Забыли пароль?
Регистрация
О компании
Доставка
Каталог товаров  
Контакты
Задать вопрос
Как сделать заказ
Рекомендации
Партнёрам
Получить консультацию

Вакцина против бруцеллеза крупного рогатого скота. Вакцина против бруцеллеза крс


Вакцина против бруцеллеза крупного рогатого скота

 

Вакцина предназначена для специфической профилактики бруцеллеза крупного рогатого скота. В качестве антигена вакцина содержит бактериальную массу нового вакцинного штамма Brucella abortus 75/79АВ - ДЕП ВГНКИ. В состав вакцины входит также желатиновый стабилизатор. Использование новой вакцины в ветеринарной практике расширяет ассортимент средств специфической профилактики бруцеллеза и позволяет в 1,5-2 раза повысить эффективность противобруцеллезных мероприятий. 3 табл.

Изобретение относится к биотехнологии, в частности к препаратам, применяемым для специфической профилактики бруцеллеза крупного рогатого скота.

Эффективность борьбы с бруцеллезом крупного рогатого скота во многом определяется средствами специфической профилактики данной болезни. В настоящее время для специфической профилактики бруцеллеза крупного рогатого скота применяют в основном живую противобруцеллезную вакцину из штамма B. abortus 82, содержащую антиген (живые микробные клетки) и сахарозо-желатиновый стабилизатор. К недостаткам вакцины из штамма B.abortus 82 относятся нестабильность, обусловленная нестабильностью свойств вакцинного штамма, абортогенность, исключающая возможность иммунизации стельных животных, и низкая иммуногенность [1]. Для приготовления вакцины против бруцеллеза крупного рогатого скота был предложен штамм B.abortus 75/79A, отличающийся от штамма 82 меньшей агглютиногенностью и отсутствием абортогенности [2]. Однако при дальнейшем изучении свойств данного штамма было установлено, что по ряду причин, в частности недостаточно высокой иммуногенности для крупного рогатого скота [1], сложности культивирования и относительно невысокой стабильности культуральных свойств, он не может быть рекомендован для изготовления противобруцеллезной вакцины. Целью изобретения является получение слабоагглютиногенной, неабортогенной, высокоиммуногенной живой вакцины из штамма бруцелл, обладающего стабильными свойствами. Цель достигается тем, что вакцина в качестве антигена содержит бактериальную массу штамма B.abortus 75/79AB при следующем содержании компонентов, мас./об.%: Бактериальная масса из штамма B.abortus - 10-40 г (125
1011 - 5001011 микр.клеток) Сахароза - 6,0 - 9,0 г Желатин пищевой - 0,9 - 0,135 г Дистиллированная вода - Остальное до 100 см3 Штамм B.abortus 75/79 AB, используемый для изготовления вакцины, получен из культуры штамма B.abortus 75/79A посредством пятикратного пассажа через организм крупного рогатого скота с последующей целенаправленной селекцией по культуральным, морфологическим, антигенным и иммуногенным свойствам. Штамм B.abortus 75/79 AB депонирован в ВГНКИ за номером 75/79 AB-ДЕП. Штамм характеризуется следующими признаками и свойствами. Морфологические признаки. Короткие грамотрицательные палочки с закругленными концами, расположенные поодиночке или парами, без спор и капсул. Размер 1,2 - 1,3 мкм, ширина 0,5 - 0,6 мкм. Культурные свойства. Культура штамма хорошо растет на плотных и жидких питательных средах: мясо-пептонном печеночном глюкозоглицериновом агаре (МППГГА), МППГГА с добавлением перевара Хоттингера, МППГТБ в аэробных условиях (не требует для культивирования повышенного процентного содержания CO2). На МППГГА (4-5 сутки инкубирования при 37-38oC) растет в виде круглых, выпуклых, шероховатых, с нечетко контурированным краем, прозрачных с голубовато-зеленоватым оттенком колоний диаметром 2,5 - 3,0 мм. При окрашивании раствором кристаллического фиолетового 1/2000 (по Уайт-Вилсону) 100% колоний окрашивается как RS-форма: по фиолетовому фону желтая исчерченность в виде 8-10 трещин слоя краски, расположенных в центре колонии. Культура дает положительную пробу с акрифлавином и положительную реакцию термоагглютинации. Культура штамма растет на МППГГА, содержащем фуксин, тионин в концентрации 1:50000, натриевую соль бензилпенициллина в концентрации 5 ЕД/см3, эритритол - 1 мг/см3, и не растет на среде, содержащей 5 мкг/см3 стрептомицина сульфат. Продуцирует h3S(8-10 мм). Лизируется фагом Тб. Агглютинабельные свойства. Культура штамма агглютинируется S- и R-антибруцеллезными сыворотками, А-моноспецифической сывороткой в титре 1:10 и не агглютинируется М-моноспецифической сывороткой. Антигенные свойства. При введении культуры штамма крупному рогатому скоту (50-200 млрд.клеток) у животных вырабатываются специфические S- и R-бруцеллезные антитела, выявляемые S и R-бруцеллезными антигенами в серологических реакциях, принятых для диагностики бруцеллеза (РА, РСК, РДСК). Безвредность. Штамм 75/79 АВ безвреден для лабораторных животных и крупного рогатого скота. При введении мышам 250 млн и морским свинкам 2 млрд микробных клеток не вызывает патологоанатомических изменений, характерных для бруцеллезной инфекции. При подкожном введении крупному рогатому скоту до 200 млрд микробных клеток не вызывает аборты и бруцеллезную инфекцию. Бруцеллы штамма 75/79 АВ не мигрируют от вакцинированных животных к интактным. Пример 1. Штамм B.abortus 75/79 АВ культивируют на плотной питательной среде или в ферментере на жидкой питательной среде. К 10-40 г бактериальной массы добавляют 90-60 см3 (до 100 см3) сахарозо-желатинового стабилизатора, содержащего 10.0% сахарозы в дистиллированной воде и 1,5% желатина, устанавливают концентрацию бакмассы, равную 125
1011 - 5001011 микробных клеток. Готовую вакцину расфасовывают в ампулы (или флаконы) и консервируют, лиофильно высушивая. Готовая вакцина представляет собой сухую пористую массу светло-коричневого или светло-желтого цвета, укупоренную в ампулу под вакуумом или во флаконы под азотом, хорошо растворяющуюся в физиологическом растворе. Полученная вакцина имеет следующий компонентный состав (табл.1). Пример 2. Полученную вакцину серий 1-3 испытывают на антигенную активность в сравнении с экспериментальной вакциной штамма B.abortus 75/79 АВ (прототип) и коммерческой вакциной из штамма B.abortus 82 (аналог). Противобруцеллезные вакцины вводят телкам в возрасте 4-5 месяцев под кожу в область задней трети шеи. Вакцину из штамма B.abortus 75/79 AB в дозах 50, 100 и 200 млрд микробных клеток, из штамма 82 и 75/79 A в дозе 100 млрд микробных клеток в объеме 5 см3. Каждым препаратом прививают 10-12 животных. Спустя 30,60,90,180,270 и 350 дней после иммунизации у животных берут кровь и исследуют серологическими методами (РБП, РА, РСК с S-бруцеллезными антигенами). Результаты испытаний антигенных свойств вакцин приведены в табл.2. Из табл. 2 видно, что вакцина из штамма 75/79 AB имеет преимущества перед экспериментальной из штамма 75/79A и вакциной из штамма 82. Спустя три месяца после иммунизации живой вакциной из штамма 75/79 AB можно проводить исследования на бруцеллез в принятых диагностических реакциях и выявлять заразившихся бруцеллезом животных. Телки, иммунизированные вакциной штамма 75/79 A (прототип) и вакциной из штамма 82 (аналог), дольше содержали в крови антитела, улавливаемые S-бруцеллезными антигенами, что затрудняет дифференциацию иммунных животных от заразившихся и оздоровление поголовья. Пример 3. Вакцину из штамма 75/79 AB серий 1-3 испытывали на иммуногенную активность в сравнении с вакцинами из штаммов 75/79 A и 82. Телок в возрасте 4-6 мес иммунизируют испытуемой вакциной в дозах 50, 100, 200 млрд микробных клеток. Вакцинами из штамма 75/79 A и из штамма 82 в дозе 100 млрд микробных клеток. Вакцины вводят в объеме 5 см3 под кожу в область задней трети шеи. Каждым препаратом иммунизируют 7-10 телок. Через 10 мес после вакцинации животных заражают стандартной культурой контрольного вирулентного штамма Б. абортус 54М/ВГНКИ в дозе 15 млн микробных клеток. Культуру вирулентного штамма наносят на конъюнктиву обоих глаз по 7,5 млн микробных клеток в объеме 0.1 см3. Спустя 42-45 дней после заражения животных убивают и проводят бактериологическое исследование лимфатических узлов и внутренних органов (30-35 объектов). Критерием оценки заражения животных служит наличие бруцелл вирулентного штамма в лимфатических узлах и внутренних органах вакцинированных животных. Результаты испытания приведены в табл.3. Из табл. 3 видно, что предложенная вакцина, содержащая антиген из штамма Б. абортус 75/79 AB, обеспечивает защиту 90-100% иммунизированных животных и по этому показателю значительно превосходит вакцинный штамм Б.абортус 75/79 A и вакцину из штамма 82. Пример 4. Испытания абортогенности (безвредности для стельных животных) проводят на 195 коровах и 64 нетелях со стельностью от 2-х до 6 мес. Испытуемую вакцину из штамма Б абортус 75/79 AB вводят в дозе 100 млрд микробных клеток в объеме 5 см3 под кожу в область задней трети шеи. За вакцинированными животными наблюдают в течение 7 мес. В результате испытания установлено, что у всех животных отелы прошли нормально. Испытуемая вакцина не вызывает аборты у стельных коров и может быть использована для иммунизации коров независимо от срока стельности. Использование предложенной вакцины в ветеринарной практике позволит повысить эффективность специфической профилактики бруцеллеза крупного рогатого скота и расширить ассортимент высокоэффективных биопрепаратов против данного заболевания. Литература: 1. Апробация вакцины из штамма 75/79A Br.abortus на крупном рогатом скоте. Никифоров И.П. и др./Ветеринария, 1995, N 8, c.20-22. 2. Авторское свидетельство SU 1701743 Al.Штамм бактерий Brucella abortus, используемый для приготовления вакцины против бруцеллеза крупного рогатого скота.

Формула изобретения

Вакцина против бруцеллеза крупного рогатого скота, содержащая антиген бруцелл и водный сахарозо-желатиновый стабилизатор, отличающаяся тем, что она в качестве антигена содержит бактериальную массу штамма Brucella abortus 75/79 AB - ДЕП ВГНКИ при следующем содержании компонентов: Сахороза, г - 6,0 - 9,0 Желатин пищевой, г - 0,9 - 1,35 Бактериальная масса штамма Brucella abortus 75/79 AB - ДЕП ВГНКИ г (микр.клетки) - 10 - 40 (1251011 - 5001011 м.к.) Вода дистиллированная, см3 - До 1005

РИСУНКИ

Рисунок 1, Рисунок 2, Рисунок 3

NF4A Восстановление действия патента Российской Федерации на изобретение

Номер и год публикации бюллетеня: 32-2003

Извещение опубликовано: 20.11.2003        

www.findpatent.ru

Вакцина против бруцеллеза крупного рогатого скота

Вакцина предназначена для специфической профилактики бруцеллеза крупного рогатого скота. В качестве антигена вакцина содержит бактериальную массу нового вакцинного штамма Brucella abortus 75/79АВ - ДЕП ВГНКИ. В состав вакцины входит также желатиновый стабилизатор. Использование новой вакцины в ветеринарной практике расширяет ассортимент средств специфической профилактики бруцеллеза и позволяет в 1,5-2 раза повысить эффективность противобруцеллезных мероприятий. 3 табл.

Изобретение относится к биотехнологии, в частности к препаратам, применяемым для специфической профилактики бруцеллеза крупного рогатого скота. Эффективность борьбы с бруцеллезом крупного рогатого скота во многом определяется средствами специфической профилактики данной болезни. В настоящее время для специфической профилактики бруцеллеза крупного рогатого скота применяют в основном живую противобруцеллезную вакцину из штамма B. abortus 82, содержащую антиген (живые микробные клетки) и сахарозо-желатиновый стабилизатор. К недостаткам вакцины из штамма B.abortus 82 относятся нестабильность, обусловленная нестабильностью свойств вакцинного штамма, абортогенность, исключающая возможность иммунизации стельных животных, и низкая иммуногенность [1]. Для приготовления вакцины против бруцеллеза крупного рогатого скота был предложен штамм B.abortus 75/79A, отличающийся от штамма 82 меньшей агглютиногенностью и отсутствием абортогенности [2]. Однако при дальнейшем изучении свойств данного штамма было установлено, что по ряду причин, в частности недостаточно высокой иммуногенности для крупного рогатого скота [1], сложности культивирования и относительно невысокой стабильности культуральных свойств, он не может быть рекомендован для изготовления противобруцеллезной вакцины. Целью изобретения является получение слабоагглютиногенной, неабортогенной, высокоиммуногенной живой вакцины из штамма бруцелл, обладающего стабильными свойствами. Цель достигается тем, что вакцина в качестве антигена содержит бактериальную массу штамма B.abortus 75/79AB при следующем содержании компонентов, мас./об.%:Бактериальная масса из штамма B.abortus - 10-40 г (125·1011 - 500·1011 микр.клеток)Сахароза - 6,0 - 9,0 гЖелатин пищевой - 0,9 - 0,135 гДистиллированная вода - Остальное до 100 см3Штамм B.abortus 75/79 AB, используемый для изготовления вакцины, получен из культуры штамма B.abortus 75/79A посредством пятикратного пассажа через организм крупного рогатого скота с последующей целенаправленной селекцией по культуральным, морфологическим, антигенным и иммуногенным свойствам. Штамм B.abortus 75/79 AB депонирован в ВГНКИ за номером 75/79 AB-ДЕП. Штамм характеризуется следующими признаками и свойствами. Морфологические признаки. Короткие грамотрицательные палочки с закругленными концами, расположенные поодиночке или парами, без спор и капсул. Размер 1,2 - 1,3 мкм, ширина 0,5 - 0,6 мкм. Культурные свойства. Культура штамма хорошо растет на плотных и жидких питательных средах: мясо-пептонном печеночном глюкозоглицериновом агаре (МППГГА), МППГГА с добавлением перевара Хоттингера, МППГТБ в аэробных условиях (не требует для культивирования повышенного процентного содержания CO2). На МППГГА (4-5 сутки инкубирования при 37-38oC) растет в виде круглых, выпуклых, шероховатых, с нечетко контурированным краем, прозрачных с голубовато-зеленоватым оттенком колоний диаметром 2,5 - 3,0 мм. При окрашивании раствором кристаллического фиолетового 1/2000 (по Уайт-Вилсону) 100% колоний окрашивается как RS-форма: по фиолетовому фону желтая исчерченность в виде 8-10 трещин слоя краски, расположенных в центре колонии. Культура дает положительную пробу с акрифлавином и положительную реакцию термоагглютинации. Культура штамма растет на МППГГА, содержащем фуксин, тионин в концентрации 1:50000, натриевую соль бензилпенициллина в концентрации 5 ЕД/см3, эритритол - 1 мг/см3, и не растет на среде, содержащей 5 мкг/см3 стрептомицина сульфат. Продуцирует h3S(8-10 мм). Лизируется фагом Тб. Агглютинабельные свойства. Культура штамма агглютинируется S- и R-антибруцеллезными сыворотками, А-моноспецифической сывороткой в титре 1:10 и не агглютинируется М-моноспецифической сывороткой. Антигенные свойства. При введении культуры штамма крупному рогатому скоту (50-200 млрд.клеток) у животных вырабатываются специфические S- и R-бруцеллезные антитела, выявляемые S и R-бруцеллезными антигенами в серологических реакциях, принятых для диагностики бруцеллеза (РА, РСК, РДСК). Безвредность. Штамм 75/79 АВ безвреден для лабораторных животных и крупного рогатого скота. При введении мышам 250 млн и морским свинкам 2 млрд микробных клеток не вызывает патологоанатомических изменений, характерных для бруцеллезной инфекции. При подкожном введении крупному рогатому скоту до 200 млрд микробных клеток не вызывает аборты и бруцеллезную инфекцию. Бруцеллы штамма 75/79 АВ не мигрируют от вакцинированных животных к интактным. Пример 1. Штамм B.abortus 75/79 АВ культивируют на плотной питательной среде или в ферментере на жидкой питательной среде. К 10-40 г бактериальной массы добавляют 90-60 см3 (до 100 см3) сахарозо-желатинового стабилизатора, содержащего 10.0% сахарозы в дистиллированной воде и 1,5% желатина, устанавливают концентрацию бакмассы, равную 125·1011 - 500·1011 микробных клеток. Готовую вакцину расфасовывают в ампулы (или флаконы) и консервируют, лиофильно высушивая. Готовая вакцина представляет собой сухую пористую массу светло-коричневого или светло-желтого цвета, укупоренную в ампулу под вакуумом или во флаконы под азотом, хорошо растворяющуюся в физиологическом растворе. Полученная вакцина имеет следующий компонентный состав (табл.1). Пример 2. Полученную вакцину серий 1-3 испытывают на антигенную активность в сравнении с экспериментальной вакциной штамма B.abortus 75/79 АВ (прототип) и коммерческой вакциной из штамма B.abortus 82 (аналог). Противобруцеллезные вакцины вводят телкам в возрасте 4-5 месяцев под кожу в область задней трети шеи. Вакцину из штамма B.abortus 75/79 AB в дозах 50, 100 и 200 млрд микробных клеток, из штамма 82 и 75/79 A в дозе 100 млрд микробных клеток в объеме 5 см3. Каждым препаратом прививают 10-12 животных. Спустя 30,60,90,180,270 и 350 дней после иммунизации у животных берут кровь и исследуют серологическими методами (РБП, РА, РСК с S-бруцеллезными антигенами). Результаты испытаний антигенных свойств вакцин приведены в табл.2. Из табл. 2 видно, что вакцина из штамма 75/79 AB имеет преимущества перед экспериментальной из штамма 75/79A и вакциной из штамма 82. Спустя три месяца после иммунизации живой вакциной из штамма 75/79 AB можно проводить исследования на бруцеллез в принятых диагностических реакциях и выявлять заразившихся бруцеллезом животных. Телки, иммунизированные вакциной штамма 75/79 A (прототип) и вакциной из штамма 82 (аналог), дольше содержали в крови антитела, улавливаемые S-бруцеллезными антигенами, что затрудняет дифференциацию иммунных животных от заразившихся и оздоровление поголовья. Пример 3. Вакцину из штамма 75/79 AB серий 1-3 испытывали на иммуногенную активность в сравнении с вакцинами из штаммов 75/79 A и 82. Телок в возрасте 4-6 мес иммунизируют испытуемой вакциной в дозах 50, 100, 200 млрд микробных клеток. Вакцинами из штамма 75/79 A и из штамма 82 в дозе 100 млрд микробных клеток. Вакцины вводят в объеме 5 см3 под кожу в область задней трети шеи. Каждым препаратом иммунизируют 7-10 телок. Через 10 мес после вакцинации животных заражают стандартной культурой контрольного вирулентного штамма Б. абортус 54М/ВГНКИ в дозе 15 млн микробных клеток. Культуру вирулентного штамма наносят на конъюнктиву обоих глаз по 7,5 млн микробных клеток в объеме 0.1 см3. Спустя 42-45 дней после заражения животных убивают и проводят бактериологическое исследование лимфатических узлов и внутренних органов (30-35 объектов). Критерием оценки заражения животных служит наличие бруцелл вирулентного штамма в лимфатических узлах и внутренних органах вакцинированных животных. Результаты испытания приведены в табл.3. Из табл. 3 видно, что предложенная вакцина, содержащая антиген из штамма Б. абортус 75/79 AB, обеспечивает защиту 90-100% иммунизированных животных и по этому показателю значительно превосходит вакцинный штамм Б.абортус 75/79 A и вакцину из штамма 82. Пример 4. Испытания абортогенности (безвредности для стельных животных) проводят на 195 коровах и 64 нетелях со стельностью от 2-х до 6 мес. Испытуемую вакцину из штамма Б абортус 75/79 AB вводят в дозе 100 млрд микробных клеток в объеме 5 см3 под кожу в область задней трети шеи. За вакцинированными животными наблюдают в течение 7 мес. В результате испытания установлено, что у всех животных отелы прошли нормально. Испытуемая вакцина не вызывает аборты у стельных коров и может быть использована для иммунизации коров независимо от срока стельности. Использование предложенной вакцины в ветеринарной практике позволит повысить эффективность специфической профилактики бруцеллеза крупного рогатого скота и расширить ассортимент высокоэффективных биопрепаратов против данного заболевания. Литература:1. Апробация вакцины из штамма 75/79A Br.abortus на крупном рогатом скоте. Никифоров И.П. и др./Ветеринария, 1995, N 8, c.20-22. 2. Авторское свидетельство SU 1701743 Al.Штамм бактерий Brucella abortus, используемый для приготовления вакцины против бруцеллеза крупного рогатого скота.

Формула изобретения

Вакцина против бруцеллеза крупного рогатого скота, содержащая антиген бруцелл и водный сахарозо-желатиновый стабилизатор, отличающаяся тем, что она в качестве антигена содержит бактериальную массу штамма Brucella abortus 75/79 AB - ДЕП ВГНКИ при следующем содержании компонентов:Сахороза, г - 6,0 - 9,0Желатин пищевой, г - 0,9 - 1,35Бактериальная масса штамма Brucella abortus 75/79 AB - ДЕП ВГНКИ г (микр.клетки) - 10 - 40 (125·1011 - 500·1011 м.к.)Вода дистиллированная, см3 - До 1005

MM4A Досрочное прекращение действия патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе

Номер и год публикации бюллетеня: 16-2002

Извещение опубликовано: 10.06.2002        

NF4A Восстановление действия патента Российской Федерации на изобретение

Номер и год публикации бюллетеня: 32-2003

Извещение опубликовано: 20.11.2003        

QB4A Регистрация лицензионного договора на использование изобретения

Лицензиар(ы): Шумилов Константин Васильевич

Вид лицензии*: НИЛ

Лицензиат(ы): Федеральное государственное унитарное предприятие "Щелковский биокомбинат"

Договор № РД0023428 зарегистрирован 21.06.2007

Извещение опубликовано: 10.08.2007        БИ: 22/2007

* ИЛ - исключительная лицензия        НИЛ - неисключительная лицензия

MM4A Досрочное прекращение действия патента из-за неуплаты в установленный срок пошлины заподдержание патента в силе

Дата прекращения действия патента: 14.05.2012

Дата публикации: 27.04.2013

bankpatentov.ru

вакцина против бруцеллеза крупного рогатого скота - патент РФ 2113857

Вакцина предназначена для специфической профилактики бруцеллеза крупного рогатого скота. В качестве антигена вакцина содержит бактериальную массу нового вакцинного штамма Brucella abortus 75/79АВ - ДЕП ВГНКИ. В состав вакцины входит также желатиновый стабилизатор. Использование новой вакцины в ветеринарной практике расширяет ассортимент средств специфической профилактики бруцеллеза и позволяет в 1,5-2 раза повысить эффективность противобруцеллезных мероприятий. 3 табл. Изобретение относится к биотехнологии, в частности к препаратам, применяемым для специфической профилактики бруцеллеза крупного рогатого скота. Эффективность борьбы с бруцеллезом крупного рогатого скота во многом определяется средствами специфической профилактики данной болезни. В настоящее время для специфической профилактики бруцеллеза крупного рогатого скота применяют в основном живую противобруцеллезную вакцину из штамма B. abortus 82, содержащую антиген (живые микробные клетки) и сахарозо-желатиновый стабилизатор. К недостаткам вакцины из штамма B.abortus 82 относятся нестабильность, обусловленная нестабильностью свойств вакцинного штамма, абортогенность, исключающая возможность иммунизации стельных животных, и низкая иммуногенность [1]. Для приготовления вакцины против бруцеллеза крупного рогатого скота был предложен штамм B.abortus 75/79A, отличающийся от штамма 82 меньшей агглютиногенностью и отсутствием абортогенности [2]. Однако при дальнейшем изучении свойств данного штамма было установлено, что по ряду причин, в частности недостаточно высокой иммуногенности для крупного рогатого скота [1], сложности культивирования и относительно невысокой стабильности культуральных свойств, он не может быть рекомендован для изготовления противобруцеллезной вакцины. Целью изобретения является получение слабоагглютиногенной, неабортогенной, высокоиммуногенной живой вакцины из штамма бруцелл, обладающего стабильными свойствами. Цель достигается тем, что вакцина в качестве антигена содержит бактериальную массу штамма B.abortus 75/79AB при следующем содержании компонентов, мас./об.%: Бактериальная масса из штамма B.abortus - 10-40 г (125вакцина против бруцеллеза крупного рогатого скота, патент № 21138571011 - 500вакцина против бруцеллеза крупного рогатого скота, патент № 21138571011 микр.клеток) Сахароза - 6,0 - 9,0 г Желатин пищевой - 0,9 - 0,135 г Дистиллированная вода - Остальное до 100 см3 Штамм B.abortus 75/79 AB, используемый для изготовления вакцины, получен из культуры штамма B.abortus 75/79A посредством пятикратного пассажа через организм крупного рогатого скота с последующей целенаправленной селекцией по культуральным, морфологическим, антигенным и иммуногенным свойствам. Штамм B.abortus 75/79 AB депонирован в ВГНКИ за номером 75/79 AB-ДЕП. Штамм характеризуется следующими признаками и свойствами. Морфологические признаки. Короткие грамотрицательные палочки с закругленными концами, расположенные поодиночке или парами, без спор и капсул. Размер 1,2 - 1,3 мкм, ширина 0,5 - 0,6 мкм. Культурные свойства. Культура штамма хорошо растет на плотных и жидких питательных средах: мясо-пептонном печеночном глюкозоглицериновом агаре (МППГГА), МППГГА с добавлением перевара Хоттингера, МППГТБ в аэробных условиях (не требует для культивирования повышенного процентного содержания CO2). На МППГГА (4-5 сутки инкубирования при 37-38oC) растет в виде круглых, выпуклых, шероховатых, с нечетко контурированным краем, прозрачных с голубовато-зеленоватым оттенком колоний диаметром 2,5 - 3,0 мм. При окрашивании раствором кристаллического фиолетового 1/2000 (по Уайт-Вилсону) 100% колоний окрашивается как RS-форма: по фиолетовому фону желтая исчерченность в виде 8-10 трещин слоя краски, расположенных в центре колонии. Культура дает положительную пробу с акрифлавином и положительную реакцию термоагглютинации. Культура штамма растет на МППГГА, содержащем фуксин, тионин в концентрации 1:50000, натриевую соль бензилпенициллина в концентрации 5 ЕД/см3, эритритол - 1 мг/см3, и не растет на среде, содержащей 5 мкг/см3 стрептомицина сульфат. Продуцирует h3S(8-10 мм). Лизируется фагом Тб. Агглютинабельные свойства. Культура штамма агглютинируется S- и R-антибруцеллезными сыворотками, А-моноспецифической сывороткой в титре 1:10 и не агглютинируется М-моноспецифической сывороткой. Антигенные свойства. При введении культуры штамма крупному рогатому скоту (50-200 млрд.клеток) у животных вырабатываются специфические S- и R-бруцеллезные антитела, выявляемые S и R-бруцеллезными антигенами в серологических реакциях, принятых для диагностики бруцеллеза (РА, РСК, РДСК). Безвредность. Штамм 75/79 АВ безвреден для лабораторных животных и крупного рогатого скота. При введении мышам 250 млн и морским свинкам 2 млрд микробных клеток не вызывает патологоанатомических изменений, характерных для бруцеллезной инфекции. При подкожном введении крупному рогатому скоту до 200 млрд микробных клеток не вызывает аборты и бруцеллезную инфекцию. Бруцеллы штамма 75/79 АВ не мигрируют от вакцинированных животных к интактным. Пример 1. Штамм B.abortus 75/79 АВ культивируют на плотной питательной среде или в ферментере на жидкой питательной среде. К 10-40 г бактериальной массы добавляют 90-60 см3 (до 100 см3) сахарозо-желатинового стабилизатора, содержащего 10.0% сахарозы в дистиллированной воде и 1,5% желатина, устанавливают концентрацию бакмассы, равную 125вакцина против бруцеллеза крупного рогатого скота, патент № 21138571011 - 500вакцина против бруцеллеза крупного рогатого скота, патент № 21138571011 микробных клеток. Готовую вакцину расфасовывают в ампулы (или флаконы) и консервируют, лиофильно высушивая. Готовая вакцина представляет собой сухую пористую массу светло-коричневого или светло-желтого цвета, укупоренную в ампулу под вакуумом или во флаконы под азотом, хорошо растворяющуюся в физиологическом растворе. Полученная вакцина имеет следующий компонентный состав (табл.1). Пример 2. Полученную вакцину серий 1-3 испытывают на антигенную активность в сравнении с экспериментальной вакциной штамма B.abortus 75/79 АВ (прототип) и коммерческой вакциной из штамма B.abortus 82 (аналог). Противобруцеллезные вакцины вводят телкам в возрасте 4-5 месяцев под кожу в область задней трети шеи. Вакцину из штамма B.abortus 75/79 AB в дозах 50, 100 и 200 млрд микробных клеток, из штамма 82 и 75/79 A в дозе 100 млрд микробных клеток в объеме 5 см3. Каждым препаратом прививают 10-12 животных. Спустя 30,60,90,180,270 и 350 дней после иммунизации у животных берут кровь и исследуют серологическими методами (РБП, РА, РСК с S-бруцеллезными антигенами). Результаты испытаний антигенных свойств вакцин приведены в табл.2. Из табл. 2 видно, что вакцина из штамма 75/79 AB имеет преимущества перед экспериментальной из штамма 75/79A и вакциной из штамма 82. Спустя три месяца после иммунизации живой вакциной из штамма 75/79 AB можно проводить исследования на бруцеллез в принятых диагностических реакциях и выявлять заразившихся бруцеллезом животных. Телки, иммунизированные вакциной штамма 75/79 A (прототип) и вакциной из штамма 82 (аналог), дольше содержали в крови антитела, улавливаемые S-бруцеллезными антигенами, что затрудняет дифференциацию иммунных животных от заразившихся и оздоровление поголовья. Пример 3. Вакцину из штамма 75/79 AB серий 1-3 испытывали на иммуногенную активность в сравнении с вакцинами из штаммов 75/79 A и 82. Телок в возрасте 4-6 мес иммунизируют испытуемой вакциной в дозах 50, 100, 200 млрд микробных клеток. Вакцинами из штамма 75/79 A и из штамма 82 в дозе 100 млрд микробных клеток. Вакцины вводят в объеме 5 см3 под кожу в область задней трети шеи. Каждым препаратом иммунизируют 7-10 телок. Через 10 мес после вакцинации животных заражают стандартной культурой контрольного вирулентного штамма Б. абортус 54М/ВГНКИ в дозе 15 млн микробных клеток. Культуру вирулентного штамма наносят на конъюнктиву обоих глаз по 7,5 млн микробных клеток в объеме 0.1 см3. Спустя 42-45 дней после заражения животных убивают и проводят бактериологическое исследование лимфатических узлов и внутренних органов (30-35 объектов). Критерием оценки заражения животных служит наличие бруцелл вирулентного штамма в лимфатических узлах и внутренних органах вакцинированных животных. Результаты испытания приведены в табл.3. Из табл. 3 видно, что предложенная вакцина, содержащая антиген из штамма Б. абортус 75/79 AB, обеспечивает защиту 90-100% иммунизированных животных и по этому показателю значительно превосходит вакцинный штамм Б.абортус 75/79 A и вакцину из штамма 82. Пример 4. Испытания абортогенности (безвредности для стельных животных) проводят на 195 коровах и 64 нетелях со стельностью от 2-х до 6 мес. Испытуемую вакцину из штамма Б абортус 75/79 AB вводят в дозе 100 млрд микробных клеток в объеме 5 см3 под кожу в область задней трети шеи. За вакцинированными животными наблюдают в течение 7 мес. В результате испытания установлено, что у всех животных отелы прошли нормально. Испытуемая вакцина не вызывает аборты у стельных коров и может быть использована для иммунизации коров независимо от срока стельности. Использование предложенной вакцины в ветеринарной практике позволит повысить эффективность специфической профилактики бруцеллеза крупного рогатого скота и расширить ассортимент высокоэффективных биопрепаратов против данного заболевания. Литература: 1. Апробация вакцины из штамма 75/79A Br.abortus на крупном рогатом скоте. Никифоров И.П. и др./Ветеринария, 1995, N 8, c.20-22. 2. Авторское свидетельство SU 1701743 Al.Штамм бактерий Brucella abortus, используемый для приготовления вакцины против бруцеллеза крупного рогатого скота.

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

Вакцина против бруцеллеза крупного рогатого скота, содержащая антиген бруцелл и водный сахарозо-желатиновый стабилизатор, отличающаяся тем, что она в качестве антигена содержит бактериальную массу штамма Brucella abortus 75/79 AB - ДЕП ВГНКИ при следующем содержании компонентов: Сахороза, г - 6,0 - 9,0 Желатин пищевой, г - 0,9 - 1,35 Бактериальная масса штамма Brucella abortus 75/79 AB - ДЕП ВГНКИ г (микр.клетки) - 10 - 40 (125вакцина против бруцеллеза крупного рогатого скота, патент № 21138571011 - 500вакцина против бруцеллеза крупного рогатого скота, патент № 21138571011 м.к.) Вода дистиллированная, см3 - До 1005

www.freepatent.ru

вакцина против бруцеллеза крупного рогатого скота - патент РФ 2108110

Вакцина предназначена для профилактики бруцеллеза крупного рогатого скота. Вакцина содержит в качестве антигена инактивированную с гидратом окиси алюминия бактериальную массу штамма B.abortus ВГНКИ N КВ 17/100. Вакцина содержит также неполный адьювант Фрейнда и физиологический раствор. Использование новой вакцины в ветеринарной практике позволяет в 1,5 - 2 раза повысить эффективность противобруцеллезных мероприятий за счет повышения иммуногености и снижения агглютиногенности вакцины. 2 табл. Изобретение относится к биотехнологии, в частности к вакцине для профилактики бруцеллеза крупного рогатого скота. Бруцеллез крупного рогатого скота - хроническое зооантропонозное заболевание, распространенное во многих странах мира, наносящее большой экономический ущерб скотоводству и представляющее серьезную опасность здоровью людей. Основным средством борьбы с бруцеллезом крупного рогатого скота, особенно в зонах его широкого распространения, является вакцинация всего поголовья и своевременное удаление из стада больных животных. Известна вакцина против бруцеллеза крупного рогатого скота, содержащая антиген из штамма Brucella abortus 19 и сахарозо-желатиновый стабилизатор [1]. Недостатками данной вакцины являются высокая агглютиногенность, так как в крови животных, иммунизированных данной вакциной в течение нескольких месяцев, а иногда и нескольких лет обнаруживают антитела в принятых для диагностики бруцеллеза серологических реакциях, что препятствует выявлению больных животных в вакцинированном стаде. Вакцину нельзя применять для иммунизации стельных коров, так как она вызывает аборты у отдельных животных. Известна также вакцина против бруцеллеза сельскохозяйственных животных, преимущественно крупного рогатого скота, содержащая инактивированный антиген из штамма Brucella melitensis N "Невский-13", неполный адъювант Фрейнда и физиологический раствор [2]. Недостатком данной вакцины является то, что в крови иммунизированных животных до 90-120 дней сохраняются агглютинирующие и комплеменсвязывающие антитела, улавливаемые в принятых для диагностики бруцеллеза серологических реакциях, которые препятствуют своевременному выявлению и удалению из стада больных бруцеллезом коров. Целью изобретения является разработка высокоиммуногенной вакцины против бруцеллеза крупного рогатого скота с низкой антигенной активностью. Цель достигается тем, что вакцина в качестве антигена содержит инактивированную с гидратом окиси алюминия бактериальную массу штамма B.abortus ВГНКИ N КВ 17/100 с концентрацией 300-400х109 бактерий в 1 см3, при следующем соотношении компонентов вакцины, об.%: инактивированная с гидратом окиси алюминия бактериальная масса штамма B.abortus N КВ 17/100 с концентрацией 300х109-400х109 микробных клеток в 1 см3 40-45,0; неполный адъювант Фрейда 50,0-55,0; физиологический раствор остальное. Для изготовления вакцины используют штамм Brucella abortus ВГНКИ N КВ 17/100. Штамм B. abortus N КВ 17/100 получен путем целенаправленной селекции по антигенности и иммуногенной активности. Штамм B. abortus депонирован в коллекции микроорганизмов Всероссийского государственного научно-исследовательского института контроля, стандартизации и сертификации ветеринарных препаратов, регистрационный номер КВ 17/100 ДЕП. Штамм B. abortus N КВ 17/100 характеризуется следующими признаками и свойствами. Морфологические признаки. Бруцеллы штамма - короткие грамотрицательные палочки с закругленными концами, расположенные изолированно, попарно и реже в виде коротких цепочек. Без капсулы, спор не образуют. Размер 1,3-1,5 х 0,6-0,8 мкм. Культуральные свойства. Культура штамма хорошо растет в аэробных условиях на плотных и жидких питательных средах, предназначенных для культивирования бруцелл. На плотных питательных средах (4-5 сут инкубирования при 37-38oС) растет в виде круглых, плоских, с нечетко контурированным краем, матовых колоний с диаметром 2,5-3,0 мм. При окрашивании раствором кристаллического фиолетового 1/2000 (по Уайт-Вилсону) 100% колоний окрашиваются как R-форма: фиолетовый центр и светлофиолетовый широкий ободок. На жидких питательных средах на 2-4 сут инкубирования: легкая опалесценция и узкое пристеночное голубоватое кольцо на границе среды. Биохимические свойства. Культура штамма растет на средах содержащих фуксин, тионин в концентрации 1: 50000, бис-трифенилангидрокарбинола оксалат в концентрации 1:100000 (маркер), пенициллин 5ЕД/см3 и не растет на среде, содержащей стрептомицина сульфат 5 мкг/см3. Продуцирует Н2S (6-8 мм). Лизируется фагом Тб. Агглютинабельные свойства. Культура штамма агглютинируется R-антибруцеллезной сывороткой и не агглютинируется S-антибруцеллезной сывороткой. Штамм не обладает типоспецифической агглютинабельностью и не агглютинируется А и М монорецепторными сыворотками. Безвредность. Штамм безвреден для человека и сельскохозяйственных животных. Вирулентность. Остаточная вирулентность: ИД для мышей линии С57 - Блек/6 - 5500 микробных клеток, что соответствует уровню аттенуированных вакцинных штаммов. Иммуногенность. Культура штамма защищает от заражения не менее 50% иммунизированных животных. Пример 1. Штамм Brucella abortus ВГНКИ N КВ 17/100 культивируют на плотной питательной среде или в ферментере на жидкой питательной среде при 37-38oС в течение 72 ч. Выращенную культуру с плотной питательной среды смывают физиологическим раствором, добавляют 0,3-0,5% формалина и 0,3-0,5% гидрата окиси алюминия, формалин и гидрат окиси алюминия вносят в ферментер сразу после окончания культивирования. После инактивации бактериальную массу отстаивают, декантируют надосадочную жидкость и устанавливают концентрацию бактериальной массы, равную 300-400х109 микробных клеток в 1 см3. Инактивированную с гидратом окиси алюминия бактериальную массу штамма B.abortus ВГНКИ N КВ 17/100 в количестве 40-45% от объема смешивают с неполным адъювантом Фрейнда в количестве 45-55% от объема с доведением до 100% физиологическим раствором. Вакцину расфасовывают во флаконы при включенной мешалке. Флаконы закрывают резиновыми пробками, обкатывают металлическими колпачками и этикетируют. Расфасованную вакцину проверяют на стерильность, безвредность и иммуногенность. Готовая вакцина представляет собой однородную водно-масляную эмульсию белого цвета с коричневым или серым оттенком. При длительном хранении возможно незначительное отслоение адъюванта над эмульсией, что не влияет на качество вакцины. Получают 3 серии вакцины, приведенные в табл. 1. Пример 2. Определяют антигенную активность адъювант-вакцины. Морских свинок (10-14 голов в группе) иммунизируют адъювант-вакциной из штамма B.abortus ВГНКИ N КВ 17/100 (серии N 1, 2, 3), полученной по примеру 1; адъювант-вакциной из штамма B.melitensis N Н-13, экспериментальной адъювант-вакциной из штамма B.abortus N 16/4 (штамм в R-форме) и живой противобруцеллезной вакциной из штамма B.abortus N 19. Адъювант-вакцины вводят в дозе 0,2 см3, живую - 1 млрд. микробных клеток в объеме 1 см3 под кожу в область паха. Через 15, 30 и 60 дней после иммунизации у животных берут кровь и исследуют в РА с единым бруцеллезным антигеном (S-антиген). Результаты исследований приведены в табл. 2. Из табл. 2 следует, что все серии предложенной адъювантвакцины из штамма B. abortus ВГНКИ N КВ 17/100 не индуцируют образования агглютининов в сыворотке крови животных и в отличие от адъювант-вакцин из штаммов B.melitensis N "Невский-13", В. abortus N 16/4 и живой вакцины из штамма В.abortus N 19 являются неагглютиногенными, что дает возможность быстро и своевременно выявлять больных вакцинированных животных в случае их заражения. В то же время среднее количество агглютининов в сыворотке крови морских свинок через 15 дней после иммунизации адъювант-вакцинами из штаммов B.melitensis N "Невский-13" - 83,0, B. abortus N 16/4 - 38,3 МЕ/см3, а живой вакциной из штамма B. abortus N 19 - 160,0 ME/cм3, и в случае заражения больные бруцеллезом животные не могут быть дифференцированы по крайней мере в течение 60 дней от иммунных - незаразившихся, создавая угрозу перезаражения. Таким образом установлено, что адъювант-вакцина из штамма В.abortus ВГНКИ N КВ 17/100 не индуцирует синтез S-антител в количестве, улавливаемом реакцией агглютинации с единым бруцеллезным антигеном. Пример 3. Иммуногенную активность новой адъювант-вакцины, полученной по примеру 1 из штамма B.abortus ВГНКИ N 17/100, сравнивают с вакцинами из штаммов B.melitensis N "Невский-13", B.abortus N 16/4 и живой вакциной из штамма B. abortus N 19. Опыт проводят на морских свинках, привитых аналогично примеру 2. Через 3 мес после прививки морских свинок заражают стандартной культурой контрольного вирулентного штамма В.abortus N 54М/ВГНКИ в дозе 80 микробных клеток (15 ИД50). Спустя 32-35 дней животных убивают и проводят бактериологическое исследование селезенки, печени, костного мозга и лимфатических узлов (всего 10 объектов). Определяют наличие бруцелл вирулентного штамма в лимфатических узлах и внутренних органах животных. Рассчитывают процент защиты (количество незаразившихся животных в процентах от общего их количества в группе) и индекс инфицированности (процентное отношение количества объектов, из которых выделена культура вирулентного штамма, к общему количеству исследованных объектов по группе животных). Результаты исследований приведены в табл. 3. Таким образом установлено, что адъювант-вакцина из штамма B.abortus ВГНКИ N RD 17/100 всех серий превосходит по иммуногенной активности адъювант-вакцины из штаммов B. melitensis N "Невский-13", B.abortus N 16/4 и не уступает живой вакцине из штамма B.abortus N 19. Пример 4. Определяют реактогенность адъювант-вакцины из штамма B.abortus ВГНКИ N КВ 17/100 (серия N 1) в опыте на телках трех-четырех месячного возраста в сравнении с адъювант-вакциной из штамма B.meliitensis N "Невский-13". Каждую вакцину вводят 10 телкам под кожу в область подгрудка в дозе 3 см3. У вакцинированных животных ежедневно в течение 10 дней измеряют температуру тела и площадь припухлости в месте введения вакцины. У животных, иммунизированных адъювант-вакциной из штамма B.abortus ВГНКИ N КВ 17/100, температура тела повышается на 0,8-1,0oС и нормализуется к 5-6 дню после вакцинации, отек в месте введения вакцины не превышает 80 см2 и начинает уменьшаться с 8-10 дня. В группе животных, иммунизированных адъювант-вакциной из штамма B.melitensis N "Невский-13", температура тела повышалась в среднем на 1,2-1,5oС и приходила в норму к 7-9 дню. Отек тканей в месте введения вакцины в среднем 100-120 см3. Заметное уменьшение величины отека отмечают через 15-20 дней после иммунизации. Таким образом, испытанную вакцину из штамма B.abortus ВГНКИ N КВ 17/100 можно отнести к слабореактогенным масляным адъювантвакцинам. Пример 5. Определяют антигенные свойства адъювант-вакцины из штамма B. abortus ВГНКИ N КВ 17/100 (серия 2) в опыте на телках трех-четырех месячного возраста. Вакцину вводят под кожу в область подгрудка в дозе 3 см3 42 телкам. Через 15 и 30 дней после иммунизации у животных берут кровь и исследуют в РА и РСК с единым бруцеллезным антигеном (S-антиген). Все животные иммунизированные адъювант-вакциной не реагируют на бруцеллез. Пример 6. Определяют антигенные свойства адъювант-вакцины из штамма B. abortus ВГНКИ N КВ 17/100 (серия 3) в опыте на телках 14-17-месячного возраста, ранее иммунизированных живой слабоагглютиногенной вакциной из штамма B.abortus N 82. Адъювант-вакцину в дозе 3 см3 вводят под кожу в область подгрудка 70 телкам. Через 15 и 30 дней после иммунизации у животных берут кровь и исследуют на бруцеллез в РА и РСК с единым бруцеллезным антигеном. Все животные ревакцинированные адъювант-вакциной не реагируют на бруцеллез. Пример 7. Определяют эффективность адъювант-вакцины из штамма B.abortus ВГНКИ N КВ 17/100 для профилактики бруцеллеза крупного рогатого скота в условиях контролируемого эпизоотологического опыта. Телок трех-четырех месячного возраста (пример 5) и 14-17-месячного возраста (пример 6), иммунизированных адъювант-вакциной из штамма B.abortus ВГНКИ N КВ 17/100, содержат в условиях хозяйства неблагополучного по бруцеллезу рогатого скота, обеспечивающих контакт с 21 коровой больной бруцеллезом. Иммунизированные адъювант-вакциной животные не заболевают бруцеллезом в течение шести месяцев, что указывает на высокую эффективность препарата. Пример 8. Определяют возможность использования адъювант-вакцины из штамма B.abortus ВГНКИ N КВ 17/100 для провокации синтеза специфических антител у больных бруцеллезом коров, не реагирующих в серологических реакциях, принятых для диагностики бруцеллеза. Коров, ранее реагировавших на бруцеллез (в РА и РСК) и утративших титры в серологических реакциях, принятых для диагностики бруцеллеза, иммунизируют адъювант-вакциной из штамма B.abortus КВ 17/100 в дозе 3 см3. Вакцину вводят под кожу в область подгрудка. Через 15 и 3 дней после иммунизации у животных берут кровь и исследую сыворотку в РА и РСК. После иммунизации животные с хронической формой бруцеллеза положительно реагируют в серологических реакциях в диагностических титрах и идентифицируются как больные. Таким образом, адъювант-вакцина из штамма B.abortus КВ 17/100 провоцирует появление положительных серологических реакций у нереагирующих на бруцеллез больных животных, что способствует скорейшему выздоровлению больных бруцеллезом животных. Использование адъювант-вакцины на основе нового штамма B.abortus ВГНКИ N КВ 17/00 в ветеринарной практике позволит повысить эффективность мероприятий по борьбе с бруцеллезом крупного рогатого скота.

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

Вакцина против бруцеллеза крупного рогатого скота, содержащая инактивированный антиген бруцелл, неполный адъювант Фрейнда и физиологический раствор, отличающаяся тем, что она в качестве инактивированного антигена бруцелл содержит инактивированную с гидратом окиси алюминия бактериальную массу штамма Brucella abortus ВГНКИ N КВ 17/100 с концентрацией 300 - 400 вакцина против бруцеллеза крупного рогатого скота, патент № 2108110 109 микробных клеток в 1 см3 при следующем соотношении компонентов, об.%: Инактивированная с гидратом окиси алюминия бактериальная масса штамма Вrucella abortus ВГНКИ N КВ 17/100 с концентрацией 300 - 400 вакцина против бруцеллеза крупного рогатого скота, патент № 2108110 109 микробных клеток в 1 см3 - 40 - 50 Неполный адъювант Фрейнда - 45 - 55 Физиологический раствор - Остальноел

www.freepatent.ru

Бруцеллез КРС, бруцеллез у коров симптомы и признаки (фото)

Заболевание может быстро распространиться по всему стаду

Тема нашего сегодняшнего разговора – бруцеллез у коров. Это острое инфекционное заболевание, вызванное особым родом бактерий – Brucella. Болезнь распространяется чрезвычайно быстро, поражая почти все стадо за короткий промежуток времени. Как правило, заражение происходит через общие водопои и кормушки, а также воздушно-капельным путем. Бруцеллезу подвержены не только коровы, но также козы, лошади, свиньи. Кроме того, способен заболеть и человек из числа тех, кто постоянно контактирует с животными или употребляет в пищу мясо и молоко от больного скота.

Свойства вредных бактерий

Другое название бруцеллеза – мальтийская лихорадка. Болезнь была обнаружена и описана британским военным врачом Брюсом в 1887 году. Среди бактерий Brucella существует четыре вида – melitensis, bovis, suis и canis, которые опасны для здоровья человека. По форме они относятся к палочковидным бактериям. Далее в тексте речь пойдет, в основном, о Brucella bovis – бычьей бруцелле.

Бактерии выживают в определенных условиях

Они особо опасны для коров и очень живучи, способны жить в почве в течение 110 дней, в навозе – примерно от одного до двух месяцев. Охлаждение и заморозка не убивает бруцелл, а позволяет успешно сохраняться в ожидании последующей разморозки. Нагревание, вплоть до 100 градусов Цельсия, способно убить эти бактерии мгновенно, до 60 градусов – за полчаса. Также они погибают под воздействием прямого солнечного света и при обработке дезинфицирующими средствами.

Механизм распространения заражения

Как правило, бруцеллез у КРС возникает при попадании в организм коровы от 10 бактерий. Среди путей проникновения инфекции можно выделить различные микротравмы, слизистые оболочки, и, прежде всего, ротовую полость, дыхательные пути. Особо опасны коровы, пережившие выкидыш. Бруцеллы в огромных количествах содержатся в околоплодных водах и плаценте. Заражен также и мертворожденный теленок. Весьма вероятным является распространение через общие кормушки, водопои, подстилку и предметы ухода.

Животные могут заразиться через общую кормушку

Бруцеллы содержатся в мясе и молоке больного животного, поэтому употребление их в пищу без предварительной обработки может быть опасно для человека. Также через мельчайшие порезы и ссадины на коже могут заразиться представители профессий, непосредственно контактирующие с крупным рогатым скотом. Например, доярки, пастухи, ветеринары, работники скотобоен, мясокомбинатов и молочных производств.

Бактерия не выживает на открытом воздухе, поэтому аэрогенное распространение исключено. Человек может заразиться бруцеллезом от человека при непосредственном контакте микротравмированных участков кожи (рукопожатия) или слизистых оболочек (поцелуи).

Микроорганизмы не живут на открытом воздухе

О сроках сохранения бруцеллезного заражения и способах его ликвидации

Бактерии бруцеллеза хорошо сопротивляются воздействию внешней среды. В непастеризованных молочных продуктах бактерии живут более 50 дней, в замороженном мясе больной коровы сохраняются в течении минимум 5 месяцев, в шкурах и мехе – около 3 месяцев.

Водоем способен очиститься от бруцелл в течение полугода, почва — за срок не менее 2 лет.

Избавиться от бруцеллезного заражения можно путем нагрева зараженной среды или обработкой дезинфицирующими веществами в течение 10 минут. Последний способ подходит только для инструментов и мест обитания животных.

Использовать молоко и мясо зараженного животного можно только после продолжительной обработки

Можно ли использовать в пищу мясо и молоко зараженных бруцеллезом коров? Ответ однозначен – можно, но с осторожностью. Для употребления в пищу мясо больной особи следует варить в течение 3-4 часов, а молоко кипятить 10-15 минут.

Только все симптомы сразу

У крупного рогатого скота бруцеллез не может быть диагностирован с ориентацией только на симптомы, поскольку они недостаточно ярко выражены. Одним из признаков болезни могут быть частые выкидыши у всего стада. Однако такое происходит у каждой коровы, в основном, один раз. Очень редко — два раза и практически никогда — три раза или более. К тому же, если заражение произошло до случки коровы с быком, аборт не происходит.

Частые выкидыши говорят о наличии болезни

Признаки заражения стада бруцеллезом:

  • волна абортов или рождение слабых телят, быстро погибающих после рождения;
  • задержка последа выкидыша, заболевания матки коров, гнойные выделения из родового отверстия;
  • ухудшение аппетита, потеря массы, повышение температуры;
  • гнойный мастит у коров;
  • воспаление семенников у быков;
  • опухоли передних и задних конечностей, артрит.

Важно отметить, что ни один из этих симптомов по отдельности не позволяет диагностировать наличие бруцеллеза у коров со 100% вероятностью.

Способы диагностики

Бруцеллез очень сходен по симптомам с туберкулезом, поэтому перед назначением лечения необходимо сдать специальные анализы для уточнения диагноза.

Перед лечением у животного берут кровь на анализ

Для подтверждения или опровержения бруцеллезного заражения проводят серологическое исследование крови больного животного. Также после аборта собираются и исследуются образцы околоплодных вод, плаценты, фрагменты тканей органов мертвого плода, таких, как желудок и печень.

У павших животных при вскрытии проводят биопсию лимфоузлов, суставов и семенников.

Мясо и молоко больных коров перед отправлением в пищевое производство проверяют на наличие бруцелл. При взятии проб для анализа следует обезопаситься от проникновения инфекции в организм исследователя, используя защитные перчатки, маски и полностью закрывающую тело одежду.

О лабораторных исследованиях заболевания

Исследование на бруцеллез сыворотки крови животного производится на физиологическом растворе поваренной соли. Различают положительные, сомнительные и отрицательные реакции, различающиеся разведением. При этом наблюдается агглютинация – склеивание и выпадение осадка из однородной взвеси бактерий.

Для коров положительной проба считается при агглютинации в физиологическом растворе с разведением 1:100, сомнительной – с разведением 1:50, отрицательной – при еще более слабом разведении. В случае сомнительной пробы проводится повторная проверка. Если разведение не усилится и при отсутствия прочих симптомов бруцеллеза, проба принимается как отрицательная.

Теперь поговорим о реакции аллергии. Животных вакцинируют абортином и ожидают реакцию от 24 до 72 часов. Повод для беспокойства – припухлость размером не менее фасолины. В том случае, если она не пропадает спустя трое суток после ввода абортина, наблюдается ее покраснение и болезненность, у вакцинированных коров жар, то реакция определяется как положительная.

Если эти симптомы проявляются по отдельности или припухлость исчезает в течение первых 2 суток с момента ввода абортина, то эта реакция не считается положительной. Положительная реакция позволяет однозначно судить о зараженности коровы, однако такие же результаты дают и выздоровевшие животные, поэтому требуется дополнительное исследование.

Вакцинация абортином

Способы лечения скота

При острой форме бруцеллеза у коров эффективным является применение антибиотиков. При хронической форме антибиотики не помогают. Тогда используют вакцину против бруцеллеза, чтобы снять симптомы. В Швейцарии применяют по инструкции препарат Каусит, однако в других странах он не сертифицирован. В США чаще всего из экономических соображений больных коров отправляют на убой. Это выходит дешевле, чем затраты на изоляцию, лечение и анализы.

В СССР неоднократно наблюдались случаи массового самопроизвольного выздоровления коров, что подтверждали многочисленные проверки. В изолированных хозяйствах выздоравливало до 80% зараженного бруцеллезом крупного рогатого скота.

Возможно лечение антибиотиками

Дать животному шанс на выздоровление или нет – решать хозяину.

Чтобы предупредить распространение заражения, больных коров либо забивают, либо изолируют, причем в отдельных карантинных хозяйствах. Опыт показал, что неполная изоляция, когда здоровые и больные животные содержатся в разных частях коровника либо просто на одной территории, результатов не дает.

О профилактике болезни

Для предотвращения размножения бруцеллезных бактерий важно своевременно убирать навоз и дезинфицировать места содержания коров с телятами. Необходимо организовать отдельные помещения для родов и для животных, подозреваемых в заболевании бруцеллезом.

Рекомендуется проводить регулярную вакцинацию стада. Проведенная таким образом иммунизация сильно снижает риск заболевания.

Регулярная профилактика поможет избавиться от патологии

Телят стоит выращивать отдельно от взрослых особей, чтобы не допустить заражения. Они должны есть из особых кормушек, пить из особых водоемов, к которым нет доступа у зараженных животных. Для телят также должна использоваться особая подстилка. Необходимо делать им прививки с культурой бруцеллеза во избежание будущего заражения.

Для профилактики бруцеллеза у человека рекомендуется пользоваться защитной одеждой, перчатками и высокими резиновыми сапогами. Чтобы без опаски пить молоко, его надо прокипятить, употреблять в пищу мясо коровы также лучше после длительной термообработки.

Больных животных нужно изолировать от всего стада

Опасность для человека

Инкубационный период болезни составляет от 2 до 3 недель. Бруцеллез поначалу почти не проявляется. Но незаметные симптомы со временем становятся невыносимыми. Ощущения нарастают постепенно от легкого недомогания до чрезвычайно сильных болей и ломоты во всем теле. Температура тела больного достигает 41 градуса по Цельсию. Наблюдается резкая потеря в весе, навязчивое желание пить.

Помимо физических симптомов больной ощущает и психологические. В конце концов на фоне постоянных ужасных болей наступает потеря связи с реальностью и шизофрения.

Болезнь редко протекает дольше 4 месяцев. Летальный исход маловероятен, но у трети переболевших наблюдаются тяжелые поражения организма и психики, приводящие к инвалидности.

Заболевание опасно для человека

Также встречается хроническая форма бруцеллеза, при которой чередуются острая фаза и ремиссия. Летальный исход остается маловероятным.

Если понравилась статья – пожалуйста, поставьте лайк и расскажите о нас друзьям.

Хотите поделиться своим опытом борьбы с болезнью? Напишите об этом в комментариях, нам будет интересно.

 

Тэги: Болезни, Коровы

znaifermu.ru

Вакцина против бруцеллеза сельскохозяйственных животных

Использование: ветеринарная биотехнология, специфическая профилактика, бруцеллез сельскохозяйственных животных. Сущность изобретения: вакцина против бруцеллеза сельскохозяйственных животных содержит суспензию штамма Br. melitensis "Невский-13" ВГНКИ N 31 и сахарозожелатиновый стабилизатор в эффективном количестве. Использование новой вакцины в ветеринарной практике позволяет в 1,5-2 раза повысить эффективность противобруцеллезных мероприятий. 4 табл.

Изобретение относится к биотехнологии, в частности к вакцине против бруцеллеза крупного рогатого скота. Бруцеллез крупного рогатого скота - хроническое зооантропонозное заболевание. Для профилактики бруцеллеза крупного рогатого скота применяют живые противобруцеллезные вакцины. Известна вакцина против бруцеллеза крупного рогатого скота, содержащая антиген из штамма Br. abortus 82 и сахарозожелатиновый стабилизатор. Недостатком данной вакцины является ее низкая иммуногенность. Известна также вакцина против бруцеллеза сельскохозяйственных животных, содержащая антиген из штамма Br. abortus 19 и сахарозожелатиновый стабилизатор. Недостатком данной вакцины является ее агглютиногенность. После иммунизации крупного рогатого скота антитела в сыворотке крови отдельных животных сохраняются до двух и более лет, что препятствует выявлению больных бруцеллезом животных. Целью изобретения является повышение иммуногенности и снижение агглютиногенности вакцины против бруцеллеза сельскохозяйственных животных. Цель достигается тем, что вакцина в качестве антигена содержит бактериальную массу из штамма Br. melitensis "Невский-13" при следующем содержании компонентов, мас. /об.%: Бактериальная мас- са из штамма Br. melitensis "Невский-13" 2,0-2,5˙1011 микр.кл./см3 Сахароза 9,5-10,5 Желатин пи- щевой 1,5-2,0 Дистиллирован- ная вода ОстальноеШтамм Br. melitensis "Невский-13", используемый для изготовления вакцины, получен путем целенаправленной селекции по иммуногенной активности и антигенности. Штамм Br. melitensis "Невский-13" депонирован в коллекции микроорганизмов Всероссийского государственного научно-исследовательского института контроля, стандартизации и сертификации ветеринарных препаратов. Штамм характеризуется следующими признаками и свойствами. Морфологические признаки. Короткие грамотрицательные палочки с закругленными концами, расположенные поодиночке или парами, без спор и капсул. Размер 0,0-1,0 мкм, ширина 0,3-0,5 мкм. Культуральные свойства. Штамм в мясопептонном печеночном глюкозоглицериновом бульоне при 37-38оС через 48-72 ч образует легкую опалесценцию и тонкое голубоватое прозрачное пристеночное кольцо. На мясо-пептонном печеночном глюкозоглицериновом агаре (4-5-е сутки) растет в виде выпуклых, круглых, прозрачных с голубовато-зеленым оттенком (в проходящем свете) колоний диаметром 2,5-3,0 мм. При окрашивании раствором кристаллического фиолетового 1/2000 колонии не полностью покрыты краской (имеются желтые просветы в виде трещин). Растет на МППГГА с добавлением фуксина 1/50 тыс., тионина 1/50 тыс. , натриевой соли бензилпенициллина 10 ЕД/мг, эритритола 0,1%, не растет на МППГГА с добавлением стрептомицина сульфата 5 мкг/мл. Не выделяет при культивировании сероводород, не лизируется фагом "Тб". Антигенная структура. Штамм не обладает типоспецифической антигенностью, культура не агглютинируется А и М моноспецифическими сыворотками, агглютинируется в РА на стекле R-антибруцеллезной сывороткой, разведенной 1/10 на

, S-антибруцеллезной сывороткой, разведенной до 80 МЕ/мл на ++.

Вирулентные свойства: штамм не вызывает патологических изменений, характерных для бруцеллеза у крупного рогатого скота при введении 2х1011и у морских свинок 1˙109 микробных клеток. Не вызывает абортов у стельных коров при иммунизации в дозе 1-2 ˙ 1011 микробных клеток. П р и м е р 1. Штамм Brucella melitensis "Невский-13" культивируют на плотной питательной среде или в ферментере на жидкой питательной среде. К 25 мл бактериальной массы добавляют 75 мл сахарозо-желатинового стабилизатора, содержащего в дистиллированной воде 9,5-10,5 г сахарозы и 1,5-2 г желатина, устанавливают концентрацию бакмассы, равную 2,0-2,5˙1011 м.к. /см3, расфасовывают в ампулы (или флаконы) и лиофильно высушивают. Готовая вакцина представляет собой сухую пористую мелкокристаллическую массу светло-коричневого или светло-желтого цвета, хорошо растворяющуюся в дистиллированной воде. Полученная вакцина имеет следующий компонентный состав (табл.1)П р и м е р 2. Полученную вакцину серий 1-3 ресуспендируют разбавителем для противобруцеллезных вакцин и вводят телкам в возрасте 4-5 месяцев подкожно в дозе 100 млрд м.к. в объеме 5 см3 и повторно в той же дозе через 10 мес. вводят под кожу в область задней трети шеи (Телок, не привитых в возрасте 4-5 мес, иммунизируют однократно за 2-3 месяца до осеменения). Коров и первотелок вакцинируют через 1-2 мес после отела. Ревакцинацию коров проводят не ранее чем через 2 года после вакцинации. Испытание эффективности вакцины проводят в трех хозяйствах, неблагополучных по бруцеллезу крупного рогатого скота. Вакциной иммунизируют животных всех возрастных групп. Всего вакцинируют 3656 голов. Результаты испытания показали, что животные, привитые вакциной из штамма "Невский-13", к 60 дню после вакцинации освобождались от агглютинирующих комплементсвязывающих антител. За время наблюдения в течение 4 лет ни одно из вакцинированных животных не заболело бруцеллезом в условиях контакта с больными животными, что указывает на высокую эпизоотическую эффективность препарата. П р и м е р 3. Испытания иммуногенных свойств вакцины серии 2 проводят на телках 8-10-месячного возраста. Телок иммунизируют подкожно в заднюю треть шеи в дозах 50-400˙109 м.к. в объеме 5 см3. Через 10 мес иммунизированных и контрольных (невакцинированных) телок заражают стандартной культурой контрольного вирулентного штамма Бр. абортус 54М/ВГНКИ в дозе 15-20 ИД50. Через 42-45 дней после заражения животных убивают и проводят бактериологическое исследование внутренних органов и лимфатических узлов (30-35 объектов). Определяют наличие бруцелл вирулентного штамма в лимфатических узлах и органах, рассчитывают процент защиты и индекс инфицированности (процент инфицированных органов и лимфоузлов). Результаты испытания представлены в табл.2. Из таблицы видно, что наивысший процент защиты животных обеспечивает иммунизирующая доза предлагаемой вакцины, равная 100 млрд. м.к. П р и м е р 4. Испытывают 2 серию вакцины на иммуногенную и антигенную активность в сравнении с вакциной из штамма Бр. абортус 19 (прототип). Телок иммунизируют вакциной из штамма Бр. мелитензис "Невский-13" в дозе 100 млрд м.к. и вакциной из штамма Бр. абортус 19 в дозе 80 млрд м.к. Через 15, 30, 60, 90, 120, 150 и 180 дней после вакцинации у телок берут кровь для исследования в РА, РСК, РБП. Результаты представлены в табл.3. Через 10 мес. после иммунизации вакцинированных и контрольных (невакцинированных) животных заражают стандартной культурой контрольного вирулентного штамма Бр. абортус 54М/ВГНКИ в дозе 15-20 ИД50, а спустя 42-45 дней убивают и проводят бактериологическое исследование (как описано в примере 3). Результаты испытаний представлены в табл.4. Результаты исследований показали, что телки, иммунизированные вакциной из штамма Бр. мелитензис "Невский-13", освобождаются от агглютининов и комплементсвязывающих антител уже через 60 дней после вакцинации, а у привитых вакциной из штамма 19 антитела сохраняются до 150 дней, что дает возможность раньше на 120 дней выявить больных животных. Данные таблицы показывают, что предложенная вакцина превосходит по иммуногенной эффективности вакцину из штамма Бр. абортус 19 и имеет существенное преимущество перед ней, а именно возможность серологических исследований через 2 мес. после вакцинации, что позволяет значительно раньше выявить больных животных и тем самым повысить эффективность проводимых противобруцеллезных мероприятий. Использование предложенной вакцины в ветеринарной практике позволит расширить ассортимент высокоэффективных биопрепаратов против бруцеллеза сельскохозяйственных животных.

Формула изобретения

ВАКЦИНА ПРОТИВ БРУЦЕЛЛЕЗА СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ, преимущественно крупного рогатого скота, содержащая антиген бруцелл и сахарозо-желатиновый стабилизатор, отличающаяся тем, что она в качестве антигена содержит бактериальную массу штамма Brucella melitensis "Невский-13" ВГНКИ N 31 при следующем содержаний компонентов:Сахароза, г/100 мл - 9,5 - 10,5Пищевой желатин, г/100 мл - 1,5 - 2,0Дистиллированная вода, мл - До 100 млБактериальная масса штамма Brucella melitensis "Невский-13" ВГНКИ N 31, ·1011 м.к./см3 - 2,0 - 2,5

MM4A Досрочное прекращение действия патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе

Дата прекращения действия патента: 01.07.2001

Номер и год публикации бюллетеня: 9-2003

Извещение опубликовано: 27.03.2003        

bankpatentov.ru

Вакцина против бруцеллеза сельскохозяйственных животных

 

Использование: ветеринарная биотехнология, специфическая профилактика, бруцеллез сельскохозяйственных животных. Сущность изобретения: вакцина против бруцеллеза сельскозхозяйственных животных содержит суспензию штамма Br. melitensis "Невский-13", ВГИКИ N 31, масляный адьювант типа неполного адъюванта Фрейнда и формалин в эффективных соотношениях. Использование новой вакцины в ветеринарной практике позволяет в 1,5 - 2 раза повысить эффективность специфической профилактики бруцеллеза сельскохозяйственных животных. 2 табл.

Изобретение относится к ветеринарной биотехнологии, в частности к способам получения вакцин, применяемых для профилактики бруцеллеза сельскохозяйственных животных.

Бруцеллез сельскохозяйственных животных - хроническое зооантропонозное заболевание, наносящее большой экономический ущерб животноводству. В системе мер борьбы с бруцеллезом ведущее место принадлежит средствам специфической профилактики заболевания. Известна вакцина против бруцеллеза сельскохозяйственных животных, содержащая антиген из штамма Brabortus 19 и сахарозо-желатиновый стабилизатор [1]. Недостатком данной вакцины является ее высокая агглютиногенность, препятствующая выявлению больных бруцеллезом животных и недостаточная, как и у всех живых вакцин, экологическая чистота. Известна также вакцина против бруцеллеза крупного рогатого скота, содержащая инактивированный антиген из штамма Br.abortus 45/20, масляный адъювант и физиологический раствор [2]. Недостатком данной вакцины является невысокая иммуногенность. Целью настоящего изобретения является повышение иммуногенной активности вакцины против бруцеллеза сельскохозяйственных животных. Цель достигается тем, что вакцина в качестве антигена содержит бактериальную массу из штамма Br.melitensis "Невский-13", в качестве масляного адъюванта - неполный адъювант Фрейнда и дополнительно формалин, при следующем соотношении компонентов мас./об.%: Бактериальная масса из штамма Br.meliten- sis "Невский-13" 1,45-1,55х x 1011 микр x x к/см3 Неполный адъювант Фрейнда 45-50 Формалин 0,3-0,5 Физиологический раствор Остальное Для изготовления вакцины используют штамм Br.melitensis "Невский-13". Штамм Br.melitensis "Невский-13" получен путем целенаправленной селекции по иммуногенной активности и антигенности. Штамм Br.melitensis "Невский-13" депонирован в коллекции Всероссийского государственного ордена Трудового Красного Знамени научно-исследовательского института контроля, стандартизации и сертификации ветеринарных препаратов. Штамм характеризуется следующими признаками и свойствами. Морфологические признаки. Короткие грамотрицательные палочки с закругленными концами, расположенные поодиночке или парами, без спор и капсул. Размер 0,6-1,0 мкм, ширина 0,3-0,5 мкм. Культуральные свойства. Штамм в мясо-пептонном печеночном глюкозо-глицериновом бульоне при 37-38оС через 48-72 ч образует легкую опалесценцию и тонкое голубоватое прозрачное пристеночное кольцо. На мясо-пептонном печеночном глюкозо-глицериновом агаре (4-5 сутки) растет в виде выпуклых, круглых, прозрачных с голубовато-зеленым оттенком (в проходящем свете) колоний с диаметром 2,5-3,0 мм. При окрашивании раствором кристаллического фиолетового 1/2000 колонии не полностью покрыты краской (имеются желтые просветы в виде трещин). На МППГГА с добавлением фуксина 1/50 тыс., тионина 1/50 тыс., натриевой соли бензилпенициллина 10 ЕД/мг, эритритола 0,1% растет. Не растет на МППГГА с добавлением стрептомицина сульфата (5 мкг/мл). Не выделяет при культивировании сероводород, не лизируется фагом "Тб". Антигенные свойства. Штамм не обладает типоспецифической антигенностью, культура не агглютинируется А и М моноспецифическими сыворотками, агглютинируется в РА на стекле R-антибруцеллезной сывороткой, разведенной 1/10 на ++, S-антибруцеллезной сывороткой, разведенной до 80 МЕ/мл на ++. Вирулентные свойства: штамм не вызывает патологических изменений, характерных для бруцеллеза у крупного рогатого скота при введении 2х1011 и у морских свинок - 1х109 микробных клеток. Не вызывает абортов у стельных коров при иммунизации в дозе 1-2х1011 микробных клеток. П р и м е р 1. Штамм Brucella melitensis "Невский-13" культивируют на мясо-пептоном печеночном глюкозо-глицериновом агаре (печеночно-мартеновском агаре с переваром Хоттингера, картофельном агаре с переваром Хоттингера) или в ферментере на жидкой питательной среде. Бактериальную массу суспендируют физиологическим раствором до концентрации 2,9х1011 - 3,1х1011 микр.к./см3. В качестве неполного адъюванта Фрейнда используют следующие составы, %: 1. Болгарское легкое минеральное масло 84 Ланолин 16 2. Синтетическое минеральное масло 84 Ланолин 16 3. Полиэтиленси- локсановая жидкость 84 Ланолин 16 4. Полиэтилсилокса- новая жидкость 84 Т-3 16 К 45-50 мл адъюванта добавляют 0,3-0,5 мл формалина и до 100 мл взвеси бактериальной массы в физиологическом растворе. Полученную смесь перемешивают. Вакцину расфасовывают во флаконы при включенной мешалке, флаконы закрывают резиновыми пробками, обкатывают металлическими колпачками и этикетируют. Расфасованную вакцину проверяют на стерильность, безвредность и иммуногенность. Готовая вакцина представляет собой белую или слегка желтовато-сероватого цвета однородную эмульсию с незначительным отслоением минерального масла над нерасслаивающейся однородной эмульсией. При встряхивании вакцина приобретает вид однородной гомогенной эмульсии. Получают 3 серии вакцины следующего состава (см. табл.1) П р и м е р 2. Полученную вакцину серий 1-3 вводят крупному рогатому скоту, нереагирующему на бруцеллез в серологических реакциях (РБП или РА и РСК или РДСК). Телок иммунизируют в возрасте 4-5 мес. Вакцину вводят подкожно в область подгрудка в дозе 3 см3. Через месяц после вакцинации вакцину вводят повторно в той же дозе. Телок, не иммунизированных в 4-5-месячном возрасте, прививают за 2-3 мес до осеменения. Вакцину вводят дважды с интервалом один месяц в дозе 3 см3 подкожно в область подгрудка. Испытание эффективности вакцины проводят в двух хозяйствах, неблагополучных по бруцеллезу крупного рогатого скота. Вакциной иммунизируют животных всех возрастных групп. Всего 1856 голов. Результаты испытания показали, что животные, привитые вакциной из штамма "Невский-13" к 90-120 дню после вакцинации, освобождались от агглютинирующих и комплементсвязывающих антител. За время наблюдения в течение двух лет ни одно из вакцинированных животных не заболело бруцеллезом в условиях контакта с больными животными, что указывает на высокую эпизоотическую эффективность препарата. П р и м е р 3. Иммуногенную активность экспериментальных серий вакцины с использованием различных адъювантов по примеру 1 сравнивают с вакциной из штамма Бр. абортус 45/20 (прототип) и живой вакциной из штамма Бр. абортус 19. Опыт проводят на морских свинках массой 350-400 г. Животных иммунизируют подкожно в область паха вакцинами в дозе 0,2 см3, а живой вакциной - в дозе 1х109 микр.к./см3. Через 85-90 дней после иммунизации всех привитых и контрольных (невакцинированных) животных заражают стандартной культурой контрольного вирулентного штамма Бр. абортус 54М/ВГНКИ в дозе 15-20 ИД50. Спустя 30-35 дней после заражения морских свинок убивают и проводят бактериологическое исследование лимфатических узлов и внутренних органов (по 10 объектов от каждого животного). Определяют наличие бруцелл вирулентного штамма в организме животных. Рассчитывают процент защиты (количество незаразившихся животных в процентах от общего количества свинок в группе) и индекс инфицированности органов (процент выделенных культур от общего количества исследованных органов и лимфатических узлов). Результаты испытания представлены в табл.2. Из табл. 2 видно, что предложенная вакцина, содержащая антиген из бруцелл штамма Бр. мелитензис "Невский-13" с неполным адъювантом Фрейнда обеспечивает защиту 70-85% иммунизированных животных и по этому показателю значительно превосходит аналогичную вакцину из штамма Бр.абортус 45/20 (прототип). Предложенная вакцина не уступает по иммуногенности живой вакцине из штамма Бр.абортус 19. Использование предложенной вакцины в ветеринарной практике позволит расширить ассортимент высокоэффективных биопрепаратов против бруцеллеза сельскохозяйственных животных.

Формула изобретения

ВАКЦИНА ПРОТИВ БРУЦЕЛЛЕЗА СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ, преимущественно крупного рогатого скота, содержащая антиген бруцелл, масляный адъювант и физиологический раствор, отличающаяся тем, что она в качестве антигена бруцелл содержит бактериальную массу штамма Brucella melitenSiS "Невский-13" ВГНКИ N 31, в качестве масляного адъюванта - неполный адъювант Фрейнда и дополнительно формалин при следующем соотношении компонентов: Неполный адъювант Фрейнда, г/100 мл - 45 - 50 Формалин, г/100 мл - 0,3 - 0,5 Физиологический раствор, мл - До 100 Бактериальная масса штамма Brucella melitenSiS "Невский-13" ВГНКИ N 31, 1011 м.к./см3 - 1,45 - 1,55

РИСУНКИ

Рисунок 1

www.findpatent.ru


Смотрите также




г.Самара, ул. Димитрова 131
[email protected]