякбронхопневмония, энцефаломиелит, полиартрит
Овцы, козы – молоднякпневмония, энтерит, конъюнктивит

Инкубационный период заболевания может длиться от трех часов до трех месяцев. Маточное поголовье КРС практически в 50% при заражении начинает абортировать, иногда на 4- месяце, а иногда на 7-м.

Коза, больная хламидиозомКоза, больная хламидиозом

Коза, больная хламидиозом

Процесс начинается внезапно, у коровы происходит повышение температуры до сорок градусов, наступает стремительное истощение и аборт. При этом послед задерживается, порождая эндометрит. Некоторые коровы после этого становятся бесплодными.

Выкидыш у коровыВыкидыш у коровы

Выкидыш у коровы

Кстати. У быков болезнь проходит практически бессимптомно, иногда последствием является уретрит или кишечная инфекция. Но они являются активными носителями вируса на протяжении длительного периода.

Диагностика хламидиоза – пошаговая инструкция

Шаг первый – учет клинических признаков

Если у животных проявились или хотя бы наметились какие-либо из вышеперечисленных клинических признаков, необходимо провести анализы на выделение бактериальной культуры хламидиа.

Шаг второй – взятие биоматериала

От заболевших особей берут пробы крови, слизи из полости носа, образцы конъюнктивы глаз, образцы фекалий. От самопроизвольно павших или умерщвленных животных взятию подлежат части органов и внутренних оболочек. При абортации берутся части плаценты, части органов плода, пробы вагинальной жидкости. У быков племенного уровня производится взятие пробы спермы.

Шаг третий – реакция мазка

Из биоматериала, взятого с заболевшего или патматериала, снятого с павшего животного изготавливают мазки. Они окрашиваются реагентами сразу по нескольким методам диагностирования. У живого молодняка КРС ветеринар может провести риноцитоскопию. Процедура состоит в следующем – с помощью ватного тампона из носовых ходов берется слизь на мазки. Окрашиваются аналогично.

Диагностика хламидиоза у КРСДиагностика хламидиоза у КРС

Диагностика хламидиоза у КРС

Шаг четвертый – серологическое исследование

Одним из диагностических методов, признанных эффективными, является серологическое исследование. При его проведении исследуются реакции антигенов и антител, которые находятся в сыворотке крови (анализ забора крови). Метод самый эффективный, помогает диагностировать болезнь в максимальном количестве возможных случаев – 98,7%.

Взятие крови у КРС из хвостовой веныВзятие крови у КРС из хвостовой вены

Взятие крови у КРС из хвостовой вены

Шаг пятый – дифференциация

Поскольку хламидиоз имеет ряд симптомов схожих со многими заболеваниями, необходим уточняющий дифференциальный диагноз. То есть подтверждение диагноза осуществляется методом исключения других заболеваний сходной симптоматики.

У возрастных КРС дифференциация происходит от ринотрахеита, бруцеллеза, трихомоноза, лептоспироза, кампилобактериоза, сальмонеллеза, вестибуловагинита.

У телят заболевание дифференцируют от парагриппа, бактериальной диареи, ринотрахеита, аденовирусной инфекции, листериоза, колибактериоза, рахита, авитаминоза, сальмонеллеза, кератоконъюнктивита.

Профилактические меры

В качестве профилактики заболевания в любых хозяйствах, где содержится поголовье сельскохозяйственного скота, на свинофермах и птицефермах, в том числе персональных мелкомасштабных, проводится иммунизация стад специальными узконаправленными вакцинами.

  1. Для овцеферм и хозяйств, содержащих коз, используется «овечья вакцина». Это эмульгированный препарат для вакцинации, эффективно противодействующий хламидиозным абортам овец. Препарат производится в Украине, на Сумская биологической фабрике. Можно применять вакцину не только для овец и коз, но и для свиней, лошадей КРС. Однократное введение. Препарат дает годовой иммунитет и 98% эффективность защиты. Вакцинация овецВакцинация овец

    Вакцинация овец

  2. Для КРС используется инактивированная культуральная вакцина, специально выработанная от хламидиоза рогатого скота. Производителем препарата является Новочеркасск. Введение троекратное. Доза на введения – 5 мл. Дает иммунитет на полгода. Вакцина против хламидиоза животных ХламидиовакВакцина против хламидиоза животных Хламидиовак

    Вакцина против хламидиоза животных Хламидиовак

  3. Аналогичным по способу и срокам действия препаратом, применяемым для КРС, лошадей и свиней, является инактивированный эмульгированный препарат для вакцинации производство Венгрия, его выпускает фирма «Филаксия».
  4. В последнее время заводчики КРС и свиней пользуются отечественной поливалентной вакциной «Плах», производитель НАРВАК НПО. Однократное введение. Срок действия – шесть месяцев. Вакцина ПЛАХВакцина ПЛАХ

    Вакцина ПЛАХ

Важно! Вакцинации подвергать можно только здоровых животных. При обнаружении в хозяйстве очага хламидиоза, необходимо срочно принимать изоляционные меры и начинать лечение.

Лечение хламидиоза

Лечит хламидиоз у животных традиционными группами антибиотиков малоэффективно. Наилучший эффект могут оказать только препараты из группы тетрациклиновых. Вместе с тем, даже при эффективном лечении, клинически здоровые животные, не имеющие симптоматики, в биоматериале при анализе можно обнаружить хламидии. Это означает возможность рецидивов. Поэтому, плюс к тетратциклиновому ряду препаратов, в комплексном лечении часто применяют специфические лечебные средства.

Молодняк КРС

Основной способ – лечение тетрациклином или окситетрациклином. Первые сутки после диагностики препараты вводятся дважды в день. Дозировка – 5000 ЕД на каждый кг массы. Затем следует однократное введение указанной дозы в течение девяти дней.

Окситетрациклин 200 LAОкситетрациклин 200 LA

Окситетрациклин 200 LA

Сыворотка реконвалесцентов – вводится инфицированным телятам в возрасте три дня и в десять дней. Доза – 0,7 мл на каждый кг массы. Увеличить терапевтический эффект от введения сыворотки можно добавлением дибиомицина. Доза – 10000 ЕД на каждый кг массы.

Для излечения телят, у которых обнаружена хламидиозная пневмония бронхов применяют аэрозольный метод. Лекарственные препараты впрыскиваются на слизистые. К ним добавляются проиммунные сыворотки и резистенты. Курс включает от 6 до 8 сеансов.

Больных телят лечат аэрозолямиБольных телят лечат аэрозолями

Больных телят лечат аэрозолями

Прокурка телят однохлористым йодом с алюминиемПрокурка телят однохлористым йодом с алюминием

Прокурка телят однохлористым йодом с алюминием

Стельные коровы

За месяц-полтора до отела стельным коровам, в целях профилактики появления мертворожденных телят и абортирования, колят дибиомицин подкожно. Инъекция представляет собой 10% взвесь препарата на тривитамине. Дозировка – 10000 ЕД на каждый кг массы. Десять суток спустя аналогичную инъекцию делают повторно.

ДибиомицинДибиомицин

Дибиомицин

Быки-производители

Если есть подозрения на хламидиоз у племенных стадных быков-производителей, им назначается курс антибиотических средств тетрациклинового ряда в той же дозировке, что и молодняку.

Лекарственные препараты, применяемые для лечения хламидиоза.

  1. Дибиомицин.
  2. Йодтриэтиленгликоль.
  3. Доксициклин. ДоксициклинДоксициклин

    Доксициклин

  4. Энрозол.
  5. Тилан.
  6. Ривакцилин.
  7. Фармазин.
  8. Эритромицин.
  9. Дитетрациклин.
  10. Энроксил. Энроксил 5% растворЭнроксил 5% раствор

    Энроксил 5% раствор

  11. Азитромицин.
  12. Энрофлоксацин.

Правила и меры

При обнаружении в любом животном хозяйстве носителей вируса и установке диагноза хламидиоз, заводчикам и фермерам, а также владельцам приусадебных хозяйств необходимо принять следующие меры, утвержденные на государственном уровне.

На хозяйство накладывается ограничение по ввозу и вывозу КРС, лошадей, свиней, коз, овец, птиц за пределы хозяйственной территории.

На хозяйство накладывается ограничение по ввозу и вывозу животных и птицНа хозяйство накладывается ограничение по ввозу и вывозу животных и птиц

На хозяйство накладывается ограничение по ввозу и вывозу животных и птиц

С территории запрещается вывоз корма, отходов, подстилки, фуража и любых предметов и материалов, которые имели соприкосновение с инфицированными животными.

Запрещается совместный выпас животных, даже без клинической симптоматики, если они содержатся на одной ферме с инфицированными хламидиозом, совместно с животными из других хозяйств.

Запрещается совместный выпас животныхЗапрещается совместный выпас животных

Запрещается совместный выпас животных

Запрещается кормление животных, у которых не диагностирована болезнь, сырых продуктов, оставшихся от кормления инфицированных животных.

На ферме и подворье вводится карантин, который предусматривает не допуск к животным лиц, не связанных с уходом за ними.

КарантинКарантин

Карантин

Запрещается вольная случка всех животных.

Ежедневно проводится клинический осмотр поголовья, и берутся лабораторные пробы биоматериала на анализ.

Проводится обязательное измерение температуры у животных из инфицированного стада.

Измерение температуры тела теленкаИзмерение температуры тела теленка

Измерение температуры тела теленка

Всех больных животных изолируют, держа отдельно друг от друга и от остального стада в течение тридцати дней, и применяя лечение тетрациклиновыми антибиотиками.

На крупных фермах, занимающихся реализацией мяса, запрещается его продажа в сыром виде, исключение – только вывоз на мясокомбинат для последующей переработки.

Продажа мяса под запретомПродажа мяса под запретом

Продажа мяса под запретом

В личных хозяйствах запрещено употреблять в пищу мясо вынужденно убитых животных из поголовья, зараженного хламидиозом.

Все хирургические операции, кроме неотложных и связанных с сохранением жизни животного, в инфицированном хозяйстве запрещены.

Дезинфекция

Непременной дезинфекции подлежат стойла, сараи, птичники, конюшни, фермы – все помещения, в которых содержится скот или птица для сельскохозяйственных нужд. Обычно дезинфекция является профилактической мерой, и проводится планово, согласно установленным санитарными службами срокам. Например, помещение для содержания КРС глобально дезинфицировать, с полной заменой подстилки, необходимо дважды в год. Птичники чистят и обеззараживают каждые четыре месяца.

Дезинфекция на фермеДезинфекция на ферме

Дезинфекция на ферме

Но если на ферме или в хозяйстве обнаружен хламидиоз, дезинфекция проводится по другим, форс-мажорным правилам.

Дезинфекция помещения при хламидиозе – пошаговая инструкция

Шаг первый – станки, стойла, кормушки

В помещении с больными животными стойла и кормушки с поилками обрабатываются одним из препаратов на выбор:

  • 2% раствором едкого натра;
  • 1% раствором глютарового формальдегида;
  • 5% раствором формалина;
  • 4% раствором феносмолина.
Шаг второй – обработка помещения

Проводится в присутствии больных животных. Можно применять:

  • 0,2% раствор надуксусной кислоты;
  • 1% раствор дезавита;
  • 1,5% раствор глютекса;
  • 1% раствор белонага;
  • 1,5% раствор витана;
  • 1% раствор финвируса.

Этими растворами обработка проводится способом протирки. Можно дезинфицировать помещение аэрозолями, но тогда необходимо хотя бы согнать животных в противоположную сторону помещения.

Сухая дезинфекция коровника препаратом IndesСухая дезинфекция коровника препаратом Indes

Сухая дезинфекция коровника препаратом Indes

Аэрозоли для дезинфекции:

  • 37% раствор формальдегида;
  • 3% раствор надуксусной кислоты;
  • 24% раствор глютарового альдегида;
  • 1% раствор дезавита;
  • 1,5% раствор йодеза.
Шаг третий – утилизация отходов и продуктов жизнедеятельности

Навоз, остатки кормов и подстилку от больных животных ежедневно убирают, складируют в изолированные бурты и подвергают биотермическому обеззараживанию в течение двенадцати месяцев.

Биотермический способ обеззараживания навозаБиотермический способ обеззараживания навоза

Биотермический способ обеззараживания навоза

Молоко инфицированных животных на протяжении всего лечения подвергается предварительному тридцатиминутному кипячению, затем уничтожению.

Шаг четвертый – утилизация павших животных

Остатки плода абортировавших самок, плаценту, а также трупы павших животных собирают, соблюдая меры предосторожности (надев спецодежду, перчатки, респираторы), складируют в непромокаемые мешки и ящики. Если необходимо, осуществляют забор патматериала для исследований. Затем содержимое уничтожают или обеззараживают.

Шаг пятый – обеззараживание инвентаря

Весь инвентарь, который является мобильным (не стационарные кормушки) – скребницы, щетки, ящики, ведра, лопаты, вилы, а также спецодежда персонала ежедневно на 4 часа погружаются в один из следующих растворов:

  • 1% раствор хлорамина;
  • 4% раствор формальдегида;
  • 2% раствор кальцинированной соды (кипятить 90 минут).

Когда ферму или хозяйство после вспышки хламидиоза можно считать «чистой»? По санитарным нормам это произойдет, если в течение трех последующих лет здесь не будет выявлено не одного очага инфекции.

Хламидиоз – серьезное заболевание, которое частично передается людям, и может привести не только к экономическим потерям, но и к человеческим жертвам.

Видео — Дезинфекция и мойка помещений

selo-exp.com

Хламидиоз крупного рогатого скота (chlamidiosis) / Инфекционные болезни сельскохозяйственных животных / Московский Ветеринарный WEB-Центр

Хламидиоз крупного рогатого скота (chlamidiosis) – контагиозная инфекционная болезнь, характеризующаяся у молодняка ринитами, бронхопневмониями, гастроэнтеритами, полиартритами, кератоконъюнктивитами, энцефаломиелитами, маститами и рождением нежизнеспособного молодняка. Хламидиозом болеет и человек.

Хламидиоз крупного рогатого скота регистрируется во всех странах мира, в том числе и в Республике Беларусь и наносит хозяйствам ощутимый экономический ущерб.

Этиология. Хламидии представлены родом Chlamidia с четырьмя очень близкими видами Chl.psittaci, Chl.pecorum, Chl.trachomatis и  Chl.pneumoniae. Они входят в группу облигатных внутриклеточных паразитов и занимают промежуточное положение между бактериями, риккетсиями и вирусами, содержат ДНК и РНК (чем существенно отличаются от истинных вирусов). Хламидии имеют шаровидную или овальную формы. Они могут существовать в виде ретикулярных телец (внутриклеточная форма), которые не  превышают в диаметре 1,2 мкм и имеют структуру типичных грамотрицательных бактерий, а также в виде промежуточных телец диаметром 0,3-0,4 мкм, то есть имеют размеры крупных вирусов.

Хламидии сравнительно устойчивы во внешней среде. Хорошо сохраняются при низких температурах, чувствительны  к ее повышению. В воде сохраняются до 17 дней, в лиофилизированном состоянии – до 3 лет, в непастеризованном молоке – 23 дня. Они легко инактивируются дезосредствами в обычных концентрациях (2 %-ный раствор натрия гидроокиси, 3 %-ный раствор фенола, 3-5-ный раствор формальдегида и др.). Хламидии чувствительны к антибиотикам тетрациклинового ряда (геомицин-ретард, окситетрациклин).

Эпизоотологические данные. В естественных условиях хламидиозом болеет крупный рогатый скот, овцы, козы, птица и человек. Из лабораторных животных к хламидиозу чувствительны белые мыши, крысы, морские свинки, кролики и обезьяны.

Источником возбудителя инфекции являются больные и переболевшие животные, которые в течение 8-12 месяцев могут являться хламидионосителями и выделяют возбудителя с истечением из глаз, носа, с фекалиями, абортплодами, околоплодными водами и оболочками, с мочой, молоком и спермой. Заражение животных происходит алиментарным, аэрогенным и половым путями.

Заболеваемость при респираторной форме составляет 70-80 %, летальность до 15-25 %. При кишечной – соответственно 30-70 % и 20-30 %, при генитальной форме заболеваемость достигает до 25-60 %. При энцефалитной форме летальность составляет – 100%.

Патогенез. Хламидии в организм проникают алиментарным, аэрогенным или половым путями. Обладая политропностью, возбудитель размножается в эпителиальных клетках слизистой оболочки желудка и кишечника, воздухоносных путей и легких, мочеполовых органов, в гепатоцитах, в эпителиальных клетках, конъюнктиве и синовиальной оболочке капсулы суставов. Особенно интенсивно хламидии размножаются в эпителиальных клетках хориона. Размножение хламидий в указанных органах приводит к развитию соответствующих симптомов.

Течение и симптомы болезни. У крупного рогатого скота хламидиоз протекает в кишечной, респираторной, генитальной, энцефалитной и конъюнктивальной формах. Возможно смешанное течение болезни.

Инкубационный период составляет от 3 до 20 дней. При кишечной форме повышается температура тела до 40-40,5 0С, наблюдается понос, угнетение, отказ от корма. Слизистая оболочка ротовой полости гиперемирована, иногда  на ней обнаруживаются эрозии и язвы.

Респираторная форма характеризуется лихорадкой. Температура тела повышается до 40-41 0С и удерживается 1-2 дня, затем снижается до нормы. Наблюдаются серозные истечения, которые на 3-4 день болезни становятся слизисто-гнойными. Появляется кашель. Слизистая оболочка носовой полости гиперемирована, отечна. Учащается пульс, дыхание, наблюдается конъюнктивит или незначительное припухание век.

Генитальная форма заболевания характеризуется абортами и задержанием последа. Развиваются метриты, эндометриты. Наблюдаются перегулы, а иногда и бесплодие животных.

При энцефалитной форме имеют место признаки поражения центральной нервной системы. Движения животных становятся некоординированными. Незадолго до гибели наблюдаются судорожные сокращения шейных и затылочных мышц, дрожание головы.

Для конъюнктивальной формы характерны слезотечение, конъюнктивит, кератит.

Патологоанатомические изменения. У абортированных плодов обнаруживают серозные отеки подкожной клетчатки, множественные точечные кровоизлияния в плевре, эпикарде, эндокарде, слизистой оболочке сычуга, в почках, в портальных лимфоузлах. В брюшной и грудной полостях обнаруживают геморрагический транссудат, печень в состоянии зернистой и жировой дистрофии. Имеет место катаральный абомазит и энтерит.

При вскрытии павших животных при респираторной форме хламидиоза слизистая оболочка носовой полости, гортани гиперемированы, отечна с кровоизлияниями, очаги уплотнения в легких, в бронхах слизистый или слизисто-гнойный экссудат, средостенные бронхиальные лимфоузлы увеличены в объеме, сочны на разрезе, с кровоизлияниями.

При энтеральной форме наблюдается острый катаральный гастроэнтерит, точечные кровоизлияния. В печени, почках, селезенке – дистрофия.

У молодняка, а иногда и у взрослых животных обнаруживают пролиферативно-фибринозные артриты с увеличением количества жидкости в них.

Диагностика. Диагноз на хламидиоз ставят на основании эпизоотологических данных, клинических признаков, патологоанатомических изменений, а также результатов лабораторных исследований.

От больных животных в лабораторию направляют пробы дефибринированной крови в объеме 3-5 мл в стерильных пробирках, смывы с носовой полости, конъюнктивы глаз и пробы фекалий.

От  павших  или вынужденно убитых животных берут кусочки внутренних органов (легких, средостенных и брыжеечных лимфоузлов, слизистой оболочки носовой полости, гортани, трахеи, селезенки, сычуга, тонкого отдела кишечника, твердой и мягкой мозговых оболочек, продолговатого мозга и кусочки синовиальной оболочки суставов).

При абортах берут кусочки плаценты, вагинальную слизь, абортировавших животных, паренхиматозные органы плодов и содержимое сычуга. От быков-производителей – пробы спермы, смывы с препуциального мешка, эякулят.

Отобранный материал замораживают и доставляют в лабораторию в термосе со льдом. Для серологических исследований отбирают и посылают парные пробы сыворотки крови (в первые дни болезни и повторно через 14-20 дней).

Лабораторным методом диагноз на хламидиоз считается установленным при:

- выделении возбудителя из исследуемого материала и его идентификации;

-  обнаружении возбудителя в исследуемом материале и получении положительных результатов исследования на хламидиоз сыворотки крови от этих животных;

- при нарастании титра антител в 2 и более раза при исследовании сыворотки крови абортировавших животных.

Дифференциальная диагностика. Респираторную и кишечную формы хламидиоза у крупного рогатого скота следует дифференцировать от инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, вирусной диареи, аденовирусной инфекции, рота- и коронавирусной инфекций, микоплазмоза, колибактериоза, сальмонеллеза, а хламидиозный энцефалит – от болезни Ауески, листериоза, бешенства и различных токсикозов.

Специфическая профилактика.Для специфической профилактики болезни в настоящее время применяют следующие вакцины:

- инактивированная эмульсин-вакцина против хламидиозного аборта овец; - инактивированная эмульсин-вакцина против хламидиоза крупного рогатого скота; - инактивированная культуральная эмульсин-вакцина против хламидиоза животных.

Лечение. В связи с тем, что хламидии внутриклеточные микроорганизмы, применение традиционных антибиотиков и сульфаниламидных препаратов малоэффективно. Для лечения больных животных и хламидионосителей применяют антибиотики тетрациклинового ряда.  Наиболее эффективным антибиотиком является геомицин-ретард, терамицин, которые применяются в дозе 1 мл на 10 кг живой массы двукратно с интервалом 3-4 дня.

Из специфических средств для лечения больных животных можно применять сыворотку реконвалесцентов.

Профилактика и меры борьбы.При установлении диагноза на хламидиоз территорию, на которой выявлено заболеваний (хозяйство, племпредприятие, ферму, базу, овчарню, свинарник), в установленном порядке объявляют неблагополучной по этой болезни и вводят ограничения.

По условиям ограничений запрещают: - ввод (ввоз) и вывод (вывоз) крупного рогатого скота, овец и свиней из неблагополучного пункта, за исключением случаев отправки поголовья на убой; - перегруппировку животных внутри неблагополучного хозяйства без разрешения ветеринарного специалиста; - вывоз сырья, сырых продуктов от убоя больных животных; - вольную случку, получение спермы от больных производителей, а также реализацию спермы, которая была заготовлена от них ранее.

В неблагополучных хозяйствах животных иммунизируют хламидиозными вакцинами в соответствии с наставлениями по их применению.

Животноводческие помещения, профилактории подвергают механической очистке и дезинфекции. Абортированные плоды, плодные оболочки, трупы утилизируют. Навоз, подстилку и т.п. обеззараживают биотермическим способом.

Молоко от клинически больных коров пастеризуют или кипятят и используют для кормления животных. Ограничения с неблагополучного пункта снимают через 30 дней после последнего случая выздоровления больных животных и проведения заключительных мероприятий.

webmvc.com

Вакцина культуральная инактивированная против хламидиоза крупного и мелкого рогатого скота

 

Изобретение относится к ветеринарной микробиологии и вирусологии. Задачей изобретения является создание специфической, высокоиммуногенной вакцины против хламидиоза крупного и мелкого рогатого скота, имеющей низкую реактогенность. Вакцина содержит фенол, в качестве антигена - штамм Chlamydia psittaci (var, bovis) ГНКИ “В-75” №18, выращенный на монослое первичной культуры клеток (ФЭК)-фибробластов эмбрионов кур с титром не ниже 10-7,0 ТЦД50/мл; в качестве адъюванта - поливинилпирролидон при их соотношении, мас.%: Chlamydia psittaci (var. bovis) ВГНКИ “В-75” №18 с титром не ниже 10-7 ТЦД50/мл 99,0-99,5; фенол 0,3-0,5, поливинилпирролидон 0,4-0,6. Вакцина высокоиммуногенна, имеет низкую реактогенность. 10 табл.

Изобретение относится к ветеринарной микробиологии и вирусологии, в частности к производству вакцин, применяемых для специфической профилактики и терапии сельскохозяйственных животных от заболевания хламидиозом. Вакцина содержит в качестве антигена цитопатогенный штамм Chlamydia psittaci (var. bovis) ВГНКИ "В-75" №18, выращенный на монослое первичной культуры клеток фибробластов эмбрионов кур (ФЭК) с титром не ниже 10-7 ТЦД50/мл. Вакцина также содержит инактиватор - фенол и адъювант - поливинилпирролидон. Вакцина специфична, высокоиммуногенна и имеет низкую реактивность.

Изобретение относится к ветеринарной микробиологии и вирусологии, в частности к производству вакцин, применяемых для специфической профилактики и терапии сельскохозяйственных животных от заболевания хламидиозом.Известна вакцина против энзоотического аборта овец инактивированная, изготовленная из зараженных хламидиями куриных эмбрионов (Franc et al. Am. j. Vet. Pec., Vol. 29, p. 1441, 1968). Недостатком данной вакцины являются ее высокая стоимость, ее изготовление требует больших затрат времени, высокое содержание баластных белков, снижающее ее иммуногенность и повышающее реактогенность. Эта вакцина не содержит специфического антигена и поэтому неиммуногенна для птиц. Данная вакцина выбрана нами в качестве прототипа.Наиболее близким по технической сущности является патент США №4386065, А 61 К 39/118, 1983. "Вакцина против энзоотического аборта овец", которая включает в себя смесь водной суспензии, инактивированных формалином хламидийных элементарных телец, полученных из организмов chlamydia SP в пределах от 2*106 до 109 ELD50/мл, размноженных в клеточной культуре и равного количества маслянного адъюванта, представляющего собой смесь светлого минерального масла и ланолина.Недостатком этой вакцины является то, что штамм хламидий как продуцент не обладает цитопатическим действием. Вследствие этого для контроля накопления хламидий необходимо ежедневно готовить мазки, производить их окраску и подсчет зараженных клеток, а при сборе сырья требуется инфицированный монослой отделить от ростовой поверхности с помощью трипсина с верстном. Для создания нужной концентрации хламидий в вакцине культуральную суспензию подвергают центрифугированию. К тому же один стационарный монослой используется как посевной материал только для пяти чистых монослоев или их эквивалентов. Все эти операции усложняют технологический процесс производства и снижают производительность при изготовлении вакцины, что делает ее дороже. К тому же вакцина профилактирует только энзоотические аборты хламидиозной природы у овец и не профилактирует хламидиоз у крупного и мелкого рогатого скота.СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯЗадачей данного изобретения является создание специфичной, высокоиммуногенной вакцины для профилактики хламидиоза крупного и мелкого рогатого скота, имеющей низкую реактогенность и получаемой более простым (в сравнении с прототипом) технологическим способом.Поставленная задача достигнута благодаря тому, что вакцина культуральная инактивированная против хламидиоза крупного и мелкого рогатого скота в качестве антигена содержит цитопатогенный штамм Chlamydia psittaci (var. bovis) ВГНКИ "В-75" №18, выращенный на монослое первичной культуры клеток фибробластов эмбрионов кур с титром не ниже 10-7 ТЦЦ50/мл, в качестве адъюванта - поливинилпирролидон, а также фенол при следующих процентных соотношениях:1. Суспензия клеток ФЭК (фибробластов эмбрионов кур), инфицированных хламидиями штамма Chlamydia psittaci (var. bovis) ВГНКИ "В-75" №18 с титром не ниже 10-7,0 ТЦД50/мл - 99-99,5.2. Фенол - 0,3-0,5.3. Поливинилпирролидон - 0,4-0,6.Существенным отличием данной вакцины от ее прототипа является то, что в качестве антигена берут штамм Chlamydia psittaci (var. bovis) ВГНКИ "В-75" №18, депонированный в коллекцию ВГНКИ ветпрепаратов. Выращивание его ведется на монослое первичной культуры ФЭК.Целью изобретения является получение штамма Chlamydia psittaci (var. bovis) ВГНКИ "В-75" №18, обладающего стабильными иммуногенными свойствами, незначительной реактогенностью и высоким цитопатическим действием. Вакцинация инактивированной вакциной, изготовленной из штамма Chlamydia psittaci (var. bovis) ВГНКИ "В-75" №18, стельных коров при внутримышечном двукратном введении в дозе 10 мл обеспечивает сохранность новорожденных телят на 93,3% против 43,6% у невакцинированных контрольных животных (2 табл.). Целью изобретения является получение штамма Chlamydia psittaci (var. bovis) ВГНКИ "В-75" №18, обладающего стабильными иммуногенными свойствами, незначительной реактогенностью и высоким цитопатическим действием.Штамм Chlamydia psittaci (var. bovis) ВГНКИ "В-75" №18 депонирован в коллекции Всероссийского государственного научно-исследовательского института контроля стандартизации и сертификации ветеринарных препаратов под номером 14.Штамм Chlamydia psittaci (var. bovis) ВГНКИ "В-75" №18 выделен в 1975 г. из абортированного плода коровы, адаптирован к монослою фибробластов эмбрионов кур (ФЭК). Штамм пассирован через организм теленка и прошел 319 пасскажей в монослое культуры ФЭК в условиях роллера, в результате чего изменились его первоначальные свойства: возросла способность накопления, выражающаяся в эмбриональных летальных дозах (ЭЛД50/03 мл) в указанной культуре, ускорился цикл развития цитоплазматических включений, в связи с чем появилась способность штамма оказывать высокое цитопатическое действие на монослой культуры (ФЭК), наряду с этим устойчиво повысилась иммуногенная активность и снизилась реактогенность.Штамм бактерий Chlamydia psittaci (var. bovis) ВГНКИ "В-75" №18 обладает следующими свойствами.МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ ПРИЗНАКИ. Элементарные зрелые частицы округлой формы, диаметром 180-200 нм, инициальные промежуточные формы - до 500-600 нм окрашиваются по методу Стемпа в розово-красный цвет, по Романовскому-Гимза в темно-голубой цвет.КУЛЬТУРАЛЬНЫЕ СВОЙСТВА. Культивируется в желточных оболочках 7-8-дневных куриных эмбрионов, в культуре фибробластов эмбрионов кур, в перевиваемой линии трахеи теленка при 37-37,5С; пассируется на белых мышах при внутрибрюшинном, назальном, интрацеребральном и подкожном заражении.АДАПТАЦИОННЫЕ СВОЙСТВА. Штамм - возбудитель хламидиоза коров, адаптируется к куриным эмбрионам, сохраняя патогенность для коров, а адаптируясь на культуре куриных фибробластов, повышает вирулентность и иммуногенность, при этом титр при титрации на 6-7-дневных куриных эмбрионах составляет 106,5-107,5 ЭЛД50/03 мл и сокращается время цикла развития.ПАТОГЕННЫЕ СВОЙСТВА. Штамм патогенен для морских свинок, вызывает у них аборты, рождение мертвых детенышей и гибель части зараженных животных, патогенен для белых мышей, вызывает заболевание и 100% гибель на 4-6 сутки при интрацеребральном введении.АНТИГЕННЫЕ СВОЙСТВА. В постановке перекрестной реакции связывания комплемента с гомологичными и гетерологичными антигенами и гипериммунными сыворотками установлено высокое антигенное родство к гомологичному антигену в тигре 1:40-1:80 (в реакции связывания комплемента (РСК) по 100% гемолизу). Антигенная близость к другим видам антигенов хламидий на 3-4 разведения отстоит дальше.ТАКСОНОМИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА. Согласно решению Юридической комиссии Международной Ассоциации Микробиологических обществ (МАМО) с 1 января 1980 г. определение рассматриваемых микроорганизмов, как Chlamydia, стало обязательным. В соответствии с "The Shorter Bergey's manual of determinative" (1980), хламидии отнесены к царству Procaryotae, отделу 2 прокариотов, индифферентных к свету, т.е. "скотобактериям", классу 2 Ricketsia. В класс Ricketsia включены порядки 1 Ricketsialesn 2 Chamydiales. Семейство Chlamydiaceae, роду Chlamydia, в котором описаны 4 вида: Chlamydia psittaci, Chlamydia trachomatis, Chlamydia pecorum, Chlamydia Pneumoniae. Все виды хламидий гетерогенны.ИММУНОГЕННЫЕ СВОЙСТВА. Пример 1. В опыте было завакцинировано 24 белые мыши инактивированной вакциной, изготовленной из штамма "SR". Вакцину вводят подкожно в дозе 0,2 мл.Подтитрованным контрольным штаммам "Р" в дозе 0,3 мл с титром 106,0 ЛД50/0,3 мл через 14 дней после первого введения вакцуины 12 опытных и 12 контрольных белых мышей заражают подкожно. Через 20 дней после введения вакцины также заражают 12 вакцинированных и 12 невакцинированных белых мышей. Результаты представлены в табл. 1.В табл. 1 показано, что штамм Chlamydia psittaci (var. bovis) ВГНКИ "В-75" №18 обладает иммуногенными свойствами, что позволяет использовать его для изготовления инактивированной вакцины против хламидиоза крупного и мелкого рогатого скота.Пример 2. Приготовленную инактивированную вакцину против хламидиоза крупного и мелкого рогатого скота из штамма Chlamydia psittaci (var. bovis) ВГНКИ "В-75" №18 испытывают в опытах на коровах.Вакцину вводят внутримышечно, двукратно с интервалом в 6 дней, в дозе 10 мл шести стельным клинически здоровым коровам. В качестве контроля используют 6 стельных невакцинированных коров. Вакцинированные и контрольные животные через 24 дня заражаются внутрибрюшинно суспензией хламидий, изолированных из паренхиматозных органов мертворожденного теленка, в титре 107 ЭЛД50 и в объеме 20 мл. Результаты иммуногенности вакцины представлены в табл. 2Таким образом, вакцина, изготовленная из штамма Chlamydia psittaci (var. bovis) ВГНКИ "В-75" №18, обеспечивает у вакцинированных коров сохранность поросят 93,3% против 43,6% у невакцинированных животных.Вторым существенным отличием является то, что в качестве адъюванта в вакцину вводят поливинилпиролидон (ПВП). Поливинилпиролидон - белый порошок, хорошо растворимый в воде, применяется как пролонгатор лекарственных средств. Ему присуще дезинтоксическое и противовоспалительное действие. В нашем препарате ПВП существенно повышает иммуногенность вакцины за счет того, что связывает (адсорбирует) антигенные белки.Сопоставительный анализ с прототипом позволяет сделать вывод, что заявляемый состав вакцины отличается от известного введением новых компонентов, а именно нового штамма Chlamydia psittaci (var. bovis) ВГНКИ "В-75" №18 с титром не менее 10-7,0 ТЦД50/мл и поливинилпирролидона в качестве адъюванта, а также соотношением компонентов.Таким образом, заявляемое техническое решение является новым. Введение в качестве адъюванта поливинилпирралидона существенно повышает иммуногенность вакцины по сравнению с вакциной, содержащей в качестве адъюванта вазелиновое масло. Для доказательства был проведен следующий опыт. Восьми морским свинкам вводилась культуральная инактивированная вакцина, изготовленная из штамма Chlamydia psittaci (var. bovis) ВГНКИ "В-75" №18, содержащая в качестве адъюванта вазелиновое масло, и восьми - вакцина, содержащая в качестве адъюванта поливинилпирролидон. Вакцина вводилась подкожно, трехкратно с интервалом 7 дней в дозе 0,2 мл. Иммуногенность вакцины оценивалась по результатам РСК (с сывороткой крови опытных морских свинок, взятой через 20 дней после последнего введения вакцины). Результаты представлены в табл. 3.Из табл. 3 следует, что иммуногенность вакцины с поливинилпирролидоном, используемым в качестве адъюванта, значительно выше, чем вакцины с вазелиновым маслом, использованным в качестве адъюванта.Таким образом, данный состав компонентов придает вакцине новые свойства, что позволяет сделать вывод о соответствии заявляемого технического решения критерию "изобретательский уровень".Пример 1. (Оптимальный вариант).Приготовление культуры клеток ФЭК, заражение ее хламидиями производили по общепринятой методике (Л.П.Дьяконов и др. Культивирование клеток и тканей животных. Часть 1, Ставрополь, 1986). Затем суспензию клеток ФЭК, инфицированных хламидиями штамма Chlamydia psittaci (var. bovis) ВГНКИ "В-75" №18, подвергали контрольным высевам на бактериальную и грибковую контаминацию. После этого чистую, не контаминированную, суспензию брали для определения титра ТЦД50/мл. Титр определяли по общепринятой методике и подсчитывали по методу Рида и Менча. В данном примере он равен 10-7,0 ТЦД50/мл.Затем смешивали компоненты в следующих соотношениях суспензии клеток ФЭК: инфицированных хламидиями 99,1%; фенол 0,35 мас.%; поливинилпирролидона 0,55 мас.%. Полученную смесь выдерживали в течение 96 часов при температуре +10С.Далее проводили выборочный контроль на иммуногенность. Для этого брали восемь морских свинок и вводили им вакцину по следующей схеме:1-е введение - подкожно 0,2 мл;2-е введение - подкожно через 7 суток 0,2 мл;3-е введение - подкожно через 14 суток 0,2 мл.Контролем служили четыре морских свинки, которым вакцина не вводилась. Через три недели после последнего введения вакцины определяли уровень накопления антител в сыворотке крови морских свинок в реакции связывания комплемента (РСК). Результат: четыре креста в разведении 1:5, четыре - в разведении 1:10; два - в разведении 1:20.Аналогично делали для титра 7,5; 7,75; 6,5; 6,0; 5,5 ТЦД50/мл. Сведения приведены в табл. 3.Таким оброзом, титр хламидийного штамма 7,0 обеспечивает высокое накопление антител в сыворотке крови морских свинок. Вакцина с качеством, приведенными в примерах 1, 4, 5, считается пригодной для применения на крупном и мелком рогатом скоте. В целях экономии штамного материала при получении титра выше 7,8 ТЦД50/мл суспензия разводится питательной средой ГЛА до титра, приведенного в примерах 1, 4, 5. Титр штамма ниже 6,5 ТЦД50/мл (пример 6) не обеспечивает необходимого накопления хламидий и не применяется для иммунизации морских свинок.В данном опыте отчетливо видна зависимость титра антител в сыворотке крови морских свинок от титра штамма Chlamydia psittaci (var. bovis) ВГНКИ "В-75" №18. Этот тест взят нами в качестве контроля иммуногенности вакцины при ее изготовлении.Пример 7. Приготовление культуры клеток ФЭК, заражение ее хламидиями, выращивание и накопление их производили по общепринятой методике. Затем суспензию клеток ФЭК, инфицированных хламидиями штамма Chlamydia psittaci (var. bovis) ВГНКИ В-75" №18, подвергали контрольным высевам для проверки на бактериальную и грибковую контаминацию и одновременно определяли усредненный титр ТЦД50/мл, который в данном примере равен 10-7,2 ТЦД50/мл.Чистую, неконтаминированную бактериальной и грибковой флорой клеточную хламидийную суспензию, объединяли в общую стерильную емкость и проводили инактивацию хламидий фенолом. Для этого в емкости смешивали компоненты в следующем соотношении: суспензии клеток ФЭК, инфицированных хламидиями, брали 99,2 мас.%, а инактиватора (фенола) добавляли 0,4 мас.%. Полученную смесь выдерживали в течение 98 часов при температуре +10С. Затем добавляли 0,4 мас.% адъюванта (поливинилпирролидона). Затем проводили выборочный контроль на полноту инактивации. Для этого 10 развивающимся куриным эмбрионам 7-ми суточной инкубации стерильно вводили в полость желточного мешка 0,3 мл вакцины и инкубировали их при 37,0-37,5 в течение 12 суток. В качестве контроля использовали 10 эмбрионов, которым вводили не инактивированную клеточную взвесь, содержащую штамм Chlamydia psittaci (var. bovis) ВГНКИ "В-75" №18. Условия инкубации такие же. Опытные эмбрионы оставались живыми в течение 12 суток. В мазках-отпечатках, изготовленных из оболочек желточного мешка, окрашенных по методу Романовского-Гимза, хламидий не обнаруживалось. Контрольные эмбрионы пали на 5-7 сутки. Этот результат соответствует установленному контролю вакцины на полноту инактивации.Аналогично делали для следующих количеств фенола: 0,3; 0,2; 0,5; 0,6 мас.%. Результаты приведены в табл. 4. Исходя из данных приведенных в табл. 4, видно, что количество инактиватора в интервале от 0,3 до 0,5 мас.% обеспечивает полноту инактивации хламидий в суспензии. Выше 0,5 мас.% фенол не добавляют с целью его экономии, т.к. качества вакцины это не улучшает. Концентрацию инактиватора ниже 0,3 мас.% не допускают, т.к. это не обеспечивает полной инактивации хламидий.Пример 12. Приготовление культуры ФЭК, заражение ее хламидиями, их выращивание и накопление производили по общепринятой методике. Затем суспензию клеток ФЭК, инфицированных хламидиями штамма Chlamydia psittaci (var. bovis) ВГНКИ "В-75" №18, подвергали контрольным высевам для проверки на бактериальную и грибковую контаминацию. Если тест оказывался отрицательным, то выборочно определяли титр ТЦД50/мл, который в этом примере равен 7,3 ТЦД50/мл. Затем смешивали компоненты в следующих соотношениях: суспензия клеток, инфицированных хламидиями, брали 99,3 мас.%, фенола - 0,3 мас.% (смесь выдерживали 10 часов при -6С), поливинилпирролидона вводили 0,4 мас.%. Процесс вели следующим образом: навеску адъюванта и инактивированную суспензию клеток, содержащую антиген штамма Chlamydia psittaci (var. bovis) ВГНКИ "В-75" №18, оставляли при комнатной температуре до его полного растворения - 24 часа. Затем проводили контроль на иммуногенность так же, как в примере 1. Результат следующий: в разведении 1:5 - ++++; в разведении 1:10 - ++++; в разведении 1:20 - ++. Аналогично делали для 0,3 мас.%. Результаты приведены в табл. 5.Как указано в табл. 5, содержание адъюванта в интервале значений от 0,4 до 0,6 мас.% обеспечивает иммуногенность вакцины в соответствии с установленным контролем. Количество адъюванта, превышающее 0,6 мас.%, не применяется с целью его экономии.Существенного улучшения качества вакцины при увеличении содержания в ней адъюванта свыше 0,6 мас.% не происходит. Содержание адъюванта ниже 0,4 мас.% не допускается, т.к. иммуногенность такой вакцины ниже установленного контроля вакцины и она не вызывает надежного иммунного ответа у коров и овец.Пример 17. Приготовление культуры клеток ФЭК, заражение ее хламидиями, их выращивание и накопление проводили по общепринятой методике. Затем суспензию клеток ФЭК, инфицированных штаммом Chlamydia psittaci (var. bovis) ВГНКИ "В-75" №18, подвергали контрольным высевам для проверки на бактериальную и грибковую контаминацию. При отрицательном результате теста определяли средний титр ТЦД50/мл, который в этом примере равен 7,4 ТЦД50/мл. Затем смешивали компоненты в следующих соотношениях: суспензии клеток ФЭК, инфицированных хламидиями, брали 99,25 мас.%; фенола - 0,35 мас.%; поливинилпирролидона - 0,4 мас.%. Далее проводили контроль на иммуногенность, как в примере 1. Результаты РСК следующие: в разведении 1:5 - ++++; в разведении 1:10 - ++++; в разведении 1:20 - +++. Аналогично делали для 99, 98, 99,5 и 99,7 мас.% суспензии клеток ФЭК, инфицированных штаммом Chlamydia psittaci (var. bovis) ВГНКИ "В-75" №18. Результат представлен в табл. 6.Как указано в табл. 6, содержание суспензии клеток ФЭК инфицированных хламидиями штамма Chlamydia (var. bovis) ВГНКИ "8-75" №18 в пределах от 99,0 до 99,5 мас.% обеспечивает иммуногенность вакцины в соответствии ее контролем. Количество культуральной клеточной суспензии выше 99,5 мас.% не применяется, т.к. это не улучшает качество вакцины, а увеличивает расход ее дорогостоящих компонентов. Использование культуральной клеточной суспензии в количестве ниже 99,0 мас.% также не допускается, т.к. вакцина при этом не обладает иммуногенностью, соответствующей установленному контролю вакцины, и не вызывает развития надежного иммунитета у крупного и мелкого рогатого скота.Лечебные свойства вакцины выявлены в опыте по определению иммунологических показателей крови у стельных коров, больных хламидиозом, до и после применения вакцины. Результаты представлены в табл. 7. В табл. 8 - контроль. Исследования иммунологических показателей крови контрольной группа не вакцинированных животных - благополучных по хламидиозу, представлены в табл. 8.Среди вакцинированных против хламидиоза коров через 1 месяц после обработки значительно снижается количество животных с иммунодефицитом. У не вакцинированных здоровых коров этот процесс выражен значительно слабее. У вакцинированных телят также улучшается иммунный статус, в отличие от невакцинированных (см. табл. 9 и 10).Таким образом, нами было доказано, что вакцина культуральная, инактивированная против хламидиоза крупного и мелкого рогатого скота, не только профилактирует заболевание, но и обладает лечебным действием и может применяться на больных хламидиозом животных.ТЕХНИЧЕСКИЙ РЕЗУЛЬТАТВакцина профилактирует и лечит хламидиоз у крупного и мелкого рогатого скота, проявляющийся у коров (овец) хроническим бесплодием (удлиненный сервис-период и аритмию полового цикла), выкидышами, абортами, рождением мертвого приплода, рождением клинически больного и латентно инфицированного молодняка, хроническими пневмониями.У телят (ягнят): энтериты, бурситы, бронхопневмонии, задержка роста и развития на фоне иммунодифицита.У быков (баранов) производителей: хронические пневмонии, артриты, бурситы, воспаления семенного канатика.Кроме того, вакцина сокращает загрязнение окружающей среды хламидиями, являющимися антропозоонозами, а также снижает затраты неблагополучного хозяйства на проведение малоэффективных лечебно-профилактических мероприятий с применением антибиотиков и других лечебных средств. Вакцина безвредна. В целом эффективность вакцины составляет 90-93%.Источники информации1. Л.П.Дьяконов, В.Ф.Глухов и др. Культивирование клеток и тканей животных. Учебно-методическое пособие (ч. 1). - Ставрополь, 1986.2. Описание к патенту США №4386065, МКИ А 61 К 39/1983.3. А.с. №645369, з.№2528058, МКИ С 12 К 5/00.4. А.с. №660390, з.№2528670, МКИ С 12 К 5/00.5. А.с. №661017, з.№2528672, МКИ С 12 К 5/00.6. А.с. №666203, з.№2528672, МКИ С 12 К 5/00.7. А.с. №666202, з.№2528669, МКИ С 12 К 5/00.8. А.с. №655160, з.№2528668, МКИ С 12 К 5/00.9. Описание к патенту №2125465.

Формула изобретения

Вакцина против хламидиоза крупного и мелкого рогатого скота культуральная инактивированная, содержащая антиген хламидий, адъювант и инактиватор, отличающаяся тем, что в качестве антигена она содержит суспензию клеток фибробластов эмбрионов кур (ФЭК), инфицированных хламидиями штамма Chlamydia psittaci (var.bovis) ВГНКИ “В-75” №18 с титром не ниже 10-7 ТЦД50/мл, инактиватор - фенол и адъювант - поливинилпирролидон при следующем соотношении ингредиентов, мас.%:Суспензия клеток ФЭК, инфицированныххламидиями штамма Chlamydia psittaci(var.bovis) ВГНКИ “В-75” №18, с титромне ниже 10-7 ТЦД50/мл 99,0-99,5Фенол 0,3-0,5Поливинилпирролидон 0,4-0,6

www.findpatent.ru

Инструкция по хламидиозу крс — Melnitsa-asb.ru

Хламидиозы крупного рогатого скота

Биопрепараты (Сыворотки и иммуноглобулины) Армавирская биофабрика ФГУП в ветеринарном интернет-магазине "Ветлек", в зоомагазине

Хламидиоз — контагиозное, хронически протекающее инфекционное заболевание сельскохозяйственных животных, птиц и человека.

1) Характеристика возбудителя: хламидии (Chlamydiales ordonov.) — большая группа патогенных организмов, отличающихся от других микроорганизмов циклом развития и механизмом адаптации к внутриклеточным условиям, их невозможно отнести к бактериям, т.к. это облигатный внутриклеточный организм, ни к вирусам, в виду того, что имеют оболочку и содержат в своем составе, как РНК, так и ДНК, подобно бактериям. Поэтому микроорганизм было предложено назвать Chlamydosoon, от греческого слова мантия — Chlamus, которая обнаруживается вокруг элементарных телец при окраски по Гимза. Хламидии не производят собственную АТФ. Зависят от энергии клетки. В результате подавления хламидиями синтеза клеточной ДНК энергия клетки превращается и переключается на синтез ДНК и протеина хламидий. Поражающие животных хламидии обладают тканевым тропизмом, но не обладают хозяиноспецифичностью, что способствует их распространению среди разных видов.

В пораженных клетках обнаруживают инфекционные элементарные частицы — округлые, диаметром 250-350 нм, которые образуются в конце внутриклеточного цикла развития хламидий. В начале инфекция в цитоплазме формируется матрикс, затем появляются крупные элементарные частицы, которые не имеют нуклеоида, их оболочка не сформирована; они не устойчивы во внешней среде, чувствительны in vitro к антибиотикам и неинфекционны. В конце инфекционного процесса появляются мелкие зрелые элементарные частицы, которые имеют ДНК — содержащий нуклеоид, плотную трехслойную оболочку; они устойчивы во внешней среде, нечувствительны in vitro к антибиотикам, обладают инфекционными свойствами. В зараженных клетках при световой микроскопии обнаруживают также цитоплазматические включения, они окрашиваются по Романовскому красно-фиолетовый цвет (незрелые) и в сине-фиолетовый (зрелые, содержащие элементарные частицы). Зрелые элементарные частицы окрашиваются акридином оранжевым в желто-зеленый и зеленый цвет, незрелые — в ярко-красный.

В первые 6 часов индукции зараженного хламидиями клеточного монослоя наблюдается адсорбция и фагоцитоз возбудителя клейкой по типу пиноцитоза. Спустя 12-18 часов, находясь в фагосоне (цитоплазматическом включении), элементарная частица разрыхляется и происходит накопление фибриллерно-гранулярного материала, из которого в последующем формируется вегетативные, а затем и зрелые элементарные частицы возбудителя, фагосомы значительно увеличиваются в размерах и содержат множество инициальных и элементарных частиц. В завершении репродукции происходит разрыв фагосомы, разрыв клетки, выход возбудителя в межклеточное пространство. Цикл завершается в течение 24-48 часов. Токсономический комитет выделил хламидии в порядок Chlamydiales, род Chlamydia, семейство Chlamydiaceae и в 1992 г. комиссией Международной ассоциации микробиологических обществ хламидии были классифицированы на 4 вида:

1. Chl. psittoci — возбудители орнитоза, пситтакоза птиц и человека.

2. Chl. trachomatis — возбудители трахомы, урогенитальных хламидиозов у человека.

3. Chl. Pneumoniae — вызывающие пневмонию у человека.

4. Chl. nicorum — вызывающие аборты, полиартриты, энцефалиты, кератоконъюктивиты, маститы животных.

а) чувствительность хламидии к действию физических, химических факторов — по отношению к различным физическим факторам и химическим агентам хламидии проявляют значительную устойчивость. Они хорошо сохраняются при низких и высоких температурах: в вводе — до 16 суток, в снегу — до 29, пастеризованном молоке — 29 суток. При комнатной температуре сохраняются 24-36 ч. при 2-14 о С — до 15 дней. Выделяясь с фекалиями животных, остаются жизнеспособными (и на перьях птиц) в течении нескольких месяцев. В лиофилизированном состоянии выживают более 3-х лет. Инактивируются при нагревании до 80 о С через 30 минут, до 70 о С — через 45 минут, под действием ультрафиолетовых лучей через 30 секунд. Быстро хламидии инактивируются под действием 0,5%-ого раствора фенола, 0,1%-ого раствора формалина, 2%-ого раствора хлорамина, 1%-ого раствора соляной кислоты, 0,2%-ого раствора марганцево-кислого калия, 2%-ого раствора едкого натра.

В отличие от вирусов хламидии обладают чувствите6льностью к антибиотикам и сульфамиламидам. В число эффективно действующих против хламидий антибиотиков включены: тилозин, тетрациклин, доксициклин, окситетрациклин, хлортетрациклин, дибиомицин, дитетрациклин, омандомицин, карбомицин, новобиоцин, левомецитин, рафампицилин и др.

К антибиотикам, не влияющим в испытанных дозах на репродукцию хламидий отнесены: стрептомицин, ристоцитин, неомицин, колимицин, нистатин, микостатин, ванокомицин, грамицидин. Такое свойство этих антибиотиков позволяет использовать их для борьбы с сопутствующей микрофлорой при выделении и культивировании хламидий.

Патоморфология, патогенез и иммуноморфология хламидиоза крупного рогатого скота

б) Антигенный состав хламидий — в настоящее время известны 3 типа основных антигенов хламидий: родоспецифический, группоспецифический и видоспецифический. Родоспецифический антиген, общий для Chl. trachomatis и Chl. psittoci является гликолипидом, в отличие от других грамотрицательных бактерий. Он термостабилен, выдерживает кипячение и автоклавирование (до 135 о С). Выявляется по средствам реакции связывания комплемента, непрямого связывания комплимента, агглютинации, гемогглютинации, преципитации в геле, иммунофецоресценции и внутрикожных тестов. Видоспецифический антиген представлен комплексом белков и имеет видовое отличие.

в) Токсичность — наличие токсинов в составе морфологических структур хламидий установили Raiks и Jonis (1944). Экспериментально доказали, что токсическое действие хламидий на животный организм характеризуется резкой дистрофией эндотелия сосудов, кровенаполнением мелких и крупных вен, тромбозом капилляров, массовыми некрозами паренхиматозных клеток печени, дистрофией эпителия извитых канальцев почек.

г) Химический состав хламидий — сложный. Оболочка примерно на 35% состоит из белков, при чем присутствует почти все белковые аминокислоты, кроме аргинина и гистидина. Фосфолипиды в виде лецитина и нейтральных жиров составляют 35-40% сухой массы хламидий. Углеводов в составе хламидий немного, богаты эти микроорганизмы гексозамином. Оболочка хламидий содержит мурановую кислоту. Хламидии обладают выраженной биохимической активностью, они содержат в своем составе ферменты, обеспечивающие синтез фолиевой кислоты.

Выделяют и культивируют хламидии на куриных эмбрионах, белых мышах, в культуре клеток.

2) Историческая справка:

История изучения хламидийных инфекций берет свое начало с конца ХIX века, когда была установлена взаимосвязь между своеобразно протекающей пневмонией человека и болезнями попугаев, завезенных из тропических стран. Роль попугаев в заражении и заболевании людей окончательно была установлена в 1892 году во время вспышки болезни у людей, имевших контакт с попугаями, завезенными из Буэнос-Айреса. Было предложено назвать это заболевание пситтакозом. Интерес к изучению пситтакоза возрос после его панацеи в 1929-1930 гг. В этот период выявили мелкие специфические базофильные тельца в тканях больных птиц. Была установлена связь между базофильными тельцами и болезнью. Haagin и Maurer выявили, что птицы, не принадлежащие к семейству попугаев, являются резервуаром инфекции и источником заражения человека возбудителем пситтакоза. Этот факт вызвал вторую волну научного интереса к этой группе микроорганизмов. Первое естественное заражение других млекопитающих, кроме человека, возбудителями пситтакоза было отмечено McNutt. Он показал, что эти возбудители вызывают энцефалит у крупного рогатого скота. За последние 4 десятилетия была определена этиологическая роль хламидий при многих спонтанных инфекциях разных видов домашних и диких животных. Выяснилось, что хламидии поражают человека и многие виды животных, вызывая разнообразные по патогенезу и клиническому течению болезни, например пневмонии, аборты, энтериты, менингоэнцефалиты, конъюнктивиты, полиартриты. При этом один и тот же возбудитель может вызывать как острое заболевание, так и латентную инфекцию с деятельным носительством.

В Советском Союзе болезнь впервые зарегистрировали: И.А. Курбанов, И.И. Терских, Х.З. Гаффаров, В.А. Николаев и др.

3) Источники инфекции, пути распространения: хламидии — возбудители с широким спектром хозяев — вызывают у человека, млекопитающих и птиц острые и хронические формы инфекций различной этиологии и локализации и бессимптомное носительство. Существует природный резервуар хламидиозов среди диких птиц (особенно голубей), грызунов и диких животных. По литературным данным инфицированность голубей составляет от 22-94%. Латентное течение хламидиоза у домашних животных и птиц затрудняет борьбу с ним. Хламидии не обладают «хозяиноспецифичностью», что обеспечивает восприимчивость к ним разных видов птиц, животных и человека. Для хламидиоза характерно деятельное, упорное течение. Животные, являясь латентными носителями, могут долгое время выделять возбудителя во внешнюю среду. Но при снижении резистентности организма болезнь проявляется клинически или переходит в деятельно рецидивирующую форму. Спонтанного самоизлечения при хламидиозе не происходит. Основным источником инфекции являются больные и переболевшие животные, выделяющие во внешнюю среду возбудителя при слезотечении, кашле, мочой и калом, маточными истечениями, молозивом, молоком, контаминированными хламидиями эякулятом, и больных и латентно инфицированных производителей. Основной путь передачи хламидиозной инфекции в стадии — генитальной.

Хламидийный аборт КРС.

Синонимы: энзоотический аборт коров, эпизоотический аборт КРС, вирусный аборт коров неориккетсиозный аборт КРС — инфекционная болезнь, протекающая чаще хронически, клинически она характеризуется:

— у коров — хроническим бесплодием (удлинением сервис-периода и аритмией полового цикла), выкидышами, абортами, рождение мертвых, больных и латентно инфицированных телят;

— у молодняка раннего возраста — энтеритами, энцефалитами, артритами, бурситами, кератоконъюктивитами, бронхопневмониями, задержкой роста и развития на фоне иммунодефицита.

— у быков-производителей — артритами, бурситами, хроническими пневмониями, воспалением семенного канатика, может протекать бессимптомно. Во всех случаях хламидиоз у производителей сопровождается обсеменением эякулята хламидиями.

Инструкция По Применению Формолвакцины Против Пастереллеза Крупного Рогатого Скота Полужидкая

Эпизоотология: в выраженных хламидиями стадах наблюдается высокий процент абортов (10-40%) и преждевременных отелов или рождение слабых телят с различными патологическими изменениями. Установлено, что после аборта животные становятся иммунными и, если не было органических изменений в половых органах, способны воспроизводить полноценное потомство. Однако удои коров могут сильно снизиться. Процент абортов в неблагополучных стадах может доходить до 70, особенно среди первотелок и вновь введенных в неблагополучное стадо коров. Заболевание носит стационарный характер. Наибольшее число больных животных регистрируют зимой и летом.

Патогенез: у естественно инфицированных взрослых животных инфекция протекает в латентной форме, и она развивается с наступлением беременности. На определенной стадии беременности возбудитель локализуется и размножается в плацентарной ткани, вызывая плацентит и некрозы. Одновременно инфицируется и плод. Хламидии размножаются в паренхиматозных органах плода, вызывают отек подкожной соединительной ткани и в результате токсического действия могут вызвать его гибель.

Симптомы: заболевание характеризуется абортами на 7-8 месяце беременности, но бывают и на 4 месяце. Заболевание начинается внезапно, и коровы перед абортом не проявляют особых клинических признаков, повышается лишь температура тела до 40,5 о С. Иногда отмечают прогрессивное истощение животных. У значительной части абортировавших животных отделение последа задерживается, развиваются метриты, вагиниты и, наконец, может наступить бесплодие. Хламидийный аборт может протекать совместно с бактериальными или паразитарными болезнями. В этих случаях возможны явления общей септицемии и гибель ослабленных животных. Хламидиозная генитальная инфекция быков изучена недостаточно. Имеющиеся сообщения указывали, что заражение чаще происходит в молодом возрасте, носительство возбудителя сохраняется длительно.

Патологоанатомические изменения: они не являются патогномичными и обнаруживаются значительные изменения в плодных оболочках, на зародышевых долях хориона интенсивные кровенаполнения сосудов и обширные кровоизлияния; у основной массы котиледонов потеряна структура, цвет их изменен от грязно-красного до коричневого. При вскрытии плодов и трупов телят в грудной и брюшной полостях обнаруживают наличие соломенно-желтого экссудата с нитями фибрина. У новорожденных телят отек подкожной соединительной ткани подгрудка и брюшной стенки. Мозговые оболочки отечны, сосуды инъецированы, встречаются участки кровоизлияний. На перикарде фибринозные наложения. Сердечная мышца дряблая с точечными кровоизлияниями. В легких очаги катарального воспаления. Печень плотная, глинистого цвета с участками некроза.

Иммунитет — механизм иммунитета при хламидиозах еще полностью не раскрыт. Как и на любую инфекцию, микроорганизм отвечает регуляцией клеточного и гуморального иммунитета, однако есть особенности:

— постинфекционный иммунитет не вырабатывается;

— если заражение происходит в эмбриональном периоде, то после рождения у телят теряется способность в выработке к хламидиям антител так же, как и на собственный блок.

Эффективность клеточного иммунитета при хламидиозной инфекции гораздо выше, чем гуморального. Т-клетки ответственны за иммунитет и могут действовать путем:

— активации макрофага

— продуцировании интерферона и ингибировании хламидийной репликации

— прямой цитоксичности против инфицированных клеток

При длительном течении хламидиозной инфекции происходит нарушение иммунногенной активности микроорганизма, что выражается резким снижением количества Т-лимфоцитов, В-лимфоцитов, а также нарушением трансформирования Т-лимфоцитов в бласты. Таким образом, такие расстройства в иммунной системе приводят к развитию синдрома иммунодефицита.

Постановка диагноза на хламидиоз представляет определенную трудность в связи с многообразием форм проявления болезни и отсутствия патогномомичных, свойственных только для хламидиоза признаков. Нередки случаи, когда хламидиоз не диагностируется вообще или проходит под другими диагнозами. Диагноз хламидиоз ставится на основании анализа клинических, патологоанатомических, эпизоотических, вирусологических и серологических исследований.

Вакцина ПЛАХ (инактивированная концентрированная против парвовирусной болезни, лептоспироза, болезни Ауески и хламидиоза свиней)

I Клиническая и патологоанатомическая диагностика затруднительна, так как нет признаков свойственных только хламидиозу.

II Эпизоотический диагноз — прежде всего обращает внимание на нарушения воспроизводительной функции коров, нетелей (аритмия половых циклов, удлинение сервис-периода, хроническое бесплодие), затем определяется влияние сезонных факторов на обострение течения болезни, особенно в сезон массовых отелов и восприимчивость всех половозрастных групп скота.

III Цитологические исследования — проверяют отпечатки клинического и патологического материала. Применяется несколько видов окраски:

1) окраска по Гомановскому

2) метод окраски раствором Люголя — позволяет выявить гликогеновый матрикс развивающихся включений, окрашивающихся йодом в темно-коричневый цвет

3) окраска методом Маккиавелло

IV Серологические исследования — применяется метод РСК с групповым хламидиозным агентом. Парные пробы сывороток, взятые во время аборта и через 3 недели после него, как правило, показывают значительное повышение титров антител. Титры антител к группоспецифическому антигену у абортировавших коров достигают 1:64 — 1:128.

V Для окончательной постановки диагноза необходимо выделить возбудителя на 6-7 суточных куриных эмбрионах или белых мышах.

Источник: http://mcx-consult.ru/hlamidiozy_krupnogo_rogatogo_skota

Вакцина ОКЗ

Общие сведения:

1. Вакцина ассоциированная инактивированная против колибактериоза, сальмонеллеза, клебсиеллеза и протейной инфекции молодняка сельскохозяйственных животных и пушных зверей (Вакцина ОКЗ).

Инструкция По Применению Формолвакцины Против Пастереллеза Крупного Рогатого Скота Полужидкая

2. Вакцина изготовлена из инактивированных культур производственных штаммов энтеробактерий, возбудителей кишечных инфекций молодняка животных (E.coli 09:К99, E.coli 0138:К88, Salmonella dublin, Salmonella enteritidis, Salmonella typhimurium, Klebsiella pneumoniae, Proteus vulgaris, Proteus mirabilis ).

Внутрь каждой коробки вкладывают инструкцию по применению вакцины.

6. Вакцину с нарушением целостности флакона, отсутствием этикетки, изменением цвета надосадочной жидкости, наличием в ней посторонней примеси (плесени, неразбивающихся хлопьев, комочков), а также неиспользованную в день вскрытия флакона выбраковывают и обезвреживают кипячением в течение 15 мин.

Вакцину транспортируют всеми видами транспорта при температуре от 2-15 С. Допускается транспортировка при температуре до 25 С в течение 10-15 дней.

9. Вакцину применяют для иммунизации животных в пунктах, неблагополучных по острым кишечным заболеваниям. Вакцинируют только клинически здоровых животных.

10. При проведении вакцинации соблюдают общепринятые правила асептики и антисептики. Шприцы и иглы стерилизуют кипячением в течение 10-15 минут. Перед применением флаконы с вакциной тщательно встряхивают

Источник: http://www.vetlek.ru/directions/?id=834

Хламидиоз Крс Инструкция

А. Баранова Е. А. Васильева Ю. Б. Текст научной работы размещён без изображений и формул.

ВАКЦИНА ПРОТИВ ХЛАМИДИОЗА ЖИВОТНЫХ «ХЛАМИДИОВАК». целью в неблагополучных и угрожаемых по хламидиозу крупного рогатого скота, овец, коз, свиней хозяйствах. Скачать подробную инструкцию (2274)&nbsp. Хламидиоз крупного рогатого скота (лат. — CrJamydophila abortus; англ. — Chlamidiosis of cattle; хламидийный, или энзоотический, аборт коров)&nbsp.

Полная версия научной работы доступна в формате PDF. Хламидиозы сельскохозяйственных животных относятся к группе заболеваний зооантропонозов и представляют потенциальную угрозу здоровью человека из- за возможности заболевания людей в результате контакта с зараженными животными и птицами. Роль хламидий, как этиологического фактора при многих спонтанных инфекциях разных видов животных и человека, была определена сравнительно недавно, в середине XX века. Поэтому болезнь, вызываемая данными микроорганизмами, еще недостаточно изучена как у человека, так и у сельскохозяйственных и домашних животных.

Хламидии широко распространены по всему миру, в том числе в Российской Федерации. Доказан путь передачи инфекции от птиц к животным и человеку, с последующей передачей инфекции от человека к человеку. В связи с этим, наряду с проблемой зоонозного хламидиоза и эпидемиологического надзора, который требует постоянного совершенствования, возникает новая глобальная проблема зооантропонозных хламидиозов, все более приобретающих социально- экономическую и демографическую значимость. Проводятся исследования по изучению взаимоотношений хламидий с другими микроорганизмами при различных смешанных инфекциях.

До настоящего времени отсутствуют сведения о интенсивности эпизоотического процесса при хламидиозе крупного рогатого скота. Совершенно не изучены клинические признаки и патологоанатомические изменения при урогинетальном хламидиозе и хламидиозном артрите у крупного рогатого скота в Ульяновской области. Неотложного решения требуют вопросы общих и специфических мер борьбы с этой болезнью. Согласно ветеринарной статистике хламидиоз крупного рогатого скота по Ульяновской области регистрируется в виде единичных случаев. По нашему мнению, Это связано со слабой изученностью вопросов этиологии, эпизоотологических особенностей, клинического проявления, патологоанатомических изменений при этом заболевании и отсутствием достоверных методов диагностики. В 2. 01. 4 году в ООО «Калатея» Барышского района установлен диагноз — хламидиоз крупного рогатого скота. Диагноз был поставлен в аккредитованной ветеринарной лаборатории ОГБУ «Симбирский центр ветеринарной медицины».

Набор препаратов для диагностики хламидиозов животных в реакции непрямой гемагглютинации (РНГА)»,полученный из эритроцитарного корпускулярного хламидийного антигена на основе возбудителя хламидиозного конъюнктивита крупного рогатого скота (штамм «СК–8. РС- 8. 5» и «ЛС- 8. Мы изучили схему лечения хламидиоза в хозяйстве СХПК им.

Калинина Чувашской Республике. Авторами для лечения крупного рогатого скота при хламидийной инфекции в были сформированы 2 группы коров- аналогов (опытная и контрольная) по 6 животных в каждой.

вакцина хипробовис 4 инструкция - fond-evo.ru

Коров опытной группы лечили тетрациклином пролонгированного действия, который назначался в дозе 1. Коровам контрольной группы назначался препарат аналог — тетрациклин гидрохлорид в дозе 1.

Таким образом, анализ источников информации показали,что хламидиоз характеризуется скрытным течением и малосимптомностью как у животных, так и у человека, тем самым обуславливает длительное бесплодие и большие экономические потери. Мы провели расчет экономического ущерба на примере животноводческого хозяйства ООО «Калатея» на 3. Потери составили 5.

Мы считаем, что в связи с открытием нового вида возбудителя, усовершенствованием диагностических, лечебно- профилактических мер и средств необходима разработка новой инструкции по предупреждению и ликвидации хламидиоза крупного рогатого скота. Наши предложения. Необходимо постоянное систематическое исследование биоматериала животных на наличие инфекционных болезней,в т. ПЦР, ИФА, РНГА. 2. Искусственное осеменение животных проводить только с использованием одноразовых перчаток. Заболевших животных обязательно основательно лечить, с использованием тетрациклина пролонгировающего действия.

Запрещать убой больных или подозрительных по заболеванию животных; если убой необходим, то вылечивать животных перед убоем. Для внутримышечного, подкожного, внутривенного и других инъекций использовать для каждого животного отдельные стерильные иглы, которые после использования подлежат обязательной дезинфекции. Кровь от животных получать с помощью одноразовых ваккумных систем ,для предотвращения попадания крови животных на окружающие предметы.

Использовать качественные корма и воду, обеспечивать сбалансированность рационов для поддержания иммунитета животных на необходимом уровне. Для лечения, вакцинации и дезинфекции использовать современные препараты и методики: полиоксидоний, джозамицин, азитромицин. Разработать и внедрить в хозяйства Ульяновской области «Программу по профилактике и ликвидации хламидиоза крупного рогатого скота». Своевременно и качественно проводить информационную работу среди населения и обслуживающего животных персонала. Подводя итог вышеизложенному, мы хотели бы сказать что очень важно контролировать развитие и распространение хламидиоза среди животных, поскольку это неприглядное на первый взгляд заболевание имеет колоссальное значение для всего человечества. Библиографический список: 1.

Хламидиоз: учебник / И. Л. Обухов, Д. А. Васильев, 2. С. 1- 2. 0. 2. Справочник ветеринарного врача/ А. Ф. Кузнецов. — Москва: «Лань», 2.

Инструкция По Борьбе С Хламидиозом Крс

Хламидиоз крупного рогатого скота (chlamidiosis). Хламидиоз крупного рогатого скота (chlamidiosis) – контагиозная инфекционная болезнь, характеризующаяся у молодняка ринитами, бронхопневмониями, гастроэнтеритами, полиартритами, кератоконъюнктивитами, энцефаломиелитами, маститами и рождением нежизнеспособного молодняка. Хламидиозом болеет и человек. Хламидиоз крупного рогатого скота регистрируется во всех странах мира, в том числе и в Республике Беларусь и наносит хозяйствам ощутимый экономический ущерб.

Согласно ветеринарной статистике хламидиоз крупного рогатого скота по новой инструкции по предупреждению и ликвидации хламидиоза крупного.

Этиология. Хламидии представлены родом Chlamidia с четырьмя очень близкими видами Chl. psittaci, Chl. pecorum, Chl. trachomatis и Chl.

pneumoniae. Они входят в группу облигатных внутриклеточных паразитов и занимают промежуточное положение между бактериями, риккетсиями и вирусами, содержат ДНК и РНК (чем существенно отличаются от истинных вирусов). Хламидии имеют шаровидную или овальную формы. Они могут существовать в виде ретикулярных телец (внутриклеточная форма), которые не превышают в диаметре 1,2 мкм и имеют структуру типичных грамотрицательных бактерий, а также в виде промежуточных телец диаметром 0,3-0,4 мкм, то есть имеют размеры крупных вирусов.

Хламидии сравнительно устойчивы во внешней среде. Хорошо сохраняются при низких температурах, чувствительны к ее повышению.

В воде сохраняются до 17 дней, в лиофилизированном состоянии – до 3 лет, в непастеризованном молоке – 23 дня. Они легко инактивируются дезосредствами в обычных концентрациях (2 %-ный раствор натрия гидроокиси, 3 %-ный раствор фенола, 3-5-ный раствор формальдегида и др. Хламидии чувствительны к антибиотикам тетрациклинового ряда (геомицин-ретард, окситетрациклин ). Эпизоотологические данные.

Вакцина ЛТФ-130 для профилактики и терапии трихофитоза крупного рогатого скота, уп. 10 фл. по 10 доз. Биопрепараты (Вакцины) в в

В естественных условиях хламидиозом болеет крупный рогатый скот, овцы, козы, птица и человек. Из лабораторных животных к хламидиозу чувствительны белые мыши, крысы, морские свинки, кролики и обезьяны. Источником возбудителя инфекции являются больные и переболевшие животные, которые в течение 8-12 месяцев могут являться хламидионосителями и выделяют возбудителя с истечением из глаз, носа, с фекалиями, абортплодами, околоплодными водами и оболочками, с мочой, молоком и спермой. Заражение животных происходит алиментарным, аэрогенным и половым путями. Заболеваемость при респираторной форме составляет 70-80 %, летальность до 15-25 %. При кишечной – соответственно 30-70 % и 20-30 %, при генитальной форме заболеваемость достигает до 25-60 %. При энцефалитной форме летальность составляет – 100%.

  1. Временная инструкция о мероприятиях по предупреждению и ликвидации. Митрофанов П.М. Меры борьбы с хламидиозом крупного рогатого скота.
  2. Борьбы и профилактики при микст-инфекциях крупного рогатого скота, крупного рогатого скота в Омской области являются хламидиоз (82-84%).
  3. Хламидии как этиологический фактор спонтанных абортов у коров впервые установили особенности хламидиоза крупного рогатого скота, но за эти годы им не удалось. Борьбу с хламидийной инфекцией следует проводить комплексным Следует срочно пересмотреть существующие инструкции по.
  4. Хламидиоз крупного рогатого скота сейчас широко распространен, и, несмотря на это, методам диагностики, профилактики и борьбы с.
  5. Подробное изучение этого заболевания у крупного рогатого скота в СССР провел П.П. Вишневский (1932). У овец паратуберкулез изучали.

Патогенез. Хламидии в организм проникают алиментарным, аэрогенным или половым путями. Обладая политропностью, возбудитель размножается в эпителиальных клетках слизистой оболочки желудка и кишечника, воздухоносных путей и легких, мочеполовых органов, в гепатоцитах, в эпителиальных клетках, конъюнктиве и синовиальной оболочке капсулы суставов. Особенно интенсивно хламидии размножаются в эпителиальных клетках хориона.

Размножение хламидий в указанных органах приводит к развитию соответствующих симптомов. Течение и симптомы болезни. У крупного рогатого скота хламидиоз протекает в кишечной, респираторной, генитальной, энцефалитной и конъюнктивальной формах. Возможно смешанное течение болезни. Инкубационный период составляет от 3 до 20 дней. При кишечной форме повышается температура тела до 40-40,5 0С, наблюдается понос, угнетение, отказ от корма. Слизистая оболочка ротовой полости гиперемирована, иногда на ней обнаруживаются эрозии и язвы.

Респираторная форма характеризуется лихорадкой. Температура тела повышается до 40-41 0С и удерживается 1-2 дня, затем снижается до нормы. Наблюдаются серозные истечения, которые на 3-4 день болезни становятся слизисто-гнойными. Появляется кашель. Слизистая оболочка носовой полости гиперемирована, отечна. Учащается пульс, дыхание, наблюдается конъюнктивит или незначительное припухание век. Генитальная форма заболевания характеризуется абортами и задержанием последа.

Развиваются метриты, эндометриты. Наблюдаются перегулы, а иногда и бесплодие животных. При энцефалитной форме имеют место признаки поражения центральной нервной системы. Движения животных становятся некоординированными. Незадолго до гибели наблюдаются судорожные сокращения шейных и затылочных мышц, дрожание головы. Для конъюнктивальной формы характерны слезотечение, конъюнктивит, кератит. Патологоанатомические изменения.

У абортированных плодов обнаруживают серозные отеки подкожной клетчатки, множественные точечные кровоизлияния в плевре, эпикарде, эндокарде, слизистой оболочке сычуга, в почках, в портальных лимфоузлах. В брюшной и грудной полостях обнаруживают геморрагический транссудат, печень в состоянии зернистой и жировой дистрофии. Имеет место катаральный абомазит и энтерит. При вскрытии павших животных при респираторной форме хламидиоза слизистая оболочка носовой полости, гортани гиперемированы, отечна с кровоизлияниями, очаги уплотнения в легких, в бронхах слизистый или слизисто-гнойный экссудат, средостенные бронхиальные лимфоузлы увеличены в объеме, сочны на разрезе, с кровоизлияниями. При энтеральной форме наблюдается острый катаральный гастроэнтерит, точечные кровоизлияния.

В печени, почках, селезенке – дистрофия. У молодняка, а иногда и у взрослых животных обнаруживают пролиферативно-фибринозные артриты с увеличением количества жидкости в них.

Диагностика. Диагноз на хламидиоз ставят на основании эпизоотологических данных, клинических признаков, патологоанатомических изменений, а также результатов лабораторных исследований. От больных животных в лабораторию направляют пробы дефибринированной крови в объеме 3-5 мл в стерильных пробирках, смывы с носовой полости, конъюнктивы глаз и пробы фекалий. От павших или вынужденно убитых животных берут кусочки внутренних органов (легких, средостенных и брыжеечных лимфоузлов, слизистой оболочки носовой полости, гортани, трахеи, селезенки, сычуга, тонкого отдела кишечника, твердой и мягкой мозговых оболочек, продолговатого мозга и кусочки синовиальной оболочки суставов). При абортах берут кусочки плаценты, вагинальную слизь, абортировавших животных, паренхиматозные органы плодов и содержимое сычуга. От быков-производителей – пробы спермы, смывы с препуциального мешка, эякулят.

Отобранный материал замораживают и доставляют в лабораторию в термосе со льдом. Для серологических исследований отбирают и посылают парные пробы сыворотки крови (в первые дни болезни и повторно через 14-20 дней). Лабораторным методом диагноз на хламидиоз считается установленным при. — выделении возбудителя из исследуемого материала и его идентификации;.

— обнаружении возбудителя в исследуемом материале и получении положительных результатов исследования на хламидиоз сыворотки крови от этих животных;. — при нарастании титра антител в 2 и более раза при исследовании сыворотки крови абортировавших животных. Дифференциальная диагностика. Респираторную и кишечную формы хламидиоза у крупного рогатого скота следует дифференцировать от инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, вирусной диареи, аденовирусной инфекции, рота- и коронавирусной инфекций, микоплазмоза, колибактериоза, сальмонеллеза, а хламидиозный энцефалит – от болезни Ауески, листериоза, бешенства и различных токсикозов.

Специфическая профилактика. Для специфической профилактики болезни в настоящее время применяют следующие вакцины. — инактивированная эмульсин-вакцина против хламидиозного аборта овец; — инактивированная эмульсин-вакцина против хламидиоза крупного рогатого скота; — инактивированная культуральная эмульсин-вакцина против хламидиоза животных. Лечение. В связи с тем, что хламидии внутриклеточные микроорганизмы, применение традиционных антибиотиков и сульфаниламидных препаратов малоэффективно.

Для лечения больных животных и хламидионосителей применяют антибиотики тетрациклинового ряда. Наиболее эффективным антибиотиком является геомицин-ретард, терамицин, которые применяются в дозе 1 мл на 10 кг живой массы двукратно с интервалом 3-4 дня.

Из специфических средств для лечения больных животных можно применять сыворотку реконвалесцентов. Профилактика и меры борьбы. При установлении диагноза на хламидиоз территорию, на которой выявлено заболеваний (хозяйство, племпредприятие, ферму, базу, овчарню, свинарник), в установленном порядке объявляют неблагополучной по этой болезни и вводят ограничения. По условиям ограничений запрещают: — ввод (ввоз) и вывод (вывоз) крупного рогатого скота, овец и свиней из неблагополучного пункта, за исключением случаев отправки поголовья на убой; — перегруппировку животных внутри неблагополучного хозяйства без разрешения ветеринарного специалиста; — вывоз сырья, сырых продуктов от убоя больных животных; — вольную случку, получение спермы от больных производителей, а также реализацию спермы, которая была заготовлена от них ранее.

В неблагополучных хозяйствах животных иммунизируют хламидиозными вакцинами в соответствии с наставлениями по их применению. Животноводческие помещения, профилактории подвергают механической очистке и дезинфекции. Абортированные плоды, плодные оболочки, трупы утилизируют. Навоз, подстилку и т.

обеззараживают биотермическим способом. Молоко от клинически больных коров пастеризуют или кипятят и используют для кормления животных.

Ограничения с неблагополучного пункта снимают через 30 дней после последнего случая выздоровления больных животных и проведения заключительных мероприятий.

Источник: http://guildsoirq.weebly.com/blog/instrukciya-po-borjbe-s-hlamidiozom-krs

ВАКЦИНА ОКЗ против колибактериоза, сальмонеллеза, клебсиеллеза и протейной инфекции молодняка сельскохозяйственных животных и пушных зверей

3. Вакцина ОКЗ представляет собой гомогенную взвесь белого цвета с серовато-желтоватым оттенком и обильным рыхлым осадком, образующимся на дне флакона при хранении и легко разбивающимся при встряхивании в гомогенную взвесь.

4. Вакцину расфасовывают по 50 см 3. 100 см 3 или 200 см 3 в стерильные стеклянные флаконы соответствующей вместимостью, которые плотно укупоривают резиновыми пробками и обкатывают алюминиевыми колпачками.

На каждом флаконе должна быть этикетка с указанием предприятия-изготовителя, его товарного знака, наименования биопрепарата, количества его во флаконе (мл), номера серии, номера контроля, даты изготовления и срока годности, способа применения, условий хранения, обозначения ТУ.

Флаконы с вакциной укладывают в коробку, на которой должна быть маркировка с указанием: наименование и товарный знак предприятия-изготовителя, его адрес, номер факса и телефона, наименование препарата, количество флаконов в коробке, номер серии, номер контроля, дата изготовления (месяц, год), срок годности, условия хранения, обозначения ТУ и надпись «Для животных».

5. Вакцину хранят в сухом, защищенном от света месте при температуре от 2-8 С. Срок годности вакцины 12 месяцев с даты изготовления. Вакцина по истечении срока годности к применению не подлежит.

Биологические свойства:

7. Действующим началом вакцины являются антигенные комплексы эшерихий, сальмонелл, клебсиелл, протеев, которые вызывают выработку у иммунизированных животных специфических антител.

8. Иммунитет у животных развивается через 2 недели и сохраняется в течение 6 месяцев. Вакцина безвредна и ареактогенна

Порядок применения:

Сроки и доза иммунизации:

ХЛАМИДИОЗ – ОПАСНЫЙ НЕВИДИМКА — VII Студенческий научный форум. Романова Т. А. Романова А. А. Кутенкова И. Ю. Юсупова Р. З. Белая Ю. В. Тутарова Е.

Синонимы: энзоотический аборт коров, эпизоотический аборт КРС, вирусный аборт Во всех случаях хламидиоз у производителей сопровождается обсеменением эякулята хламидиями. Согласно ветеринарной статистике хламидиоз крупного рогатого скота по новой инструкции по предупреждению и ликвидации хламидиоза крупного.

У многих видов хламидий, выделенных от животных, особый тропизм особенности хламидиоза крупного рогатого скота, но за эти годы им не удалось. Следует срочно пересмотреть существующие инструкции по.

Кл.слова (ненормированные): патоморфологические изменения — аорта — крупный рогатый скот — хламидиоз — атеросклероз Аннотация: Изучение патоморфологических изменений. Возбудителем хламидиоза крупного рогатого скота является Cl.psittaci, который представляет собой элементарные тельца округлой формы диаметром 250-350 нм. Хламидиоз крупного рогатого скота регистрируется во всех странах мира, в том числе и в Республике Беларусь и наносит хозяйствам ощутимый экономический ущерб. ВАКЦИНА ПРОТИВ ХЛАМИДИОЗА ЖИВОТНЫХ «ХЛАМИДИОВАК» целью в неблагополучных и угрожаемых по хламидиозу крупного рогатого скота, овец, коз, свиней хозяйствах. Скачать подробную инструкцию (2274).

Продолжает совершенствоваться лабораторная диагностика хламидиозов, благодаря чему расширяются знания о спектре хламидиозной инфекции, в недалеком прошлом ограниченные лишь трахомой и орнитозом, открываются возможности своевременного выявления хламидий и разработки научно обоснованных лечебных и профилактических мероприятий. Кроме того, в очагах эпизоотий заметно снижается продуктивность животных, наблюдается падеж, что наносит значительный экономический ущерб сельскому хозяйству. Суммируя вышесказанное, можно сказать, что современная ситуация по хламидиозам требует интенсификации научных исследований, направленных на дальнейшее совершенствование диагностики, профилактики и борьбы с данной болезнью, причем важную роль в постановке диагноза играют эпизоотологические данные.

Социальная значимость хламидиоза обусловлена провоцированием мужского и женского бесплодия,что влияет на демографические показатели в России. По данным ВОЗ заболеваемость хламидиоза особенно высока в группе людей активного трудоспособного и репродуктивного возраста и составляет 1,5 — 2% по официальным данным статистики и 5 % по не официальным, при этом инфицированность подростков — 2. В настоящее время выделены ранее неизвестные инфекционные агенты, являющиеся возбудителями болезней крупного рогатого скота, свиней и лошадей в хозяйствах региона Среднего Поволжья и Предуралья, которые по своим иммунобиологическим характеристикам идентифицированы как хломидии. Современные диагностические, лечебно- профилактические препараты включают.

После трехкратного введения препарата ТПД в опытной группе происходило оздоровление организма крупного рогатого скота, т. В контрольной группе во все сроки исследования выделены хламидии.

Источник: http://jaguar18.weebly.com/home/hlamidioz-krs-instrukciya

melnitsa-asb.ru

Вакцина для специфической профилактики хламидиоза крупного и мелкого рогатого скота

Изобретение относится к области ветеринарной микробиологии и биотехнологии. Вакцина содержит инактивированные хламидийные очищенные антигены из штаммов вида Chlamydia psittaci: М3-89 - возбудителя хламидиозного менингоэнцефалита телят, 250 - возбудителя хламидиозного аборта коров и СК-89 - возбудителя хламидиозного конъюнктивита телят, выращенные одновременно в желточной и аллантоисной оболочках куриных эмбрионов и взятые в соотношении 0,25:0,25:0,5 соответственно с концентрацией хламидий 16-18 мг/мл, адсорбированных на алюмокалиевых квасцах и эмульгированных в масляно-ланолиновом адъюванте, с содержанием 0,2% глутарового альдегида в качестве консерванта. Вакцина обладает высокой иммуногенной активностью с широким спектром антигенности при различных клинических формах заболеваний крупного и мелкого рогатого скота. 9 табл.

 

Изобретение относится к области ветеринарной микробиологии и биотехнологии, в частности к производству вакцины для специфической профилактики хламидиоза крупного и мелкого рогатого скота, этиологическим агентом которого является Chlamydia psittaci.

Хламидиозы крупного и мелкого рогатого скота - инфекционная болезнь, протекающая в виде абортов, рождения мертвых плодов или слабого потомства, уретритов, орхитов, баланопоститов, простатитов, семенного везикулита, гастроэнтероколита, полиартрита, бронхопневмоний, конъюнктивитов, энцефаломиелитов и других синдромов.

Хламидиоз крупного и мелкого рогатого скота в последние годы получил широкое распространение в животноводческих и овцеводческих хозяйствах страны (Азалов Ф.З., Курбанова И.А Хламидиоз быков-производителей. // Ж. Ветеринария. 1987, №6, с.34-36; 17 с. Хамадеев Р.Х., Хусаинов Ф.М., Равилов А.З. и др. Хламидиоз крупного рогатого скота. Ветеринария. 1990, №2, с.42-44. Хусаинов Ф.М. Клинико-эпизоотологическое проявление и специфическая профилактика хламиидиоза крупного рогатого скота. //Автореф. дис. на соискание уч. ст. канд. вет. наук. Казань. 1992, с.17; Караваев Ю.Д., Калугина И.А., Дьяков Л.П., Белоусов В.И. Диагностика, профилактика и меры борьбы с хламидиозами животных. // Ж. Ветеринария. 1999. №2, с.28-30).

Для хламидиозной инфекции в целом характерна слабая иммунологическая реакция, тенденция к хроническому и латентному течению с сохранением возбудителя в организме даже после острого переболевания и клинического выздоровления. (Хламидиозы сельскохозяйственных животных. М., "Колос", 1984. - С.71-76).

Меры борьбы с хламидиозом крупного и мелкого рогатого скота как у нас в стране, так и за рубежом до недавнего времени были основаны на применении медикаментозных средств, ветеринарно-санитарных и ограничительных мероприятий. Разработка эффективных мер борьбы и специфической профилактики при хламидиозе крупного рогатого скота находятся в стадии постоянной разработки и апробации. В США в 1979 году A.S.Seawell предложил комплексную вакцину для профилактики хламидиоза овец, крупного рогатого скота и свиней. Препарат представляет собой живую эмбрион-вакцину, приготовленную из штамма хламидий пневмонии кошек, безопасного для с.-х. животных (Seawell A.S. Methods of wsing chlamydia vaccine for preventing and treating bovine and diseases, США). При учете эффективности применения живых вакцин исследователи пришли к выводу, что они более перспективны по сравнению с инактивированными препаратами, но в силу обстоятельств эти препараты не нашли широкого применения в ветеринарии, прежде всего это связано с тем, что живые вакцины имели ограниченный срок хранения (Н.З.Хазиповы др. Иммунитет и специфическая профилактика. // Хламидиозы с.-х. животных. - М., "Колос", - 1984. - С.193-200).

В нашей стране известна выпускаемая биологической промышленностью "Инактивированная эмульсин-вакцина против хламидиозного аборта овец". Авторы Ю.Д.Караваев, Н.И.Налетов (Авторское свидетельство СССР №692128, Кл. А61К 39, 1977) рекомендовали данную вакцину для специфической профилактики хламидиоза овец и крупного рогатого скота, однако ее применение не привело к ощутимым результатам (Тр. института ВИЭВ. - 1981. - №53. - С.95-102).Наиболее близким аналогом по сущности к предлагаемому изобретению (прототип) является "Вакцина против хламидиоза сельскохозяйственных животных", содержащая в качестве антигена возбудитель хламидиозного аборта крупного рогатого скота, выращенный в желточной оболочке куриных эмбрионов, инактивированный мертиолятом, а в качестве адъюванта служат раствор тригидрооксиметиламинометана и тетраметилдиамина, раствор акриламинда и метилбисакриламида, раствор персульфата аммония и раствор глутарового альдегида (см. авт. свид. №826744 "Вакцина против хламидиоза сельскохозяйственных животных", кл. С12 N5/00 за 1984 г.).

Состав вакцины, взятый в качестве прототипа, следующий (мл):

Антигенная жидкость из 20-40%-ной суспензии желточных мешков, зараженных хламидиями (ЭЛД50 10-6,5-10-7,0- 8-0
Смесь растворов тригидрооксиметиламинометана (0,23%-ного)- 1-2
Смесь растворов акриламида (30%-ного) с метилбисакриламидом
(0,8%-ным)- 3-4
1,4%-ный раствор персульфата аммония- 1-2
25%-ный раствор глутарового альдегида до конечной
концентрации 0,05- 0,038

Недостатком известной вакцины является невысокая эффективность ее против хламидиоза крупного рогатого скота и овец из-за существующих антигенных различий между штаммами хламидий крупного и мелкого рогатого скота, а также неочищенность от компонентов желточной оболочки куриных эмбрионов исходной биомассы хламидий, в качестве которой используют 20-40%-ную суспензию возбудителя хламидиозного аборта коров (штамм "250") и, как следствие этого, слабая иммуногенная активность вакцины, не обеспечивающая формирование длительного и напряженного иммунитета против хламидиоза крупного рогатого скота и овец. Внутри вида Chl.psittaci, изолированного от крупного рогатого скота и овец, штаммы отличаются между собой по биохимическим свойствам и антигенной структуре, а также вирулентностью по отношению к экспериментальным и естественным организмам. Это дает основание утверждать о существовании внутри вида Chl.psittaci серотипов и даже вариантов. Установлено, что штаммы, выделенные от крупного рогатого скота при аборте, пневмонии и диареи телят по тинкториальным и антигенным свойствам близки к штаммам, выделенным от овец при аборте, пневмонии и диарее. В то же время штаммы хламидий, выделенные от крупного и мелкого рогатого скота при аборте и энтериальных инфекциях, по антигенным свойствам отличаются от возбудителей, выделенных от крупного и мелкого рогатого скота при полиартритах и энцефаломиелитах, что необходимо учитывать при конструировании противохламидиозных вакцин (В.Н.Сюрин, В.Н.Фомина. Частная ветеринарная вирусология // Москва "Колос", - 1979. - С.460-463). Однако некоторые исследователи, которые исходят из наличия в составе всех хламидий общегруппового термостабильного антигена, высказываются о возможности создания единой вакцины, обеспечивающей защиту от хламидиозов с.-х животных всех видов (В.А.Бортничук. Хламидиозы свиней. // Киев, "Урожай", 1991. - С.152). Проблема создания универсальной и эффективной вакцины с широким спектором антигенности против хламидиозов сельскохозяйственных животных остается актуальной.

Задачей изобретения является получение вакцины, обладающего высокой иммуногенной активностью с широким спектром антигенности при различных клинических формах заболевания крупного и мелкого рогатого скота.

Поставленная задача достигается тем, что вакцина для специфической профилактики хламидиоза крупного и мелкого рогатого скота содержит инактивированные и очищенные хламидийные антигены из штаммов хламидий вида Chlamydia psittaci: "М3-89" - возбудителя хламидиозного менингоэнцефалита телят, "250" - возбудителя хламидиозного аборта коров и "СК-89" - возбудителя хламидиозного конъюнктивита телят, выращенных одновременно в желточной и аллантоисной оболочках куриных эмбрионов, взятых в соотношении 0,25; 0,25; 0,5 соответственно и с концентрацией 16-18 мг/мл, адсорбированных на алюмокалиевых квасцах и эмульгированных в масляно-ланолиновом адъюванте, с содержанием 0,2% глутарового альдегида в качестве консерванта, со следующим составом вакцины (мл):

1. Инактивированные хламидийные антигены из штаммов вида Chl.psittaci:
- "МЗ-89" с титром ЭЛД50 10-5,5-10-7,7 в 0,3 мл13,7-12,6
- "250" с титром ЭЛД50 10-5,5-10-7,7 в 0,3 мл13,7-12,6
- "СК-89" с титром ЭЛД50 10-5,5-10-7,7 в 0,3 мл24-25
2. Масло-ланолиновый адъювант48-49
3. 10% раствор алюмо-калиевых квасцов0,4-0,5
4. 10% раствор глутарового альдегида0,2-0,3

Входящие в вакцину штаммы хламидий "М3-89", "250", "СК-89" нами изысканы, депонированы и являются производственными.

Штамм "МЗ-89" - возбудитель менингоэнцефалита крупного рогатого скота выделен в 1989 году из мозга теленка, отнесен к порядку Chlamydiales, сем. Chlamydiaceae, роду Chlamydia, виду Chlamydia psittaci. Штамму присвоен регистрационный номер МЗ-89 ДЕП во Всероссийской государственной коллекции штаммов микроорганизмов, используемых в ветеринарии и животноводстве (123022, г.Москва, Звенигородское шоссе, 5, ВГНКИ). Штамм депонирован 26 апреля 2000 г.

Штамм "250" - возбудитель хламидиозного аборта коров выделен в 1970 г. от абортированного плода коровы, отнесен к порядку Chlamydiales, сем. Chlamydiaceae, роду Chlamydia, виду Chlamydia psittaci. Штамм возбудителя хламидиозного аборта коров депонирован во Всероссийской государственной коллекции штаммов микроорганизмов, используемых в ветеринарии и животноводстве (123022, г.Москва, Звенигородское шоссе, 5, ВГНКИ).

"СК-89" - возбудитель хламидиозного конъюнктивита крупного рогатого скота выделен в 1989 году из истечений глаз теленка с признаками конъюнктивита, отнесен к порядку Chlamydiales, сем. Chlamydiaceae, роду Chlamydia, виду Chlamydia psittaci. Штамму возбудителя хламидиозного конъюнктивита крупного рогатого скота присвоен регистрационный номер "СК-89"-ДЕП во Всероссийской государственной коллекции штаммов микроорганизмов, используемых в ветеринарии и животноводстве (123022, г.Москва, Звенигородское шоссе, 5, ВГНКИ). Штамм депонирован 26 апреля 2000 г.

Входящие в вакцину штаммы хламидии "МЗ-89", "250", "СК-89" обладают следующими свойствами:

- культивироваться в оболочке желточного мешка развивающегося куриного эмбриона 6-7 суточного и аллантоисной оболочке 8-9 суточного возраста;

- вызывают специфическую гибель куриных эмбрионов, инфицированных в желточную полость, в течение 4-8 суток после заражения и накапливаются в титре 10-5,5-7,7 ЭЛД50/0,3 мл;

- должны быть свободными от контаминации посторонними микроорганизмами;

- в мазках-отпечатках из желточной оболочки и мазках из аллантоисной жидкости должны просматриваться при исследовании под большим увеличением микроскопа элементарные тельца хламидии, окрашенные по Стэмпу в красный, по Романовскому-Гимза в темный цвет, располагающиеся вне и внутри клеток кокковидной формы, величиной 250-300 нм.

Антигенные свойства штаммов "МЗ-89", "250" и "СК-89" изучали по способности индуцировать формирование антител у морских свинок при иммунизации гомологичным антигеном и путем выявления антител в иммунных хламидийных сыворотках, полученных к гомологичным и производственным штаммам хламидий "Ростиново-70" - возбудителя хламидиозного аборта овец, "Лори" - возбудителя хламидиоза птиц, а также стандартных диагностикумов, изготовленных в условиях лаборатории вирусологии ФГУ ″ФЦТРБ″ г.Казань. Работа выполнялась согласно "Методическим рекомендациям по лабораторной диагностике хламидиозов сельскохозяйственных животных", утвержденным Департаментом ветеринарии Минсельхозпрода России от 30 июня 1999 года.

Данные по изучению антигенных свойств штаммов хламидий "МЗ-89", "250"и "СК-89" представлены в таблице 1.

Таблица 1Характеристика антигенных свойств штаммов хламидий "МЗ-89", "250", "СК-89".
№ п/пГипериммунные сызоротки, полученные к штаммам хламидийАнтигены из штаммов хламидий
"МЗ-89""250""СК-89""Ростиново-70""Лори"
1."МЗ-89"80х40х20х80х20х
2."250"40х80х20х160х20х
3."СК-89"20х40х80х40х20х
4."Ростиново-70"40х160х80х160х40х
5."Лори"20х10х20х40х40х
Обозначение: "x" - обратная величина титров антител

Приведенные в таблице 1 данные показывают, что антигены из штаммов МЗ-89", "250" и СК-89" реагируют между собой в титрах на один и два порядка ниже, чем с гомологичными штаммами, что свидетельствует об их выраженном антигенном отличии и их принадлежности штаммов "МЗ-89", "250", СК-89" к хламидиям.

Иммуногенные свойства штаммов хламидий: "МЗ-89", "250", "СК-89" изучали на белых мышах. С этой целью готовились очищенные, концентрированные и инактивированные препараты, которые двукратно, с интервалом 7 дней, вводили белым мышам в дозе 0,3-0,4 см3. Через 14 дней после иммунизации белых мышей искусственно заражали гомологичными и гетерологичными культурами хламидий. Результаты опытов приведены в таблице 2.

Таблица 2.Характеристика иммунногенности штаммов хламидий крупного рогатого скота "МЗ-89", "250", "СК-89"
Штамм, используемый для иммунизацииПроцент выживания б. мышей, заражения штаммами
"МЗ-89""СК-89""250"
14."МЗ-89"93±960±1090±1
15."СК-89"68±2598±2560±25
16."250"62±1060±3,592±1
17.Контроль8±11020±26

В экспериментальных опытах на белых мышах установили (таблица 2), что двукратная внутрибрюшинная иммунизация суспензиями на основе штаммов "МЗ-89", "250" и "СК-89" предохраняет белых мышей от развития хламидиозной инфекции при искусственном заражении гомологичными штаммами. Так, от "МЗ-89" - 93%, "250" - 90%,"СК-89" - 60% при гибели 80-92% интактных белых мышей. Таким образом, в опытах по изучению иммунногенных свойств штаммов "МЗ-89", "СК-89", "250" установили, что изготовленные на их основе препараты обеспечивают у привитых животных формирование напряженного иммунитета от заражения гомологичными и слабый - от гетерологичных штаммов.

Патогенные свойства штаммов хламидий: "МЗ-89", "СК-89" и "250" для лабораторных животных, крупного и мелкого рогатого скота представлены в таблице 3.

Таблица 3Патогенность штаммов хламидий "МЗ-89", "СК-89", "250" для лабораторных животных и крупного и мелкого рогатого скота
№ п.пДанныеШтаммы
"МЗ-89""СК-89""250"
1.2.3.4.
Патогенность для белых мышей
Способ зараженияГибель в процентах
1.интраназально60-9090-10080-90
2.подкожно40-5040-5030-40
3.внутрибрюшинно60-7080-9090-97
Патогенность для морских свинок
Способ зараженияГибель в процентах
4.подкожно---
5.внутрибрюшинно-40-50-
6.интраназально-40-50-
Патогенность для крупного и мелкого рогатого скота
Способ зараженияКлиника заболевания
7.внутривенно, внутримышечноменингоэнцефалитконъюнктивитыаборты, рождения мертвых и нежизнеспособных телят, ягнята

При сравнительной оценке трех штаммов "МЗ-89", "СК-89", "250", относящихся к одному виду Chl.psittaci, были выявлены существенные различия в вирулентности, иммуногенности и антигенности (таблица 3). Так, при интраназальном способе заражения белых мышей штаммом "МЗ-89" наблюдали гибель 60-90% белых мышей, а при подкожном и внутрибрюшинном способах - 40-70%. У штамма "СК-89" наибольшая гибель белых мышей наблюдалась при интраназальном способе заражения (90-100%) и более низкая при подкожном и внутрибрюшинном способах (40-50 и 80-90% соответственно). При заражении белых мышей штаммом "250" наибольшая гибель (80-97%) наблюдалась при интраназальном и внутрибрюшинном способах и наименьшая (30-40%) - при подкожном.

При заражении морских свинок штаммами "МЗ-89" и "250" все животные переболевали, тогда как при внутрибрюшинном и интраназальном способах заражения штаммом "СК-89" более 40-50% морских свинок из числа заболевших погибали от пневмонии.

Существенные различия в течение заболевания наблюдали при внутривенном заражении крупного рогатого скота штаммами "МЗ-89", "250" и "СК-89". Так, у животных, зараженных штаммом хламидий "МЗ-89", в основном наблюдали признаки менингоэнцефалита, "СК-89" - конъюнктивита, а при заражении штаммом "250" - аборты.

На основании изучения биологических свойств штаммов "МЗ-89", "250", "СК-89" нами были установлены выраженные межштаммовые различия в вирулентности в отношении к экспериментальным и естественным животным.

Полученные данные при изучении иммунногенных свойств штаммов: "МЗ-89", "СК-89" и "250" свидетельствуют о разной их иммуногенной активности и, как следствие, слабом иммунитете.

Таким образом, результаты по сравнительному изучению биологических свойств штаммов хламидий "МЗ-89", "СК-89" и "250" показали, что выделенные штаммы значительно отличаются между собой, хотя и относятся к одному и тому же виду хламидий - Chl.psittaci. Полученные данные служили научной предпосылкой при конструировании полиштаммовой вакцины для специфической профилактики хламидиоза крупного и мелкого рогатого скота.

Поэтому для повышения эффективности созданной противохламидиозной вакцины были взяты отличные друг от друга штаммы хламидий крупного рогатого скота: "МЗ-89" - возбудитель менингоэнцефалита телят, "СК-89" - возбудитель конъюнктивита телят, "250" - возбудитель хламидиозного аборта коров, тем самым добились значительного повышения иммуногенности вакцины за счет расширения спектра антигенности препарата, что является одним из отличительных признаков в созданной противохламидиозной вакцине от существующего прототипа.

Пример 1. Приготовление нативных суспензий хламидий.

Используют куриные эмбрионы 6-7 дневного возраста, половину которых заражают в желточную полость штаммами хламидий "250" и "МЗ-89", вторую половину штаммом хламидий "СК-89" в разведении до 10-4 в дозе 0,3 мл. Инфицированные эмбрионы инкубируют при 37-38°С в течение двух дней, затем проводят овоскопию, отбирают и уничтожают павшие (неспецифическая гибель), а живые эмбрионы заражают повторно в аллантоисную полость суспензией, разведенной до 10-3 в дозе 0,3 мл соответственно штаммами "250", "МЗ-89" и "СК-89". Далее зараженные эмбрионы инкубируют при 37-38°С в течение 7-8 дней. Специфическая гибель 90-95% инфицированных эмбрионов происходит на 6-9 дни после первичного заражения. Павшие эмбрионы охлаждают и вскрывают. От каждого эмбриона отсасывают 4-5 мл хламидиосодержащей аллантоисной жидкости и отбирают 1-2 г хорион-аллантоисной и желточной оболочек вместе с сопутствующим желтком.

Хламидиосодержащий материал до использования хранят в замороженном при минус 20-30°С состоянии. Аллантоисную жидкость перед заморозкой осветляют центрифугированием при 3 тыс.об/мин в течение 30 минут.

Для получения полуфабриката вакцины из хламидиосодержащего материала трех штаммов готовят 10%-ную суспензию на фосфатно-буферном физиологическом растворе (ФСБ) рН 7,2-7,4 следующим образом: хламидиосодержащие оболочки взвешивают, подвергают трехкратному замораживанию и оттаиванию и суспендируют до 20%-ной концентрации на коллоидной мельнице, добавив расчетное количество ФБР. Суспензию центрифугируют при 3000 об/мин в течение 30 минут и отсасывают средний слой центрифугата - взвесь хламидий. Осадок тканей и верхний желточный слой удаляют. Замороженную хламидиосодержащую аллантоисную жидкость размораживают в водяной бане при температуре 37°С. Размороженную, слегка опалесцирующую аллантоисную жидкость разводят в соотношении 1:1 с ФБР.

Пример 2. Объединение штаммов хламидий и инактивация.

Хламидиосодержащие суспензии инфицированных оболочек и аллантоисной жидкости штаммов "МЗ-89", "СК-89" и "250" объединяют и добавляют формальдегид в конечной концентрации 0,2-0,3%. Суспензию после добавления реагентов перемешивают и выдерживают в течение 48 часов при температуре 37-38°С для инактивации хламидий. Хламидии из инактивированной суспензии осаждают путем центрифугирования при 18-20 тыс.об/мин в течение 60 минут. Надосадочную жидкость вместе с верхним желточным слоем удаляют, осадок элементарных телец хламидий взвешивают и ресуспендируют в соотношении 1:25 с ФБР, содержащим 0,2-0,3% глутарового альдегида.

Стандартизацию суспензии по содержанию элементарных телец хламидий осуществляют путем определения ее оптической плотности. Для этого из приготовленной взвеси хламидий готовят разведение 1:10 (к 0,5 мл взвеси добавляют 4,5 мл ФБР) и измеряют коэффициент поглощения на ФЭК 56М при длине волны 540 нм в кюветах с рабочей длиной 10 нм. Оптимальным для получения иммунногенной вакцины является коэффициент поглощения, равный 1,8-2,0 единиц, что соответствует содержанию 16-18 мг антигена в одном мл суспензии.

Стандартизированную взвесь хламидий пропускают через коллоидную мельницу, добавляют алюмо-калиевые квасцы в конечной концентрации 0,4-0,5% и снова гомогенезируют в течение 5 минут, затем взвесь сливают в стеклянные баллоны и помещают в рефрижератор при 4-6°С на 1-2 суток. В этих условиях хламидии адсорбируются на алюмо-калиевых квасцах и осаждаются в виде хлопьев. Надосадочную жидкость отсасывают и удаляют, а осадок ресуспендируют до исходного объема фосфатно-буферным раствором, содержащим 0,2-0,3% глутарового альдегида. Полученные полуфабрикаты вакцины с консервантом хранят в рефрижераторе при 4-6°С.

Пример 3. Приготовление вакцины

Для изготовления 1000 мл вакцины берут: 514 мл инактивированного антигена штаммов ("МЗ-89", "СК-89" и "250"), 4,0 мл 10% раствора алюмо-калиевых квасцов, 2,0 мл 10% раствора глутарового альдегида и добавляют 480 мл стерильной масло-ланолиновой смеси в соотношении 84:16. Пропускают через коллоидную мельницу и расфасовывают в стерильные флаконы по 100 мл.

При изменении минимума или максимума в соотношениях компонентов при изготовлении вакцины происходит расслоение эмульсии на водную и масляную фракции, что снижает иммуногенность вакцины.

Пример 4. Контроль вакцины на стерильность, безвредность и на антигенную и иммуногенную активность.

Контроль вакцины на стерильность, стойкость эмульсии и безвредность проводится по общепринятым методам.

Испытывалось 10 серий вакцины на лабораторных животных и телятах. Белых мышей массой 16-18 г вакцинировали внутрибрюшинно в дозе 0,1 мл, морских свинок подкожно по 1,0 мл с последующим наблюдением за состоянием подопытных животных в течение 14 и 23 дней соответственно.

Падежа лабораторных животных после вакцинации в течение срока наблюдения не установлено. Общее состояние вакцинированных животных во всех сериях опытов было удовлетворительным. Испытуемые серии вакцины против хламидиоза крупного и мелкого рогатого скота были стерильны и безвредны (таблицы 4 и 5).

Таблица 4Результаты изучения стерильности экспериментальных серий вакцины против хламидиоза крупного и мелкого рогатого скота
№ п/пНомера серии вакциныБактериальные питательные среды
МПБМПАМППБСабуро
1.№1стерильностерильностерильностерильно
2.№3стерильностерильностерильностерильно
3.№5стерильностерильностерильностерильно
4.№8стерильностерильностерильностерильно
5.№13стерильностерильностерильностерильно
6.№14стерильностерильностерильностерильно
7.№19стерильностерильностерильностерильно
8.№20стерильностерильностерильностерильно
9.№23стерильностерильностерильностерильно
10.№24стерильностерильностерильностерильно
Таблица 5Результаты изучения безвредности экспериментальных серий вакцины против хламидиоза крупного и мелкого рогатого скота на белых мышах и морских свинках
№№ п/пНомера серии вакциныВакцинированоСнято с контроляПало животных
б/мм/сб/мм/сб/мм/с
1.№112412400
2.№312-12-0-
3.№515415400
4.№815-15-0-
5.№1310410400
6.№1412212200
7.№1912-12-0-
8.№2012412400
9.№2312-12-0-
10.№2410410400
ВСЕГО:122221222200
Примечание: б/м - белые мыши;м/с - морские свинки.

Контроль иммуногенности проводят на морских свинках. Животных вакцинируют в дозе 0,5 мл подкожно в области лопатки справа и слева (по 0,25 мл). Вакцинация способствует выработке специфических хламидийных антител на 30-35 день в титрах 1:5-1:80 (средний арифметический титр не ниже чем 1:20) (таблица 6).

Таблица 6Накопление комплементсвязывающих антител в крови морских свинок через 30 дней после вакцинации экспериментальными сериями инактивированной эмульсионной вакцины против хламидиоза крупного и мелкого рогатого скота.
№ п/пНомера серии вакциныКоличество вакцинированных животныхСредние титры антител в РСК с антигеном
хламидийнымконтрольным
12345
1.№2641:531:10
2.№141:301:6
3.№541:871:20
4.№1341:301:6
5.№2041:871:20
6.№541:1701:83
7.№141:451:20
8.№2441:1201:55
9.№541:1701:83
10.№1341:261:10
11.№1441:221:10
12.№2041:1001:45
Средний титр антител (M±m)481:78±261:31±13

Контроль иммуногенной активности вакцины против хламидиоза крупного и мелкого рогатого скота проводят на белых мышах. Мышей вакцинируют подкожно в дозе 0,2-0,3 мл. Контрольное заражение опытных и интактных животных проводят штаммами хламидий "МЗ-89", "СК-89" и 250" внутрибрюшинно в дозе 0,4 мл через 30 дней после иммунизации. Выживаемость белых мышей после контрольного заражения вирулентными культурами хламидий штаммом "МЗ-89", "СК-89" и "250" колебалась в пределах 67-80% (М±м 73,3±4,3%) и 77-83% (М±м 80±2,4%), 70-85% (М±м 76,6±2,4%) соответственно. Средний процент выживаемости вакцинированных мышей после контрольного заражения составил 78,2±2,1% (таблица 7). В группах контрольных мышей после заражения отмечается 100% клиническое заболевание и гибель от 60 до 80% животных. Выживаемость интактных мышей после заражения штаммами хламидий "МЗ-89", "СК-89", "250" колеблется в пределах 13-39% (24±2,4%), 16-18% (17±1,4%) и 11-40% (26±1,6%) соответственно.

Испытание эффективности разработанной полиштаммовой вакцины в лабораторных условиях в остром опыте на телятах и овцах показало, что биопрепарат обладает иммуногенностью и вызывает у животных формирование иммунитета против возбудителей хламидиозного менингоэнцефалита, полиартрита, кератоконъюктивита и аборта коров, овец, что подтверждалось результатами клинических, серологических, микроскопических и вирусологических исследований (акты по испытанию полиштаммовой вакцины на телятах и овцах прикладываются).

Вакцину применяют с профилактической целью в неблагополучных по хламидиозу крупного и мелкого рогатого скота хозяйствах, племпредприятиях и в частном секторе. Вакцинируют клинически здоровых телят, коров, нетелей, быков-производителей различных половозрастных групп овец, находящихся на территории, неблагополучной по хламидиозу. Больных хламидиозом животных перед вакцинацией подвергают лечению антибиотиками тетрациклинового ряда и после клинического выздоровления вакцинируют против хламидиоза. Телят вакцинируют с 1-6 мес возраста, ревакцинируют через 6 мес в той же дозе. Телок случного возраста перед вакцинацией исследуют серологически на хламидиоз. Вакцинируют клинически здоровых и серонегативных животных перед осеменением и через 6 мес проводят ревакцинацию половиной прививочной дозы. Ягнят после окончания окотов вакцинируют однократно. Овцематок и ярок вакцинируют за 1-2 мес до осеменения или случки. Быков-производителей и баранов перед первичной вакцинацией исследуют серологически на хламидиоз. Вакцину вводят крупному и мелкому рогатому скоту строго внутримышечно в области верхней трети шеи, в дозах телятам в возрасте от 1 до 6 мес - 1,0 мл; телкам случного возраста, нетелям, коровам и быкам-производителям - 2,0 мл; ягнятам в возрасте от 1 до 3 мес - 0,5 мл; яркам, овцематкам и баранам-производителям - 1,0 мл. У вакцинированных животных на месте введения вакцины наблюдают местную реакцию в виде небольшой припухлости, которая исчезает в течение 2-4 недель. Иммунитет у привитых животных наступает через месяц после прививки и сохраняется в течение шести месяцев. Продукты убоя, полученные от вакцинированных животных, независимо от срока вакцинации, реализуют без ограничений. Срок годности вакцины 1 год.

Производственное испытание вакцины, изготовленной в лаборатории вирусологии ФГУ "ФЦТРБ" (г.Казань), проводили в животноводческих, овцеводческих хозяйствах зоны Среднего Поволжья РФ. Данные по вакцинации против хламидиоза крупного рогатого скота и овец в неблагополучных по хламидиозу хозяйствах представлены в таблице 8, из которой следует, что в результате применения вакцины количество абортов и мертворождений среди коров, нетелей и овцематок, а также заболеваемость, падеж и вынужденный забой телят, ягнят от хламидиозной инфекции в этих хозяйствах сократились более чем в 2 раза.

Таблица 8Оценка эффективности вакцины против хламидиоза крупного и мелкого рогатого скота в неблагополучных хозяйствах РФ (1992-2001 г.)
№ п.п.Регионы РФ, хозяйстваКол-во (гол.)До вакцинации, годыПосле вакцинации, годы
коровы, овцематкителята, ягнятааборты, м/рождениепадеж, вынужденный убойаборты, м/рождениепадеж, вынужденный убой
Республика "Марий-Эл"19921993-1995
1.с/з Мичуринский89164099/1162/9,647/522/3
2.с/з Кожласолинск94360597/1030/5,043/4,518/3
3.с/з Нуктужский36828748/1250/1720/526/9
4.АХОМ "Карла Маркса"61428620/829/1112/214/5
Пермская область19971999
5.ЗАО "Звезда"39038819/552/133/0,835/9
Республика Татарстан19992001
6.Колхоз им. Тимирязева12831139-25-2

За период 2000-2004 г. в ФГУ "ФЦТРБ" изготовлено более 137 тыс.доз вакцины против хламидиоза крупного и мелкого рогатого скота, которая используется в 165 неблагополучных по хламидиозу крупного и мелкого рогатого скота хозяйствах Российской Федерации (таблица 9). Опыты по широкому производственному испытанию разработанной нами вакцины крупного и мелкого рогатого скота инактивированной эмульсионной в различных регионах показали, что вакцина обладает высокой эффективностью и при систематическом использовании обеспечивает стабилизацию эпизоотической ситуации по хламидиозу и оздоровление в животноводческих и овцеводческих хозяйствах от хламидиозной инфекции.

Таблица 9Данные по вакцинации крупного и мелкого рогатого скота инактивированной эмульсионной вакцины в неблагополучных хозяйствах РФ за период (2001-2004 г.).
№ п.п.Наименование регионов РФКоличество хозяйствИспользовано доз вакцины
Республики:
1.Татарстан1513725
2.Чувашия2937300
3.Марий-Эл1714625
4.Башкирия21400
5.Удмуртия1500
Области:
1.Пермская область720750
2.Кировская область35050
3.Нижнегородская область25000
4.Саратовская область1800
5.Челябинская область23750
6.Саратовская область1800
7.Беларуссия130000
8.Оренбургская область11000
9.Алтайский край12500
Всего:165137200

Вакцина для специфической профилактики хламидиоза крупного и мелкого рогатого скота, содержащая инактивированный антиген Chlamydia psittaci, адъювант и консервант, отличающаяся тем, что содержит инактивированные и очищенные хламидийные антигены из штаммов МЗ-89 - возбудителя хламидиозного менингоэнцефалита телят, 250 - возбудителя хламидиозного аборта коров и СК-89 - возбудителя хламидиозного конъюнктивита телят, выращенных одновременно в желточной и аллантоисной оболочках куриных эмбрионов, взятых в соотношении 0,25:0,25:0,5, соответственно, с концентрацией хламидий 16-18 мг/мл, адсорбированных на алюмокалиевых квасцах и эмульгированных в масляно-ланолиновом адъюванте, с содержанием 0,2% глутарового альдегида, в качестве консерванта.

www.findpatent.ru

Вакцина для специфической профилактики хламидиоза крупного рогатого скота

 

Использование: ветеринарная микробиология, специфическая профилактика хламидиозной инфекции крупного рогатого скота, вакцина. Сущность изобретения: вакцина содержит инактивированный формальдегидом в присутствии глутарового альдегида, очищенный антиген из штамма Chlamydia psittaci "250" - возбудителя аборта коров, выращенный одновременно в желточный и аллантоисной оболочках куриных эмбрионов, с концентрацией 15-20 мкг/мл, адсорбированный на алюмокалиевых квасцах и эмульгированный в маслоланолиновой смеси. Использование вакцины уменьшает количество абортов и мертворождений у коров и нетелей, снижает заболеваемость и гибель телят от хламидиозной инфекции. 4 табл.

Изобретение относится к ветеринарной микробиологии и может быть использовано для специфической профилактики хламидиозной инфекции крупного рогатого скота.

Хламидиоз крупного рогатого скота инфекционная болезнь, которая проявляется преимущественно абортами у коров и нетелей преждевременным рождением слабых и нежизнеспособных телят, воспалительными явлениями органов генитальной системы у коров и быков-производителей и заболеваемостью молодняка крупного рогатого скота гастроэнтеритом, пневмонией, полиартритом, менингоэнцефалитом и другими синдромами. Хламидиоз крупного рогатого скота в последние годы получил широкое распространение в животноводческих комплексах и племпредприятиях страны. Для хламидиозной инфекции в целом характерна слабая иммунологическая реакция, тенденция к хроническому и латентному течению с сохранением возбудителя в организме даже после острого переболевания и клинического выздоровления [1] Меры борьбы с хламидиозом крупного рогатого скота как у нас в стране, так и за рубежом до недавнего времени были основаны на применении медикоментозных средств, ветеринарно-санитарных и ограничительных мероприятий. Недостатком указанной вакцины является низкая эффективность ее для иммунизации крупного рогатого скота против хладиоза из-за существующих между штаммами хламидий антигенных различий. Известно, что существующие между штаммами хламидий антигенные различия значительно влияют на эффективность иммунизации против заболеваний, вызываемых хламидиями (Ata F.A. Storz J. 1973). Наиболее близким по сущности к предлагаемому изобретению (прототип) является "Вакцина против хламидиоза сельскохозяйственных животных", содержащая в качестве антигена возбудитель хламидиозного аборта, выращенный в желточной оболочке куриных эмбрионов, инактивированный мертиолятом, а в качестве адъюванта служат раствор тригидрооксиметиламинометана и тетраметилдиамина, раствор акриламинда и метилбисакриламида, раствор персульфата аммония и раствор глутарового альдегида [2] Состав вакцины, взятой в качестве прототипа, следующий, мл: Антигенная жидкость из 20-40%-ной суспензии желточных мешков, зараженных хламидиями (ЭЛД50 10-6,5-7,0) 8-10 Смесь растворов тригидрооксиметиламинометана (36,3%-ного) с тетраметилдиамином (0,23%-ным) 1-2 Смесь растворов акриламида (30%-ного) и метилбисакриламидом (0,8%-ным) - 3-4 1,4%-ный раствор персульфата аммония 1-2 25% -ный раствор глутарового альдегида до конечной концентрации 0,05% - 0,038 Недостатком известной вакцины является неочищенность от компонентов желточной оболочки куриных эмбрионов исходной биомассы хламидий в качестве которой используют 20-40%-ную суспензию возбудителя хламидиозного аборта коров (штамм "250") и низкая концентрация хламидийного антигена в инактивированной вакцине и как следствие этого слабая иммуногенная активность вакцины необеспечивающая формирование длительного и напряженного иммунитета против хламидиоза крупного рогатого скота. Целью изобретения является разработка противохламидиозной вакцины, обеспечивающей повышение напряженности и длительности иммунитета за счет щадящей инактивации возбудителя, очистки, концентрации, адсорбции на алюмокалиевых квасцах и эмульгирования биомассы хламидий в масляно-ланолиновой смеси. Поставленная цель достигается тем, что возбудитель хламидиозного аборта коров (штамм "250") выращивают одновременно в желточной и хорионаллантоисной оболочках куриных эмбрионов (согласно авт.св. N 1641883 от 15 декабря 1990 г. ), биомассу хламидий инактивируют 0,2%-ным формальдегидом в присутствии 0,1% глутарового альдегида в течение 24 ч, антиген подвергают очистке и концентрированию до 30-40 мкг/мл хламидий дифференциальным центрифугированием, адсорбируют на алюмокалиевых квасцах и эмульгируют в масляно-ланолиновой смеси при следующих соотношениях компонентов мас. Антиген из штамма Chlamydia psittaci "250" 45-50 Масло-ланолиновый адъювант 45-50 Формальдегид 0,04-0,06 Сопоставительный анализ с прототипом позволяет сделать вывод, что предлагаемая вакцина против хламидиоза крупного рогатого скота отличается от известной новым способом выращивания специфического хламидийного антигена одновременно в желточной и аллантоисной оболочках куриного эмбриона, новым ускоренным способом инактивации хламидий путем комбинированного воздействия на возбудителя формальдегидом (0,2% ) в присутствии глутарового альдегида (0,1%), очисткой биомассы от компонентов куриных эмбрионов, концентрацией до 30-40 мк/мл специфического хламидийного антигена и введением в состав вакцин новых компонентов, а именно: алюмокалиевых квасцов, минерального масла (ПЭС-3) и в качестве консерванта формальдегида. Таким образом предлагаемое техническое решение соответствует критерию "новизна". Анализ составов известных вакцин против хламидиоза сельскохозяйственных животных (авт.св. N N 826744, 690128) показал, что некоторые введенные в предлагаемом решении вещества известны, например, возбудитель хламидиозного аборта коров (штамм "250"), масляный адъювант. Однако их применение в этих препаратах в сочетании с другими компонентами не обеспечивает вакцинам такие свойства, которые они проявляют в предложенном решении, а именно: значительное усилие иммуногенных свойств и, как следствие повышение напряженности и длительности противохламидийного иммунитета у вакцинированного крупного рогатого скота. Таким образом, данный состав компонентов придает вакцине новые свойства, что позволяет сделать вывод о соответствии предлагаемого решения критерию "существенные отличия". В качестве антигена в вакцине используют штамм (Chlamydia psittaci "250" возбудитель хламидиозного аборта коров. Штамм выделен от абортированного плода коровы и депонирован в коллекции микроорганизмов Всесоюзного государственного научно-контрольного института ветеринарных препаратов под номером 5 от 3 октября 1990 г. Штамм Chlamydia psittaci "250" обладает следующими свойствами: Морфологические признаки. Культура штамма представляет собой мелкие элементарные тельца хламидий, имеющие сферическую форму размером 200-400 нм. которые хорошо воспринимают карбол-фуксин Циля в разведении 1:5 и окрашиваются по модифицированному методу Стемп в ярко-красный цвет. Культуральные свойства. Штамм хламидий "250" хорошо культивируется в желточной оболочке 6-7 суточных и аллантоисной оболочке 8-9-суточный развивающихся куриных эмбрионов. Специфическая гибель куриных эмбрионов, инфицированных в желточную полость, отмечается на 5-9 сутки после заражения; возбудитель накапливается при этом в титре 106,5-10-7,5ЭЛД50 в 0,3 мл. Патогенные свойства. Штамм хламидий "250" обладает токсичностью и высокой вирулентностью для лабораторных и восприимчивых животных. При внутрибрюшинном и интраназальном заражении белых мышей и морских свинок в дозе соответственно 0,5 и 1 мл 10%-й свежеполученной суспензией инфицированных желточных оболочек, вызывает заболевание и гибель животных на 4-16 сутки после введения материала. У нетелей после внутреннего заражения в дозе 8 мл 10-7,5ЭЛД50 в 0,3 мл штамм обусловливает аборты и рождения слаборазвитого приплода на 20-60 сутки после инфицирования. Иммуногенные свойства. Использование в качестве антигена биомассы, приготовленной из штамма Chlamydia psittaci "250" в инактивированной адсорбированно-эмульгированной вакцине обеспечивает формирование у 100% привитых животных напряженного и длительного иммунитета. В экспериментальных опытах при двукратной иммунизации нетелей вакцина предохраняла 100% животных от развития хламидиозной инфекции и абортов после искусственного заражения их вирулентным штаммом возбудителя хламидиозного аборта коров. Использование вакцины в полевых опытах в неблагополучных по хламидиозу хозяйствах существенно уменьшает количество абортов и мертворождений у коров и нетелей, снижает заболеваемость и гибель телят от хламидиозной инфекции и тем самым в 4-5 раз сокращает потери молодняка крупного рогатого скота и уменьшает напряженность эпизоотической ситуации по хламидийным инфекциям. Для экспериментальной проверки предлагаемой вакцины, ее готовят следующим образом. Куриные эмбрионы 7-дневного возраста заражают в желточную полость суспензией свежепассированного штамма хламидий "250" возбудителя хламидиозного аборта коров, разведенной до 10-4 в дозе 0,3 мл. Инфицированные эмбрионы инкубируют при 37-38oC в течение двух дней, затем проводят овоскопию, отбирают и уничтожают павших (неспецифическая гибель), а живые эмбрионы заражают повторно в аллантоисную полость суспензий штамма "250", разведенной до 10-3 в дозе 0,3 мл. Далее зараженные эмбрионы инкубируют при 37-38oC в течение 7-8 дней. Специфическая гибель 90-95% инфицированных эмбрионов происходит на 6-9 дни после первичного заражения. Павшие эмбрионы охлаждают и вскрывают. От каждого эмбриона отсасывают 4-4,5 мл хламидосодержащей аллантоисной жидкости и отбирают 1-2 г хорионаллантоисной и желточной оболочек вместе с сопутствующим желтком. Хламидосодержащий материал до использования хранят в замороженном при минус 20-30oC состоянии. Аллантоисную жидкость перед заморозкой осветляют центрифугированием при 3 тыс. об/мин в течение 30 мин. Для получения полуфабриката вакцины из хламидиосодержащего материала готовят 10%-ю исходную суспензию на фосфатно-буферном физиологическом растворе (ФБР) pH 7,2-7,4 следующим образом: хламидиосодержащие оболочки взвешивают подвергают термолизису путем трехкратного замораживания и оттаивания, и суспензируют до 20% -й концентрации на коллоидной мельнице добавив расчетное количество ФБР. Суспензию центрифугируют при 3000 об/мин в течение 30 мин и отсасывают средний слой центрифугата взвесь хламидий. Осадок тканей и верхний желточный слой повторно гомогенизируют в таком же количестве ФБР, центрифугируют в тех же условиях и снова отсасывают суспензию хламидий. Замороженную хламидиосодержащую аллантоисную жидкость размораживают по возможности быстро в водяной бане при температуре 37oC интенсивно встряхивая флакон с целью предотвращения образования крупных хлопьев. Размороженную слегка опалесцирующую аллантоисную жидкость разводят в соотношении 1:1 с ФБР. Хламидиосодержащие суспензии инфицированных оболочек и аллантоисной жидкости объединяют в соотношении 1:1 и добавляют сначала глутаровый альдегид в конечной концентрации 0,1% затем через 30 минут, формальдегид в конечной концентрации 0,2% Суспензию после добавления реагентов перемешивают и выдерживают в течение 24 ч при температуре плюс 20-24o (комнатная температура) для инактивации хламидий. Хламидии из инактивированной суспензии осаждают путем центрифугирования ее при 18-20 тыс. об/мин в течение 60 мин. Надосадочную жидкость вместе с верхним желточным слоем удаляют, осадок элементарных телец хламидий взвешивают и ресуспендируют в соотношении 1:10 с ФБР, содержащим 0,1% формальдегида. Стандартизацию суспензии по содержанию элементарных телец хламидий осуществляют путем определения ее оптической плотности. Для этого из приготовленной взвеси хламидий готовят разведение 1:10 (к 0,5 мл взвеси добавляют 4,5 мл ФБР) и измеряют коэффициент поглощения на ФЭК 56М при длине волны 540 нм в кюветах с рабочей длиной 10 мм. Оптимальным для получения иммуногенной вакцины является коэффициент поглощения, равный 2,4-2,6 единиц, что соответствует содержанию 30-40 мкг антигена в одном мл суспензии. Стандартизованную взвесь хламидий пропускают через коллоидную мельницу, добавляют алюмо-калиевые квасцы в конечной концентрации 0,5% и снова гомогенизируют в течение 5 мин, затем взвесь сливают в стеклянные баллоны и помещают в рефрижератор при 4-6oC на 1-2 суток. В этих условиях хламидии адсорбируются на алюмокалиевых квасцах и осаждаются в виде хлопьев. Надосадочную жидкость осторожно отсасывают и удаляют, а осадок ресуспендируют до исходного объема фосфатно-буферным раствором, содержащим 0,1% формальдегида. Процедуру отмывки хламидий от избытка алюмо-калиевых квасцов повторяют 2-3 раза. Полученный полуфабрикат вакцины с консервантом хранят до использования в рефрижераторе при 4-6oC. Пример 1. Для изготовления 1 л вакцины берут 500 мл инактивированного антигена Chlamydia psittaci "250", содержащего 30 мкг/мл хламидий адсорбированных на алюмо-калиевых квасцах с 0,08% формальдегида. Добавляют 500 мл стерильной масло-ланолиновой смеси в соотношении 84:16. Пропускают через коллоидную мельницу и расфасовывают в стерильные флаконы по 100 мл. Средний арифметический титр комплементсвязывающих антител в сыворотке крови вакцинированных морских свинок составляет не ниже 1:20. Пример 2. Для изготовления 1 л вакцины берут 450 мл инактивированного антигена Chlamydia psittaci "250", содержащего 40 мкг/мл хламидий адсорбированных на алюмо-калиевых квасцах с 0,12% формальдегида. Добавляют 550 мл стерильной масло-ланолиновой смеси в соотношении 85:15. Пропускают через коллоидную мельницу и расфасовывают в стерильные флаконы по 100 мл. Средний арифметический титр комплементсвязывающих антител в сыворотке крови вакцинированных морских свинок составляет не ниже 1:20. При изменении минимума и максимума в соотношениях компонентов при изготовлении вакцины происходит расслоение эмульсии на водную и масляную фракции, что снижает иммуногенность эмульсионной вакцины. Контроль вакцины на стерильность, стойкость эмульсии и безвредность проводится по общепринятым методам. Контроль иммуногенности проводят на морских свинках. Животных вакцинируют в дозе 0,5 мл подкожно в области лопатки справа и слева (по 0,25 мл). Вакцинация способствует выработке специфических хламидийных комплементсвязывающих антител на 30-35 день в титрах 1:5 1:80 (средний арифметический титр не ниже 1:20). Вакцину применяют с профилактической целью в хозяйствах и племпредприятиях неблагополучных или угрожаемых по хламидиозу крупного рогатого скота. Вакцинируют все серонегативное поголовье крупного рогатого скота однократно один раз в год с трехмесячного возраста. Телок случного возраста и коров вакцинируют за 20-25 дней до осеменения или случки. Больных хламидиозом животных перед вакцинацией подвергают лечению с использованием антибиотиков тетрациклинового ряда и вакцинируют после выздоровления. Вакцину вводят крупному рогатому скоту в асептических условиях подкожно в область подгрудка или верхней трети шеи из расчета не более 1,5 мл в одно место в следующих дозах: 1 мл телятам в возрасте от 3 до 6 месяцев; 2 мл телятам в возрасте от 6 до 12 месяцев; 3 мл телятам старше года, коровам и быкам-производителям. У вакцинированных животных на месте введения вакцины образуется уплотнение размером до 3х4 см, которое постепенно рассасывается в течение 4-8 месяцев. Иммунитет у привитых животных создается через 30 сут. после вакцинации и сохраняется в течение 12 месяцев. Срок годности вакцины 1,5 года. Проведены испытания 6 экспериментальных и 3 опытно-промышленных серий инактивированной эмульсионной вакцины против хламидиоза крупного рогатого скота на антигенную и иммуногенную активность. Экспериментальные серии вакцины были испытаны в опытах на лабораторных животных и нетелях. Белых мышей массой 16-18 г вакцинировали двукратно подкожно с интервалом 7 дней в дозе 0,1-0,15 мл. Через 21-28 дней после вакцинации мышей заражали возбудителем хламидиозного аборта коров (штамм "250") внутрибрюшинно в дозе 0,3-0,5 мл 10%-й взвесью возбудителя. Одновременно с иммунизированными мышами инфицировали интактных (контрольных) мышей аналогичного возраста. Результаты проведенных шести серий опытов (табл. 1) показали, что выживаемость предварительно вакцинированных мышей после контрольного заражения вирулентной культурой хламидий колебалась в пределах 86-92,3% (88,61,2% ). При этом в контрольной группе отмечалась гибель от 66,7 до 88% мышей (78,7% ). Следовательно, вакцина обладает высокой иммуногенностью и обеспечивает устойчивость вакцинированных мышей к искусственному заражению вирулентной культурой хламидий. В опытах на нетелях в экспериментальных условиях было установлено, что двукратное подкожное введение вакцины в дозе по 1,5 мл нетелям предохраняет их от развития хламидиозного аборта крупного рогатого скота после контрольного заражения вирулентным штаммом хламидий "250" (табл. 2). В условиях Херсонской биофабрики согласно разработанной нами технологии было изготовлено 3 опытно-промышленные серии вакцины против хламидиоза крупного рогатого скота. Производственный контроль стерильности, безвредности и иммуногенной активности, их приемку, а также заключение о промышленном производстве было сделано согласно приказу ГУВ СССР N 57 от 5.06.90 г. При этом было установлено, что все три изготовленные опытно-промышленные серии вакцины являются стерильными, безвредными и иммуногенными препаратами (Акт Херсонской биофабрики от 24 мая 1990 г.). Производственные испытания вакцины, изготовленной на Херсонской биофабрике, проводили в девяти неблагополучных по хламидиозу хозяйствах ТССР и Владимирской области. При этом было вакцинировано 6862 гол. крупного рогатого скота, в том числе 3715 коров, 79 быков-производителей и 3068 телят и телок случного возраста. Результаты испытания вакцины в полевых условиях обобщены в табл. 3 и 4. Из приведенных в табл. 3 данных видно, что через месяц после вакцинации у 100% вакцинированных животных выявлена серопозитивность в РСК к хламидийному антигену. Средний арифметический титр специфических хламидийных антител при этом колебался в пределах 1:65 1:87. Через 6 месяцев положительно на хламидиоз по РСК реагировали от 90 до 93,6% вакцинированных животных со средним арифметическим титром 1:12 1:14. Через 12 месяцев серопозитивность к хламидиозному антигену сохранилась у 50-60% крупного рогатого скота со средним комплементсвязывающих антител 1:7 1:10. Таким образом вакцинация животных обусловливает их серопозитивность к хламидиозному антигену. Максимальный уровень антител (титры 1:10 1:160) формируется через 30-35 дней после вакцинации и сохраняется на высоком уровне у 90-93,6% животных в течение 6 месяцев; затем происходит постепенное снижение уровня серопозитивности к 12 месяцам после иммунизации. Оценку эффективности вакцинации крупного рогатого скота в полевых условиях проводили сравнивая количество абортов и мертворождений среди коров и нетелей, а также количества падежа и вынужденного убоя телят в неблагополучных хозяйствах до вакцинации (1989 г.) и после вакцинации (1990, 1991 гг. ). Из приведенных в табл. 4 данных видно, что количество абортов и мертворождений в пяти хозяйствах до вакцинации составили в среднем 6% падеж и вынужденный убой 10% Общие потери молодняка составили в среднем 16% После применения вакцины количество абортов и мертворождений в этих же хозяйствах уменьшилось в 5,4 раза и составило лишь 1,1% Одновременно в 3,7 раза сократилась заболеваемость и вынужденный убой телят от хламидиозной инфекции. Общие потери молодняка после вакцинации составили 3,7% что в 4,2 раза меньше, чем до применения вакцины в этих хозяйствах. Следовательно, вакцина в условиях неблагополучного по хламидиозу крупного рогатого скота хозяйства до минимума сокращает количество абортов и мертворождаемости, значительно уменьшает заболеваемость и гибель телят от хламидиозной инфекции, улучшает эпизоотическую обстановку по хламидиозу и таким образом обеспечивает повышение продуктивности животных. Ввиду того, что предлагаемое изобретение обладает признаками патентоспособности вакцина для специфической профилактики хламидиоза крупного рогатого скота может быть представлена для загранпатентования. Внедрение вакцины в ветеринарную практику позволит животноводческим хозяйствам предотвратить экономические потери, обусловленные недополучением до 20% телят за счет абортов, мертворождений у коров и нетелей, падежа и вынужденного убоя телят, а также стабилизации привесов на откорме животных и сохранение уровня удоя молока лактирующими коровами.

Формула изобретения

Вакцина для специфической профилактики хламидиоза крупного рогатого скота, содержащая инактивированный антиген Chlamydia psittaci, адъювант и консервант, отличающаяся тем, что содержит инактивированный и очищенный хламидийный антиген из штамма Chlamydia psittaci "250" возбудителя аборта коров в концентрации 15 20 мг/мл, адсорбированный на алюмокалиевых квасцах и эмульгированный в масляно-ланолиновом адъюванте, а в качестве консерванта - формальдегид при следующих соотношениях компонентов, мас. Инактивированный и очищенный хламидийный антиген из штамма Chlamydia psittaci "250" возбудителя аборта коров 45 50 Алюмокалиевые квасцы 0,2 0,3 Масляно-ланолиновый адъювант 45 55 Формальдегид 0,04 0,06о

РИСУНКИ

Рисунок 1, Рисунок 2, Рисунок 3, Рисунок 4

www.findpatent.ru


Смотрите также




г.Самара, ул. Димитрова 131
[email protected]